1、cell differentiation一、概念二、細胞分化的物質基礎和特點三、細胞分化的可逆性和全能性四、細胞分化的實質五、細胞分化的機理六、影響細胞分化的因素七、癌細胞 一、概念l細胞分化（cell differentiation）是一種類型的細胞在形態結構生理功能和生化特性等方面穩定地轉變成另一類型細胞的過程。l黑色素細胞體外培養三十多代l多細胞生物中細胞分化發生于整個生活史中，但胚胎期是最重要的分化期l細胞分化發生于一切真核細胞中，并可追溯到原核細胞二、細胞分化的物質基礎和特點(一)細胞分化的物質基礎新的性狀=新的蛋白質（二）細胞分化的特點1、決定性 在能識別一個細胞的分化以前，就有了

2、一個預先保證細胞怎樣變化的時期，這個階段稱為細胞決定（cell determination）。如動物受精卵的卵裂（動物極，植物極）（1）細胞決定的穩定性和遺傳性 成蟲盤細胞 9年，1800代后l將成蟲盤取出再移到幼蟲體內，當幼蟲變態時被移植的成蟲盤細胞仍發育成相應的成體結構。 a、正常果蠅的觸角為具芒觸角；b、突變果蠅的觸角發育為足 引自lehninger principles of biochemistry 3rd ed. （2）轉決定（transdetermination） 即決定的細胞改變了原來的預定發育方向，使細胞分化的結果偏離決定方向，也就是從一種遺傳狀態轉變成另一種遺傳狀態稱為轉決

3、定轉決定的發生是遺傳性突變的結果，它是一群細胞而不是單一細胞發生變化。轉決定的細胞：其它類型（同源異形）或原初狀態的結構。2、時空性 “時”=不同的發育階段 “空”=環境3、不可逆性 l一個細胞一旦分化成穩定類型以后，就不能逆轉到未分化狀態。如哺乳動物高度分化的成熟紅細胞不會再返回到有核的前體細胞。l有機體常保留一部分未分化的多能性干細胞，可用來彌補失去的可逆性，一旦需要，干細胞即進行分裂，新細胞按發育途徑產生專一的分化細胞。三、細胞分化的可逆性和全能性細胞分化絕對是不可逆的？1958 steward：分化的細胞脫分化（dedifferentiation）胚性細胞的狀態再分化（rediffer

4、entiation） 根莖完整植株，與胚胎發育過程相似。l細胞全能性（totipotency）指已經分化的細胞在一定條件下不僅能脫分化，而且還保持著全套基因組織，并且有再生生物體的遺傳潛力。l1964年guha等培養毛葉曼陀羅的花藥產了單倍體花粉植物，動物細胞也能象植物細胞那樣脫分化而再生新的肢體，如蠑螈在切除肢體后可再生。(一)植物細胞全能性l已被廣泛用于生產實踐中，現已培養出一大批包括水稻、小麥、煙草、苗木、花卉等。（二）動物細胞的全能性受精卵能夠分化出各種細胞、組織，形成一個完整的個體。隨著分化發育的進程，細胞逐漸喪失其分化潛能。細胞分化潛能細胞分化潛能 的改變的改變全能性全能性（tot

5、ipotent）多能性多能性（pluripotency)pluripotency)單能性單能性（monopotency)monopotency)終末分化終末分化（terminal terminal differentiation)differentiation)1全能性細胞 僅在低等動物中存在或高等動物在胚胎發育的早期。2全能性細胞核 現在的技術手段還不能使已分化的高等動物細胞直接再生成完整個體，但許多研究證明已分化的細胞核仍保持著全套基因組并在一定條件下可具有全能性。gurdon（62，74，75）用非洲爪蟾為材料進行核移植，證明了已分化細胞核仍保持著全套的基因組。童第周1978曾報導將黑斑

