1、課時達標效果檢測一、選擇題1. (2014 濟南高二檢測)基因工程中因受體細胞不同，目的基因導入的方法也不同，下列敘述不正確的是 ()A. 將目的基因導入棉花細胞內常用花粉管通道法B. 將目的基因導入老鼠細胞內常用顯微注射法C. 將目的基因導入大腸桿菌內常用感受態細胞轉化法D. 將目的基因導入小麥細胞內常用農桿菌轉化法【解析】選 D 。小麥是單子葉植物，其受傷后不能分泌酚類物質，農 桿菌對它沒有感染能力。2. (2014 鄭州高二檢測 )下列關于目的基因導入微生物細胞的敘述中，不正確的是 ()A. 常用原核生物作為受體細胞， 是因為原核生物繁殖快， 且多為單細 胞、遺傳物質相對較少B. 受體細

2、胞所處的一種能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態稱為感受態C. 感受態細胞吸收DNA分子需要適宜的溫度和酸堿度D. 感受態細胞吸收重組表達載體DNA分子的液體只要調節為適宜的pH即可，沒必要用緩沖液【解析】選D。由于原核生物具有繁殖快，且多為單細胞、遺傳物質 相對較少等特點， 所以早期的基因工程通常都用原核生物作為受體細 胞；受體細胞經 Ca2+ 處理后，處于一種能吸收周圍環境中 DNA 分子 的生理狀態，稱為感受態；感受態細胞吸收 DNA分子需要在適宜的 溫度和酸堿度的緩沖液中完成。3. 下列關于cDNA文庫和基因組文庫的說法中，不正確的是（）A. cDNA文庫中只含有某種生物的部分基因，基

3、因組文庫中含有某種生物的全部基因B. 如果某種生物的cDNA文庫中的某個基因與該生物的基因組文庫中的某個基因控制的性狀相同，則這兩個基因的結構也完全相同C. cDNA文庫中的基因都沒有啟動子D. 一種生物的cDNA文庫可以有許多種，但基因組文庫只有一種【解析】選B。cDNA文庫中的DNA來源于mRNA的反轉錄過程，所以該DNA（或基因）與該生物體內的原DNA在結構上是有區別的， 如不含有啟動子、內含子等。4. （2014 棗莊高二檢測）2013年3月在上海和安徽首次發現 H7N9禽流感病例，現在我國多地出現禽流感疫情，為此某研究小組為了研制 預防H7N9禽流感病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其

4、簡要的操作 流程如下圖。下列有關敘述錯誤的是（）A. 步驟所代表的過程是反轉錄B. 步驟需使用限制酶和 DNA連接酶C. 步驟可用CaCb處理大腸桿菌，使其從感受態恢復到常態D. 檢驗Q蛋白的免疫反應特性，可用Q蛋白與患禽流感康復的雞的血 清進行抗原一抗體特異性反應實驗【解析】選C。由圖可知：步驟是由 RNA合成DNA的過程，表 示反轉錄，選項 A正確；步驟是把目的基因與質粒連接，構建重 組質粒的過程，該過程需使用限制酶和 DNA連接酶，選項B正確； 步驟可用CaCl2處理大腸桿菌，使其從常態轉化為感受態，選項 C 錯誤；檢驗Q蛋白的免疫反應特性，可用 Q蛋白與患禽流感康復的 雞的血清進行抗原

5、-抗體特異性反應實驗，選項 D正確。5. （2014 揭陽高二檢測）甲、乙兩圖均為DNA測序儀顯示的圖像，已 知甲圖顯示的堿基順序為 TCGAAT則乙圖顯示的堿基順序為（）甲乙復制起始點用于轉移T'jzA 的基因A. TCGCAC B.ACCGTG C.ATTCAG D.TCCGGA【解析】選B。由第一幅圖給出的條件可知，從左到右看依次為ACGT，但解題時應從上向下看，這樣就可得出乙圖顯示的堿基順序為ACCGTG。6. （2014 荷澤咼二檢測）農桿菌中含有一個大型的Ti質 粒（如右圖所示），在侵染植物細胞的過程中，其中的 T-DNA片段轉入植物的基因組。若想用基因工程并通過農桿菌向某

