RAGE與MMP-9：腹主動(dòng)脈瘤組織中的分子密碼與臨床啟示一、引言1.1研究背景腹主動(dòng)脈瘤（AbdominalAorticAneurysm，AAA）是一種嚴(yán)重威脅人類健康的血管疾病，其主要特征為腹主動(dòng)脈局部永久性擴(kuò)張，直徑通常達(dá)到正常直徑的1.5倍以上。作為一種動(dòng)脈退行性病變，AAA在老年人群中較為常見，且男性發(fā)病率高于女性。隨著全球人口老齡化進(jìn)程的加速，AAA的發(fā)病率呈逐漸上升趨勢(shì)，已成為一個(gè)日益嚴(yán)峻的公共衛(wèi)生問題。AAA的危害極大，其最嚴(yán)重的并發(fā)癥是破裂，一旦發(fā)生破裂，死亡率可高達(dá)70%-90%。在破裂前，AAA往往缺乏明顯的臨床癥狀，使得患者難以察覺，這也導(dǎo)致許多患者在初次診斷時(shí)就已處于疾病的晚期，錯(cuò)失了最佳的治療時(shí)機(jī)。即使在接受了手術(shù)治療的患者中，術(shù)后的死亡率和并發(fā)癥發(fā)生率仍然較高，給患者的生命健康和生活質(zhì)量帶來了巨大的影響。此外，AAA還會(huì)導(dǎo)致其他嚴(yán)重的后果，如瘤體壓迫周圍組織和器官，引起相應(yīng)的癥狀；瘤內(nèi)血栓脫落可導(dǎo)致遠(yuǎn)端動(dòng)脈栓塞，引發(fā)急性缺血性事件等。目前，雖然手術(shù)治療（包括開放手術(shù)和血管內(nèi)介入治療）是AAA的主要治療方法，但這些治療手段都存在一定的局限性。開放手術(shù)創(chuàng)傷大，恢復(fù)時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)患者的身體條件要求較高；血管內(nèi)介入治療雖然創(chuàng)傷較小，但費(fèi)用昂貴，且存在一定的術(shù)后并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)，如內(nèi)漏、支架移位等。此外，對(duì)于一些直徑較小的AAA，目前尚無有效的藥物治療方法，只能采取定期觀察的策略，這也增加了患者的心理負(fù)擔(dān)和醫(yī)療成本。因此，深入研究AAA的發(fā)病機(jī)制，尋找有效的生物標(biāo)志物，對(duì)于早期診斷、預(yù)測(cè)疾病進(jìn)展和破裂風(fēng)險(xiǎn)以及開發(fā)新的治療方法具有重要的意義。近年來，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，越來越多的研究聚焦于AAA發(fā)病機(jī)制中的分子生物學(xué)變化，其中晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（ReceptorforAdvancedGlycationEnd-products，RAGE）與基質(zhì)金屬蛋白酶9（MatrixMetalloproteinase-9，MMP-9）在AAA發(fā)生、發(fā)展過程中的作用受到了廣泛關(guān)注。1.2研究目的與意義本研究旨在通過檢測(cè)RAGE與MMP-9在正常腹主動(dòng)脈壁、未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁以及破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁中的定位表達(dá)，深入探討它們?cè)诟怪鲃?dòng)脈瘤發(fā)生、發(fā)展乃至破裂過程中的作用。從臨床角度來看，目前對(duì)于腹主動(dòng)脈瘤的診斷主要依賴于影像學(xué)檢查，如超聲、CT血管造影（CTA）和磁共振血管造影（MRA）等。然而，這些方法對(duì)于早期微小動(dòng)脈瘤的檢測(cè)存在一定的局限性，且無法準(zhǔn)確預(yù)測(cè)動(dòng)脈瘤的破裂風(fēng)險(xiǎn)。而RAGE與MMP-9作為潛在的生物標(biāo)志物，若能明確它們與腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，將為腹主動(dòng)脈瘤的早期診斷提供新的思路和方法。例如，通過檢測(cè)血液或組織中的RAGE與MMP-9水平，可能實(shí)現(xiàn)對(duì)腹主動(dòng)脈瘤的早期篩查，有助于在疾病的早期階段發(fā)現(xiàn)病變，從而為患者爭(zhēng)取更多的治療時(shí)間。在治療方面，當(dāng)前腹主動(dòng)脈瘤的治療手段有限，對(duì)于直徑較小的動(dòng)脈瘤缺乏有效的藥物治療方法。了解RAGE與MMP-9在腹主動(dòng)脈瘤發(fā)病機(jī)制中的作用，可能為開發(fā)新的藥物治療靶點(diǎn)提供依據(jù)。通過干預(yù)RAGE與MMP-9的表達(dá)或活性，有可能阻止或延緩腹主動(dòng)脈瘤的進(jìn)展，降低破裂風(fēng)險(xiǎn)，為患者提供更有效的治療方案，改善患者的預(yù)后和生活質(zhì)量。從學(xué)術(shù)研究角度而言，深入探究RAGE與MMP-9在腹主動(dòng)脈瘤中的作用機(jī)制，有助于進(jìn)一步完善腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病理論，豐富對(duì)血管疾病發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)，為后續(xù)相關(guān)研究提供重要的理論基礎(chǔ)，推動(dòng)血管醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展。二、腹主動(dòng)脈瘤概述2.1定義與分類腹主動(dòng)脈瘤是一種嚴(yán)重的血管疾病，其定義為腹主動(dòng)脈管腔的局限性或彌漫性擴(kuò)張，當(dāng)管徑超過正常值1.5倍以上時(shí)，即可診斷為腹主動(dòng)脈瘤。