1、田七顆粒質量標準研究【摘要】 目的建立山七顆粒的質量標準。方法采用tlc法對處方小的三七進行定性鑒 別，用hplc法對制劑中人參皂昔rgl與三七皂昔r1進行定量測定。結果在tlc鑒別中能 檢出三七，人參皂昔rgl在0.6285.652 pg(r=0.999 8)、三七皂昔r1在0.1551.395 pg(r = 0.999 8)范圍內呈良好的線性關系，平均回收率分別為99.24%(rsd = 0.84%)和99.14%(rsd = 1.13%)。結論本方法操作簡便，準確，重復性好，精密度高，可作為該制劑的質量控制方法。【關鍵詞】 出七顆粒；薄層色譜法；人參皂昔rgl；三七皂昔r1；高效液相色譜

2、法abstract： objective to establish the quality standard for tianqi granule methods radix notoginscng in tianqi granule was identified by tlc the ginsenoside rgl and notoginsenoide r1 in tianqi were determined by hplc result radix notoginscng could be identified by tlc the linear ranges of ginsenoside

3、 rgl and notoginsenoide r1 were at 0.6285.652 pg (r=0.999 8) and 0551.395 pg (r=0.999 8), respectively. the average recoveries were 99.24% (rsd= 0.84%) and 99.14% (rsd= 1.13%). conclusion the method is simple, accurate and with good reproducibility and high precision, and can be used for quality con

4、trol of tianqi granule.key words： tianqi granule； tlc； ginsenoside rgl ； notoginsenoide r1 ； hplciii七顆粒主要以三七為原料加工制成，具有活血定痛、祛瘀牛新的作用。三七主要含人參 皂昔rbl、rgl、re和三七皂昔r1等20余種皂昔成分，其中人參皂昔rbl、rgl和三七皂 井r1是含量最高的3個成分，三七皂井r1 乂是三七的特征性成分1。本試驗對制劑的質量 標準進行了研究，用tlc法對處方中的三七進行了定性鑒別，并采用hplc法測定田七顆粒中 人參皂ffrgl和三七皂卄r1的含量，方法簡便，準確，

5、重現性好,可作為該制劑的質量控制方 法。1儀器與試藥agilentlloo系列高效液相色譜儀：g1311a四元泵,g1313a h動進樣器,g1379a脫氣 機,g1314vwd檢測器,agilent 1100化學工作站；uv2201型紫外可見分光光度儀。田七顆粒,廣西玉林制藥有限責任公司生產；人參皂甘rgl和三七皂昔r1對照甜(供含 量測定用，批號：人參皂ft1 rgl為0703-9914> 0703-9813,三七皂甘r1為0745-200109),均由 中國藥晶生物制晶檢定所提供。甲醇、乙臘為色譜純，其余試劑均為分析純。2定性鑒別収本晶2 g,研細，加甲醇20 ml,超聲處理30

6、min,濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2 ml使溶解, 作為供試品溶液。另取缺三七的陰性對照品2g,同法制成陰性對照品溶液。再取人參皂昔 rgl、人參皂昔rbl和三七皂昔r1對照品，分別加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作為對 照品溶液。照薄層色譜法2005年版中華人民共和國藥典(一部)附錄v1b試驗，吸取供試 品溶液、對照品溶液及陰性對照液各2 pl,分別點于同一硅膠g薄層板上，以正丁醇乙酸乙 酯水(4 : 1 : 5)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液,105 °c加熱至 斑點顯色清晰。供試品色譜屮,在與人參皂廿rgl、人參皂廿rbl和三七皂廿r1對照品

7、和應 的位置上，顯紅色的斑點,而陰性對照液無相應斑點。3含量測定3.1色譜條件agilent eclipse xdb-c18 色譜柱(4.6 mmx250 mm,5 pm),流動相：乙 un-0.05%磷酸溶液 (18 : 82)；流速：1.0ml/mim檢測波長：203 nm：柱溫：30 °c；進樣量：10 »l。理論塔 板數按三七皂背r1計算應不低于3 000o3.2對照品溶液的制備分別精密稱取人參皂莒rgl和三七皂背r1對照品適量,加甲醇制成每1 ml含人參皂昔 rgl 0.396 mg和三七皂背r1 0.092 mg的混合溶液，搖勻，即得。3.3供試品溶液的制備取木

