藥品檢驗技術Drugtestingtechnology嚴謹檢測藥品，保障健康安全授課專業：分析檢驗技術Major:AnalyticaltestingtechnologyAnalyticalTestingTechniquesRepository分析檢驗技術資源庫AnalyticalTestingTechniquesRepository項目7-2：任務1：

基本原理任務3:

在藥物檢驗中的應用任務2:

基本操作流程薄層色譜法AnalyticalTestingTechniquesRepository分析檢驗技術資源庫AnalyticalTestingTechniquesRepository任務一

基本原理

薄層色譜法（TLC）系將供試品溶液點于薄層板上，在展開容器內用展開劑展開，使供試品所含成分分離，所得色譜圖與適宜的標準物質按同法所得的色譜圖對比，亦可用薄層色譜掃描儀進行掃描，用于鑒別、檢査或含量測定。思考：薄層色譜是氣相色譜還是液相色譜，為什么任務一

基本原理4流動相（展開劑）起始線溶劑前沿分離機制：混合物中各組分的吸附能力的差異，分離過程：吸附→解吸→再吸附→再解吸→無數次洗脫→分離固定相：硅膠流動相（展開劑）：有機溶劑分離機制：液-固吸附色譜原點任務一

基本原理51.化合物A在薄層板上從原點遷移7.6cm,溶劑前沿距原點16.2cm。①計算化合物A的Rf

？②在相同的薄層系統，溶劑前沿距原點14.3cm，化合物A的斑點應在此薄層板上何處？寫出公式、計算過程、結果、不用抄題作答正常使用主觀題需2.0以上版本雨課堂主觀題10分任務一

基本原理Rf值的特點當色譜條件一定時，組分的Rf值為一常數，為0～1。若Rf=0，表示斑點在原點不動；若Rf=1，表示斑點隨展開劑遷移至溶劑前沿，《中國藥典》（2015年版）：除另有規定外，雜質檢查時，各雜質斑點的比移值Rf以在0.2～0.8為宜。任務一

基本原理Rf影響比移值的因素固定相溫度組分性質流動相8任務一

基本原理9色譜中，溶質的保留和分離選擇性決定于三個因素：溶解能力流動相溶質吸附劑吸附作用極性組分（二）吸附劑與展開劑的選擇競爭任務一

基本原理（二）儀器與材料1.常用的固定相硅膠（最常用）氧化鋁聚酰胺任務一

基本原理硅膠H薄層硅膠的種類硅膠H不含黏合劑硅膠H硅膠G含有黏合劑硅膠H硅膠GF254含有粘合劑含有能夠在254nm下產生熒光的熒光劑藥典實例任務二

基本操作流程鋪板點樣展開顯色若用預制板，可不鋪版若斑點本身有顏色，可不顯色薄層色譜操作流程薄層預制板第任務二

基本操作流程（二）儀器與材料儀器和材料鋪板硅膠（常用硅膠G）研缽CMC-Na（事先制成3—5%的水溶液）玻璃板任務二

基本操作流程自動鋪板儀將1份固定相（如硅膠G）和3份水或加有黏合劑的水溶液，如0.2%～0.5%羥甲基纖維素鈉水溶液（CMC-Na）在研缽中按同一方向研磨混合，去除氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布（厚度為0.2～0.3mm），取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干后，在105～110℃烘30分鐘，隨即置于有干燥劑的干燥箱中備用。一、鋪板任務二

基本操作流程儀器和材料活化活化：烘箱（105-110℃）活化30分鐘后放入干燥器課堂活動：你知道為什么硅膠需要活化？干燥器任務二

基本操作流程常用的吸附劑——硅膠硅膠吸附作用：氫鍵作用吸附強度：硅醇基數目活化：105-110℃左右（除水）O—Si—O—Si—OHOOOO硅醇基17任務二

基本操作流程二、點樣毛細管點樣針（手動點樣）18薄層-全自動點樣儀樣品薄層板點樣針任務二

基本操作流程19注意：點樣速度要快，防止斑點擴散太大，點樣的直徑不宜太大，一般2～3mm即可。不同樣品溶液不能混用點樣針，以免交叉污染。手動點樣過程1-2cm1-2cm溶劑前沿1-2cm任務二

基本操作流程三、展開雙槽層析缸展開過程在通風櫥中進行（注意環保，用后的實際不能隨便倒掉，要放在專用的回收瓶中！！！）層析缸蓋子密封性要好；展開之前先“飽和”（將薄層板在無展開劑一側靜置15-30分鐘，此過程又叫預平衡），其目的是防止邊緣效應；盡量用新配制的展開劑，展開劑不能浸過點樣原點展開過程中不要隨意移動層析缸展開至溶劑前沿時及時拿出薄層板，在通風櫥中晾干任務二

基本操作流程展開過程任務二

基本操作流程22vvvv展開操作應注意的問題231檢查層析缸密閉性展開前——先飽和，防止邊緣效應展開時，注意展開劑不要浸到點樣線vvvv任務二

基本操作流程四顯色方法1-化學顯色法噴霧顯色（化學顯色法）內裝化學顯色劑（如Fecl3試液））常用的顯色劑1.Fecl3試液—含有酚羥基化合物（專屬型）2.茚三酮顯色劑—含有氨基酸類化合物（專屬型）3.碘顯色劑—針對大多數化合物（通用型）4.硫酸顯色劑—針對大多數化合物（通用型）任務二

基本操作流程各種紫外光燈臺式手持式箱式常用的薄層用紫外光燈有三種類型：手持式，臺式，箱式，可調節三個波檔：254nm,360nm,日光儀器和材料顯色2任務二

基本操作流程物理顯色法化學顯色法任務三

在藥物檢驗中的應用鑒別含量測定薄層色譜法的應用雜質檢查在一部藥典中大量應用在二部藥典中大量應用較少用課程思政在薄層色譜法

中應用了較多的有機溶劑，要注意在使用過程中環保，做好自我防