6、蛙的紅細胞核移入去核的黑斑蛙的卵，核即分裂，卵發育成正常蝌蚪，血細胞核變成各種有功能的細胞核。 1997年克隆羊的誕生（wilmut）說明高度分化的細胞核仍具有全能性 3不可逆的分化細胞 哺乳動物的紅細胞成熟后失核，馬副蛔蟲體細胞染色體消減（染色體失去達80）等屬此類。具有相同基因組成的細胞為什么會出現不同的性狀呢？肌細胞：收縮性蛋白質紅細胞：血紅蛋白四、細胞分化的實質細胞分化歸根到底在于特定基因的表達即細胞分化的實質（本質）是基因表達的調控問題。differentiation process usually involving changes in gene expression by wh

7、ich a precursor cell becomes a distinct specialized cell type（一）基因的差次表達（differential expression，順序表達sequential） 胚胎在發育過程中之所以相繼出現新的細胞類型是由于有關的特定基因按照一定順序相繼活化的結果，這種現象稱基因的差次表達。 （二）奢侈基因與管家基因1奢侈基因（luxury gene） 指與各種分化的特殊性狀有直接關系的基因，是編碼組織特異性蛋白的基因，對細胞生存無多大影響。如血紅蛋白、絲心蛋白的基因。其特點是：（1）在特定的分化細胞中表達；（2）只在特定的時間內表達；（3）對細

8、胞的生存無直接影響；（4）對細胞的分化起決定性作用。2管家基因（housekeeping gene） 指維持細胞最低限度的生命活動所不可缺少的基因，是細胞生存所必須的。如編碼與細胞分裂及能量代謝有關的蛋白質的基因，其特點是：（1）所有細胞共有；（2）細胞周期的任何時期都表達；（3）對細胞分化只起協助作用。管家基因與奢侈基因的拷貝數？重復基因（repeated or duplicated gene）非重復基因（unrepeated or unique gene）重復106以上稱為高度重復，如隨體dna，1025中度重復 rrna、trna、5srna的基因。非重復基因，重復次數102以下，如絲心

9、蛋白的基因。管家基因=中度重復；奢侈基因=非重復基因，但有例外如羽毛角蛋白的基因100240。五、細胞分化的機理 （一）細胞分化與基因本身的變化l分化的細胞或核具有全能性l為何致癌病毒基因整合到宿主細胞引起細胞癌變，說明基因本身的變化與細胞分化有一定關系，現認為基因活性的變化與dna的甲基化和dna重排有關。（二）轉錄水平的調節 轉錄控制(transcriptional control)是真核生物控制基因表達的重要調控方式，通過轉錄調控，使基因在不同組織中進行差異表達。如何判斷兩種組織中差異蛋白的來源?轉錄調控的實驗證據：組織特異性mrna。 1唾腺染色體 疏松區和puff位置的變化說明細胞分

10、化過程中染色體的基因按照一定順序進行差次表達，什么因素導致基因的開關轉錄出不同的mrna？2染色質重組實驗 gilmour和paul取兔子胸腺和骨髓細胞的染色質分別分離出dna、非組pr和組pr，用重組的染色質作模板，加入rna聚合酶和各種前體核苷酸就可合成rna結果如下：（1）未分離的胸腺染色質能合成胸腺mrna（2）未分離的骨髓染色質能合成骨髓mrna （3）重組的胸腺染色質能合成胸腺mrna（4）重組的骨髓染色質能合成骨髓mrna （5）骨髓dna組pr胸腺dna組pr胸腺非組蛋白重組后合成胸腺mrna（6）骨髓dna組pr胸腺dna組pr骨髓非組蛋白重組后合成骨髓mrna 染色體重組實

11、驗表明，非組蛋白與基因選擇性表達的調節密切相關，特異的非組pr可能決定相應的特定基因的轉錄，即調節轉錄過程中的調控因素是非組pr。但也有人證明mrna是基因表達的激活因素（牛滿江1970，孵化1618小時的雞胚切成兩半，放在生理鹽水中或心臟的mrna中浸泡后培養，發現在生理鹽水中浸泡過的雞胚發育正常，而心臟mrna浸過的心臟發育特大，而其它均發育不良，故牛滿江認為心臟的mrna激活了心肌的基因表達）。3.組蛋白轉移模型（histone displacement model）stein 1975年提出組蛋白轉移模型：組蛋白與dna鏈結合，抑制轉錄，非組蛋白在一定的部位與dna結合，它發生磷酸化帶

