1、1淋巴細胞亞群免疫表型與臨床淋巴細胞亞群免疫表型與臨床2主要內容 概念 各類淋巴細胞的基礎知識 淋巴細胞亞群檢測的臨床意義3一、概念 淋巴細胞淋巴細胞 屬白細胞的一種，由淋巴器官產生，是機體免疫應答功能的重要細胞成分。 淋巴細胞的免疫表型淋巴細胞的免疫表型 淋巴細胞的膜表面分子膜表面分子（分化群抗分化群抗原原 CD）可用于鑒定和區分其亞群和亞類，是研究淋巴細胞的重要工具。 淋巴細胞亞群淋巴細胞亞群 按其發生遷移、表面分子和功能的不同，可分為T細胞、B細胞和自然殺傷(NK)細胞。淋巴細胞的免淋巴細胞的免疫表型疫表型 淋巴細胞的膜表面分子膜表面分子（分化群抗原分化群抗原 CD）可用于鑒定和區分其亞

2、群和亞類，是研究淋巴細胞的重要工具。4淋巴亞群在外周血中的比例（%淋巴細胞） T淋巴細胞 50-84% NK細胞 7-40% B淋巴細胞 5-18%5各類淋巴細胞的基礎知識6T淋巴細胞7 概念概念 來源于骨髓的淋巴樣干細胞，在胸腺中成熟的淋巴細胞，故稱胸腺依賴性淋巴細胞（thymus-dependentlymphocyte），簡稱T細胞。 功能功能 負責細胞免疫功能，參與抗腫瘤、抗細胞內感染微生物、移植排斥、遲發型超敏反應；對部分體液免疫發揮輔助功能。 免疫表型免疫表型：CD3，與TCR形成復合體，是T細胞識別抗原和轉導信號的主要單位。 CD3+/CD4+：輔助性T細胞 CD3+/CD8+：殺

3、傷性T細胞8T淋巴細胞的分化發育 T細胞在胸腺中的發育細胞在胸腺中的發育 T細胞在外周淋巴器官中的分化發育細胞在外周淋巴器官中的分化發育9T細胞在胸腺中的發育細胞在胸腺中的發育 三個階段三個階段u雙陰性階段雙陰性階段 (DN)u雙陽性階段雙陽性階段 (DP)u單陽性階段單陽性階段 (SP) 三個重要事件三個重要事件uTCR基因重排基因重排u陽性選擇陽性選擇u陰性選擇陰性選擇 三個重要結果三個重要結果u獲得功能性獲得功能性TCRu獲得獲得MHC限制性限制性u獲得自身耐受獲得自身耐受1011T T細胞在外周淋巴器官中的分化發育細胞在外周淋巴器官中的分化發育 初始初始T細胞細胞主要定居于外周淋巴器官

4、的胸腺依賴區 T細胞在外周淋巴器官與抗原接觸后，最終分化為具有不同效應功能的T細胞亞群，效應效應T細胞細胞和記憶記憶T細胞細胞。12T淋巴細胞亞群淋巴細胞亞群n 按按T細胞細胞所處的活化階段所處的活化階段 初始初始T細胞（細胞（naive T cell） 效應效應T細胞（細胞（effector T cell） 記憶性記憶性T細胞（細胞（memory T cell）n 按按TCR的表型分類的表型分類 TCR + T細胞細胞 TCR + T細胞細胞n 按按T細胞的細胞的CD4和和CD8分子表型分子表型 CD4+ T細胞細胞 輔助輔助T細胞細胞 CD8+ T細胞細胞 殺傷殺傷T細胞細胞 按按T細胞的

5、功能分類細胞的功能分類 Th（help T cell） Tc/C TL（cytotoxic T cell） Tr（regulatory T cell）13初始初始T T細胞、效應細胞、效應T T細胞和記憶細胞和記憶T T細胞細胞 初始初始T細胞細胞 表型：CD45RA+、 CD62L+、CD25-（IL-2R） 特點：未接觸抗原的成熟T細胞，有分化潛能 效應效應T細胞細胞 表型： CD4+、CD8+ 遷往炎癥部位，執行細胞免疫效應 記憶性記憶性T細胞細胞 表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R） 特點：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化141516Th、CTL、Ts和和Treg細胞細

