1、實驗七實驗七 果蠅唾腺染色體的制片與觀察果蠅唾腺染色體的制片與觀察 一、實驗目的一、實驗目的 1.了解唾腺了解唾腺CS的特點的特點 2. 學習分離唾腺的技術(shù)學習分離唾腺的技術(shù) 3. 掌握唾腺掌握唾腺CS制片方法制片方法 二、實驗原理二、實驗原理 永久間期永久間期CS 復制而不分開復制而不分開 伸展狀態(tài)伸展狀態(tài) 壓片法壓片法 多線染色體的特點多線染色體的特點 巨大巨大, ,多線多線 體細胞聯(lián)會體細胞聯(lián)會 染色中心染色中心 深深、淺淺、疏疏、密密 不同的橫紋不同的橫紋 三、實驗材料三、實驗材料、器具器具、藥品試劑藥品試劑 黑果蠅黑果蠅(D. virilis)三三齡幼蟲齡幼蟲 解剖鏡解剖鏡,顯微鏡顯

2、微鏡,培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱;解剖針解剖針, 鑷子鑷子, 載片載片,蓋片蓋片,吸水紙吸水紙 0.7NaCl,1mol/L HCl; 醋酸洋醋酸洋 紅紅;培養(yǎng)基培養(yǎng)基 四、實驗步驟四、實驗步驟 1. 三齡幼蟲培養(yǎng)三齡幼蟲培養(yǎng) 營養(yǎng)豐富營養(yǎng)豐富 松軟松軟, ,濕度大濕度大 追加酵母液追加酵母液 幼蟲密度幼蟲密度 15 18 2. 解剖幼蟲解剖幼蟲 肥大幼蟲肥大幼蟲,洗去雜物洗去雜物 1 d 0.7% NaCl 一手持解剖針壓住蟲體后端一手持解剖針壓住蟲體后端 處處, ,一手持針扎一手持針扎 住頭部住頭部, ,適當用力向前拉適當用力向前拉, ,唾腺隨頭部拉出唾腺隨頭部拉出 唾液腺唾液腺 解剖針解剖針解剖針解剖

3、針 唾液腺唾液腺 頭部口器頭部口器 脂肪帶脂肪帶 挑出唾液腺挑出唾液腺 唾腺唾腺 腸道腸道 唾腺與腸道的區(qū)別唾腺與腸道的區(qū)別 頭頭 尾尾 唾腺唾腺 注意注意: :剝離過程中剝離過程中, ,不能讓載片上的生理鹽水干涸不能讓載片上的生理鹽水干涸 剔除脂肪剔除脂肪 3. 解離和染色解離和染色 剝離唾腺置載片中央剝離唾腺置載片中央,加加1d HCl,解離解離1 2 棄棄HCl,沖洗沖洗2 3次次,1-2 /次次,最后停最后停10 ,吸干吸干 加加1d染液染液,浸染浸染5 4. 壓片及觀察壓片及觀察 載片置平整處載片置平整處, ,加蓋加蓋 片片, ,輕敲輕敲; ;用力下壓用力下壓 低倍至高倍鏡檢低倍至高

4、倍鏡檢 簡要操作步驟簡要操作步驟 幼蟲幼蟲清洗清洗1d鹽水鹽水取唾腺取唾腺 剔除脂肪剔除脂肪解離解離2 水洗水洗2-3次次 吸干吸干浸染浸染5 蓋片蓋片覆濾紙覆濾紙 輕敲輕敲壓片壓片鏡檢鏡檢 五、注意事項五、注意事項 1. 水不可太多水不可太多,否則幼蟲會漂浮而且活躍否則幼蟲會漂浮而且活躍 2. 一定加生理鹽水一定加生理鹽水,否則唾腺易干否則唾腺易干 3. 將脂肪組織清除干凈將脂肪組織清除干凈 4. 吸水時勿將唾腺一起吸走吸水時勿將唾腺一起吸走 5. 染色時間不可過長染色時間不可過長,否則背景也著色否則背景也著色 6. 壓片時要揉壓片時要揉,用力要均勻用力要均勻 六、作業(yè)六、作業(yè) 1. 制作形態(tài)良好制作形態(tài)良好、分散適