腦脊液和漿膜腔積液檢驗,1,一腦脊液檢查,腦脊液的生理腦脊液標本的采集檢測項目腦脊液檢查的臨床應用,2,腦脊液生理,腦脊液（cerebrospinal fluid，CSF）是存在于腦室及蛛網膜下腔中的無色透明液體。成人平均總量約150ml.血腦屏障（blood brain barrier，BBB） 對血漿各種成分通透性各有不同，其中通透性高的有：Na、Cl、Mg離子及乙醇等 其次為：清蛋白、葡萄糖、Ca離子、尿素和肌酐等最難通過有：Fbg、補體、抗體、膽固醇、膽紅素等,概念,腦脊液（cerebrospinal fluid，CSF）,血腦屏障（blood brain barrier，BBB）,3,生理,70%脈絡叢,30%細胞間隙,側腦室,第三腦室,室間孔,中腦導水管,第四腦室,蛛網膜下腔及腦池,中間孔,兩側孔,超濾作用,主動分泌,蛛網膜絨毛,血管及神經根間隙,吸收,4,標本采集,CSF標本一般通過穿刺取得，部位：腰椎，特殊情況下可由小腦延髓池或側腦室壓力測試：穿刺成功后先作壓力測定，正常在80180mmH2O超過200mmH2O放出CSF量應控制在2ml內，低于80mmH2O可作動力試驗以了解有無蛛網膜下腔阻塞。采集：采CSF于3支無菌試管中，每管12ml，采集順序如下,1細菌學檢查,2化學學檢查,3理學學檢查,如懷疑惡性腫瘤可再留1 管作細胞學檢查,5,標本采集的注意事項,細胞破壞或CSF凝固影響細胞計數和分類糖分解致GLU結果偏低，細菌自溶或死亡影響細菌檢出率 化學檢查 肝素抗凝一般性狀檢查 EDTA抗凝,送檢及時,抗凝劑選擇,6,CSF檢查項目,顯微鏡檢查,免疫學檢查,化學檢查,病原學檢查,理學檢查,7,理學檢查,顏色 透明度 凝固性 壓力,8,CSF顏色,9,紅色時新舊出血鑒別,10,黃色：黃變癥,11,透明度,混濁原因,腦脊液中細胞成分增多,腦脊液中細菌、真菌增多,腦脊液中蛋白質增多,幾種常見腦脊液,正常腦脊液,清晰透明,化膿性腦膜炎,結核性腦膜,病毒性腦炎、神經梅毒,明顯混濁,毛玻璃樣輕度混濁,透明外觀,12,凝固性,CSF的凝固性表現形式CSF的凝固性的臨床意義正常CSF：靜置1224h不形成薄膜、凝塊或沉淀。化膿性： 標本靜置12h可形成凝塊或沉淀；結核性： 靜置1224h標本表面有纖細網膜形成，黃色膠凍 蛛網膜下腔梗阻， CSF循環受阻，蛋白質高達15g/L時。,薄膜（pellicle）,凝塊（clot）,沉淀,正常CSF標本,化膿性腦膜炎,結核性腦膜炎,黃色膠凍狀,不形成,13,比密測定,正常人腰穿CSF比密為：1.006-1.008比密增高:見于顱內高壓 比密降低:見于腦脊液分泌增多,14,顯微鏡檢查,1、細胞計數,2、白細胞分類計數,3、細胞學檢查,顯微鏡檢查,15,1 細胞計數,細胞計數 參考值 1.紅細胞：無。2.白細胞：成人（010）106/L；兒童（015）106/L；新生兒（030）106/L。,細胞總數計數,白細胞計數,1、細胞計數,細胞計數方法,手工顯微鏡計數,16,2 白細胞分類計數,方法:直接分類和染色分類參考值 淋巴細胞和單核細胞為主，兩者之比約7：3。中性粒細胞可見少量偶見軟腦膜和蛛網膜細胞、室管膜細胞、脈絡膜細胞。