1、68國外醫學外科學分冊血管內皮生長因子與肝細胞癌(文獻綜述)(華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院普外科,武漢430030廖曉鋒綜述易繼林審校)提要血管內皮生長因子(VEGF)在肝細胞癌(HCC)的生長、浸潤和轉移過程中起重要作用。它作為一種新的腫瘤標志物和抗癌靶點,日益受到人們的關注。關鍵詞血管內皮生長因子癌肝細胞中圖分類號:R3;R73文獻標識碼:A文章編號:1000-6877(2001)02-0068-02血管內皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF),可特異性促進內皮細胞分裂增殖并增加血管通透性。在腫瘤細胞分泌的多種血管生成因子中,因子,與腫

2、瘤的形成和發展密切相關(1(HCC)程中VEGF。本文就此方面作一綜述1.VEGFVEGF是一個分子量為46kd的高度糖基化的堿性蛋白,由兩個分子量各為23kd的不同亞基以二硫鍵連接所組成的二聚體。它為血小板源生長因子(PDGF)家族的一個成員,可由正常細胞及腫瘤細胞產生和分泌。根據VEGFmRNA剪接的不同,分4種形式:VEGF121,VEGF165,VEGF189和VEGF206(3)。VEGF與內皮細胞上兩種特異性受體flt21和KDR/Flk21結合而發揮作用:(1)促進內皮細胞增殖。VEGF是一種內皮細胞特異性有絲分裂原。它與KDR/Flk21結合刺激內皮細胞增殖,而與flt21結合

3、參與血管分化和生成(4,5)。(2)提高血管通透性。VEGF增加微血管特別是毛細血管后靜脈和小靜脈的通透性,是已知最強的血管滲透劑,比組胺作用大5萬倍。因此,VEGF可刺激血漿纖維蛋白等外滲并沉積在細胞外基質,作為腫瘤基質和新毛細血管網形成的基礎。(3)改變細胞外基質。VEGF可促進內皮細胞表達血漿蛋白溶酶激活物(PA)及血漿纖溶酶原激活物抑制劑21(PAI21),以及誘導組織因子、間質膠原酶和蛋白水解酶等在內皮細胞的表達,從而改變細胞外基質,誘導血管形成(6)。2.VEGF信號傳導機制VEGF促血管生成作用是經過蛋白激酶C(PKC)通路傳遞信號的。79)阻滯劑能有效VVEGF介導細胞接種小鼠

4、,發現VEGF阻滯劑明顯抑HCC增生能被PKC2,同時血管再生減少,蛋白激酶活性降低。說明VEGF促腫瘤生長和腫瘤血管的生成同樣經PKC介導的信號傳遞通路發揮作用的(10)。當VEGF經旁分泌途徑與其細胞膜上的特異受(PLC2),體結合時,激活漿膜的靶分子磷脂酶C2促進磷脂酰肌醇24,52二磷酸(PIP2)水解,使內PLC2質網上的Ca2+通道開放并向胞漿釋放Ca2+,進一步激活PKC(11,12),從而經PKC信號傳遞通路發揮其生物學功能。3.VEGF在HCC的表達及其表達調控用RT2PCR方法檢測HCC標本,發現76.5%(37/48)的腫瘤組織表達VEGFmRNA(13)。用North2

5、()()ernblot技術,Zhou14和Mise15分別發現75%(21/28)和60%(12/20)的HCC表達VEGFmRNA。用免疫組化和原位雜交技術證實VEGF蛋白及mRNA表達主要在HCC細胞,腫瘤組織VEGF的表達水平明顯高于鄰近正常組織的表達,強陽性染色的腫瘤細胞多位于腫瘤浸潤邊緣或腫瘤包膜附近,其表達水平與腫瘤血管化程度呈正相關(1517)。其他研究也顯示了()HCC高表達VEGF18,19,說明VEGF主要由HCC細胞產生,與HCC腫瘤血管生成和HCC的發生、發展密切相關。VEGF表達與HCC大小、分化程度的關系意(15,20)見不一。VEGF在HCC中的表達受多種因素的影

6、響和調節。(1)缺氧能增加VEGF基因表達,并且當缺氧和IGF2同時作用時,誘導VEGF表達的作用相加(21,22)。(2)多種細胞因子能上調VEGF表達。Ya22001年第28卷第2期69供了又一途徑。由于大多數HCC細胞高表達VEGF,而正常組織不表達或低表達,使VEGF成為阻斷血管形成的比較理想的靶點(27)。針對VEGF誘發的血管生成可采用(1)抑制VEGF基因表達:利用反義寡核苷酸(ODN)技術治療;(2)直接拮抗VEGF作用:應用VEGF及其受體的單克隆抗體;(3)阻止VEGF與其受體結合:蘇拉明及Lavendustin等。實驗顯示(28,29),抗VEGF抗體明顯抑制動物移植性腫

7、瘤的生長和轉移,使腫瘤血管通透性降低,管徑縮小,最終腫瘤血管消失。因此,對HCC的VEGF深入研究,必將為人們進一步了解HCC的發生、發展和轉移機制,最終征服HCC產生深遠影響。用ELISA方法測定6種HCC細胞系培、和養物上清液VEGF蛋白水平,發現TNF2IL21等8種細胞因子均增加VEGF分泌,其中TNF2IFN2作用最為顯著。bFGF和IGF2增強VEGF表達的(22,23)作用也有報道。(3)突變的ras基因和p53基因maguchi等(20)可上調VEGF的表達,野生性p53使VEGF表達下調。HCC經肝動脈栓塞后,因缺O2使Bcl22基因表達上調。在Bcl22陽性染色區,VEGF