在實(shí)際臨床應(yīng)用中，由于測(cè)量同一個(gè)人正常腹主動(dòng)脈和擴(kuò)張動(dòng)脈的比例，并結(jié)合年齡、性別、種族和體表面積等因素進(jìn)行校正較為復(fù)雜，通常情況下，若腹主動(dòng)脈直徑超過3cm，便可診斷為腹主動(dòng)脈瘤。這一定義為臨床醫(yī)生提供了一個(gè)相對(duì)明確的診斷標(biāo)準(zhǔn)，有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)和識(shí)別腹主動(dòng)脈瘤患者。腹主動(dòng)脈瘤按照形態(tài)學(xué)可分為囊性動(dòng)脈瘤和梭形動(dòng)脈瘤。囊性動(dòng)脈瘤呈囊狀突出，其瘤體僅累及動(dòng)脈壁的一部分，外觀上如同一個(gè)囊袋附著在動(dòng)脈上。這種形態(tài)的動(dòng)脈瘤在臨床上相對(duì)較少見，但其破裂風(fēng)險(xiǎn)較高，一旦破裂，往往會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的后果。梭形動(dòng)脈瘤則呈均勻性擴(kuò)張，瘤體累及整個(gè)動(dòng)脈周徑，從外觀上看，動(dòng)脈呈梭形膨大。梭形動(dòng)脈瘤較為常見，其發(fā)展相對(duì)較為緩慢，但隨著瘤體的逐漸增大，同樣會(huì)對(duì)周圍組織和器官產(chǎn)生壓迫，增加破裂的風(fēng)險(xiǎn)。從病因?qū)W角度分類，腹主動(dòng)脈瘤主要包括動(dòng)脈粥樣硬化性腹主動(dòng)脈瘤、感染性腹主動(dòng)脈瘤、先天性腹主動(dòng)脈瘤以及創(chuàng)傷性腹主動(dòng)脈瘤等。動(dòng)脈粥樣硬化性腹主動(dòng)脈瘤是最為常見的類型，約占腹主動(dòng)脈瘤的90%以上。動(dòng)脈粥樣硬化是一個(gè)復(fù)雜的病理過程，其特征是血管壁逐漸增厚和硬化，血管內(nèi)腔狹窄和彈性降低。在動(dòng)脈粥樣硬化的形成過程中，內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂，炎性細(xì)胞和脂質(zhì)進(jìn)入血管壁，隨后脂質(zhì)沉積和氧化，形成脂肪條紋和脂質(zhì)斑塊。隨著病情的發(fā)展，平滑肌細(xì)胞增殖、巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，導(dǎo)致血管壁持續(xù)炎癥和纖維化，最終過度的細(xì)胞外基質(zhì)重塑和金屬基質(zhì)蛋白酶活化，破壞了血管壁結(jié)構(gòu)，促使動(dòng)脈粥樣硬化性腹主動(dòng)脈瘤的形成。感染性腹主動(dòng)脈瘤是由細(xì)菌、真菌或其他病原體感染主動(dòng)脈壁引起的。主動(dòng)脈壁原發(fā)感染導(dǎo)致的動(dòng)脈瘤較為罕見，大部分感染性腹主動(dòng)脈瘤是由繼發(fā)感染引起。葡萄球菌和沙門氏菌是最常見的致病菌，結(jié)核桿菌和梅毒也可導(dǎo)致主動(dòng)脈瘤發(fā)生。感染性腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病率雖然較低，但病情往往較為兇險(xiǎn)，容易出現(xiàn)破裂、感染擴(kuò)散等嚴(yán)重并發(fā)癥。先天性腹主動(dòng)脈瘤通常與一些先天性疾病相關(guān)，如馬凡綜合征、厄爾斯-丹洛斯綜合征等。這些遺傳性疾病會(huì)導(dǎo)致血管壁的結(jié)構(gòu)和功能異常，使患者更容易發(fā)生腹主動(dòng)脈瘤。馬凡綜合征是一種常染色體顯性遺傳性結(jié)締組織疾病，主要影響心血管、骨骼和眼睛等系統(tǒng)。患者的血管壁中彈力纖維發(fā)育異常，導(dǎo)致血管壁薄弱，容易形成動(dòng)脈瘤。厄爾斯-丹洛斯綜合征則是一組以皮膚和關(guān)節(jié)過度伸展、組織脆性增加為特征的遺傳性疾病，也會(huì)增加腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。創(chuàng)傷性腹主動(dòng)脈瘤是由于外力直接作用于腹主動(dòng)脈，如車禍、高處墜落、刀刺傷等，導(dǎo)致動(dòng)脈壁部分或完全破裂，在局部形成血腫，隨后血腫機(jī)化，形成動(dòng)脈瘤樣擴(kuò)張。創(chuàng)傷性腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生與創(chuàng)傷的嚴(yán)重程度、部位以及治療是否及時(shí)等因素密切相關(guān)。2.2流行病學(xué)特征腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病率呈現(xiàn)出明顯的隨年齡增長(zhǎng)而上升的趨勢(shì)。在65歲以上的人群中，其發(fā)病率顯著提高，據(jù)相關(guān)研究表明，該年齡段人群中腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病率可達(dá)2%-4%。隨著年齡的進(jìn)一步增長(zhǎng)，尤其是70歲-79歲年齡段，腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病率更高，成為老年人群中較為常見的血管疾病之一。這主要是因?yàn)殡S著年齡的增加，人體血管壁的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生一系列變化，血管壁的彈性和抗張能力逐漸降低，動(dòng)脈粥樣硬化的程度也更為嚴(yán)重，使得血管壁更容易受到血流動(dòng)力學(xué)的影響而發(fā)生擴(kuò)張，從而增加了腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。在性別方面，腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病率具有顯著的性別差異，男性患者的發(fā)病率明顯高于女性。