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生物化學試題及答案(14)第十四章 基因重組與基因工程 測試題一、名詞解釋:1. 基因工程(genetic engineering)。2. 接合作用 (conjugation )。3. 轉化作用 (transforation )。4. 轉導作用 (transduction )。5. 轉座 (transposition )。6. 轉座子 (transposons )。7. 同源重組 (homologous recombination )。8. 基本重組 (general recombination )。9. DNA克隆 (DNA cloning )。10. 復制子 ( replicon )。11. 限制性核酸內切酶 (restriction endonuclease )。12. 回文結構 (palindrome )。13. 配伍末端 (compatible end )。14. 目的DNA (target DNA)。15. 互補DNA (complementary DNA;cDNA )。16. 克隆載體 (cloning vector )。17. 表達載體 (expression vector )。18. 質粒 (plasmid )。19. 互補 (alpha complementation )。20. 基因組DNA文庫 ( genomic DNA library )。21. 標志補救 (marker rescue )。22. 轉染 (transfection )。23. 基因組DNA (genomic DNA)。24. 感受態細胞 (competent cell )。25. 聚合酶鏈反應 (polymerase chain reaction )。26. cDNA文庫 (cDNA library )。27. 保守性轉座 (conservative transposition )。28. 復制性轉座 (duplicative transposition )。29. 溶菌生長途徑 (lysis pathway )。30. 溶源生長途徑 (lysogenic pathway)。二、填空題:31. 自然界的常見基因轉移方式有_ 、_ 、_ 、_。32. 不同DNA分子間發生的共價連接稱為_有_ 、_兩種方式。33. 某些基因可以從一個位置移動到另一個位置,這些可移動的DNA序列包括_和_。34. 由_和_介導的基因移位或重排稱為轉座。35. 反轉錄病毒整合酶可特異地識別整合反轉錄病毒的cDNA的_,轉座酶可特異識別轉座子的_,發生特異性整合。36. 基因工程的載體必須具備的條件有_ 、_ 、_。37. 限制性內切核酸酶識別的核苷酸序列的個數為_、_和_,其切口有_端和_端。38. 基因工程常用的載體DNA分子有_ 、_和_。39. 一個完整的DNA克隆過程應包括_ 、_ 、_ 、_ 、_。40. 目的基因獲取的途徑或來源有_ 、_ 、_ 、_。41. 基因工程過程中重組體直接篩選法的方式有_ 、_ 、_。42. 基因克隆的原核表達體系的E,coli表達體系的表達載體應符合的標準有:_ 、_ 、_ 、_。43. 基因克隆真核生物表達體系常見的有_ 、_ 、_表達體系。44. 根據重組體DNA的性質不同,將重組體DNA導入受體細胞的方式有_ 、_ 、_等。45. M13噬菌體基因間隔區插入E,coli的一段調節基因及_的N端_個氨基酸殘基的編碼基因,其編碼產物為_的片段,突變型lac- E,coli可表達該酶的片段。當宿主細胞與克隆載體同時表達兩個片段時,宿主細胞可使特異的作用物變為蘭色化合物,即稱為_。46. 如果M13的外源基因被插入到lac Z 基因內,則在含有Xgal的培養基上生長時會出現_色菌落,如果在lac Z基因內無外源基因插入,在同樣的條件下呈現_色菌落。