我們在液質連用中最常用的兩種接口方式就是APCI源和ESI源,歡迎大家就兩種源的應用原理、使用范圍，在制作標準曲線時，線性范圍的大小、峰的響應大小的比較等問題展開討論！APCI 和ESI 都是API源中兩種離子化方法： 1）原理上：APCI利用電暈放電離子化，氣相離子化。ESI利用離子蒸發(fā)，液相離子化。2）適用范圍：APCI 使用于中等極性，小分子化合物，且具有一定的揮發(fā)性。而ESI 使用于極性化合物和生物大分子。3）多電荷：APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子。ESI 能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類等生物分子。ESI主要用于極性、大分子有機物，APCI一般用于弱極性、小分子有機物。ESI易形成多電荷離子，因而可測大分子。APCI主要產生單電荷離子，限于四極桿的質量分析范圍，一般測定分子量低于1000的有機物。還有一種APPI源，可用于弱極性分子的離子化。ESI除與四極桿、離子阱匹配外，也可配合TOF、FTICR用于生物大分子的研究。APCI應用范圍較窄，常見如某些環(huán)境污染物檢測、甘油三酯檢測等，一定程度上互補了ESI的應用。ESI的優(yōu)點與缺點(1)優(yōu)點1.分子量確認2,適合于揮發(fā)及不揮發(fā)的溶質3.適合于離子化及極性的溶質4.好的靈敏度5.高分子量測定6.適合于毛細管色譜(2)缺點1.相對較低的LC流速。2.在溶液中必須離子化。3.在高鹽條件下會發(fā)生離子抑制。4.產生加和離子影響結果。5.有限的結構信息。補充一點：APCI要求的進樣量比ESI大。ESI在工作時要求流速越低靈敏度越高，主要原因是高流速不適合脫溶劑，ESI的電離假設是庫侖爆炸的模式，如果流速過高，會有抑制。所以在做大分子的時候，還有采用nano-ESI源，流速可以降低到nL級。APCI要求較高流速才可以有更好的離子化效果，如果流速過低電暈針放電無法電離出足夠的電子或者質子與樣品分子發(fā)生反應（印象里是這樣，不對的地方請指正），導致靈敏度降低。APPI源（大氣壓下的閾值光電離源）是在APCI源上加了一個紫外燈（也有使用激光的），通過紫外燈的照射使帶有共軛雙鍵的化合物選擇性電離，由于其選擇性好，所以對特定的化合物靈敏度會有提高。現在還有廠家提出H-ESI源，說是靈敏度比普通ESI能提高5-10倍，具體情況還不了解，有了解請幫忙跟貼說明，謝謝！進質譜的物質推薦使用揮發(fā)性的酸、堿或鹽，磷酸鹽為非揮發(fā)性鹽，最好不要直接進質譜，否則容易損傷質譜，此外也不利于化合物的檢測。解決方法：一、用甲醇水或者乙腈水溶液溶解樣品二、樣品溶液提取后進樣三、使用切換閥可能是你質譜條件不是最優(yōu)，建議用10ug/mL的溶液用Syringe Pump進樣優(yōu)化質譜條件，一般Discharge Current設為：3-5 uA，太高不好，雖然自動優(yōu)化會優(yōu)化到12 uA, Vaporize Temp. 一般設為400-550度，Sheath Gas一般為30 arb，Aux Gas一般為：5-15 arb。談談Thermo Finigan ESI各參數的意義及優(yōu)化過程。參數分為流速相關參數、分子量相關參數。流速相關參數：電噴霧電壓（Spray Voltage）：正離子最大值是5000v，一般設置4500v負離子最大值是4000v，一般設置3800v一般情況下該參數設置值越高，響應會相應提高。不過一般建議不用其最大值。鞘氣（Sheath gas）：如果用0.2-0.3mL/min建議用30 arb輔助氣（Aux gas）：如果用0.2-0.3mL/min建議用 5 arb加熱毛細管溫度（Capillary temperature）：最大值為400度，建議用300-350度，根據化合物的熱穩(wěn)定性選擇Source CID：一般設置為8-10V 分子量相關參數：Tube lens offset：建議不要去優(yōu)化，使用校正時校正曲線上的參數。因為優(yōu)化完后該值會被寫到校正表中，時間一長，校正的曲線就不好用了。其他還包括Q1、Q2、Q3中各個透鏡電壓，這些參數都是分子量相關的參數，因校正時已校正，建議不要自己去優(yōu)化。ESI 為電噴霧，即樣品先帶電再噴霧，帶電液滴在去溶劑化過程中形成樣品離子，從而被檢測，對于極性大的樣品效果好一些； APCI 為大氣壓力化學電離源，樣品先形成霧，然后電暈放電針對其放電，在高壓電弧中，樣品被電離，然后去溶劑化形成離子，最后檢測，對極性小的樣品效果較好。ESI 的軟電離程度較APCI 的還小，但其應用范圍較APCI 的大，只有少部分ESI 做不出，可以用APCI 輔助解決問題，但是APCI還是不能解決所有ESI 解決不了的問題。一般用ESI 和 APPI 搭配使用比 ESI 和APCI 的應用范圍更廣一些。電噴霧電離源是一種軟電離方式，即便是分子量大，穩(wěn)定性差的化合物，也不會在電離過程中發(fā)生分解，它適合于分析極性強的大分子有機化合物，如蛋白質、肽、糖等。電噴霧電離源的最大特點是容易形成多電荷離子。這樣，一個分子量為10000Da的分子若帶有10個電荷，則其質荷比只有1000Da，進入了一般質譜儀可以分析的范圍之內。根據這一特點，目前采用電噴霧電離，可以測量分子量在300000Da以上的蛋白質。大氣壓化學電離源主要用來分析中等極性的化合物。有些分析物由于結構和極性方面的原因，用ESI不能產生足夠強的離子，可以采用APCI方式增加離子產率，可以認為APCI是ESI的補充。APCI主要產生的是單電荷離子，所以分析的化合物分子量一般小于1000Da。用這種電離源得到的質譜很少有碎片離子，主要是準分子離子。APCI與ESI源都能分析許多樣品，而且靈敏度相似，很難說出哪一種更合適。同時至今沒有一個確切的準則判斷何時使用某一種電離方式更好。但是通常認為ESI有利于分析生物大分子及其它分子量大的化合物，而APCI更適合于分析極性較小的化合物。APCI源不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析生物大分子。而ESI源由于它能產生一系列的多電荷離子，特別適合于蛋白質，多肽類的生物分子。ESI和APCI共同點:1、使用高電壓元件和霧化氣噴霧法產生離子2、通常產生(M+H)+或(M-H)-等準分子離子3、產生極少的碎片，但可以控制產生結構碎片、非常靈敏的電離技術。不同點:1、生成離子的方式不同，ESI：液相離子化；APCI：氣相離子化2、樣品兼容性ESI：極性化合物和生物大分子APCI：非極性，小分子化合物（相對ESI而言）且有一定揮發(fā)性3、流速兼容性ESI：0.001到1ml/minAPCI：0.2到2ml/min4、ESI的適用范圍要