1、甲狀腺癌腫瘤標志物的研究進展論文導讀：以前的研究表明高分子量CK的免疫組化可用于組織切片中PTC的輔助診斷。這些特異性腫瘤標志物作為甲狀腺癌的分子標記與甲狀腺細針穿刺活檢、免疫組化及臨床檢驗等技術一起分析。可提高對良性和惡性甲狀腺腫瘤診斷的精確性和敏感性。關鍵詞：甲狀腺腫瘤，腫瘤標志物，診斷甲狀腺癌多起病隱匿，常以無痛性甲狀腺結節為最初臨床表現。雖然通過臨床觸診、B超、核素顯像及細針穿刺細胞學活檢(FNAB)等綜合評價可在一定程度上提高診斷的精確性，但早期診斷仍有困難。隨著分子和蛋白水平對腫瘤研究的進展，與甲狀腺癌發生、發展、轉歸有關的腫瘤標志物近年來出現較多，而理想的腫瘤標志物應該具有特異性

2、高、敏感性強、可信度高及穩定性強的特點1。我們就近年來對甲狀腺癌腫瘤標志物的研究進展作一綜述。1 Galectin3 Galectin3(Gal3)是半乳糖苷酶結合蛋白家族成員，分子質量為31ku，主要存在于細胞質中，亦可位于胞膜及胞核。已有研究證明2，Gal3可作為甲狀腺惡性腫瘤特別是甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)的一個表型特征，考慮Gal3的表達和PTC細胞保持高度增殖活性有關，但其具體作用機制仍不明確。Paron等3利用2DE和MALDIMS方法研究大鼠甲狀腺細胞系FRTL5和Kiras癌基因轉化細胞系Kimol的細胞核蛋白質表達差異，

3、發現Gal3過度表達于Kimol中，而在FRTL5中不表達。研究表明Gal3通過和甲狀腺轉錄因子(thyroid transcriptionfactor1, TTF1)的同源結構域相互作用使TTF1的轉錄活性上調， TTF1是甲狀腺特有的甲狀腺球蛋白和甲狀腺過氧化物酶基因轉錄的調控因子，它的表達水平和甲狀腺細胞增殖水平成正比。Gal3通過和TTF1的相互作用調控甲狀腺細胞的生長分化過程，在腫瘤的轉化和轉移方面起重要作用。Galectin-3免疫過氧化物酶染色可在針吸細胞中進行，具有簡單、易推廣、結果相對可靠的特點。2 細胞角蛋白(CK) 細胞角蛋白是形成表皮細胞中的角質蛋白，是哺乳類動物細胞5

4、種支架成分之一，來源于局部上皮細胞。以前的研究表明高分子量CK的免疫組化可用于組織切片中PTC的輔助診斷。近年來，CK 的研究方向漸轉向低分子量CK-19。CK-19為I型角蛋白，可表達于正常非角化上皮及異常增生上皮的基底層細胞，主要表達于單層上皮細胞，當這些細胞癌變后角蛋白組成不變，但CK-19表達增加。在正常甲狀腺濾泡中僅為局灶性陽性，而在甲狀腺乳頭狀癌中表達增多，尤其當染色強陽性時，支持乳頭狀癌的診斷，普遍用于區別乳頭狀癌和乳頭狀增生，但陽性率也不盡相同。總的來說，CK是一個有用的甲狀腺癌輔助診斷標記，但特異性不高。3 組織蛋白酶B Srisomsap1等4利用2DE對多種甲狀腺疾病組織

5、的蛋白質表達情況進行了研究,分離出組織蛋白酶B(cathepsin B, CB)等。CB是細胞溶酶體中的一種半胱氨酸蛋白酶，可降解層連蛋白、纖連蛋白、IV 型膠原等細胞外基質成分。研究表明, CB在乳腺癌、甲狀腺癌、肺癌、卵巢癌等多種惡性腫瘤中表達上調，且活性明顯升高5。腫瘤細胞CB的表達上調及活性增強有助于降解基底膜主要成分層粘蛋白和IV 型膠原，同時CB通過激活其他蛋白酶如膠原酶、尿激酶等產生協同作用使腫瘤易于侵襲及擴散。利用ESIMS分析CB，結果顯示有4個特異性的斑點：CB1、CB2、CB3、CB4，其中CB2、CB3在甲狀腺濾泡型腺瘤、PTC和甲狀腺濾泡癌中的表達明顯上調，而在結節性

6、甲狀腺腫和Graves病中表達減低。提示可以通過檢測CB水平鑒別那些在顯微鏡下難以區分的甲狀腺濾泡型腺瘤和結節性甲狀腺腫。4 血管內皮生長因子(VEGF) 新血管的生成是實體瘤生長和進展過程中很重嬰的因素。VEGFC又稱淋巴管生成因子，是近幾年新發現的VEGF家族中的新成員，是唯一能使淋巴管增生的因子，在惡性腫瘤的淋巴結轉移中起一定作用。多項實驗表明，甲狀腺癌中VEGF、VEGFC的表達明顯高于正常甲狀腺，但慢性淋巴細胞性甲狀腺炎的組織和血清中也有高水平的VEGF表達。VEGF、VEGFC在不同類型的甲狀腺癌中表達量不同：VEGF在PTC中陽性表達低于FTC、MTC和ATC，VEGFC在PTC