47. 典型的插入序列是由_序列和一個_編碼基因構成。48. 插入序列發生的轉座有_和_兩種形式。49. 當細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,_就可以從一個細胞(細菌)轉移到另一細胞(細菌),這種類型的DNA轉移稱為_作用。50. 重組DNA技術中常用的工具酶有_、_、_、_。三、選擇題: A型題51. 關于接合作用正確的是A與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,染色體DNA從一個細胞(細菌)轉移至另一細胞(細菌)B細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,某些較大質粒DNA從一個細胞(細菌)轉移至另一細胞(細菌)C細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,噬菌體DNA從一個細胞(細菌)轉移至另一細胞(細菌)D細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,所有類型的質粒DNA從一個細胞(細菌)轉移至另一細胞(細菌)E細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時,所有類型的噬菌體DNA從一個細胞(細菌)轉移至另一細胞(細菌)52. 下列那種方式保證了免疫球蛋白的多樣性?A轉化 B轉染 C轉位 D轉導 E接合53. 微切割技術使目的基因可來源于下列那種物資?A真核細胞染色體DNA B人工合成DNA CCDNA DG文庫 EC文庫54. 基因工程的特點是:A在分子水平上操作,在分子水平上表達 B在分子水平上操作,在細胞水平上表達C在細胞水平上操作,在分子水平上表達 D在細胞水平上操作,在細胞水平上表達E以上均可以55. 實驗室內常用的連接外源性DNA和載體DNA的酶是:ADNA連接酶 BDNA聚合酶 CDNA聚合酶 DDNA聚合酶 E反轉錄酶56用來鑒定DNA的技術是:ANorthern印跡 BSouthern印跡 CWestern印跡 D親和層析 E離子交換層析57用來鑒定DNA的技術是:ANorthern印跡 BSouthern印跡CWestern印跡 D親和層析E離子交換層析58重組DNA技術中常用的工具酶下列那項不是:A限制性核酸內切酶 BDNA連接酶CDNA聚合酶 DRNA聚合酶E反轉錄酶59F- 細胞與F+細胞混合培養,產生F+細胞的過程為:A轉化 B轉導C接合 D突變E轉位60DNA致癌病毒感染宿主細胞后,使之發生癌變是因為發生了:A轉化 B轉導C接合 D轉座E轉位61關于基因工程的敘述,不正確的是:A根據實驗目的選擇目的基因 B選擇一個適合的載體C把目的基因和載體分別用限制性核酸內切酶切開 D連接酶只連接目的基因和載體E把重組體轉化到細胞中去的過程不是絕對的62限制性核酸內切酶不具有那項特點:A僅存在原核細胞中 B用于重組DNA技術中的為類酶C能識別雙鏈DNA中特定的堿基順序 D具有一定的外切酶活性E辨認的核苷酸序列常具有回文結構63限制性核酸內切酶識別DNA中核苷酸序列的個數為:A4、5、6 B 5、6、7C 6、7、8 D4、6、8E 4864如果某限制性核酸內切酶識別的堿基序列為6個,則24Kb的一段隨機的DNA序列可出現的切口數為:A4次 B5次C6次 D7次E8次65關于限制性核酸內切酶的敘述,下列那項是錯誤的:A限制性核酸內切酶分為三類,用于基因工程的為酶 B限制性核酸內切酶切割后可產生粘性末端或平端C識別的核苷酸序列個數可以是6個或8個 D識別的序列一般具有回文結構E識別的DNA為單鏈66關于基因工程的敘述,下列那項是錯誤的?A基因工程也稱基因克隆 B只有質粒DNA可作為載體C重組體DNA轉化或轉染宿主細胞 D需獲得目的基因E需對重組DNA進行純化篩選67有關質粒的敘述,下列那項是錯誤的?A. 