相關(guān)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，在大于65歲的人群中，男性腹主動(dòng)脈瘤的患病率比女性高3倍-4倍。這種性別差異可能與多種因素有關(guān)，一方面，男性患動(dòng)脈粥樣硬化的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高，而動(dòng)脈粥樣硬化是腹主動(dòng)脈瘤的主要病因之一；另一方面，雌激素對(duì)女性血管壁具有一定的保護(hù)作用，能夠抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，減少炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激，從而降低腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。然而，需要注意的是，雖然女性發(fā)病率較低，但女性患者在診斷時(shí)往往年齡更大，動(dòng)脈瘤發(fā)展更為迅速，破裂的可能性也更大，且女性患者的病死率是男性的4倍，其圍手術(shù)期和遠(yuǎn)期病死率較高，并發(fā)癥發(fā)生率較高，住院時(shí)間較長(zhǎng)。地域因素也對(duì)腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病率產(chǎn)生影響。從全球范圍來看，發(fā)達(dá)國(guó)家的發(fā)病率普遍高于發(fā)展中國(guó)家。在歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家，腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病率相對(duì)較高，這可能與這些國(guó)家人群動(dòng)脈粥樣硬化的嚴(yán)重程度較高以及吸煙等不良生活方式較為普遍有關(guān)。在發(fā)展中國(guó)家，隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和生活方式的西方化，腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病率也呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)。例如，在一些新興工業(yè)化國(guó)家，由于人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)中高脂肪、高膽固醇食物的攝入增加，同時(shí)體力活動(dòng)減少，導(dǎo)致肥胖、高血壓、高血脂等心血管疾病的危險(xiǎn)因素增多，進(jìn)而使得腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病率有所上升。生活習(xí)慣與腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生也密切相關(guān)。長(zhǎng)期吸煙是腹主動(dòng)脈瘤的重要危險(xiǎn)因素之一。吸煙會(huì)導(dǎo)致動(dòng)脈壁內(nèi)皮功能障礙，加速動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程，煙草中的尼古丁、焦油等有害物質(zhì)還會(huì)引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，促進(jìn)炎癥反應(yīng)和細(xì)胞外基質(zhì)重塑，加劇動(dòng)脈瘤的發(fā)展。即使已發(fā)現(xiàn)腹主動(dòng)脈瘤，吸煙者的瘤徑擴(kuò)張速度也較快，并且更易出現(xiàn)破裂等嚴(yán)重并發(fā)癥。此外，肥胖也是腹主動(dòng)脈瘤的危險(xiǎn)因素之一，肥胖狀態(tài)下，腹部脂肪大量堆積，加重了對(duì)主動(dòng)脈的機(jī)械負(fù)荷，促進(jìn)了動(dòng)脈瘤的形成。同時(shí)，肥胖常伴有高血壓、糖尿病等心血管疾病，這些因素都會(huì)加速腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)展。2.3發(fā)病機(jī)制腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病機(jī)制是一個(gè)復(fù)雜的過程，涉及多個(gè)方面，目前尚未完全明確。動(dòng)脈粥樣硬化、炎癥反應(yīng)和血管平滑肌細(xì)胞功能異常在腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵作用。動(dòng)脈粥樣硬化被認(rèn)為是腹主動(dòng)脈瘤最主要的致病因素。在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展進(jìn)程中，血管內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)受到多種因素的損傷，如高血脂、高血壓、高血糖以及吸煙等。受損的內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致血管內(nèi)膜的通透性增加，使得血液中的脂質(zhì)，尤其是低密度脂蛋白（LDL）更容易進(jìn)入血管壁內(nèi)。進(jìn)入血管壁的LDL會(huì)被氧化修飾，形成氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）。ox-LDL具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性，它會(huì)吸引單核細(xì)胞進(jìn)入血管內(nèi)膜下，并分化為巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞通過其表面的清道夫受體大量攝取ox-LDL，逐漸轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞。