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文檔簡介

1、精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點基因工程基因工程的概念基因工程為指根據(jù)人們的愿望,進行嚴格的設(shè)計,通過,給予生物以,制造出;基因工程為在上進行設(shè)計和施工的,又叫做;(一)基因工程的基本工具1. “分子手術(shù)刀”( 1)來源:主要為從中分別純化出來的;( 2)功能:能夠識別雙鏈dna分子的某種的核苷酸序列,并且使每一條鏈中部位的兩個核苷酸之間的斷開,因此具有性;( 3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的dna片段末端通常有兩種形式:和;2. “分子縫合針”(1) 兩種 dna連接酶( e· colidna 連接酶和 t4- dna連接酶)的比較:相同點:都縫合鍵;區(qū)分: e&#

2、183;colidna連接酶來源于,只能將雙鏈dna 片段互補的之間的磷酸二酯鍵連接起來;而t 4dna 連接酶能縫合,但連接平末端的之間的效率較;(2) 與 dna聚合酶作用的異同:dna 聚合酶只能將加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵; dna連接酶為連接的末端,形成磷酸二酯鍵;3. “分子運輸車”( 1)載體具備的條件:;( 2)最常用的載體為、 它為一種 暴露的.結(jié)構(gòu)簡潔的.獨立于,并具有的雙鏈dna分子 ;( 3)其它載體:精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點 二 基因工程的基本操作程序第一步:1. 目的基因為指:;2. 原核基因?qū)嵭蝎@得,真核基因

3、為;人工合成目的基因的常用方法有_和_;3. pcr 技術(shù)擴增目的基因( 1)原理:( 2)過程:第一步:加熱至90 95;其次步:冷卻到55 60,;第三步:加熱至70 75,;其次步:1. 目的:使目的基因在受體細胞中,并且可以,使目的基因能夠;2. 組成:( 1)啟動子:為一段有特別結(jié)構(gòu)的,位于基因的,為識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因,最終獲得所需的;( 2)終止子:也為一段有特別結(jié)構(gòu)的,位于基因的;( 3)標記基因的作用:為為了鑒定受體細胞中,從而將挑選出來;常用的標記基因為;第三步:1. 轉(zhuǎn)化的概念:為目的基因進入受體細胞內(nèi),并且在受體細胞內(nèi)維護穩(wěn)固和表達的過程;2. 常用的轉(zhuǎn)化方法:

4、將目的基因?qū)胫参锛毎翰杉{最多的方法為,其次仍有和等;精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛S玫姆椒椋淮朔椒ǖ氖荏w細胞多為;將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的緣由為,最常用的原核細胞為,其轉(zhuǎn)化方法為:先用處理細胞,使其成為,再將溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在肯定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸取dna分子,完成轉(zhuǎn)化過程;3. 重組細胞導入受體細胞后,挑選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)為;第四步:1. 第一要檢測,方法為采納;2. 其次仍要檢測,方法為采納;3. 最終檢測,方法為從轉(zhuǎn)基因生物中提取,用相應(yīng)的進行;4. 有時仍需進行

5、的鑒定;如;(三)基因工程的應(yīng)用1. 植物基因工程:;2. 動物基因工程:;3. 基因治療:;(四)蛋白質(zhì)工程的概念蛋白質(zhì)工程為指以作為基礎(chǔ),通過,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行,或制造一種,以滿意人類的生產(chǎn)和生活的需求;(基因工程在原就上只能生產(chǎn)的蛋白質(zhì))轉(zhuǎn)錄翻譯精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點答案專題 1基因工程基因工程的概念體外 dna重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)新的遺傳特性更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品因dna分子水平dna重組技術(shù)(一)基因工程的基本工具1. 限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)( 1) 原核生物( 2) 特定特定磷酸二酯鍵專一( 3) 黏性末端平末端 ;2. d

6、na 連接酶(1) 磷酸二酯 t 4 噬菌體黏性末端兩種末端低 ;(2) 單個核苷酸兩個 dna片段3. 載體( 1) 能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)固儲存; 具有一至多個限制酶切點,供外源dna片段插入 ; 具有標記基因,供重組dna的鑒定和挑選 ;( 2) 質(zhì)粒細菌染色體之外自我復(fù)制才能環(huán)狀( 3)噬菌體的衍生物.動植物病毒 二 基因工程的基本操作程序第一步: 目的基因的獵取1. 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因;2. 直接分別人工合成反轉(zhuǎn)錄法 _化學合成法 _;3. ( 1) dna雙鏈復(fù)制( 2) dna解鏈 ;引物結(jié)合到互補dna鏈;熱穩(wěn)固 dna聚合酶從引物起始互補鏈的合成;其次步: 基因表達載體的構(gòu)

7、建1. 穩(wěn)固存在遺傳至下一代表達和發(fā)揮作用;精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點2. 目的基因 啟動子 終止子 標記基因( 1) dna片段首端rna聚合酶轉(zhuǎn)錄出 mrna蛋白質(zhì) ;( 2) dna片段尾端 ;( 3) 為否含有目的基因含有目的基因的細胞抗生素基因 ;第三步: 將目的基因?qū)胧荏w細胞_2+2. 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁衍快.多為單細胞.遺傳物質(zhì)相對較少大腸桿菌ca感受態(tài)細胞 重組表達載體dna分子3. 標記基因為否表達 ;第四步: 目的基因的檢測和表達1. 轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上為否插入了目的基因dna 分子雜交技術(shù);2. 目的基因為否轉(zhuǎn)錄出了mrna用標記的目的基因作探針與mrna雜交 ;3. 目的基因為否翻譯成蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 的抗體抗原抗體雜交;4. 個體生物學水平轉(zhuǎn)基因抗蟲植物為否顯現(xiàn)抗蟲性狀(三)基因工程的應(yīng)用1. 抗蟲.抗病.抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì);2.

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