6、胞n 輔助性輔助性T細胞（細胞（Th）CD4CD8-TH1，TH2 功能：具有輔助其他免疫細胞分化和調節免疫應答（促進和抑制）的作用n 細胞毒性細胞毒性T細胞（細胞（CTL） 主要表面標記：CD4-CD8+CD28+ 功能：特異性直接殺傷靶細胞 殺傷機制： 釋放穿孔素，顆粒酶殺傷靶細胞 通過Fasl介導靶細胞的凋亡17n 抑制性抑制性T細胞（細胞（Ts） 主要表面標志：CD4-CD8+CD28- 功能：對免疫應答有重要的負調節功能，抑制性T細胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應等疾病發生有關。n 調節性調節性T細胞（細胞（Treg） 主要表面標記：CD4+CD25+ 功能：抑制免

7、疫應答 18小結ThCTLTsTreg表面標志CD3+CD4+CD8-CD3+CD4-CD8+CD28+CD3+CD4-CD8+CD28-CD3+CD4+CD25+主要功能19NK淋巴細胞20 NK細胞：一種大顆粒淋巴細胞。英文全稱為“natural killer cell”，也稱作“自然殺傷細胞”。 它是一種能直接殺傷靶細胞效應的特殊的淋巴細胞系，具有抗腫瘤抗感染免疫調節的功能，且表現為速發效應。在醫學上被稱作是“人體抵抗癌細胞和病毒感染細胞的第一道防人體抵抗癌細胞和病毒感染細胞的第一道防線線”。21NK細胞的表型nNK細胞表面標志物：CD3-/CD16+CD56+n與T細胞、B細胞相比，N

8、K細胞表面標志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-，部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性，表達IL-2受體鏈（P75，CD122），CD11b/CD18陽性。22細胞因子細胞因子誘導殺傷細胞（殺傷細胞（CIK） CIK（cytokine-induced Killer）細胞是由r-IFN、CD3-Ab、IL-1、IL-2等細胞因子在體外誘導并大量擴增的具有殺傷腫瘤活性的細胞，是一種新型、高效、廣譜的免疫細胞，是目前最新的腫瘤免疫治療手段。 CIK細胞：CD3+T細胞為主的異質性細胞群體，同時表達CD3、CD56，兼CTL強大的抗瘤活性，和NK細胞非MHC限制性殺瘤特點，目前所知殺傷活性最強的免

9、疫效應細胞。23CIK的表型及起源的表型及起源：表型：表型： CD3+CD56+和CD3CD56兩個亞群，主要效應細胞CD3+CD56+。分布：分布：優先分布肝臟，CD3+CD56+占肝臟CD3細胞的1/3，其次外周血，占-5%。來源：來源：主要是CD3+CD56的T細胞，多數是CD4-CD8 + 及CD4-CD8-。24B淋巴細胞25nB淋巴細胞是免疫系統中的抗體產生細胞。u產生的抗體可與抗原起特異性的結合，如中和細菌的外毒素使其失去毒性作用；u抗體與抗原結合后形成的復合物易被吞噬細胞清除；u抗體與抗原結合后再結合補體清除病原體。nB細胞特異性標志物：CD19、CD20等uB淋巴細胞檢測時，

10、多用CD3-CD19+來作為檢測標志。26B細胞的亞群 周圍淋巴器官中的B細胞具有異質性 可依據CD5是否表達分為B1和B2兩亞群性質B1B2初次產生時間胎兒期出生后更新方式自我更新骨髓產生特異性多反應性單特異性是否有CD5表達有無27淋淋 巴巴 細細 胞胞 亞亞 群群 與與 臨臨 床床28淋巴細胞亞群的檢測內容29目前常做以下項目的檢測目前常做以下項目的檢測n淋巴細胞亞群分析 T細胞亞群分析uT淋巴細胞（CD3+）u輔助T細胞(CD3+CD4+)u殺傷/抑制T細胞（CD3+CD8+)uCD4+/CD8+的比值 B細胞(CD3+CD19+) NK細胞(CD3-CD16+56+)n活化淋巴細胞的

11、檢測30TBNK檢測的適用人群 腫瘤病人化療過程中，抗癌藥物對同樣處于增殖狀態的、對腫瘤敏感的活化淋巴細胞也有殺傷作用，甚至免疫功能嚴重損毀。 活動期的自身免疫病患者，必然表現為淋巴細胞亞群絕對值和活化淋巴細胞百分比的明顯異常。 懷疑有免疫缺陷的病人 器官移植患者術后監測中更具有不可或缺的作用31淋巴細胞亞群的正常參考值（%淋巴細胞群）項 目百分率（%）總T淋巴細胞（CD3+CD19-)50-84輔助/T淋巴細胞（CD3+CD4+)27-51抑制/細胞毒T淋巴細胞（CD3+CD8+)15-44輔助/抑制T淋巴細胞比值0.71-2.78NK細胞（CD3-/CD16+56+)7-40總B淋巴細胞（

