1、尿素尿素co(nhco(nh2 2) )2 2 重要的農(nóng)業(yè)氮肥。重要的農(nóng)業(yè)氮肥。只有被土壤中細(xì)菌分解為只有被土壤中細(xì)菌分解為nhnh3 3才能被植物吸才能被植物吸收利用收利用脲酶脲酶課題背景課題背景co(nh2)2 + h2o co2 +2nh3（一一） 篩篩 選選 菌菌 株株 kh kh2 2popo4 4 1.4g 1.4g nahpo nahpo4 4 2.1g 2.1g mgso mgso4 4 h h2 2o 0.2go 0.2g 葡萄糖葡萄糖 10.0g10.0g 尿素尿素 1.0g1.0g 瓊脂瓊脂 15.0g15.0g 將上述物質(zhì)溶解后，將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到用蒸餾水

2、定容到1000ml1000ml。 該培養(yǎng)基的配方中，為微該培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的生物的生長提供碳源和氮源的分別是什么物質(zhì)？分別是什么物質(zhì)？ 此配方能否篩選出產(chǎn)生脲酶此配方能否篩選出產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌？為什么？的細(xì)菌？為什么？碳源：葡萄糖、尿素碳源：葡萄糖、尿素氮源：尿素氮源：尿素能。只有產(chǎn)生脲酶的能。只有產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌能利用尿素作為氮細(xì)菌能利用尿素作為氮源而生存。源而生存。能分解尿素的細(xì)菌的篩選能分解尿素的細(xì)菌的篩選 根據(jù)培養(yǎng)基配方，回答下列問題：根據(jù)培養(yǎng)基配方，回答下列問題：方法方法 運(yùn)用運(yùn)用稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法來來統(tǒng)計(jì)統(tǒng)計(jì)樣品中的樣品中的活菌活菌數(shù)。數(shù)。（二）（

3、二） 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目原理原理 1 1個(gè)菌落個(gè)菌落11個(gè)活菌個(gè)活菌為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在在3030300300的平板上進(jìn)行計(jì)數(shù)。的平板上進(jìn)行計(jì)數(shù)。為使結(jié)果接近真實(shí)值，需培養(yǎng)計(jì)算出為使結(jié)果接近真實(shí)值，需培養(yǎng)計(jì)算出三個(gè)或三個(gè)以上三個(gè)或三個(gè)以上的平板菌落的平板菌落平均數(shù)平均數(shù)。統(tǒng)計(jì)的菌落往往比活菌的實(shí)際數(shù)目統(tǒng)計(jì)的菌落往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低低。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 閱讀教材閱讀教材2222頁頁“（二）統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目（二）統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目”一段，并討論一段，并討論教材中提出的問題。教材中提出的問題。 甲：沒有甲：沒有重復(fù)實(shí)驗(yàn)重復(fù)實(shí)驗(yàn)（至少涂布（至少涂布3 3個(gè)平

4、板）個(gè)平板） 乙：乙：a a組結(jié)果誤差過大，不應(yīng)用于計(jì)算平均值組結(jié)果誤差過大，不應(yīng)用于計(jì)算平均值計(jì)算公式：計(jì)算公式：某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106 的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每克樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1ml） ( )a. 2.34108b. 2.34109c. 234d. 23.4 b每克樣品中的菌株數(shù)每克樣品中的菌株數(shù) =（cv）m（三）（三） 設(shè)設(shè) 置置 對(duì)對(duì) 照照 設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。度。閱讀閱讀p22p2

5、22323頁頁“（三）設(shè)置對(duì)照（三）設(shè)置對(duì)照”一段討論教材中提出一段討論教材中提出的問題。的問題。菌落菌落計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)制培養(yǎng)制培養(yǎng)基基樣品稀釋樣品稀釋涂布平板涂布平板土壤取樣土壤取樣 準(zhǔn)備準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和和選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基。 相同的菌液，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落相同的菌液，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯數(shù)目應(yīng)明顯多于多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為對(duì)照，用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起白胨培養(yǎng)基可以作為對(duì)照，用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了到了選擇選擇作用。作用。（1 1）制培養(yǎng)基）制培養(yǎng)基（2 2）

6、土壤取樣）土壤取樣 從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去（鏟已經(jīng)過消從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去（鏟已經(jīng)過消毒處理）表層土毒處理）表層土3cm3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先滅菌左右，再取樣，將樣品裝入事先滅菌過的信封中。過的信封中。稀釋倍數(shù)為稀釋倍數(shù)為 10101 1 10106 6。每個(gè)稀釋度均用。每個(gè)稀釋度均用3 3個(gè)選擇培養(yǎng)基。個(gè)選擇培養(yǎng)基。（3 3）樣品稀釋涂布）樣品稀釋涂布 （4 4）微生物的培養(yǎng)與觀察）微生物的培養(yǎng)與觀察 1. 1.培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落是否篩選出菌落 對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長，對(duì)照的培