8、品適量，研細，取約1.2 g,精密稱定,加水適量使溶解并轉移至分液漏斗中川水飽和的 正丁醇萃取3次，每次20 ml,合并疋丁醇萃取液,加氨試液洗滌2次，每次20 ml,棄公氨試液， 正丁醇層蒸十，殘渣加卬醇溶解并移入10 ml量瓶中，加卬醇至刻度,搖勻川0.45呵濾膜濾過, 作為供試品溶液。3.4空口試驗按處方及制備丄藝制備不含三七藥材的陰性樣品，再按供試品溶液的制備方法制備并測 定。按照上述色譜條件，吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10 yl,分別注入色 譜儀，進行測定。結果供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，分別有相同保超時間的色 譜峰，而陰性對照在此保留時間無干擾(見圖1

9、)。因此,可在此系統條件下對人參皂昔rgl和 三七皂背r1進行定量分析。3.5線性關系的考察精密稱取人參皂背rgl對照品31.4 mg,置50 ml量瓶屮，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻, 作為人參皂廿rgl對照品貯備液(0.628 mg/ml)。分別精密吸取貯備液1.0、3.0、5.0、7.0、 9.0 ml,分別置于10 ml量瓶屮，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成濃度分別為0.062 8、0.1884、 0.314 0> 0.439 6、0.565 2 mg/ml的溶液。分別精密吸取10 pl,注入液札i色譜儀，記錄峰而積。 以人參皂莒rgl對照品進樣量(pg)為橫坐標，峰面積為縱坐標，

10、繪制標準illi線,得回歸方程：y = 209.713x0.260,r=0.999 &人參皂廿rgl在0.6285.652 pg范i韋i內呈良好的線性關系。精密稱取三七皂廿r1對照品7.75 mg,置50 ml量瓶屮，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻, 作為三七皂廿r1對照品貯備液(0.155mg/ml)。分別精密吸取貯備液1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 ml,分別置于10 ml雖瓶中，加卬醇稀釋至刻度，搖勻，制成濃度分別為0.015 5、0.046 5、0.077 5、0.108 5、0.139 5 mg/ml的溶液。分別精密吸取10 pl,注入液和色譜儀,記錄峰而積。以 三七皂

11、廿r1對照品進樣量(昭)為橫坐標，峰而積為縱坐標，繪制標準曲線,得冋歸方程：y= 208.065x-2.85,r=0.999 &三七皂昔r1在0.1551.395 jig范圍內呈良好的線性關系。3.6精密度試驗取對照品溶液，重復進樣6次，測定峰面積，人參皂背rgl和三七皂計r1的rsd分別為 0.56%和0.69%,表明精密度良好。3.7重復性試驗取同一批號(030102)的田七顆粒，共6份，按“3.3”項制備，進樣，測定峰面積，人參皂計rgl平 均含量為 3.708 mg/g, rsd=1.01%；三七皂昔 r1 平均含量為 0.698 mg/g,rsd=0.92%。3.8穩定性考察

12、精密吸取同一供試品溶液,分別于制備后12 h內每隔2 h進樣1次，測定峰面積，人參皂背 rgl和三七皂廿r1的rsd分別為1.52%和1.47%,表明樣品溶液在12 h基木穩定。3.9加樣凹收率測定取已知含量的樣品(人參皂什rgl含量3.708 mg/g和三七皂昔r1含量0.698 mg/g)6份滯 密稱定，分別精密加入人參皂昔rgl對照品貯備液4.5 ml和三七皂背r1對照品貯備液3.5 ml,揮干甲醇后，按供試品溶液的制備方法制備，根據上面色譜條件測定峰面積,計算回收率， 結果見表1、表2。表1人參皂w rgl加樣回收率試驗結果(略)表2三七皂背r1加樣 回收率試驗結果(略)3.10樣品測定分別精密吸取10 »l對照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件，注入色譜儀，測定，結果 見表3。表3樣品測定結杲(略)4討論在定性鑒別項下，曾選用氯仿甲醇水(65 : 35 : 10) 10 °c以下的下層液作為展開劑，但其 相對濕度應控制在50%左右，濕度過高容易使斑點變形移位，所以選川了木試驗的正丁醇乙 酸乙酯水(4 : 1 : 5)的上層溶液為展開劑。在含量測定項下，供試品溶液制備中述比較了另外 的捉取方法：乙醛脫脂和超聲捉取，結果比木文的含量稍低，所以選擇了本試驗的捉取方法。 參考文獻2,采用乙將0.05%磷酸