6、種植物中導入抗旱基因，以下分析合理的是 （多選）（）A. 若用 Ti 質粒作為抗旱基因的載體，目的基因的插入位置應該在T-DNA片段內，且要保證復制起始點和用于轉移 T-DNA的基因片段不 被破壞B. 將重組Ti質粒導入農桿菌中時，可以用 CaT處理細菌C. 轉基因抗旱植物培育是否成功的最簡單檢測方法是看該植物是否 具有抗旱性狀D. 若能夠在植物細胞中檢測到抗旱目的基因， 則說明該基因工程項目 獲得成功【解析】選A、B、C。若用Ti質粒作為抗旱基因的載體，目的基因 的插入位置應該在 T-DNA 片段內，且要保證復制起始點、終止點和 用于轉移 T-DNA 的基因片段不被破壞，否則不會成功；將重組

7、 Ti 質粒導入農桿菌中時，可以用 Ca 2+處理細菌，便于完成轉化；轉基 因抗旱植物培育是否成功的最簡單檢測方法是看該植物是否具有抗 旱性狀；能夠在植物細胞中檢測到抗旱目的基因， 并能成功表達出抗 旱性狀，才說明基因工程項目獲得成功。二、非選擇題7. （2014 武漢高二檢測）農桿菌是一種在土壤中生活的微生物， 能在 自然條件下感染植物， 因而在植物基因工程中得到了廣泛的運用。 下 圖為農桿菌轉化法的示意圖，試回答下列問題：(1)插入目的基因的染色體DNA I 導入植物細胞丁X廂禮鑒I腳鯛麟植財胞般情況下農桿菌不厶匕能感染的利用農桿菌自然條件下感染植物。具體原理是在農桿菌的Ti質粒上存在T-

8、DNA片段，它具有可轉移至受體細胞并整合到受體細胞 上的特點，因此只要將攜帶外源基因的DNA片段插入到（部位）即可。根據T-DNA這一轉移特點，推測該DNA片段上可能含有控制（酶）合成的基因。圖中c過程中，能促進農桿菌向植物細胞轉移的物質是 類化合物。植物基因工程中除了農桿菌轉化法之外，還可采。（至少寫出兩種）【解題關鍵】解答本題的關鍵有:（1）分析農桿菌能感染雙子葉植物和裸子植物的本質;（2）分析農桿菌中Ti質粒中的T-DNA特點及其整合到染色體 DNA的實質?！窘馕觥浚?）農桿菌一般不能感染的植物是單子葉植物，可感染雙子 葉植物和裸子植物。利用其感染性，可實現目的基因導入植物細胞。 真正可

9、轉移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的 DNA 上的是農桿 菌 T-DNA 片段，因此目的基因必須插入到該部位才能成功。 (2) 根據 T-DNA 這一轉移特點，可以推測該 DNA 片段能控制合成 DNA 連接 酶、限制酶以實現與雙子葉植物細胞染色體 DNA 的整合。 (3)植物細 胞受傷后可產生酚類化合物，促進農桿菌向植物細胞轉移。 (4) 植物 基因工程中除了農桿菌轉化法之外，還有基因槍法和花粉管通道法 等。答案： (1)單子葉植物 目的基因導入植物細胞染色體的 DNA T-DNA 片段(內部 )(2)DNA 連接酶、限制酶 (3) 酚(4) 基因槍法、花粉管通道法【互動探究】(1) 怎樣

10、操作能使農桿菌感染單子葉植物？提示： 可在單子葉植物受損處涂加酚類化合物來吸引農桿菌。(2) 根據題干分析，為什么動植物病毒也可作為基因工程的載體？ 提示：病毒能夠侵染正常細胞， 有的病毒還能將自己的核酸整合到宿 主細胞的染色體上，所以可以作為基因工程的載體。8. ( 能力挑戰題 ) 回答下列與基因工程有關的問題：I .來源于豇豆的胰蛋白酶抑制劑基因(CPTI基因)具有廣譜的抗蟲特 性。但直接把該基因轉入農作物后，發現轉基因植株中合成的 CPTI蛋白質的積累量并沒有達到能夠強烈抑制害蟲的濃度。 于是科研工作者在體外對CPTI基因進行了修飾，在其兩端分別融合了“信號肽”序列和“內質網滯留信號”序