隨著泡沫細(xì)胞的不斷堆積，形成了早期的動(dòng)脈粥樣硬化病變——脂肪條紋。隨著病變的進(jìn)一步發(fā)展，平滑肌細(xì)胞會(huì)從血管中膜遷移到內(nèi)膜下，并在生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的作用下增殖。同時(shí)，巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞會(huì)分泌多種炎性細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）等，這些細(xì)胞因子會(huì)進(jìn)一步加劇炎癥反應(yīng)，促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，導(dǎo)致血管壁增厚和纖維化。此外，炎癥反應(yīng)還會(huì)激活基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs），MMPs能夠降解血管壁中的細(xì)胞外基質(zhì)成分，如膠原蛋白、彈性蛋白等，使血管壁的結(jié)構(gòu)和功能受到破壞，從而為腹主動(dòng)脈瘤的形成奠定了基礎(chǔ)。炎癥反應(yīng)在腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病機(jī)制中占據(jù)著核心地位。腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中存在大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，包括巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等。這些炎性細(xì)胞會(huì)分泌多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子，如TNF-α、IL-6、IL-8等，這些物質(zhì)會(huì)進(jìn)一步加劇炎癥反應(yīng)，形成一個(gè)惡性循環(huán)。TNF-α能夠激活核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路，促進(jìn)多種炎性基因的表達(dá)，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的放大。同時(shí)，TNF-α還可以誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞的凋亡，減少血管壁中平滑肌細(xì)胞的數(shù)量，降低血管壁的強(qiáng)度。IL-6可以促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的活化和增殖，增強(qiáng)免疫反應(yīng)，還能刺激肝臟合成急性時(shí)相蛋白，加重全身炎癥反應(yīng)。IL-8是一種強(qiáng)大的趨化因子，能夠吸引中性粒細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞向炎癥部位聚集，進(jìn)一步加劇炎癥反應(yīng)。此外，炎癥反應(yīng)還會(huì)導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙。正常情況下，血管內(nèi)皮細(xì)胞能夠合成和釋放一氧化氮（NO）等血管舒張因子，維持血管的正常舒張功能。在炎癥狀態(tài)下，內(nèi)皮細(xì)胞的功能受到抑制，NO的合成和釋放減少，導(dǎo)致血管收縮和痙攣，進(jìn)一步增加了血管壁的應(yīng)力，促進(jìn)了腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)展。血管平滑肌細(xì)胞在維持血管壁的結(jié)構(gòu)和功能中起著重要作用。在腹主動(dòng)脈瘤的形成過程中，血管平滑肌細(xì)胞發(fā)生了一系列的功能異常改變。一方面，平滑肌細(xì)胞的增殖能力下降，導(dǎo)致血管壁中平滑肌細(xì)胞的數(shù)量減少。研究表明，在腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中，平滑肌細(xì)胞的增殖相關(guān)基因表達(dá)下調(diào)，細(xì)胞周期進(jìn)程受到抑制，使得平滑肌細(xì)胞難以進(jìn)行正常的分裂和增殖。另一方面，平滑肌細(xì)胞會(huì)發(fā)生表型轉(zhuǎn)化，從收縮型表型轉(zhuǎn)變?yōu)楹铣尚捅硇汀：铣尚推交〖?xì)胞具有較強(qiáng)的合成和分泌能力，它們會(huì)大量合成和分泌細(xì)胞外基質(zhì)成分，如膠原蛋白、纖維連接蛋白等，但這些細(xì)胞外基質(zhì)的質(zhì)量和結(jié)構(gòu)往往存在缺陷，無法有效地維持血管壁的強(qiáng)度和彈性。此外，平滑肌細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的反應(yīng)性也發(fā)生了改變。在正常情況下，平滑肌細(xì)胞對(duì)一些生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子具有適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)性，能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、遷移和分化。在腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病過程中，平滑肌細(xì)胞對(duì)這些信號(hào)分子的反應(yīng)性增強(qiáng)或減弱，導(dǎo)致細(xì)胞功能的紊亂。