1、螆莈肁莃蚆蕿蚃 Tris是什么？有什么作用？ Tris-HCI , Tris-EDTA 如何配制？膀芁膅祎腿螃螄 Tris :三羥甲基氨基甲烷三羥甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般簡稱為 Tris)是一種有機化合物，其分子式為(HOCH2)3CNH2 。Tris被廣泛應用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備。例如，在生物化學實驗中常用的TAE和TBE緩沖液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基因此可以與醛發生縮合反應 Tris為弱堿，在室溫(25 C下，它的pKa為8.1 ;根據緩沖理論，Tris緩沖液的有效 緩沖范圍在pH7

2、.0到9.2之間。Tris堿的水溶液pH在10.5左右，一般加入鹽酸以調節pH值至所需值，即可獲得該pH值的緩沖液。但同時應注意溫度對于 Tris的pKa的影響。由于Tris緩沖液為弱堿性溶液，DNA在這樣的溶液中會被去質子化，從而提高其溶解性。人們常常在Tris鹽酸緩沖液中加入 EDTA制成“TE緩沖液”，TE緩沖液被用于 DNA的穩定和 儲存。如果將調節 pH值的酸溶液換成乙酸，則獲得“TAE緩沖液”(Tris/Acetate/EDTA ),而換成硼酸則獲得“TBE緩沖液”(Tris/Borate/EDTA )。這兩種緩沖液通常用于核酸電泳實驗中。蒀蚃肆罿羃節羆用途：有機合成中間體。在電泳

3、緩沖液中同甘氨酸構成緩沖體系，穩定電泳過程中的PH值。在凝膠中也起到穩定 PH的作用，只不過是 Tris-HCl緩沖體系。 Tris緩沖液 不僅被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑，還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質晶體生長。Tris緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲(C. elegans核纖層蛋白lamin )的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質電泳緩沖液的主要成分之一。此外， Tris還是制備表面 活性劑、硫化促進劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標準物。蒄芆螀膂肅膆蚈 1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)組份濃度 1 m Tris-HCl 配制量

4、 1L配制方法：蒞羋莂裊芆葿薀1.稱量121.1 g Tris 置于I L燒杯中。肀蒂莃蒅肇螀羂 2.加入約800 ml的去離子水，充分攪拌溶解。3.按下表加入濃 HCI量調節所需要的pH值。螞膅蚅衿羀螄薅 pH 值 濃 HCl7.4約 70 ml7.6約 60 ml8.0約 42ml螂裊蟻腿蚆螅蚈4.將溶液定容至1 L。5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。注意：應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1 C,溶液的pH值大約降低0.03個單位。羅膈薃膃裊葿袁1.5 M Tris-HCl (pH8.8)羀螃羅肄羇羈薄組份濃度1.5 MTris-HCl

5、配制量 1 L配制方法袃蒃芄蝿賺肂膄1.稱量181.7 g Tris置于1 L燒杯中。2.加入約800 ml的去離子水，充分攪拌溶解。3. 用濃HCI調節pH值至8.8。4.將溶液定容至1 L。5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。注意： 應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1C,溶液的pH值大約降低0.03個單位。芅蚈薁莁襖薈薈 TE 即 Tris-EDTA buffer (10mM Tris , 1mM EDTA , pH7.4 pH7.6 pH8.0 )。袈肇薀蚅螈莀肂常用分子生物學試劑，用于DNA的溶解等。羀蝕芃羈袇節袂配制 1 0 XTE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)組份濃度：100 mM Tris-HCI , 10 mMEDTA配制量：1 L配制方法：1. 袀肅肇蠆莂蚄肇量取下列溶液，置于I L燒杯中。薃芇芇薂膂腿蒈 1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4 , 7.6 , 8.