小型環狀雙鏈DNA分子 B可小到23Kb ,大到數百個KbC能在宿主細胞中獨立自主地進行復制 D常含有耐藥基因E只有一種限制性核酸內切酶切口68有關質粒的敘述,下列那項是錯誤的?A質粒的某些遺傳信息可賦予宿主細胞 B質粒較易轉化C質粒的遺傳表型可作為轉化子的篩選依據 DPBR322的分子中僅有一個EcoR內切酶位點 EPBR322含有半乳糖苷酶的片段基因69有關噬菌體的敘述錯誤的是:A. 常用作克隆載體的噬菌體有噬菌體和M13噬菌體 B噬菌體DNA改造成的載體有gt系列和EMBL系列Cgt系列適用于插入型載體,用于cDNA克隆 DEMBL系列適用于置換型載體,用于基因組DNA克隆EM13噬菌體基因間隔區插入了Ecoli的一段調節基因和LacZ的C端氨基酸編碼基因70下列那項不是重組DNA的連接方式A粘性末端與粘性末端的連接 B平端與平端的連接C粘性末端與平端的連接 D人工接頭連接E同聚物加尾連接71關于翻譯,下列那項不正確?A重組體由目的基因與載體連接組成 B重組體能轉化細胞C重組體的表達在細胞水平 D重組體有獨立繁殖的能力E重組體的表達體系有真核和原核兩種72關于基因重組的敘述,錯誤的是:A整段的DNA不能在細胞內進行交換 B整段的DNA能在細胞內進行交換C整段的DNA能在不同的物種間進行交換 D交換的DNA能在新的位置上進行復制轉錄翻譯E基因重組可引起自然突變現象73基因重組的方式不包括:A轉化 B轉導C轉位 D轉換E整合74關于噬菌體錯誤的是;A. 噬菌體DNA進入宿主菌后可整合到宿主菌DNA中又可保持獨立狀態B. B依賴本身的酶系進行其DNA的復制C. C依賴宿主的酶系進行其DNA的轉錄D. D依賴宿主的酶系表達其蛋白質外殼E. E當噬菌體從宿主細胞釋放出來,再感染另外的宿主時,可發生轉導作用75有關噬菌體的敘述那項不符合:A感染大腸桿菌時僅把DNA注入大腸桿菌內 B有溶源和裂解兩種生活方式C溶源和裂解兩種生活方式可以相互轉變 D噬菌體是由外殼蛋白和DNA組裝而成E當從一個宿主細胞釋放出來,再感染另外宿主時,一定發生轉導作用76DNA克隆不包括下列那項步驟?A選擇一個適合的載體 B限制性核酸內切酶在特異位點裂解質粒和目的基因C用連接酶連接載體DNA和目的DNA,形成重組體 D用載體的相應抗生素抗性篩選含重組體的細菌E重組體用融合法導入細胞77下列那項不能作為表達載體導入真核細胞的方法?A磷酸鈣轉染 B電穿孔C脂質體轉染 D顯微注射E氯化鈣轉染78下列那項不能作為基因工程重組體的篩選方法A 抗藥性標志選擇 B宿主菌的營養缺陷標志補救C原位雜交 DSouthern印跡PCR技術79下列那項不是重組體篩選的免疫化學方法的工作原理及特點:A. 將瓊脂培養板上的轉化子菌落經蒸汽裂解釋放抗原B. 將固定目的基因編碼蛋白質的抗血清聚乙烯薄膜覆蓋在裂解菌落上C. 再使用32P標記的DNA探針與薄膜反應D. 經放射自顯影檢出陽性反應菌落E免疫學方法特異性強靈敏度高,尤其適用于選擇不為宿主菌提供任何選擇標志的基因80重組DNA技術不能應用于:A疾病基因的發現 B生物制藥CDNA序列分析 D基因診斷E基因治療81基因重組是指DNA分子的:A共價連接 B氫鍵連接C離子鍵連接 D交換E退火82下列那種藥物不能用基因工程的方法生產?A胰島素 B干擾素C白細胞介素 D性激素E促紅細胞生成素83DNA重組技術不能應用于下列哪個方面?A. 