設計性實驗 丹參對垂體后葉素致兔心肌缺血的保護作用 實驗目的 2 11 2020 2 學習用垂體后葉素造成急性心肌缺血的實驗方法 觀察藥物抗心肌缺血的作用 實驗原理 2 11 2020 3 垂體后葉素可使全身血管 包括冠狀血管 收縮 靜脈注射后使動物產生急性心肌缺血狀態 出現心室肌靜息張力的增加和發展張力的下降 以及心電圖ST段及T波的變化 可作為冠狀動脈痙攣 急性發作的心絞痛模型 垂體后葉素的注射劑量不同可引起不同程度的障礙 劑量不大時 可迅速恢復 因此可反復在同一動物身上進行多次實驗 材料與方法 2 11 2020 4 一 實驗動物 家兔1只二 器材與藥品 10ml注射器 1ml注射器 手術臺 嬰兒秤 MedLab生物信號采集分析系統 垂體后葉素注射液 20 氨基甲酸乙酯 丹參注射液 生理鹽水 三 方法與步驟 2 11 2020 5 取家兔一只 稱重 用25 烏拉坦溶液 按1g kg 4ml kg 靜脈注射麻醉 麻醉后將兔背位固定于手術臺上 正中切口頸部皮膚 分離右側頸總動脈 遠心端結扎 并在近心端夾上動脈夾 以阻斷血流 用虹膜剪作 V 形切口 將連于壓力換能器的已充滿肝素生理鹽水的心導管向心臟方向插入頸總動脈內 移去動脈夾 觀察屏幕顯示先出現血壓波形 繼續將導管插向左室腔 當波形由血壓波變成下沿達0mmHg附近具有明顯舒張期而峰頂平坦的波形時 即表明導管口已通過主動脈瓣進入左室腔內 再送入導管約0 2 0 4cm 若還保持同樣波形則可把心導管結扎固定 將心電輸入線的三個針形電報分別插入右前肢及右 左后肢皮下 記錄II導聯心電 或采用頭胸導聯 MedLab生物信號采集處理儀參數設置 記錄方式 連續記錄 存盤方式 連續存盤 第1通道 AC輸入 放大倍數1000 第2通道 DC輸入 放大倍數200 采樣速率 1ms 2 11 2020 8 將頭皮針連接在已注滿生理鹽水的10ml注射器上 然后用頭皮針頭刺入耳緣靜脈中 并用木夾或膠布固定 連續記錄正常心室內壓 心電 左室內壓峰值 LVSP mmHg 由心室壓基線到曲線頂峰高度 左室舒張末壓 LVEDP mmHg 心室舒張末或收縮初室內壓轉折點到基線高度 左室內壓正負變化速率最大值 dp dtmax mmHg s LVSP LVEDP 制作心肌缺血由耳緣靜脈注射垂體后葉素1 5U kg 用生理鹽水稀釋到3ml 30秒注射完畢 并立即于注射后20s 40s 1min 2min 5min 10min 20min 30min 分別記錄心功能參數及心電圖的變化 特別注意觀察心率 ST段 T波的變化 待心功能參數及心電圖恢復正常后 由耳緣靜脈注射解救藥物丹參注射液2 5ml kg 15min后再給同量的垂體后葉素 觀察上述同樣時間內心功能參數及心電圖的變化 實驗結果 2 11 2020 11 實驗結果以曲線表示 對已記錄的實驗結果進行回放重顯 剪輯 對給藥前后的波形進行測量以表格形式記錄實驗原始數據綜合全實驗室的實驗數據結果進行統計處理 藥物對垂體后葉素所致兔心肌缺血的對抗作用 注意事項 2 11 2020 13 ST段上移多發生在注射垂體后葉素后 立即至1 5min內 5min內恢復 T波升高常在注射后立即至45s之間 25min至1小時 恢復正常 參考文獻 1 苗戎 陳靜 韓力軍 張莉 復方丹參注射液對急性實驗性心肌缺血左室舒張功能的影響 J 天津中醫 1998 03 2 苗戎 陳靜 高嵐 復方丹參注射液對心肌缺血左室dp dTmin的影響 J 現代中西醫結合雜志 