例如，血小板衍生生長(zhǎng)因子（PDGF）可以促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，但在腹主動(dòng)脈瘤中，平滑肌細(xì)胞對(duì)PDGF的反應(yīng)性異常增強(qiáng)，導(dǎo)致細(xì)胞過度增殖和遷移，進(jìn)一步破壞了血管壁的結(jié)構(gòu)。2.4臨床表現(xiàn)與診斷方法腹主動(dòng)脈瘤在早期往往缺乏明顯的臨床癥狀，許多患者是在進(jìn)行其他檢查時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)的。部分患者可能會(huì)出現(xiàn)腹部搏動(dòng)性腫塊，患者自己或醫(yī)生在觸診腹部時(shí)，可感覺到與心跳節(jié)律一致的搏動(dòng)，這種搏動(dòng)性腫塊是腹主動(dòng)脈瘤較為典型的體征之一。當(dāng)瘤體逐漸增大，壓迫周圍組織和器官時(shí)，會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的壓迫癥狀。如果壓迫胃腸道，可導(dǎo)致患者出現(xiàn)腹脹、消化不良、食欲不振等癥狀，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)鹉c梗阻；壓迫輸尿管時(shí)，會(huì)導(dǎo)致腎盂積水，患者可能出現(xiàn)腰部脹痛、尿頻、尿急等泌尿系統(tǒng)癥狀；壓迫下腔靜脈則會(huì)引起下肢或下半身的水腫，患者表現(xiàn)為下肢腫脹、皮膚緊繃等。疼痛也是腹主動(dòng)脈瘤常見的癥狀之一，多位于臍周及中上腹部，性質(zhì)多為鈍痛。當(dāng)動(dòng)脈瘤侵犯腰椎時(shí)，患者會(huì)出現(xiàn)腰骶部疼痛。如果近期患者出現(xiàn)腹部或腰部劇烈疼痛，這常常預(yù)示著瘤體瀕臨破裂，是非常危險(xiǎn)的信號(hào)，需要立即進(jìn)行緊急處理。腹主動(dòng)脈瘤最嚴(yán)重的情況是破裂，一旦發(fā)生破裂，患者會(huì)突然出現(xiàn)腰背部劇烈疼痛，疼痛程度劇烈，難以忍受，同時(shí)伴有休克表現(xiàn)，如面色蒼白、出冷汗、血壓下降、心率加快等。如果破裂口較大，出血迅速，患者甚至可能在入院前就因失血過多而死亡。若血液破入后腹膜，出血會(huì)局限形成血腫，腹痛及失血休克癥狀可持續(xù)數(shù)小時(shí)或數(shù)天，但血腫隨時(shí)有再次破裂入腹膜腔導(dǎo)致患者死亡的可能。此外，瘤體還可能破入下腔靜脈，產(chǎn)生主動(dòng)脈靜脈瘺，引發(fā)心力衰竭，嚴(yán)重威脅患者生命。在診斷方面，目前有多種方法用于腹主動(dòng)脈瘤的檢測(cè)和診斷。超聲檢查是一種常用的篩查方法，具有無創(chuàng)、費(fèi)用低廉、可重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，其敏感性可以達(dá)到90％以上，能夠清晰地觀察到主動(dòng)脈瘤的血管腔內(nèi)病變，可用于腹主動(dòng)脈瘤的初步篩查和術(shù)后隨訪。然而，超聲檢查對(duì)操作者的技術(shù)水平依賴性較強(qiáng)，不同的探頭切線可能會(huì)得到不同的數(shù)據(jù)，影響測(cè)量結(jié)果的客觀性。而且對(duì)于位置較深的腹主動(dòng)脈瘤和髂動(dòng)脈瘤，由于腸道氣體的干擾，其診斷準(zhǔn)確率會(huì)有所下降。CT血管造影（CTA）是診斷腹主動(dòng)脈瘤的重要方法之一，也是目前術(shù)前檢查和術(shù)后隨訪的金標(biāo)準(zhǔn)。CTA可以準(zhǔn)確直觀地觀察到瘤體的直徑、長(zhǎng)度、形態(tài)以及與其他動(dòng)脈血管的解剖學(xué)關(guān)系，能夠提供詳細(xì)的血管圖像信息，幫助醫(yī)生全面了解動(dòng)脈瘤的情況，為制定治療方案提供重要依據(jù)。通過CTA檢查，醫(yī)生可以清晰地看到動(dòng)脈瘤的位置、大小、瘤壁的鈣化情況以及瘤腔內(nèi)是否有血栓形成等。磁共振血管造影（MRA）同樣能夠精確地觀察到腹主動(dòng)脈瘤血管壁的情況，它不需要使用造影劑，對(duì)于對(duì)造影劑過敏的患者是一種較好的選擇。MRA可以提供高分辨率的血管圖像，有助于發(fā)現(xiàn)一些細(xì)微的血管病變，但MRA檢查時(shí)間較長(zhǎng)，費(fèi)用相對(duì)較高，且對(duì)體內(nèi)有金屬植入物（如心臟起搏器、金屬固定器等）的患者存在一定限制。數(shù)字減影血管造影（DSA）曾經(jīng)是診斷腹主動(dòng)脈瘤的重要手段，但由于其屬于有創(chuàng)檢查，操作相對(duì)復(fù)雜，且存在一定的并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)，如穿刺部位出血、血管損傷、感染等，目前在臨床上已較少單獨(dú)用于腹主動(dòng)脈瘤的診斷，更多地是在介入治療過程中用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和指導(dǎo)操作。三、RAGE相關(guān)研究3.1RAGE的結(jié)構(gòu)與功能晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE）屬于免疫球蛋白超家族成員，是一種多配體跨膜受體，在人體多種細(xì)胞表面廣泛存在，如內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及平滑肌細(xì)胞等。其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)決定了它在多種生理和病理過程中發(fā)揮著重要作用。