產前診斷 B攜帶者測試C癥候前診斷 D遺傳病的易感性E傳染病的傳染性84一種可靠的DNA診斷學方法,下列那項是不必符合的?A能正確擴增靶基因 B能準確區分單個堿基的差別C本底或噪聲低,不干擾DNA的鑒定 D便于完全自動化操作E方法簡便,易于推廣應用85關于轉化錯誤的是:A受體細胞獲得新的遺傳表型 B外源DNA一定整合進受體細胞基因組C自然界中較大的外源DNA轉化幾率較低 D自然界中較大的外源DNA轉化幾率較高E越大的外源DNA與染色體整合幾率越低86關于同源重組不正確的是:A同源重組不需要特異的DNA序列 B同源重組要求兩分子間序列必須相同CRecBCD具有內切酶和解旋酶活性 DHolliday中間體的形成,是同源重組的重要步驟E需要DNA連接酶參與87下列那種酶是重組DNA技術中最重要的?A反轉錄酶 B堿性磷酸酶C末端轉移酶 DDNA聚合酶EDNA連接酶88在分子生物學中,基因克隆主要指:ADNA的復制 BDNA的轉錄CDNA的剪切 DRNA的轉錄ERNA的剪接89在分子生物學中,重組DNA又稱為:A酶工程 B蛋白質工程C細胞工程 D基因工程EDNA工程90基因工程中,不常用到的酶是;A限制性核酸內切酶 BDNA聚合酶CDNA連接酶 D逆轉錄酶EDNA解鏈酶91限制性核酸內切酶酶切后的DNA末端最常見的是:A平頭末端 B3突出末端C5突出末端 D粘性末端E缺口末端92能識別DNA的特異序列,并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類酶稱為:ADNA內切酶 B限制性內切核酸酶C非限制性內切核酸酶 D限制性外切核酸酶E非限制性外切核酸酶93cDNA是指:A在體外經反轉錄合成的與RNA互補的DNA B在體外經反轉錄合成的與DNA互補的DNAC在體外經反轉錄合成的與RNA互補的RNA D在體內經反轉錄合成的與RNA互補的RNAE在體內經反轉錄合成的與RNA互補的DNA94基因工程中通常使用的質粒存在于:A細菌染色體 B酵母染色體C細菌染色體外 D酵母染色體外E以上均不是95質粒的分子結構是:A環狀雙鏈DNA B環狀單鏈DNAC環狀單鏈RNA D線狀雙鏈DNAE線狀單鏈DNA96聚合酶鏈反應常常縮寫為:APRC BPERCPDR DBCREPCR97在已知DNA序列的情況下,獲取目的基因的最方便的方法是:A人工化學合成 B基因組文庫法CcDNA文庫法 DPCR法E從染色體DNA直接提取98EcoR切割DNA雙鏈產生:A平端 B5突出的粘性末端C3突出的粘性末端 D鈍性末端E配伍末端99用于PCR反應的酶是:ADNA連接酶 B堿性磷酸酶C逆轉錄酶 D限制性內切核酸酶ETaq DNA聚合酶100Pst內切酶切割目的基因后產生:A 5G A A T T C 3 B 5G T TA A C 3 3C T T A AG 5 3C A A T T G 5 C 5C T G C AG 3 D5C T GC A G 3 3GA C G T C 5 3G A CG T C 5 E 5G A A T T C 3 3C T T A A G 5101將Pst切割后的目的基因與同樣切割的載體DNA連接是:A同聚物加尾連接 B人工接頭連接C平端連接 D粘性末端連接E非粘性末端連接102限制性核酸內切酶切割DNA后產生:A3磷酸末端和5羥基末端 B5磷酸末端和3羥基末端C3磷酸末端和5磷酸末端 D3羥基末端和5羥基末端E3羥基末端5羥基末端和磷酸103基因工程中使目的基因與載體拼接的酶是:ADNA聚合酶 BRNA聚合酶CDNA連接酶 DRNA連接酶E限制性核酸內切酶104以質粒為載體,將外源基因導入受體菌的過程稱為:A轉化 B轉染C轉導 D轉位E感染105最常用的篩選轉化細菌是否含有質粒的方法是:A營養互補篩選 B抗藥性篩選C免疫化學篩選 D原位雜交篩選ESouthern印跡篩選106互補篩選屬于:A抗藥性標志篩選 B酶聯免疫篩選C標志補救篩選 D原位雜交篩選E免疫化學篩選107進行同聚物加尾法連接目的基因和載體DNA時,需要那種酶?ADNA聚合酶 BRNA聚合酶C引物酶 D逆轉錄酶E末端轉移酶108確切的講,cDNA文庫包含:A一個物種的全部基因信息 