,17,3 細胞學檢查,細胞成分:可見免疫活性細胞、單核吞噬細胞、多形核白細胞、腫瘤細胞。細胞收集方法：離心沉淀、細胞玻片離心儀染色方法可用綜合應用多種染色鑒別（吖啶橙熒光染色-腫瘤細胞等）PAS染色-鑒別原淋與腺癌細胞,18,CSF細胞計數和分類的臨床意義1,增高常見于,19,1.常見NS系統感染性疾病細胞計數與分類特點,細胞數（1050）106/L為輕度升高，（50100）106/L為中度增高， 200106/L以上為顯著增高,20,CSF細胞計數和分類的臨床意義2,。,均勻血性腦脊液，可見大量紅細胞N明顯增高出血23天后可見吞噬細胞,細胞數正常或稍高，L為主，可見腫瘤細胞。找到白血病細胞是腦膜白血病證據,細胞數可增高，可見E及漿細胞增高，沉淀可查出蟲卵、原蟲、幼蟲等,2.蛛網膜下腔出血,3.中樞神經腫瘤,4.腦寄生蟲病,21,（二）化學檢查,蛋白質檢查,蛋白質定量試驗,蛋白質定性試驗,葡萄糖測定,氯化物測定,酶學檢查,ALT、AST、CK、LD、NSE,22,蛋白定性試驗,23,蛋白質定量試驗,磺柳酸-硫代硫酸鈉比濁,1.蛋白沉淀劑比濁法,麗春紅S、考馬斯亮藍,2.染料結合比色法,參考值 （成人）腰池 200400mg/L 小腦延髓池100250mg/L 腦室 50150mg/L,對靈敏度和精密度較高，對pH要求高,簡便、快速、無需特殊儀器、標本量大、對球蛋白和白蛋白沉淀能力不同精密度差,方法學評價:,代表方法:,24,蛋白質檢查的臨床意義,1. 血腦屏障通透性增加：腦膜炎：化膿性腦膜炎顯著增高、結核性腦膜炎中度增高，病毒性腦膜炎輕度增高。出血、內分泌或代謝性疾病：腦室或蛛網膜下腔出血、糖尿病毒性神經病變、甲狀腺功能減退、尿毒癥及脫水藥物中毒：如乙醇、酚噻嗪、苯妥因。,25,蛋白質檢查的臨床意義,2. 腦脊液循環障礙 ：腦部腫瘤或椎管梗阻如蛛網膜下腔粘連。蛛網膜下腔梗阻時，蛋白質10g/L以上，腦脊液呈膠凍狀，有蛋白-細胞分離現象。3. 鞘內Ig合成增加：如多發性硬化癥，神經梅毒,26,葡萄糖測定,常用方法葡萄糖氧化酶法己糖激酶法，特異性更高；,方法學評價測定應及時，久時間放置應加適量氟化鈉抑制細菌或細胞利用葡萄糖，理想采血時間應在禁食4小時后。,參考值 2.54.4mmol/L,27,臨床意義,1.減低中樞神經系統細菌性、真菌性感染：化膿性感染時降低最為嚴重且早期就可明顯降低。結核性其次中樞神經系統腫瘤：腦膜瘤時腦脊液葡萄糖含量明顯降低甚至為零。腦寄生蟲病：腦囊蟲病、血吸蟲、弓形蟲病時2.升高 血糖升高或下丘腦受損傷,28,氯化物測定,腦脊液中氯化物含量影響因素腦脊液自身理化性質、血漿氯化物含量血液PH值影響。方法：滴定法、比色法、電量法、離子選擇電極法，后者目前常用。參考值 120130mmol/L,29,氯化物測定的臨床意義,減低 見于細菌性、真菌性腦膜炎：結核性腦膜炎下降顯著，可低于102mmol/L。低氯血癥：嘔吐、腎上腺功能減退增高 見于尿毒癥、呼堿 等,30,病原學檢查,1、標本離心取沉淀涂片作染色革蘭氏染色抗酸染色墨汁染色或苯胺黑染色熒光染色。涂片鏡檢：血吸蟲卵、肺吸蟲卵、阿米巴、弓形蟲等 。