8、染色高于Bcl22陰性染色區,說明Bcl22與VEGF的表達有密切關系(24)。4.VEGF與HCC的生長和轉移腫瘤的生長和轉移是一個多步驟的復雜過程,其中腫瘤血管的生成起重要的作用。VEGF作為腫瘤組織中最主要的血管生成因子,不僅與HCC的腫瘤血管發生、增殖有關,并直接與其浸潤、轉移有關。VEGF通過內皮細胞上的特異受體,直接刺激內皮細胞增殖,產生纖維蛋白溶酶原激活劑和膠原酶等,并增加血管通透性,促進血漿纖維蛋白外滲細胞移動,有利于血管生成,落,為腫瘤的浸潤(11實驗證明基因并受四環素調HCC細胞,再將這種HCC細胞接種小鼠,發現VEGF過度表達時HCC明顯增長,并且腫瘤血管生成增加,腫瘤生

9、長程度與VEGF基因表達水平相關;抑制VEGF表達則導致腫瘤生長減慢。在體外,VEGF水平的變化不改變HCC增殖狀態,但在內皮細胞存在時,VEGF轉染的腫瘤細胞則表達很強的侵襲力。這說明在內皮細胞協同下VEGF對HCC的生長起重要作用。用RT2PCR方法檢測HCC手術標本中的VEGFmRNA發現,在腫瘤內有癌栓或包膜形成差的標本中VEGFmRNA水平顯著高于腫瘤內無癌栓或包膜形成好者,表明VEGF對HCC的浸潤和轉移起作用,是衡量HCC生長、轉移的重要(13)指標。()Jinno等26檢測了86例HCC患者的血漿VEGF濃度,發現其濃度高于正常人、慢性肝炎和肝硬化者。在HCC患者中,血漿VEG

10、F水平與遠轉移密切相關,B期血漿VEGF顯著升高。因此,血漿VEGF被認為是HCC遠轉移的一個特異、敏感且準確的腫瘤標志物,可應用于臨床實踐。5.展望VEGF可成為一個有用的標志物,在HCC的診斷和預后判斷中起重要作用。通過長期阻斷血管形成來抑制惡性腫瘤生長及轉移的休眠療法為治療HCC提參考獻M.1995;67:281-1996;77(5):858-KA.JBiolChem1996;27(2):603-4.ShalabyF,etal.Nature1995;376:62-66.5.FongGH,etal.Nature1995;376:66-70.6.DvorakHF,etal.AmJPath19

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15、腫瘤藥物生長因子受體抑制劑中圖分類號:R73文獻標識碼:A文章編號:1000-),進展,、進展、轉移過程中的許多相關分子()。讓這些基因表達或蛋白合成,運用高容量篩選試驗篩選天然的和合成的分子文庫,就可得到大量的相關產物,以供X線晶體衍射分析。該方法不僅可以提供這些分子的三維結構,而且還可以提供這些分子同其配體或抑制物相互作用的結構信息。人們以這些分子為研究對象,利用X線晶體衍射結構分析結果,進行計算機輔助藥物設計,就能獲得特異性地殺死腫瘤細胞的藥物(1),新型抗腫瘤藥物的研究。1.生長因子受體酪氨酸激酶(RTKs)和絲氨酸/蘇氨酸激酶信號傳導系統及其抑制劑在腫瘤細胞增殖過程的信號傳導中,RT

16、Ks起著重要作用。與生長因子RTKs相關的絲裂信號傳導途徑如下:內源性配體(生長因子)結合其RTKs后使受體二聚化,導致RTKs胞漿部分的酪氨酸磷酸化。受體磷酸化后允許生長因子受體結合蛋白2(Grb2)接頭蛋白通過其SH2結構域同RTKs的胞內部分結合。結合的Grb2被激活,并通過其SH3結構域同鳥嘌呤核苷酸交換因子Sos的富含脯氨酸區結合,這樣導致Sos遷移到胞膜,并同Ras2GTP結合蛋白相結合。Sos與Ras結合后激活Ras,后者依次激活絲裂原激活的蛋白激酶(MAPK)“瀑布”。激活的細胞外信號調節激酶(ERK)遷移至胞核,通過磷酸化并激活相應的轉錄,從而啟動細胞分裂所必需的基因的表達。

17、Ras還存在其他的上游調節因子和下游效應物。表皮生長因子受體(EGFR)、HER22/neu受體、血小板衍生的生長因子受體(PDGFR)、血管內皮細胞生長因子受體(VEGFR)、成纖維細胞生長因子受體(FGFR)是研究最廣的用于抗癌的RTKs。臨床上已試用它們的中和抗體治療多種實體癌。最近美國已批準抗HER22/neu的抗體Herceptin用于治療轉移性乳腺癌(2)。抗EGFR和HER22/neu的兩種抗體聯合運用治療卵巢癌細胞株的實驗研究也取得進展(3)。抗RTKs的小分子抑制劑大多是抑制其受體激酶的活性。它們可能模仿酪氨酸和/或ATP底物。如22氨基吡啶2,32d嘧啶酮對卵巢癌和結腸癌有效(4)。它們可選擇性抑制多種酪氨酸激酶,包括EGF