B一個物種的全部RNA信息C一個生物體組織或細胞的全部基因信息 D一個生物體組織或細胞的全部RNA信息E一個生物體組織或細胞所表達mRNA信息109下列描述最能確切表達質粒DNA作為克隆載體特性的是:A小型環狀雙鏈DNA分子 B攜帶有某些耐藥基因C在細胞分裂時恒定地傳遞給子代細胞 D具有自我復制能力E獲得目的基因110表達人類蛋白質的最理想的細胞體系是:AEcoli表達體系 B原核表達體系C酵母表達體系 D昆蟲表達體系E哺乳類細胞表達體系B型題:(111113)A噬菌體感染宿主菌后核酸進入菌體的過程 B外來DNA引起生物類型改變的過程C溶源菌中的噬菌體全部基因都表達 D溶源菌中的噬菌體部分調控區的基因表達E帶有宿主DNA的噬菌體111溶源狀態是:112進入裂解周期是:113轉導噬菌體是指:(114116)A接合作用 B轉化作用C轉導作用 D轉座作用E轉移作用114F因子陰性細胞與F因子陽性細胞形成F因子陽性細胞的是:115病毒從被感染的細胞釋放出來,再次感染另一細胞時,發生在供體細胞與受體細胞之間的DNA轉移的是:116從一個染色體位點轉移至另一位點的分散的重復序列稱為:(117120)A插入序列轉座 B轉座子轉座C位點特異的重組 D同源重組E溶源117噬菌體DNA和宿主染色體的特異靶位點整合稱為:118噬菌體的生長方式是:119Tn3發生的DNA轉移的是:120復制后的一個復制本遷移至新位,另一個仍保留在原位的是: (121123)ARec A BEcoRCRuv C DLex AEF factor121有蛋白水解酶活性的是:122能使同源重組中單鏈DNA對另一雙鏈DNA的侵入的是:123切割Holliday中間體的內切酶是:(124126)AReplicon BCloningCInverted repeats DPalindromeETransposons124目的基因與載體連接形成:125來自同一始祖的相同副本或拷貝的集合稱為:126限制性內切核酸酶識別的序列具有:(127129)A抗藥性篩選 B分子雜交篩選CRNA反轉錄 D免疫學方法E體外翻譯127用于鑒定質粒是否轉化的一般方法是:128用于鑒定轉化子細胞是否含有目的基因的常用方法是:129利用目的基因表達產物的特異性抗體來篩選含有目的基因的轉化子細胞的方法是:(130132)A限制性核酸內切酶 BDNA連接酶C反轉錄酶 DTaq DNA聚合酶E堿性磷酸酶130識別DNA回文結構并對其雙鏈進行切割的是:131用于PCR反應的酶是:132將目的基因與載體進行拼接的酶是:(133134)A支原體 B衣原體C噬菌體 D細菌E酵母133常用于原核表達體系的是:134常用于真核表達體系的是:(135137)A轉染 B轉化C感染 D轉導E轉位135以質粒為載體,細菌為宿主的導入方式是:136以噬菌體為載體,細菌為宿主的導入方式是:137以病毒為載體,哺乳動物細胞為宿主的導入方式是:(138139)A抗藥性篩選 BRNA反轉錄C免疫化學方法 D體外翻譯EPCR138對重組體內基因進行直接篩選的方法是:139通過鑒定基因表達產物篩選重組體的方法是:(140142)ARNA聚合酶 B末端轉移酶C堿性磷酸酶 D反轉錄酶E核苷酸酶140能切除DNA末端磷酸基的是:141能在DNA3羥基末端進行同聚物加尾的是:142合成cDNA用的是:(143145)A同聚物加尾連接 B人工接頭連接C粘性末端連接 D缺口末端連接E平端連接143外源基因和載體DNA經過EcoR切割后的連接屬于:144在外源基因和載體DNA末端加同聚物后進行連接屬于:145在外源基因和載體DNA末端添加短核苷酸序列,人為制造粘性末端后進行連接屬于:X型題:146可用于基因工程載體的DNA分子有:A染色體DNA B病毒DNAC細菌DNA D噬菌體DNAE質粒DNA147重組DNA技術的基本過程包括:A目的基因的獲取 