12、CD3-CD19+)5-18T淋巴細胞+NK淋巴細胞+B淋巴細胞95-1053233NK細胞CIK細胞B細胞34淋巴細胞亞群的臨床意義35n 淋巴細胞亞群分析是檢測細胞免疫和體液免疫功能的重要指標，它總體反映機體當前的免疫功能、狀態和平衡水平，并可以輔助診斷某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態反應性疾病等），分析發病機制，觀察療效及檢測預后有重要意義 。n 當某種細胞亞群所占百分比過高或過低，都提示存在免疫功能紊亂，但一般情況下對疾病的診斷和鑒別無特異性。36淋巴細胞亞群測定的結果解釋淋巴細胞亞群測定的結果解釋 T細胞異常 CD4細胞異常 CD8細胞異常 CD4/CD8比

13、值異常 B細胞異常 NK細胞異常37 總T、總B、NK細胞可以用來判斷某些免疫缺陷和自身免疫性疾病，也可以用于監測移植后得免疫重建。38T細胞減少細胞減少 見于先天性免疫缺陷病（例如DiGeorge綜合癥，胸腺發不發育） 以及腎臟和心臟移植后接受預防排斥的免疫調節藥物OKT-3的患者 也常見于惡性腫瘤、自身免疫性疾病（SLE和RA等）、先天性免疫缺陷病、艾滋病、接受放療、化療或者使用腎上腺皮質激素等免疫抑制劑資料的患者。39T細胞增多細胞增多 見于慢性活動性肝炎、重癥肌無力等自身免疫病活動期 40 CD4淋巴細胞減少：見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應用免疫抑制劑患者。 CD4淋巴細胞

14、增加：可能有過強的細胞免疫反應；或某些免疫增強藥物的有效結果。 CD8淋巴細胞增多：見于自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活動性肝炎、腫瘤及病毒感染等。 CD8淋巴細胞減少：見于機體對各種病毒感染的免疫反應；腫瘤患者具有抗腫瘤免疫反應時 。 CD8細胞與CD4細胞同時減少：見于各種嚴重的免疫缺陷以及腫瘤患者晚期或免疫系統嚴重損傷后。 41CD4/CD8比值異常比值異常 CD4/CD82.5表明細胞免疫功能處于“過度活躍”狀態，容易出現自體免疫反應，見于類風濕類風濕性關節炎關節炎、I型糖尿病等。 CD4CD810稱為“免疫抑制”狀態，常見于（1）免疫缺陷病，如艾滋病時的比值常顯著小于0.

15、5；（2）惡性腫瘤，當發生癌轉移時,CD3 、CD4 細胞數明顯減少的同時CD8 細胞數明顯增多,CD4/ CD8 比值明顯降低,提示惡性腫瘤患者晚期細胞免疫功能更低,預后更差 ；（3）再生障礙性貧血、白血病；（4）某些病毒感染；CD4/CD8降到1.0以下為“倒置”,是較為明顯的異常；（5）用于器官移植后監測機體的免疫狀態、用藥劑量的調整、抑制排斥反應的發生。若移植后CD4/CD8較移植前明顯增加，則可能發生排斥反應。比值持續減低表明移植后感染，若比值0.2時應停用免疫抑制劑，以免繼發嚴重感染而導致移植失敗。 注意分清主要是注意分清主要是CD8細胞增多還是細胞增多還是CD4減少減少42B細胞的異常 B細胞明顯增加：細胞明顯增加：見于淋巴組織增生失調（例如慢性淋巴細胞白血病），也見于病毒感染早期。 B細胞缺如：細胞缺如：見于原發性B細胞缺陷病（如性聯無丙種球蛋白血癥）和重癥聯合免疫缺陷（T細胞同時缺如）；體液免疫功能不良者則減少；在生命垂危時可呈現極度減少 43NK細胞異常細胞異常 NK細胞增多：見于病毒感染，腫瘤早期患者（尚有抗腫瘤免疫反應時） NK細胞減少：