考情解讀考點(diǎn)1.微生物的分離和培養(yǎng)。2.某種微生物數(shù)量的測定。3.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用。4.利用微生物進(jìn)行發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用。5.酶活力測定的一般原理和方法。6.酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用。7.制備和應(yīng)用固相化酶。8.從生物材料中提取某些特定的成分。9.運(yùn)用發(fā)酵加工食品的基本方法。10.測定食品加工中可能產(chǎn)生的有害物質(zhì)。11.蛋白質(zhì)的提取和分離?？记?.考查題型：多以簡答題呈現(xiàn)。2.命題趨勢：常以發(fā)酵食品加工為背景考查對(duì)幾種食品加工技術(shù)的原理、操作、注意事項(xiàng)的理解能力；以某種微生物的培養(yǎng)或分離為實(shí)例考查微生物操作技術(shù)的掌握情況，以及運(yùn)用生物技術(shù)解決某種實(shí)際問題的能力；以某種生物技術(shù)流程圖考查獲取信息能力。1．(選修1P2正文)20℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_________℃。2．(選修1P2正文)在發(fā)酵過程中，隨著酒精度數(shù)的提高，__________的色素也進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。3．(選修1P3正文)醋酸菌是一種____________，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)，其最適生長溫度為____________℃。4．(選修1P3正文)當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成________；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將________變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?．(選修1P14正文)雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有____________________，倘若將尿素作為唯一氮源，可篩選出尿素分解菌，倘若將____________作為唯一碳源，則可篩選出纖維素分解菌。6.(選修1P15正文)無菌技術(shù)的目的是__________________，關(guān)鍵是_____________________。7．(選修1P18正文)微生物的接種方法最常用的是____________________(工具為接種環(huán))和________________________(工具為涂布器)，后者可用于活菌計(jì)數(shù)。8．(選修1P22正文)____________是指允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。9．(選修1P22正文)用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低的原因是___________________________________________________________________________。10．(選修1P22旁欄小字)運(yùn)用________________法進(jìn)行計(jì)數(shù)，每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)M。其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。11．(選修1P22～23正文)判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染的方法是________________________。12．(選修1P24資料二)當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù)在______________________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，在同一稀釋度下，至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出__________________，并根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。13．(選修1P28正文)在篩選纖維素分解菌時(shí)，采用__________染色法，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，在培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的__________。14．(選修1P29資料三)常用的剛果紅染色法有兩種，一種是先____________，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在__________時(shí)就加入剛果紅。15．(選修1P50正文)固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定的空間內(nèi)的技術(shù)，包括______________________________________________。16．(選修1P72正文)植物芳香油的提取方法_________________等。_______________________是植物芳香油提取的常用方法。考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1．培養(yǎng)基制備與微生物純化技術(shù)特別提醒(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照：隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。(2)觀察菌落需用固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基要添加凝固劑，如瓊脂。(3)倒平板的溫度一般在50℃左右較為適宜，溫度過高會(huì)燙手，溫度過低培養(yǎng)基又會(huì)凝固。2．微生物分離與計(jì)數(shù)的兩個(gè)實(shí)例3．理清“4”種傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作技術(shù)4．泡菜腌制過程中，乳酸菌數(shù)量、乳酸含量和亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時(shí)間變化的曲線特別提醒(1)亞硝酸鹽是硝酸鹽還原菌促進(jìn)硝酸鹽還原形成的，而不是硝化細(xì)菌氧化氨形成的。