BPCR反應C克隆載體的構建 D目的基因與載體的連接E重組體分子導入受體菌148基因克隆又稱為:A重組DNA B重組RNACDNA克隆 DRNA克隆E蛋白質復制149組成PCR反應體系的物質包括:ARNA引物 BTaq DNA聚合酶CRNA聚合酶 DDNA模板EddNTP150對于重組體的篩選,屬于直接選擇法的是:A免疫化學法 B原位雜交法CSouthern印跡 D補救標志篩選E抗藥性標志篩選151對于重組體的篩選,屬于非直接選擇法的是:A免疫化學法 B原位雜交法CSouthern印跡 D補救標志篩選E酶聯免疫篩選152限制性核酸內切酶切割DNA時可產生:A5粘性末端 B3粘性末端C平末端 D單鏈缺口E粘性末端153基因工程中目的基因的來源有:A化學合成 BPCR合成CCDNA文庫 D基因組文庫E組織細胞中染色體DNA直接提取154基因工程中外源性基因又稱為:A目的基因 B目的DNAC目的RNA Dtarget DNAE外源RNA155重組DNA技術中常用的工具酶有:A限制性核酸內切酶 BDNA聚合酶CDNA連接酶 D反轉錄酶E末端轉移酶156使細胞獲取新的遺傳表型的方式有:A接合作用 B轉化作用C轉導作用 D轉座E以上均可以157作為基因工程的載體必須具備的條件是:A能獨立自主復制 B易轉化C易檢測(含有抗藥性基因等) D具有限制性內切核酸酶的切口E易提取獲得158限制性內切核酸酶識別的核苷酸序列可以是:A4個 B5個C6個 D7個E8個159將表達載體導入真核細胞的轉染方法有:A磷酸鈣轉染 BDEAE葡聚糖介導轉染C電穿孔 D脂質體轉染E顯微注射160為保證轉錄和翻譯的順利進行,表達載體必須具備的DNA序列應包括:A較強的啟動子 B較強的衰減子C較強的沉默子 D合適的SD序列E核糖體結合位點161融合蛋白的結構中包含有:AN端為原核蛋白質 BN端為真核蛋白質CC端為原核蛋白質 DC端為真核蛋白質ENC兩端為原核蛋白質,中間為真核蛋白質162可以連接的目的基因與載體的末端有:A同一限制性內切核酸酶切割的粘性末端 B不同一限制性內切核酸酶切割的配伍末端C不同一限制性內切核酸酶切割的不同類型的粘性末端 D同一限制性內切核酸酶切割的平端 E不同一限制性內切核酸酶切割的平端四、問答題:163什么叫基因克隆?簡述基因克隆的步驟。164限制性內切核酸酶有哪些特點?165簡述重組DNA技術中目的基因的獲取來源和途徑。166簡述互補篩選重組體質粒細菌的原理。167基因工程中重組體篩選的方法有那些?168基因工程Ecoli表達體系的表達載體必須符合那些標準?169常用的真核表達體系有哪些?常用于細胞轉染的方法有哪些?170已知有一mRNA分子,你怎樣才能使它翻譯出相應的蛋白質?簡述其過程。171一種可靠的DNA診斷學方法必須符合哪些標準?172作為基因工程的載體必須具備哪些條件?173什么叫基因重組?簡述沙門氏菌是怎樣逃避宿主免疫監視的?參考答案:一、名詞解釋:1. 基因工程(gentic engineering )是指將DNA重組體引進受體細胞中,建立無性系的過程。因此,又稱為基因克隆(gene cloning)。克隆某一基因或DNA 片段過程中,將外源DNA插入載體分子所形成的復制子是雜合分子-嵌合DNA(DNA chimerase),所以又稱為重組DNA(recombinant DNA)。2. 當細胞(細菌)與細胞(細菌)相互接觸時,質粒DNA就可以從一個細胞(細菌)轉移到另一個細胞(細菌),這種類型的DNA轉移稱為接合作用。3. 由外源性DNA導入宿主細胞,并引起生物類型改變的過程或使宿主細胞獲得新的遺傳表型稱為轉化作用。4. 當病毒從被感染的(供體)細胞釋放出來,再次感染另一(受體)細胞時,發生在供體細胞與受體細胞之間的DNA轉移及基因重組稱為轉導作用。或帶有宿主DNA的噬菌體或病毒,再感染另外的宿主的過程中發生的DNA轉移及基因重組稱為轉導作用。