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操作規程出凝血3.1活化部分凝血酶時間(APTT)測定(第四版)出凝血3.2 原理: 在37條件下用激活劑(糅花酸)激活因子XII和XI,以腦磷脂替代血小板提供凝血的催化表面,在因子IX的參與下,測定貧血小板血漿的凝固時間。部分活化凝血酶時間測定(APTT)是內源性凝血系統的篩選實驗。標本處理:患者處于休息狀態下,采空腹靜脈血(急診病人除外)。采血者應技術熟練,“一針見血”,以防止組織損傷,使外源性凝血因子進入標本。最好不與其它實驗一起采集而使血液停留在針管的時間延長。采完血后,將血液沿管壁緩緩注入試管,避免產生氣泡;然后迅速將血液和抗凝劑輕輕顛倒混勻,避免用力震蕩。全血要在1小時內分離血漿。分離乏血小板血漿時,要在室溫下3000rpm離心10分鐘,室溫下可存放4小時。全部試驗不能在4小時內完成,應將乏血小板血漿分裝在0.51.0ml的小試管中快速冷凍,儲存于-20冰箱中。冷凍過的標本不能再次冷凍,否則結果會不準確。冷凍血漿融化時,應將盛冷凍血漿的容器置于37水浴中,并輕輕搖動,使其迅速融化。出凝血3.4 試劑: APTT試劑:試劑購于天津威士達公司。德靈Actin試劑(試劑盒代號B4218-1)。每瓶試劑內含磷脂(從兔腦中提取),1.0104mol/L糅花酸,穩定劑共2ml。0.025M氯化鈣:實驗室自制。 試劑從冰箱中取出,室溫平衡15min后上機分析。出凝血3.5 儀器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自動血液凝固儀。出凝血3.6 操作:按儀器操作步驟執行標準操作。出凝血3.1開機:按下機器側面的POWER 按鈕。開機后機器進行自檢,當屏幕上邊顯示“Ready:”時可以進行試驗。出凝血3.2檢查消耗品:1、準備反應杯:打開儀器上蓋裝反應杯的蓋子查看反應杯是否夠量,不足時,需及時添加。(一次性最多可放1000 個杯子)2、準備試劑:按照儀器對試劑的要求,把試劑準備好,放到儀器內相應位置,注意查看試劑的量和有效期。如還不熟悉試劑位置時,可在主屏幕上選Reagent Setting,按屏幕顯示放置試劑。3、查看儀器的洗液瓶和廢液瓶出凝血3.3準備標本:將樣本放入樣本架,再將樣本架放到儀器進樣器上。出凝血3.4輸入檢測項目:主菜單上按下Work List 鍵,進入工作菜單,輸入APPT項目。出凝血3.5輸入樣本號: 按屏幕下菜單的ID No.鍵,按順序輸入樣本的序號。出凝血3.6開始檢測:錄入完所有測試信息,按下屏幕右上角START 鍵,開始檢測。出凝血3.7質量控制:使用德靈公司的leve11質控品做質量控制。每批質控品的值不超過2SD。(詳見出凝血1質量控制)出凝血3.8 計算:儀器自動計算出結果。出凝血3.9 參考值:23s33s,由DADE BEHRING公司推薦。出凝血3.10 臨床意義:APTT是內源性凝血系統的篩選實驗。 APTT延長:見于凝血因子VIII、IX、XI、XII、V、II減低或缺乏,纖維蛋白原缺乏癥,抗凝物質存在等。 APTT縮短:見于高凝狀態、血栓性疾病等。出凝血3.11 參考文獻:1) 主編王鴻利.止血與血栓檢驗技術.(第一版1992.6)上海科學技術出版社.2) 主編李家增 王鴻利 韓忠朝.血液實驗學.(第一版1997.10)上海科學技術出版社.3) 主編鄧家棟 楊崇禮 楊天楹.臨床血液學.(第一版1985)上海科學技術出版社.4) 主編鄧家棟 楊天楹 楊

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