2、細菌培養（血平板、巧克力平板CO2環境培養、中國藍平板）動物接種、真菌培養,31,腦脊液檢查的臨床應用,1. 中樞神經系統感染性疾病的診斷與鑒別診斷2. 腦血管病診斷與鑒別診斷3. 腦腫瘤診斷4. 中樞神經系統疾病治療及療效觀察,32,常見中樞神經感染疾病CSF檢查特點,33,二 漿膜腔積液檢驗,漿膜腔（serous cavity）：是人體的胸腔、心包腔、腹腔和關節腔的統稱，正常情況下僅含少量液體起潤滑作用，漿膜腔積液：病理情況下漿膜腔內大量液體潴留形成的積液，根據產生原因及其性質不同分為漏出液（transudate）滲出液（exudate）,34,漏出液和滲出液,漏出液是通過毛細血管濾出、并在組織間隙或漿膜腔內積聚的非炎癥性組織液，多為雙側性。原因有毛細血管流體靜壓增高，血漿膠體滲透壓減低，淋巴回流受阻，鈉水潴留,滲出液是毛細血管通透性增高，以致液體、血液內大分子物質和細胞從血管滲出至血管外、組織間隙及漿膜腔形成的積液原因 微生物的毒素缺氧炎性介質等,漏出液,滲出液,35,標本采集與保存,采集：分裝4管第1管.細菌學檢查（注意無菌、及時）第2管.化學檢查第3管.一般性狀檢查（理學）第4管.細胞檢查理學和細胞學檢查可加EDTA-K抗凝，化學檢查可加肝素,穿刺術采集,第1管.細菌學檢查（注意無菌、及時）第2管.化學檢查第3管.一般性狀檢查（理學）第4管.細胞檢查,保存,理學和細胞學檢查可加EDTA-K抗凝，化學檢查可加肝素,36,檢查項目,理學檢查,免疫學檢查,顯微鏡檢查,化學檢查,CEA,AFP,TAP,CA-125,SCCP,細菌學檢查,37,理學檢查,1 量 正常時量較少，病理情況下液體較多其程度與病變輕重及部位有關。2. 比密 滲出液1.018 漏出液1.015,38,一般性狀檢查,3 顏色 正常為清亮、淡黃色液體。病理時變化多樣，一般滲出液色深些1）紅色：淡紅、鮮紅、暗紅等 多由穿刺損傷、結核、腫瘤、出血性疾病所致2）白色：呈膿性或乳白色，多因白細胞增加、胸導管阻 塞破裂，大量脂肪變性細胞3）綠色：銅綠假單胞菌感染4）棕色：阿米巴感染5）黃色或淡黃：黃疸6）黑色：曲霉菌感染7）草黃色：尿毒癥引起的心包積液,39,一般性狀檢查,4.透明度 與其所含細胞、細菌、蛋白質量有關。正常漿膜腔液：清晰透明滲出液 ：不同程度混濁，乳糜液 ：脂濁漏出液 ：清晰透明。5凝固性 正常 ：無凝塊，漏出液 ：無凝塊，滲出液 ：有凝塊，也可因纖溶酶溶解無凝塊。,40,化學檢查,1粘蛋白定性試驗（Rivalta test）粘蛋白等 電點在PH35，在稀酸溶液中產生白色沉淀，漏出液為陰性，滲出液多為陽性2蛋白質定量1） 方法與血清蛋白定量一致，漏出液一般小于25g/L，電泳清蛋白相對較高，大分子蛋白相對較少。滲出液大于30g/L，電泳譜與血清蛋白電泳一致。 2 ）常以積液蛋白與血清蛋白比大于0.5為滲出液的判斷指標之一,41,化學檢查,3葡萄糖定量漏出液葡萄糖含量較血糖稍低，滲出液多明顯降低3.33mmol/L，4乳酸鐵(lactate iron)測定 鑒別細菌性和非細菌性感染,升高提示細菌感染。,42,顯微鏡檢查1,1.細胞計數，RBC意義不大，WBC滲出液500106/L漏出液1001