1998 07 3 魏硯明 歐陽五慶 張黎 王俊 申進寶 玉米幼芽提取物對垂體后葉素致家兔心肌缺血的保護作用 J 安徽農業科學 2007 07 附 配對樣本均數的t檢驗 所謂配對樣本 pairedsample 是指兩個樣本中的觀察對象由于存在某種聯系或具有某些相近的重要特征而結成對子 matching 每對中的兩個個體隨機分配接受兩種不同的處理 主要有三種情況 醫學研究中常見的配對樣本 配成對子的兩個個體分別給予兩種不同的處理 如把同窩 同性別和體重相近的動物配成一對 把同性別 同病情和年齡相近的病人配成一對等 同一個體同時分別接受兩種不同處理 如同一動物的左右兩側神經 同一份標本分成兩部分 同一個體自身前后的比較 如高血壓患者治療前后的舒張壓比較 肝炎患者治療前后的轉氨酶比較等 對于配對樣本數據 應該首先計算出各對差值的均數 當兩種處理結果無差別或某種處理不起作用時 理論上差值的總體均數應該為0 故可將配對樣本資料的假設檢驗視為樣本均數與總體均數 0的比較 所用方法為配對t檢驗 pairedt test 公式 2 11 2020 18 其中 Sd為差值d的標準差 例 用簡便法和常規法分別對12份人尿進行尿鉛含量測定 所得結果如表10 1 問根據現有資料能否說明兩種方法檢測結果不同 利用Excel進行醫學統計t檢驗分析 單擊 工具 菜單中的 數據分析 命令可以瀏覽已有的分析工具 如果在 工具 菜單上沒有 數據分析 命令 應在 工具 菜單上運行 加載宏 命令 在 加載宏 對話框中選擇 分析工具庫 在進行兩個樣本均值相等假設分析時 可使用t 檢驗分析 根據情況選擇 成對雙樣本均值分析 雙樣本等方差假設分析和雙樣本異方差假設分析 2 11 2020 22 成對雙樣本均值的t 檢驗分析 當樣本中的觀察值存在配對關系時 可以使用 成對雙樣本t 檢驗 例如對一個樣本組在實驗前后進行了兩次檢測 為確定實驗前后樣本均值是否相等 應使用成對t檢驗 2 11 2020 23 2 11 2020 24 2 11 2020 25 數據錄入 數據分析 分析時 在 工具 菜單中 單擊 數據分析 命令 在數據分析對話框中 選擇t 檢驗 成對雙樣本均值分析 拉出成對雙樣本均值分析對話框 2 11 2020 26 選擇輸入項 2 11 2020 27 其中有如下輸入項 變量1的區域 輸入需要分析的第一個數據區域的單元格引用 該區域必須由單列或單行數據組成 可單擊輸入框右面的按鈕 回到電子表格上自數據開始的單元格向結尾的單元格拖動 此時變量1的區域 A1 K1 自動進入輸入域中 然后單擊輸入域右面的按鈕 回到原對話框 2 11 2020 28 其中有如下輸入項 變量2的區域 輸入需要分析的第二個數據區域的單元格引用 該區域必須由單列或單行的數據組成 輸入方法同前 變量2的區域為 A2 K2 2 11 2020 29 假設平均差 在此輸入期望中的樣本均值的差值 缺省為0值 即假設樣本均值相同 標志 如果輸入區域的第一行或第一列中包含有標志項 應選中此項 如果輸入區域沒有標志項 Excel將在輸出表中生成適宜的數據標志 這里選中此項 Alpha 在此輸入檢驗的統計意義水平 該值范圍為0 1之間 缺省為0 05 2 11 2020 30 輸出區域信息可選擇如下單選項 輸出區域 在此輸入對輸出表左上角單元格的引用 Excel會自動確定輸出區域的大小并顯示信息 可單擊輸入框右面的按鈕 回到電子表格上 單擊輸出開始的單元格 如A3 然后再單擊輸