(2)在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，通過目測比較，可大致估算出亞硝酸鹽的含量。1．(2020·全國Ⅰ，37)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉栴}：(1)實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用__________________的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是________。甲、乙培養(yǎng)基均屬于________培養(yǎng)基。(2)實(shí)驗(yàn)中初步估測搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋________倍。(3)在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原因可能是________________________________________________(答出1點(diǎn)即可)。(4)若要測定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請(qǐng)寫出主要實(shí)驗(yàn)步驟：____________________________________________________。(5)上述實(shí)驗(yàn)中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即____________________________________________________________________。2．(2022·全國甲，37)某同學(xué)從被石油污染的土壤中分離得到A和B兩株可以降解石油的細(xì)菌，在此基礎(chǔ)上采用平板培養(yǎng)法比較二者降解石油的能力，并分析兩個(gè)菌株的其他生理功能。實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基成分如下：培養(yǎng)基Ⅰ：K2HPO4、MgSO4、NH4NO3、石油。培養(yǎng)基Ⅱ：K2HPO4、MgSO4、石油。操作步驟：①將A、B菌株分別接種在兩瓶液體培養(yǎng)基Ⅰ中培養(yǎng)，得到A、B菌液；②液體培養(yǎng)基Ⅰ、Ⅱ中添加瓊脂，分別制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按圖中所示在平板上打甲、乙兩孔?；卮鹣铝袉栴}：(1)實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中作為碳源的成分是______________。培養(yǎng)基中NH4NO3的作用是為菌株的生長提供氮源，氮源在菌體內(nèi)可以參與合成__________________________________(答出2種即可)等生物大分子。(2)步驟①中，在資源和空間不受限制的階段，若最初接種N0個(gè)A細(xì)菌，繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是__________。(3)為了比較A、B降解石油的能力，某同學(xué)利用步驟②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表所示(“＋”表示有透明圈，“＋”越多表示透明圈越大，“－”表示無透明圈)，推測該同學(xué)的實(shí)驗(yàn)思路是_____________________________________________________________。菌株透明圈大小平板Ⅰ平板ⅡA＋＋＋＋＋B＋＋－(4)現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤，根據(jù)上表所示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，治理石油污染應(yīng)選用的菌株是__________，理由是________________________________________________________。思維延伸——判斷與填充(1)配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pH(2020·浙江7月選考，19)()(2)可使用平板劃線法統(tǒng)計(jì)活細(xì)菌總數(shù)(2020·天津，19)()(3)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落(2020·江蘇，19)()(4)接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)基污染(2019·江蘇，12)()(5)為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，涂布用的菌濃度應(yīng)控制在30～300個(gè)/mL(2021·江蘇，18)()(6)人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學(xué)擬從中分離出葡萄球菌，用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基上涂布(2021·北京，12)()(7)(2019·全國Ⅰ,37節(jié)選)將土壤懸浮液接種在培養(yǎng)基[氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機(jī)鹽(適量)，X(15g/L)]上，篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(僅含有C、H兩種元素)。培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌比例會(huì)______，其原因是_____________________________。3．(2021·全國乙，37)工業(yè)上所說的發(fā)酵是指微生物在有氧或無氧條件下通過分解與合成代謝將某些原料物質(zhì)轉(zhuǎn)化為特定產(chǎn)品的過程，利用微生物發(fā)酵制作醬油在我國具有悠久的歷史，某企業(yè)通過發(fā)酵制作醬油的過程示意圖如下?；卮鹣铝袉栴}：(1)米曲霉發(fā)酵過程中，加入大豆、小麥和麥麩可以為米曲霉的生長提供營養(yǎng)物質(zhì)，大豆中的________可為米曲霉的生長提供氮源，小麥中的淀粉可為米曲霉的生長提供________。(2)米曲霉發(fā)酵過程的主要目的是使米曲霉充分生長繁殖，大量分泌制作醬油過程所需的酶類，這些酶中的________、________能分別將發(fā)酵池中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成易于吸收、風(fēng)味獨(dú)特的成分，如將蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和__________。