從結(jié)構(gòu)上看，RAGE由一個(gè)較短的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域、一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和一個(gè)細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域組成。其中，細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域是RAGE行使功能的關(guān)鍵區(qū)域，它由3個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域構(gòu)成，分別為V型、C1型和C2型。這3個(gè)結(jié)構(gòu)域通過保守的半胱氨酸之間形成的二硫鍵維持穩(wěn)定的空間構(gòu)象。V型結(jié)構(gòu)域位于最外側(cè)，是RAGE與配體結(jié)合的主要部位，對(duì)RAGE識(shí)別和結(jié)合不同配體起著至關(guān)重要的作用；C1型和C2型結(jié)構(gòu)域則在維持RAGE整體結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性以及協(xié)助V型結(jié)構(gòu)域與配體結(jié)合方面發(fā)揮重要作用。跨膜結(jié)構(gòu)域?qū)AGE錨定在細(xì)胞膜上，確保其在細(xì)胞表面的穩(wěn)定存在，同時(shí)也為細(xì)胞內(nèi)、外信號(hào)的傳遞提供了物理通道。細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域雖然較短，但含有一些特定的氨基酸序列和結(jié)構(gòu)基序，能夠與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)分子相互作用，啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。RAGE作為多配體受體，能夠識(shí)別并結(jié)合多種配體，包括晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）、高遷移率族蛋白B1（HMGB1）、S100蛋白家族成員等。這種多配體結(jié)合特性使得RAGE參與了多種細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)過程，在炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞增殖與凋亡等生理和病理過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。當(dāng)RAGE與配體結(jié)合后，會(huì)觸發(fā)一系列細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件。以RAGE與AGEs結(jié)合為例，二者結(jié)合后，RAGE的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域會(huì)發(fā)生構(gòu)象變化，從而招募并激活細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)分子，如絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）家族成員、蛋白激酶B（AKT）等。這些激活的信號(hào)分子會(huì)進(jìn)一步磷酸化下游的效應(yīng)分子，從而激活核因子-κB（NF-κB）等轉(zhuǎn)錄因子。NF-κB進(jìn)入細(xì)胞核后，能夠調(diào)控一系列與炎癥、免疫反應(yīng)相關(guān)基因的表達(dá)，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）等，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的發(fā)生和放大。在氧化應(yīng)激方面，RAGE與配體結(jié)合還會(huì)激活煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶，促使細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）的產(chǎn)生增加。過多的ROS會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞氧化損傷，破壞細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸等生物大分子，進(jìn)一步加重細(xì)胞的損傷和功能障礙，同時(shí)也會(huì)激活其他與氧化應(yīng)激相關(guān)的信號(hào)通路，形成一個(gè)惡性循環(huán)，加劇組織的損傷和疾病的發(fā)展。在細(xì)胞增殖與凋亡調(diào)控中，RAGE信號(hào)通路也發(fā)揮著重要作用。在某些腫瘤細(xì)胞中，RAGE的激活能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖和存活。研究表明，RAGE與配體結(jié)合后，通過激活PI3K/AKT信號(hào)通路，上調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，同時(shí)下調(diào)促凋亡蛋白Bax的表達(dá)，從而抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和發(fā)展。而在一些正常細(xì)胞中，RAGE的過度激活可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡異常增加。