1、提高山羊胚胎移植成功率因素的探討 魏志杰，尹海科，王忠林，王學主，任寶華（陜西省布爾羊良種繁育中心，陜西麟游721500）胚胎移植技術是把優秀母畜進行超數排卵處理，并經配種后產生更多的優質胚胎，然后利用手術方法移植到其它同類與采胚母畜同時發情未經配種的母畜子宮內，即人們常所說的“借腹懷胎”，該方法是加速良種擴繁的一種有效途徑。但胚胎移植技術復雜、科技含量高，投資成本大，使該技術在國內畜牧良種繁育方面應用力度大，移植妊娠率相對不高，制約了畜牧良種繁育推廣和畜牧業快速發展。陜西省布爾羊良種繁育中心從1998年開始，連續引進泰國、澳大利亞、南非等國外胚胎生物工程專家與西農大專家合作開展山羊胚胎移植上

2、千例，取得了很好的成果。從供體、受體的選擇；供體的超排；受體同期化發情處理；胚胎回收、沖洗、鑒定；受體移植；受體羊的飼養等方面作了深入研究，總結出了提高山羊胚胎移植成功率的主要因素。1選擇優秀的供受體1.1供體應選擇表現型好，生產水平高，遺傳性穩定，體質健康，發情周期正常，無生殖道疾病，有12胎正常繁殖史的25歲青壯年羊做供體。1.2受體 要求體形大，健康無生殖道疾病，產奶量高，哺乳力強的空懷母羊為受體。如：關中奶山羊、莎能奶山羊等都是很好的受體羊。受體羊年齡以25歲且有12胎的正常繁殖史。供、受體羊的比例一般為1：101：12為宜。2加強供、受體羊的飼養管理供受體在手術前34月必須全部選留到

3、位，并且做好疫病的預防接種及必要的疫病監測及驅蟲等工作，從術前2個月加強飼養，將日糧中的蛋白質逐漸提高到20%30%，要求羊只身體健康，中上等膘情，防止過肥或過瘦。供體羊特別在處理期間及受體羊胚移后，不能突然改變飼養環境、飼養方式及飼養標準，避免長途運輸，意外驚嚇等應激影響，導致羊只不排卵，胚胎退化及死亡，影響移植受胎率。3選擇適宜的胚移季節根據當地氣候環境情況，山羊胚胎移植最佳適宜的季節為810月份，7月份羊只處于發情初期，出現發情不排卵的比率較高，11月份移植所產生的羔羊在次年4月份其成活率及生長速度較低。應避開最熱和最冷季節，氣溫高于32環境下，移植成功率較低，另外，陰雨天氣對移植成功率

4、也有一定的影響，應盡量避開。4使用最佳藥品，準確把握劑量胚胎移植技術在國內運用規模尚小，沒有專門生產胚移藥品的廠家，目前國內使用的胚移藥品大部分都是科研單位自己研制，沒有大量應用臨床實踐，效果也不明顯，副作用較大。其進口藥物釋放性能好，效價穩定，我們在胚移過程中，多年使用進口硅膠陰道栓（georg），其操作方法簡單，處理效果好，受到國內專家好評。我們總結出了胚胎移植采用21天藥物處理程序，在d9換栓一次，注射加拿大生產的fsh（foltropinr），劑量為200300mg為宜，臂部肌肉分4d8次遞減注射，pmsg劑量以200iu為宜，受體同期發情利用率可達87.7%，撤栓時間受體應比供體早撤

5、栓半天（即12h）。供體羊注射pmsg為劑量大則產生的未受精卵多，發情持續時間長。5做好供體羊配種及受體羊試情記錄此項工作是關系到胚胎質量，推算胚齡和確定移植時間的一個關鍵環節，應認真對待。發情測定，以供受體羊開始接受爬跨時間到拒絕接受爬跨時間為準，以68h進行一次測情，一般用結扎輸精管后3個月的試情公羊測情，供體配種采用人工授精與公羊本交相結合的方式進行，間隔6h配種一次，胚胎有效利用率為99.8%，從發情開始至發情結束為止，一定要做好詳細的登記。6抓好胚胎移植術前的環境及器械消毒工作手術前對手術器械進行高壓（15磅壓力30min）、干熱（2201h）滅菌，場地用紫外線照射30min，噴灑消