7、養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。養(yǎng)基已篩選出一些菌落。 2. 2.樣品的稀釋操作是否成功樣品的稀釋操作是否成功 如果得到了如果得到了2 2個(gè)或個(gè)或2 2個(gè)以上菌落數(shù)目在個(gè)以上菌落數(shù)目在3030300300的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)。菌落的計(jì)數(shù)。 3. 3.重復(fù)組的結(jié)果是否一致重復(fù)組的結(jié)果是否一致 如果各位同學(xué)選取的是同一種土樣，統(tǒng)計(jì)的如果各位

8、同學(xué)選取的是同一種土樣，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn)，則需要從各結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn)，則需要從各項(xiàng)操作過程中去分析、尋找可能的原因。項(xiàng)操作過程中去分析、尋找可能的原因。能分解尿素的細(xì)菌的鑒定能分解尿素的細(xì)菌的鑒定鑒定的原理：鑒定的原理： 細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基的phph升高。升高。鑒定方法：鑒定方法： 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，利在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，利用此培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基的顏色變化。用此培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基的顏色變化。1.1.使用選擇培養(yǎng)基的目的是（使

9、用選擇培養(yǎng)基的目的是（ ） a.a.培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng)細(xì)菌 b.b.培養(yǎng)真菌培養(yǎng)真菌 c.c.使需要的微生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 d.d.表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別2.2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是別是( )( ) a.co a.co2 2和和n n2 2 b. b.葡萄糖和葡萄糖和nhnh3 3 c.coc.co2 2和尿素和尿素 d.d.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素c cd d3.3.下列說法不正確的是（下列說法不正確的是（ ）a.a.科學(xué)家從科學(xué)家從70708080度熱泉中分離

10、到耐高溫的度熱泉中分離到耐高溫的taqdnataqdna聚聚 合酶。合酶。b.b.統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的5 5個(gè)平板的菌落數(shù)依次為個(gè)平板的菌落數(shù)依次為m1m1、m2m2、 m3m3、m4m4、m5m5，以，以m3m3作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值。作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值。c.c.設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度 d.d.同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多。種類最多。4.4.為培養(yǎng)和分離出酵母菌

11、并淘汰雜菌，常在培養(yǎng)基中為培養(yǎng)和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養(yǎng)基中加入（）加入（） a.a.較多的氮源物質(zhì)較多的氮源物質(zhì) b.b.較多的碳源物質(zhì)較多的碳源物質(zhì) c.c.青霉素類藥物青霉素類藥物 d.d.高濃度食鹽高濃度食鹽b bc c 5、實(shí)驗(yàn)測(cè)定鏈霉素對(duì)、實(shí)驗(yàn)測(cè)定鏈霉素對(duì)3種細(xì)菌的抗生素效應(yīng)，用種細(xì)菌的抗生素效應(yīng)，用3種細(xì)種細(xì)菌在事先準(zhǔn)備好的瓊脂塊平板上畫菌在事先準(zhǔn)備好的瓊脂塊平板上畫3條等長的平行線（條等長的平行線（3條線均與下圖中的鏈霉素帶接觸），將平板置于條線均與下圖中的鏈霉素帶接觸），將平板置于37條條件下恒溫培養(yǎng)件下恒溫培養(yǎng)3天，結(jié)果如圖所示。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析以天，結(jié)果如圖所示。從

12、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析以下敘述，不正確的是下敘述，不正確的是 a鏈霉素能阻止結(jié)核菌的生長鏈霉素能阻止結(jié)核菌的生長 b鏈霉素對(duì)結(jié)核菌比對(duì)霍亂菌更有效鏈霉素對(duì)結(jié)核菌比對(duì)霍亂菌更有效c鏈霉素對(duì)結(jié)核菌比對(duì)傷寒菌更有效鏈霉素對(duì)結(jié)核菌比對(duì)傷寒菌更有效 d鏈霉素可以用于治療傷寒病人鏈霉素可以用于治療傷寒病人d d 4 4、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是方法依次是 ( )( ) 化學(xué)消毒化學(xué)消毒 灼燒滅菌灼燒滅菌 干熱滅菌干熱滅菌 紫外線消毒紫外線消毒 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌 巴氏巴氏消毒法消毒法

13、a.a. b. b.c.c.d.d.解析：培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐解析：培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速徹底的滅菌效果；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化迅速徹底的滅菌效果；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒；牛奶為不破壞其營養(yǎng)成分可采用巴紫外線消毒；牛奶為不破壞其營養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法。氏消毒法。a a5、某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種、培養(yǎng)及菌落觀察與計(jì)數(shù)。請(qǐng)