例如，在糖尿病視網(wǎng)膜病變中，AGEs與RAGE結(jié)合后，通過激活caspase家族蛋白酶，誘導(dǎo)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡，導(dǎo)致視力下降。3.2RAGE的表達(dá)調(diào)控機(jī)制RAGE的表達(dá)調(diào)控是一個(gè)復(fù)雜而精細(xì)的過程，涉及轉(zhuǎn)錄水平、翻譯后修飾及與其他分子的相互作用等多個(gè)層面，這些調(diào)控機(jī)制共同維持著RAGE在體內(nèi)的穩(wěn)態(tài)，確保其在生理和病理?xiàng)l件下發(fā)揮適當(dāng)?shù)墓δ堋Ｔ谵D(zhuǎn)錄水平，RAGE基因的啟動(dòng)子區(qū)域包含多個(gè)順式作用元件，這些元件能夠與轉(zhuǎn)錄因子相互作用，從而調(diào)節(jié)RAGE基因的轉(zhuǎn)錄活性。其中，核因子-κB（NF-κB）、激活蛋白-1（AP-1）和特異性蛋白1（SP1）等轉(zhuǎn)錄因子在RAGE基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在炎癥狀態(tài)下，細(xì)胞受到病原體、細(xì)胞因子或其他刺激時(shí)，NF-κB信號(hào)通路被激活。激活的NF-κB蛋白會(huì)從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)，與RAGE基因啟動(dòng)子區(qū)域的κB位點(diǎn)結(jié)合，從而促進(jìn)RAGE基因的轉(zhuǎn)錄，使RAGE的表達(dá)水平升高。研究表明，在脂多糖（LPS）刺激巨噬細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中，LPS能夠激活NF-κB信號(hào)通路，導(dǎo)致RAGE基因轉(zhuǎn)錄增加，RAGE蛋白表達(dá)上調(diào)，進(jìn)而參與炎癥反應(yīng)的調(diào)控。AP-1是由c-Jun和c-Fos等蛋白組成的轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物，它也能夠與RAGE基因啟動(dòng)子區(qū)域的特定序列結(jié)合，調(diào)節(jié)RAGE的轉(zhuǎn)錄。在氧化應(yīng)激條件下，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量的活性氧（ROS），ROS可以激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路，進(jìn)而激活A(yù)P-1。激活的AP-1與RAGE基因啟動(dòng)子結(jié)合，促進(jìn)RAGE的轉(zhuǎn)錄，使細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激做出反應(yīng)。除了這些常見的轉(zhuǎn)錄因子外，RAGE基因的轉(zhuǎn)錄還受到一些其他因素的影響。例如，高糖環(huán)境可以通過激活蛋白激酶C（PKC）信號(hào)通路，間接調(diào)節(jié)RAGE基因的轉(zhuǎn)錄。在糖尿病患者體內(nèi)，長(zhǎng)期的高血糖狀態(tài)會(huì)導(dǎo)致PKC的激活，激活的PKC可以磷酸化一些轉(zhuǎn)錄因子，使其與RAGE基因啟動(dòng)子的結(jié)合能力增強(qiáng)，從而促進(jìn)RAGE的轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致RAGE在血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等細(xì)胞中的表達(dá)升高，參與糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展。翻譯后修飾是調(diào)節(jié)RAGE功能和穩(wěn)定性的重要機(jī)制之一。RAGE蛋白在翻譯后可以發(fā)生多種修飾，包括糖基化、磷酸化和泛素化等。糖基化是RAGE蛋白常見的修飾方式之一，RAGE的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域含有多個(gè)潛在的N-糖基化位點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，RAGE的糖基化修飾對(duì)其與配體的結(jié)合能力和信號(hào)傳導(dǎo)功能具有重要影響。通過對(duì)RAGE糖基化修飾的研究發(fā)現(xiàn)，去除RAGE的糖基化修飾會(huì)導(dǎo)致其與晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）的結(jié)合能力下降，從而影響RAGE介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路。此外，糖基化修飾還可能影響RAGE的穩(wěn)定性和細(xì)胞內(nèi)定位。磷酸化修飾也是調(diào)節(jié)RAGE功能的重要方式。RAGE的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域含有多個(gè)磷酸化位點(diǎn)，在細(xì)胞受到刺激時(shí)，這些位點(diǎn)可以被特定的蛋白激酶磷酸化。磷酸化后的RAGE可以招募不同的信號(hào)傳導(dǎo)分子，從而激活不同的信號(hào)通路。研究表明，在RAGE與AGEs結(jié)合后，RAGE的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域會(huì)發(fā)生磷酸化，進(jìn)而激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)一系列生物學(xué)效應(yīng)的發(fā)生。泛素化修飾則主要參與RAGE蛋白的降解過程。