儀器分析環/境/與/生/化/工/程/學/院主講人：劉英項目三色譜法定性定量分析方法3.21色譜定性分析方法2色譜定量分析方法CONTENTS目錄學習目標知識目標：1、理解色譜定性分析方法；2、掌握色譜定量分析方法。能力目標：1、能利用色譜的定性分析方法對物質進行定性；2、學會利用色譜定量分析方法對物質進行定量分析。重難點：色譜定量分析方法一、色譜定性分析方法1.利用純物質定性①利用保留值定性：通過對比試樣中具有與純物質相同保留值的色譜峰，來確定試樣中是否含有該物質及在色譜圖中位置。不適用于不同儀器上獲得的數據之間的對比。②利用加入法定性：將純物質加入到試樣中，觀察各組分色譜峰的相對變化。一、色譜定性分析方法1.利用純物質定性①利用保留值定性：通過對比試樣中具有與純物質相同保留值的色譜峰，來確定試樣中是否含有該物質及在色譜圖中位置。不適用于不同儀器上獲得的數據之間的對比。“相同的色譜條件”試樣標樣一、色譜定性分析方法①利用保留值定性一、色譜定性分析方法②利用加入法定性：將純物質加入到試樣中，觀察各組分色譜峰的相對變化。試樣加標試樣“峰高加入法”“相同的色譜條件”一、色譜定性分析方法2.利用文獻保留值定性相對保留值γ21：僅與柱溫和固定液性質有關。

在色譜手冊中都列有各種物質在不同固定液上的相對保留值數據，可以用來進行定性鑒定。一、色譜定性分析方法3.保留指數（I）又稱Kovats指數，是一種重現性較好的定性參數。測定方法：將正構烷烴作為標準，規定其保留指數為分子中碳原子個數乘以100（如正己烷的保留指數為600）。待測物質X的保留指數（IX）是通過選定正構烷烴，其分別具有Z和Z＋n個碳原子。被測物質X的（調整）保留時間應在兩個正構烷烴的調整保留值之間：一、色譜定性分析方法保留指數計算方法一、色譜定性分析方法4.與其他分析儀器聯用的定性方法小型化的臺式色質譜聯用儀（GC-MS，LC-MS）；色譜-紅外光譜儀聯用儀；組分的結構鑒定。一、色譜定性分析方法二、色譜定量分析方法色譜定量分析依據色譜峰面積A或峰高h與組分的量（濃度或質量）成正比。一般多以峰面積A進行定量。二、色譜定量分析方法1.峰面積的測量方法（1）峰高（h）乘半峰寬（W1/2）：近似將色譜峰當作等腰三角形。此法算出的面積是實際峰面積的0.94倍：A=h·W1/2（2）峰高乘平均峰寬：當峰形不對稱時，可在0.15h和0.85h處分別測定峰寬，由下式計算峰面積：

A=h·(W0.15+W0.85)/2（3）峰高乘保留時間：在一定操作條件下，同系物的半峰寬與保留時間成正比，對于難于測量半峰寬的窄峰、重疊峰（未完全重疊），可用此法測定峰面積：∵W1/2∝

tR，W1/2＝b·tR，A=1.064h·W1/2

∴

A=h·b·tR二、色譜定量分析方法（4）微機自動積分處理色譜峰分析結果二、色譜定量分析方法2.定量校正因子與組分性質及檢測器性能有關。試樣中各組分質量與其色譜峰面積成正比，即：mi=fiAi絕對校正因子：比例系數fi

，單位面積對應的物質量：

fi=mi/Ai定量校正因子與檢測器響應值（靈敏度）成倒數關系：

fi=1/Si

二、色譜定量分析方法

相對校正因子fi'：即組分的絕對校正因子與標準物質的絕對校正因子之比。當mi、ms以質量為單位時，所得相對校正因子稱為相對質量校正因子（f'm）；當mi、ms以摩爾為單位時，所得相對校正因子稱為相對摩爾校正因子（f'M）。二、色譜定量分析方法3.常用的定量方法（1）歸一化法特點及要求：

歸一化法簡便、準確；進樣量的準確性和操作條件的變動對測定結果影響不大；

不足：僅適用于試樣中所有組分全出峰的情況。二、色譜定量分析方法色譜峰分析結果（1）歸一化法二、色譜定量分析方法（2）外標法（也稱標準曲線法）依據峰面積A或峰高h與組分的含量或濃度成正比，繪制標準曲線。二、色譜定量分析方法（2）外標法(標準曲線法)標準系列溶液的配制與測定:二、色譜定量分析方法標準系列溶液的配制與測定:（2）外標法二、色譜定量分析方法外標法定量二、色譜定量分析方法（2）外標法(也稱標準曲線法)特點及要求：外標法不使用校正因子，準確性較高;操作條件變化對結果準確性影響較大;對進樣量的準確性控制要求較高，適用于大批量試樣的快速分析。二、色譜定量分析方法（3）內標法適用于試樣中不是所有組分都能出峰的情況。

1.內標物要滿足以下四點要求：①試樣中不含有該物質；②與被測組分性質比較接近；③不與試樣發生化學反應；④出峰位置應位于被測組分附近，且與組分峰不重疊。二、色譜定量分析方法2.試樣配制：準確稱取一定量的試樣m樣(g)，準確加入一定量內標物ms(g)，則：二、色譜定量分析方法二、色譜定量分析方法如以內標物為基準，則其相應計算公式:提示：此時＝1.0。二、色譜定量分析方法內標法的特點(1)內標法的準確性較高，操作條件和進樣量的稍許變動對定量結果的影響不大。(2)每個試樣的分析，都要進行兩次稱量，不適合大批量試樣的快速分析。

二、色譜定量分析方法（4）標準加入法測得樣品中待測組分i（濃度為wi）的峰面積為Ai（或峰高hi）；

濃度為wi→Ai再向該樣品中加入一定量的標準物質，總濃度為wiˊ(與樣品相比，濃度增量⊿wi)

，測得峰面積為Aiˊ(或峰高hiˊ)，則：

濃度為wiˊ→Aiˊ

二、色譜定量分析方法（4）標準加入法測得樣品中待測組分i（濃度為wi）的峰面積為Ai（或峰高hi）；

濃度為wi→A