5. 轉座即是指一個或一組基因從一個位置轉倒基因組的另一個位置。可移動的DNA序列包括插入序列和轉座子。故由插入序列和轉座子介導的基因轉移或重排稱轉座。6. 轉座子是可以從一個染色體位點轉移至另一個位點的分散的重復序列。轉座子也包括含有兩個反向重復序列的側翼,內有轉座酶基因,并含有抗生素耐藥基因等其他基因7. 8. 9. 10. 11. 。 7 發生在 同源序列間的重組稱為同源重組,又稱基本重組 (general recombination)。 同源重組不需要特異DNA 列,而是依賴兩分子間序列的相同或類似性。 8 發生在 同源序列間的重組稱為同源重組,又稱基本重組 (general recombination)。 9 是指含有單一DNA重組體的無性系。或指將DNA重組體引進受體細胞中,建立無性系的過程。因此,又稱為基因克隆(gene cloning)。 10 外源DNA插入載體DNA分子所形成的具有自我復制能力的DNA分子稱為復制子( replicon )。11 限制性內切核酸酶(Restriction endonuclease)是指能識別DNA的特異序列,并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內切酶。12. DNA的核苷酸序列呈二元旋轉對稱結構即回文結構Palindrome(或正讀反讀序列相同的DNA序列)。13. 不同限制性內切酶識別位點不同,但切割后產生相同類型的粘性末端,稱為配伍末端。14. DNA重組技術中是我們所需要的DNA序列或基因,就稱為目的基因(target gene)或目的 DNA (target DNA )。15. 以mRNA為模板,利用反轉錄酶合成與mRNA互補的DNA稱為cDNA ( complementary DNA)。16. 克隆載體(cloning vector )是攜帶目的基因,實現目的基因的無性繁殖或表達有意義的蛋白質所采用的一些DNA分子。17. 為使插入的目的基因可轉錄進而翻譯成多肽鏈,而特意設計的克隆載體又稱為表達載體(expression vector)。即具有轉錄和翻譯所必須的DNA序列的載體。18. 存在于細菌染色體以外的環狀DNA分子。19. M13噬菌體的基因間隔區插入EColi 的調節基因及LacZ(-半乳糖苷酶基因)的N-端146個aa殘基編碼基因,其產物為-半乳糖苷酶的-片段。而突變型 Lac Ecoli 可表達-半乳糖苷酶的片段(酶的C-端), 單獨的-片段及-片段均無-半乳糖苷酶的活性,當含有LacZ的 M13噬菌體轉化Lac Ecoli 細菌時, -片段及-片段共同表達,宿主 Lac Ecoli 細菌才有-半乳糖苷酶活性,使特異的作用物變為蘭色化合物,(生長的細菌為蘭色)即-互補。20. 把生物體全部的DNA 提純后,用限制性內切核酸酶,隨機切割成許多片段,將所有片段均重組入同一類載體上,得到許多重組DNA分子,繼而全部轉入受體菌擴增,使每個細菌內都攜帶一種重組DNA分子的多個拷貝,這樣生長的全部細菌所攜帶的所有基因組DNA片段,即為整個基因組。21. 如克隆基因能夠在宿主菌表達,且表達產物與宿主菌的營養缺陷互補,那么就可以利用營養突變菌株進行篩選,即標志補救。22. 將表達載體導入真核細胞的過程或方法。23. 一個細胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息,或整套基因的全部DNA片段。24. 具備接受外源DNA的能力的經過特殊方法處理的受體菌。25. PCR (polymerase chain reaction ) 是一種DNA迅速大量擴增的方法,短時間內獲得大量DNA。有利目的基因的獲得。26. 以

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