12、上負電荷，即與帶正電荷的組蛋白牢固結合而使dna裸露（結合物從dna上離開）使此部位dna發生轉錄。組蛋白能使基因的轉錄過程關閉，而非組蛋白則能有選擇地使基因的轉錄過程打開。這只是大概的認識有許多細節不能解釋清楚：如非組蛋白種類很多，那種非組蛋白調節哪種基因的轉錄？組蛋白被包圍在核小體內在轉錄時怎樣使其脫離？而非組蛋白也是受基因編碼的，其調節如何都有待進一步研究。 （三）轉錄后調控 轉錄后調控指mrna的后加工及其降解。1簡單的轉錄本的加工 2復雜的轉錄本的加工（四）翻譯（轉譯）水平的調節 細胞質中進行的轉譯水平的調控包括:mrna穩定性的控制、翻譯起始的控制、翻譯效率、差別翻譯等。對于翻譯水

13、平的調節目前有的實驗表明分化細胞內并無專門調節mrna翻譯的機制，而有些實驗則揭示存在翻譯水平的調節。1gurdon（1971）把兔、小鼠、鴨等的血紅蛋白mrna及牛晶體蛋白mrna分別注入非洲爪蟾的卵母細胞中，結果這些異體mrna都很穩定并翻譯成相應的pr，說明非洲爪蟾卵母細胞的轉譯機構無特異性。2woodland（1974）把兔、小鼠的血紅蛋白的mrna注射到非洲爪蟾的受精卵，發現這些mrna穩定，并在第八天（蝌蚪期）發現有兔、小鼠的血紅蛋白，它存在于蝌蚪的任一組織內，包括肌肉。說明異源mrna穩定并在分化的細胞中也可表達，這說明分化細胞內并無專門控制某種mrna轉譯的機制。3童第周和牛滿

14、江（1975） 鯽金魚 鯉金魚4翻譯效率 兔紅細胞前體中提取mrna，它們含有大量的、鏈合成的mrna，注入蛙卵母細胞，鏈合成約為鏈5倍（5:1）似乎在卵蛙母細胞中mrna轉譯效率高，可是把血紅素一塊注射蛙卵母細胞中，、產量相同.說明血紅素可能通過影響轉譯的速度而對基因表達進行某種調控。5卵母細胞的翻譯調控 在許多脊椎動物和無脊椎動物的未受精卵細胞質中貯存許多mrna，但它們大部分不用來翻譯，只有受精后才能翻譯。受精引起新的mrna合成?放線菌素d(actinomycin d)=rna合成抑制劑l關于其活化機理推測是受精前被蛋白質遮蓋或局限在某特定部位不轉譯，受精后擺脫束縛才轉譯。這些貯存在卵

15、母細胞中沒有翻譯活性的mrna常被稱作“隱蔽” mrna(masked mrna)，受精后mrna從無活性到有活性狀態的轉變發生相當快。l這些預存mrna的激活與兩個不同的事件有關：一是結合的抑制蛋白被釋放，二是通過卵細胞質中一種酶的作用使mrna多聚(a)尾巴長度增加。 （五）翻譯后調控 在真核生物中許多激素的合成都是以一個共同的前體合成的，稱為聚蛋白，然后切割成不同的蛋白質。但是在不同的組織中，切割的方式是不同的，因此相同的基因在不同的組織中合成不同的激素蛋白。例如多肽蛋白阿黑皮素原(pro-opiomelanocortin pomc)的合成就是一例 一、概念二、細胞分化的物質基礎和特點 基礎是新的蛋白質的產生 特點是（1）決定性（2）時空性（3）不可逆性 三、細胞分化的可逆性和全能性四、細胞分化的實質 奢侈基因的表達五、細胞分化的機理 5層次或者說3水平課后閱讀資料：課后閱讀資料：1.1.克隆羊多莉前世今生克隆羊多莉前世今生2.2.世界上首只克隆羊多利被執行世界上首只克隆羊多利被執行“安樂死安樂死”3.viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells. wilmut i, s