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文檔簡介
1、細菌的生理、分布、消毒與滅菌,一、細菌的人工培養 二、細菌的分布 空氣中細菌的檢測 咽拭培養 三、消毒與滅菌,細菌的人工培養,一、常用培養基的制備原則 1、培養基的制備原則: 適當的營養成分。 合適的酸堿度。 配制后經滅菌后方可使用。 2、培養基配制的基本程序 按一定配方稱了各種物質溶解測定及調整PH濾過分裝滅菌、備用。,常用培養基的種類 1,按用途可分為 (1)基礎培養基: (2)營養培養基: (3)鑒別培養基: (4)選擇培養基: (5)厭氧培養基:,常用培養基的種類 2,按物理性狀可分為: 1)液體培養基 2)固體培養基,在液體培養基中加入23%瓊脂,固體培養基傾倒平皿上即成“平板”傾入
2、試管內即可制成“斜面培養基3)半固體培養基:當液體培養基內加入0.20.5%瓊脂時即成之。,二、細菌人工培養的接種方法:,(一)細菌分離培養接種法平板劃線分離培養法 目的:使混雜在一起的細菌分散生長。,平板區劃線法 培養后菌落的散布情況,一個細菌在固體培養基上,經過一定時間的生長繁殖之后,所形成的肉眼可見的細菌集團,稱為菌落。 很多菌落連在一起,融成一片,稱為菌苔。,描述菌落: 大小:以直徑(mm)表示之,1mm左右為小菌落,23mm為中等大菌落,3mm以上為大菌落。 形成:圓形、卵圓形及不規則形。 邊緣:整齊或不整齊、鋸齒狀、毛發狀等。 表面:光滑、濕潤、皺紋、干燥等。 隆起度:扁平、凸起、
3、中心凹陷等。 透明度:透明、半透明、不透明。 顏色:無色、白色、黃色等。 溶血性:在血平板上產生溶血毒素的細菌,可以使培養基中的紅細胞破壞溶解,可分為完全溶血、草綠色溶血及不溶血,(二)細菌純培養接種法,目的:測試其生物學性狀、保種等。 方法: 斜面培養基接種 液體培養基接種 穿刺接種法,斜面培養基接種法,斜面上生長狀態觀察:可見有均勻一致的菌苔,如有不同的菌落出現,則表明污染了雜菌。,液體培養基接種法,液體培養基中生長狀態觀察:示培養前的液體培養基多為清徹透明的。接種細菌后,由于細菌種類不同,可有以下三種生長形式。 混濁:液體變為混濁。 菌膜:液體澄清,表面有一薄膜。 沉淀:管底有沉淀物。,
4、半固體培養基接種方法,半固體中生長狀態觀察:無鞭毛(無運動)的細菌,經培養后僅沿穿刺線生長,培養基清亮。有運動的細菌,沿穿刺線向外擴散,穿刺線摸糊不清,培養基混濁。,空氣中細菌的檢測,一、實驗目的與原理 二、實驗材料 三、實驗方法,咽拭培養實驗,一、實驗目的與原理 二、實驗材料 血平板、棉簽 三、實驗方法,紫外線的殺菌作用,一、實驗目的與原理 了解紫外線對不同種細菌的殺菌作用及紫外線的穿透力。 紫外線的殺菌波長范圍為240280nm,265266nm的作用最強。 其主要是使DNA上相鄰的嘧啶通過共價鍵結合形成二聚體,影響DNA的正常鹼基配對。 紫外線的穿透力很弱,其殺菌只限于表面的照射。,二、
5、實驗材料 1、菌種: 2、培養基:瓊脂平板 3 、紙片、鑷子及紫外線燈等 三、實驗方法 1、涂平板。 2、打開皿蓋,蓋紙片。 3、紫外線照射30分鐘。 4、取掉紙片,蓋好皿蓋,37孵育24小時,觀察生長情況。,皮膚消毒前后的細菌學檢查,一、實驗目的與原理 觀察消毒劑的消毒效果 二、實驗材料 1、2%碘酒,75%酒精 2、瓊脂平板 三、實驗方法,細菌對抗生素的敏感性測定,一、實驗目的與原理 了解藥物敏感性試驗方法及實踐中的重要意義 二、實驗材料 1、菌種:金黃色葡萄球菌68小時肉湯培養物。 2、培養基:普遍瓊脂平板。 3、抗生素:含各種抗生素干燥濾紙片、小鑷子、 米尺等。 三、實驗方法,細菌對抗生素的敏感試驗(紙片法),四、實驗結果,抑菌圈,細菌對藥物敏感時,在該藥紙片周
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