6、毒劑等方式進行手術場地及環境消毒，整個手術過程做到無菌操作。手術前受體禁食24h，限量飲水，為防止手術前腹壓過大，造成手術困難和羊生殖道的損傷。7選擇正確的沖胚方法供體采胚多采用手術沖胚法進行，子宮角采集胚胎應于配種后66.5d進行，輸卵管沖胚法在配種后23d進行。麻醉以國產藥品846合劑肌肉注射進行全身麻醉，同時準備國產速醒靈解麻藥品進行解救以防異外，手術部位利用電動剪進行剪毛，5%的碘酊消毒，切口應在乳房前腹中線兩側23cm處手術切口，以提高羊只可手術次數，創口以34cm為宜，當摸到子宮角或卵巢后不要強抓，用食指和中指輕輕夾住子宮角或輸卵管，緩慢牽引出切口外，不可用力過大或觸壓卵巢，進行子

7、宮角沖胚，沖胚液以2030ml為宜，沖胚管（進口）氣囊注入空氣為34ml，沖洗凈手術部位的血凝塊，向腹腔內注入含青鏈霉素的溫熱生理鹽水250500ml，將子宮角或輸卵管完全還納腹腔后，檢查腹腔有無異物，然后進行腹膜縫合，依次為肌肉、皮膚縫合，皮膚涂紅霉素軟膏。8胚胎質量鑒定將沖出的胚胎倒入檢卵皿內，在顯微鏡下進行檢查，評定等級，按其質量分為a、b、c三級，將c級胚胎及未受精卵、死胚、變性胚等不可用胚棄掉。一般根據受體羊黃體發育程度進行13枚移植。盡量將兩枚胚胎同時移植入有黃體的同側子宮角內，據測定其胚胎成活率為70.5%，明顯高于移植1枚的成活率（62%）。9胚胎質量與移植方法將胚齡為66.5

8、d胚胎移入同步發情12h(9.742.85)的受體子宮角內，此時大多為早期囊胚或囊胚，其受胎率及產羔率也較高，桑椹胚受胎率52.6%(81/51)，產羔率85.6%(101/118)；早期囊胚受胎率59.4%(19/32)；產羔率88.5%(23/26)；擴張囊胚的受胎率66.2%（43/65)，產羔率78.3%(65/83)；囊胚受胎率57.7%(45/78)，產羔率98.5%(58/59)；孵化胚的受胎率52.2%(24/26)，產羔率81.8%(27/33)。由此可見，胚胎質量的好壞，對受胎率影響很大。采用腹腔鏡進行移植，其特點是創口小，移植速度快，術后感染率低，一般手術熟練者移植1只需

9、1.53min，每天可移植120150只，鮮胚妊娠率為60%80%，術后感染率為5%以下，可以有效地節約時間，提高受胎率。10飼養管理與妊娠診斷由于移植后的受體羊身價倍增，應加強其飼養管理，給予營養豐富的飼草飼料，避免因驚嚇、急趕、突然改變飼養環境，喂冰凍飼料及飲水等引起的應激反應，引起胚胎早期死亡，胚移羊中后期流產，應加強飼養管理。利用b超儀器進行早期診斷，對懷孕胚移羊按移植時間批次以35只為單位組群，安排責任心強的人員管護飼養，每天檢查12次傷口，發現傷口感染盡早處理。移植后兩個情期再進行妊娠診斷：一般以2個情期未返情或用試情羊放入測情進行鑒定，借助超聲波掃描儀進行確診，及時處理空懷羊給懷孕羊補充胡蘿卜等