7、中陽性表達高于其他類型甲狀腺癌。這可能與濾泡狀癌易發生血行轉移，乳頭狀癌易發生淋巴道轉移的生物學行為有關6。Jiang7等研究了VEGF，VEGFC和VEGFD在PTC中的表達和意義，認為VEGFC和VEGFD 與PTC 的淋巴結轉移密切相關，且可作為PTC淋巴轉移的預測因子。5端粒酶 端粒酶是一種核糖蛋白酶，能以自身RNA為模板，逆轉錄合成端粒DNA，保持端粒的長度而維持細胞的分裂能力，使細胞逃脫衰老和死亡而獲得永生化，因此端粒酶的異常激活是惡性腫瘤細胞無限增殖的關鍵。研究表明，端粒酶活性不僅在甲狀腺癌中高表達，而且與癌的甲狀腺外侵犯。Ki67標記指數及低分化密切相關。有學者認為，對于組織和

8、細胞病理學不易區分的濾泡性甲狀腺癌和濾泡性甲狀腺腺瘤來說，端粒酶活性是很好的鑒別標志物，他們發現100的濾泡性甲狀腺癌有端粒酶活性表達，而良性濾泡性甲狀腺腺瘤的陽性率只為19，癌旁的正常甲狀腺組織則無端粒酶活性。由于端粒酶活性檢測具有高度的特異性和敏感性，適用于術前組織FNA標本，有希望作為早期病例的篩查手段。論文發表。86 降鈣素 降鈣素由甲狀腺癌濾泡旁細胞合成及分泌，是MTC較敏感且特異的腫瘤標志物，在MTC幾乎都呈陽性表達且水平升高，而且表達程度與MTC分化程度和侵襲生長能力有關。在未經刺激的情況下，血清降鈣素100 pgml，則提示可能存在MTC。Costante等9 測定了5817例

9、甲狀腺結節的血清基礎降鈣素水平，當該值t20 pgmI且100pgml則有手術指征。Bugalho等10評估了血清降鈣索測定與FNAB 用于MTC術前診斷的價值，發現前者較后者敏感性更高(98VS 63)。7 P53 P53基因是人類腫瘤研究中較為重要的腫瘤抑制基因，定位于染色體17P13上，編碼一個由393個氨基酸組成的核磷蛋白。P53蛋白分為野生型及突變型兩種。野生型P53蛋白據認為是細胞周期相關蛋白可通過誘導P21基因表達來抑制細胞周期G1S轉換。而突變型P53蛋白失去誘導P21轉錄功能，從而喪失G1S轉換抑制作用。P53蛋白為轉錄因子，其生物學作用為細胞周期G1期DNA損傷的監控點，在

10、維持細胞正常生長，抑制惡性增殖過程中起重要作用11。在甲狀腺腫瘤中P53基因突變幾乎全部發生在惡性度極高的間變性癌中或低分化癌中，說明P53突變是甲狀腺腫瘤發生中的晚期事件，其存在常預示預后不良。論文發表。這些特異性腫瘤標志物作為甲狀腺癌的分子標記與甲狀腺細針穿刺活檢、免疫組化及臨床檢驗等技術一起分析，可提高對良性和惡性甲狀腺腫瘤診斷的精確性和敏感性，并且為甲狀腺腫瘤的分類及惡性程度的預測提供新的分子基礎，也為研究甲狀腺癌形成的分子發病機制提供重要的線索。論文發表。可見它們的確立對于指導甲狀腺癌的診斷和早期治療具有重要的臨床意義。然而要在與腫瘤發病有關的諸因素中找出它們的內在聯系，使它們真正成

11、為臨床應用工具尚需長期艱苦的探索。參考文獻：1AlaiyaA,AlMohannaM,LinderS.Clinicalcancerproteomics:promisesandpitfallsJ.JProteomeRes,2005,4(4):12131222.2CvejicD,SavinS,PetrovicI,etal.Galectin3expressioninpapillarymicrocarcinomaofthethyroidJ.Histopathology,2005,47(2):209214.3ParonI,ScaloniA,PinesA,etal.Nuclearlocalizationof

12、Galectin3intransformedthyroidcells:aroleintranscriptionalregulationJ.BiochemBiophysResCommun,2003,302(3):545553.4SrisomsapIC,SubhasitanontIP,OttoA,etal.DetectionofcathepsinBupregulationinneoplasticthyroidtissuesbyproteomicanalysisJ.Proteomics,2002,2(6):706712.5LamparskaPrzybyszM,GajkowskaB,MotylT.Ca

13、thepsinsandBIDareinvolvedinthemolecularswitchbetweenapoptosisandautophagyinbreastcancerMCF7cellsexposedtocamptothecinJ.PhysiolPharmacol,2005,56(3):159179.6張曉黎，郭華，蔣玲端粒酶與甲狀腺腫瘤J國外醫學內分泌學冊，2000，20(4)：188一l917DelaTorreNG，BuleyI，WassJA，eta1Angiogenesisandlymphangiogenesisinthyroidproliferativelesions：relat

14、ionshiptotypeandtumourbehaviourJEndocrRelatCancer,2006，l3(3)：93l-9448JiangHG，GaoM，TangWP,eta1ExpressionandsignificanceofVEGF,VEGF-C，andVEGF-DinpapillarythyroidcarcinomaJAiZheng,2005，24(9)：1136-11399CostanteG，MeringoloD，DuranteC，eta1Predictivevalueofserumealeitoninlevelsforpreoperativediagnosisofmedullarythyroidcarcinomainacohortof5817consecutivepatientswiththyroidnodulesJJclinEndocrinolMetab,2007,92(2)：450-45510BugalhoMJ，SantosJR，SobrinhoLPreoperativediagnosisofmedullarythyroidcarcinoma：fine