米曲霉發(fā)酵過程需要提供營養(yǎng)物質(zhì)，通入空氣并攪拌，由此可以判斷米曲霉屬于________(填“自養(yǎng)厭氧”“異養(yǎng)厭氧”或“異養(yǎng)好氧”)微生物。(3)在發(fā)酵池發(fā)酵階段添加的乳酸菌屬于________(填“真核生物”或“原核生物”)，添加的酵母菌在無氧條件下分解葡萄糖的產(chǎn)物是______________。在該階段抑制雜菌污染和繁殖是保證醬油質(zhì)量的重要因素，據(jù)圖分析該階段中可以抑制雜菌生長的物質(zhì)是____________。思維延伸——判斷與填充(1)某同學(xué)在家用帶蓋玻璃瓶制作果酒和果醋時(shí)，將玻璃瓶用酒精消毒后，裝滿葡萄汁，待酒精發(fā)酵后去除瓶蓋，蓋一層紗布，再進(jìn)行醋酸發(fā)酵(2020·江蘇，18)()(2)利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵(2019·江蘇，9)()(3)果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反(2019·江蘇，9)()(4)利用發(fā)酵罐進(jìn)行葡萄酒主發(fā)酵過程中可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時(shí)終止發(fā)酵(2018·江蘇，16)()(5)(2020·全國Ⅲ，37節(jié)選)制作果酒需要____________，這一過程中也需要O2，O2的作用是________________________________________________________________________。(6)(2018·全國Ⅲ，37節(jié)選)制作面包時(shí)，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是____________________________________________。(7)(2022·重慶，25節(jié)選)先釀制果酒再生產(chǎn)果醋的優(yōu)勢有________(填編號(hào))。①先釀制果酒，發(fā)酵液能抑制雜菌的生長，有利于提高果醋的產(chǎn)率②釀制果酒時(shí)形成的醋酸菌膜，有利于提高果醋的產(chǎn)率③果酒有利于溶出水果中的風(fēng)味物質(zhì)并保留在果醋中(8)(2022·重慶，25節(jié)選)果酒中的酒精含量對(duì)果醋的醋酸產(chǎn)率會(huì)產(chǎn)生一定的影響。某技術(shù)組配制發(fā)酵液研究了初始酒精濃度對(duì)醋酸含量的影響，結(jié)果見圖。該技術(shù)組使用的發(fā)酵液中，除酒精外還包括的基本營養(yǎng)物質(zhì)有________________(填寫兩種)。據(jù)圖可知，醋酸發(fā)酵的最適初始酒精濃度是________；酒精濃度為10%時(shí)醋酸含量最低，此時(shí)，若要盡快提高醋酸含量，可采取的措施有___________________________(填寫兩個(gè)方面)。題組一微生物的培養(yǎng)、分離與計(jì)數(shù)1．(2022·江蘇南通高三檢測)如圖為微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的有關(guān)操作，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．步驟①中，需將接種環(huán)灼燒至變紅，以殺滅雜菌B．步驟②中，將接種環(huán)冷卻時(shí)不宜距酒精燈火焰太遠(yuǎn)C．圖中接種方法的目的是使菌種逐漸稀釋，經(jīng)培養(yǎng)后獲得單個(gè)菌落D．接種后應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，培養(yǎng)后可以根據(jù)結(jié)果進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)2．(2022·山西呂梁高三二模)尿素[CO(NH2)2]含氮量高，化學(xué)性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定，是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中一種重要的氨肥，但只有當(dāng)其被細(xì)菌分解成銨態(tài)氮后，才能更好地被植物吸收。請(qǐng)回答下列問題：(1)某研究小組認(rèn)為根據(jù)下表成分配置的培養(yǎng)基不能用于篩選分離尿素分解菌，理由是__________________________________________，若要篩選并鑒定該種細(xì)菌，需要對(duì)下表培養(yǎng)基的成分進(jìn)行修改，具體修改措施為______________________________，并根據(jù)菌落周圍出現(xiàn)________鑒定該菌。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O蛋白胨葡萄糖尿素蒸餾水1.4g2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g定容至1000mL(2)圖1表示該研究小組對(duì)尿素分解菌進(jìn)行分離、計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)流程，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，5個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為155、175、150、41、160個(gè)，分析第4個(gè)平板菌落數(shù)較低的原因可能是__________________________________________，1g土壤中的活菌數(shù)約為________個(gè)(保留小數(shù)點(diǎn)后兩位)，用這種方法統(tǒng)計(jì)得到的數(shù)值往往__________(填“偏大”或“偏小”)。(3)該研究小組將分離到的尿素分解菌在最適培養(yǎng)溫度條件下進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，并測定其生長曲線如圖2所示。說明：OD600為樣品中蛋白質(zhì)、核酸的濃度，用此指標(biāo)來代表細(xì)菌濃度；A點(diǎn)為培養(yǎng)10h時(shí)的細(xì)菌濃度。振蕩培養(yǎng)的目的是________________________________________________________，通常在培養(yǎng)末期細(xì)菌的數(shù)量會(huì)顯著減少，但圖中研究人員實(shí)際測得的細(xì)菌濃度下降較慢，最可能的原因是________________________________________________________________________。題組二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用3．(2022·河南高三模擬)米酒、酸奶、泡菜等都屬于