11、列，在它們的共同作用下，CPTI蛋白質在轉基因植株中的積累量明顯提咼。(1) 在此項基因工程中，供體細胞是 ; CPTI基因是人們所需要的特定基因，稱為 。(2) 在體外對CPTI基因進行修飾時，首先要用處理，形成黏性末端?！靶盘栯摹毙蛄屑啊皟荣|網滯留信號”序列的化學本質II .研究人員欲將目的基因通過質粒導入大腸桿菌細胞內，以表達某種所需的蛋白質。已知質粒中兩個抗性基因： A是抗鏈霉素基因，B 是抗青霉素基因。假設目的基因只能插入到A基因中，而所用大腸桿 菌不帶有任何抗性基因。(1) 與質粒相比，下列哪些結構含有的堿基種類較多 ()A.核糖體 B.線粒體 C.葉綠體(2) 當完成了基因工程的

12、操作后，經過一段時間的培養，對工程菌進行檢測會產生以下三種結果： 抗鏈霉素的同時也抗青霉素，這說明 。 不抗鏈霉素但抗青霉素，這說明 o 既不抗鏈霉素也不抗青霉素，這說 明?！窘馕觥縄 .(1)CPTI基因來源于豇豆，因此供體細胞是豇豆細胞，該 基因屬于目的基因。(2)用限制酶處理CPTI基因，可以在其兩端形成 黏性末端。(3) “信號肽”序列及“內質網滯留信號”序列都能與CPTI 基因連接在一起，其本質都是 DNA。II .(1)質粒是小型環狀DNA ,堿基組成為4種；核糖體中只含RNA , 堿基組成為4種；線粒體、葉綠體中含有 DNA和RNA，堿基種類 為5種。(2)質粒中含有抗鏈霉素基因

13、 A和抗青霉素基因B,如果目 的基因只能插入到 A基因中，則重組的結果是抗鏈霉素基因不能表 達，抗青霉素基因可以表達。因此，如果工程菌抗鏈霉素的同時也抗 青霉素，說明質粒已導入，但導入前并未與目的基因發生結合；如果 工程菌不抗鏈霉素但抗青霉素，說明重組的質粒順利導入受體細胞； 如果工程菌既不抗鏈霉素也不抗青霉素，說明質粒未能導入受體細 胞。答案：1.(1)豇豆細胞 目的基因限制酶 (3)DNAI .(1)B、C(2)質粒已導入，但導入前并未與目的基因發生結合重組的質粒順利導入受體細胞 質粒未能導入受體細胞9. (2014 福州高二檢測)蘇云金芽孢桿菌(Bt)能產生具有殺蟲能力的 毒素蛋白。下圖

14、是轉 Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(ampr 為抗氨芐青霉素基因)，據圖回答下列問題。孑榊限斟酶識期序列與歯詡忖點 aWt咖心或鐳黑tiGATCC CCTAGGHind III 加曲11 B屜用11 I Bsf I毒素蛋白 蘇云金芽砲桿菌BamU II Bst I 曲屏I目的基因/ffffjiH I Hind : 1( d h箍整合的帶有目的 基因的T-DNA11 I植物DMAHDNA連接酶咱的基因T-DNA涂布在氨節青霉 素選擇平板上大腸桿菌序二X.sb/更組Tj質牡轉移a的基頁的質粒IF(1) 將圖中的 DNA用Hind皿、BamH完全酶切后，反應管中有種DNA片段。(2) 圖中表

15、示Hind皿與BamH酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得種重組質粒；如果換用Bst I與BamH酶切，目的基因與質粒連接后可獲得種重組質粒。目的基因插入質粒后，不能影響質粒的。(4)圖中的Ti質粒調控合成的vir蛋白，可以協助帶有目的基因的T-DNA導入植物細胞，并防止植物細胞中 對T-DNA勺降解。(5) 已知轉基因植物中毒素蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人 類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細 胞。(6) 生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的 基因頻率的增長速率?！窘馕觥勘绢}考查基因工程的相關知識。(1)由于上述兩種酶形成的 黏性末端不一樣，所以被兩種不同的限制酶完全切割之后所形成的片 段有4種。同時被兩種限制酶切割有兩種不同的目的基因，所以 重組質粒有兩種。Bst I與Ba