當(dāng)RAGE蛋白被泛素化修飾后，會(huì)被蛋白酶體識(shí)別并降解，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)RAGE的蛋白水平。在某些病理?xiàng)l件下，RAGE的泛素化修飾異常可能導(dǎo)致RAGE蛋白的積累，進(jìn)而影響細(xì)胞的功能。例如，在神經(jīng)退行性疾病中，RAGE的泛素化修飾減少，導(dǎo)致RAGE蛋白在神經(jīng)元中積累，引發(fā)神經(jīng)炎癥和細(xì)胞損傷。RAGE在細(xì)胞內(nèi)還會(huì)與其他分子相互作用，這些相互作用也對(duì)其表達(dá)和功能產(chǎn)生重要影響。RAGE可以與一些分子伴侶蛋白相互作用，分子伴侶蛋白能夠幫助RAGE正確折疊和組裝，確保其結(jié)構(gòu)和功能的完整性。例如，熱休克蛋白70（Hsp70）可以與RAGE結(jié)合，協(xié)助RAGE的折疊和轉(zhuǎn)運(yùn)，維持其正常的生物學(xué)功能。如果Hsp70與RAGE的相互作用受到干擾，可能會(huì)導(dǎo)致RAGE的錯(cuò)誤折疊和聚集，影響其正常功能的發(fā)揮。RAGE還可以與細(xì)胞內(nèi)的一些信號(hào)傳導(dǎo)分子形成復(fù)合物，共同調(diào)節(jié)細(xì)胞的生物學(xué)行為。RAGE與Toll樣受體4（TLR4）在某些情況下可以相互作用，共同激活下游的信號(hào)通路，增強(qiáng)炎癥反應(yīng)。在脂多糖（LPS）刺激的細(xì)胞中，RAGE和TLR4可以協(xié)同作用，激活NF-κB信號(hào)通路，促進(jìn)炎癥因子的表達(dá)，加劇炎癥反應(yīng)。此外，RAGE還可以與一些細(xì)胞骨架蛋白相互作用，影響細(xì)胞的形態(tài)和遷移能力。3.3RAGE與相關(guān)疾病RAGE與多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，尤其是在糖尿病、神經(jīng)退行性疾病以及心血管疾病等領(lǐng)域，其作用機(jī)制的研究已成為熱點(diǎn)，為理解這些疾病的病理過程提供了新的視角。在糖尿病及其并發(fā)癥方面，RAGE扮演著關(guān)鍵角色。糖尿病患者長(zhǎng)期處于高血糖狀態(tài)，體內(nèi)的還原糖如葡萄糖等與蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或核酸的游離氨基之間會(huì)發(fā)生非酶糖化反應(yīng)，形成晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）。隨著病情進(jìn)展，AGEs在體內(nèi)大量積累，其與RAGE的結(jié)合成為糖尿病并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。當(dāng)AGEs與內(nèi)皮細(xì)胞表面的RAGE結(jié)合后，會(huì)激活一系列信號(hào)通路。通過激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）家族成員，如細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2（ERK1/2）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38MAPK等，使這些激酶發(fā)生磷酸化，進(jìn)而激活下游的轉(zhuǎn)錄因子，導(dǎo)致炎癥因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等的表達(dá)增加，引發(fā)炎癥反應(yīng)。同時(shí)，AGE-RAGE相互作用還會(huì)激活核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路，促進(jìn)炎癥相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)一步加劇炎癥反應(yīng)。在糖尿病血管病變中，AGE-RAGE信號(hào)通路對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能產(chǎn)生顯著影響。它會(huì)抑制內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮（NO）的合成和釋放，NO作為一種重要的血管舒張因子，其減少會(huì)導(dǎo)致血管舒張功能障礙，血管收縮增強(qiáng)，進(jìn)而使血壓升高。AGE-RAGE還會(huì)增加內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附分子的表達(dá)，如細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）、血管細(xì)胞黏附分子-1（VCAM-1）等，促使單核細(xì)胞、白細(xì)胞等黏附并遷移到血管內(nèi)膜下，引發(fā)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，加速動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程。在糖尿病腎病中，RAGE的異常表達(dá)導(dǎo)致腎臟系膜細(xì)胞增殖，細(xì)胞外基質(zhì)過度堆積，最終引發(fā)腎小球硬化，導(dǎo)致腎功能受損。神經(jīng)退行性疾病如阿爾茨海默病（AD）和帕金森病（PD）也與RAGE密切相關(guān)。在AD患者的大腦中，大量的淀粉樣蛋白（Aβ）會(huì)在腦組織中沉積，這些Aβ可以與RAGE特異性結(jié)合。Aβ-RAGE相互作用激活神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，使其釋放大量炎性細(xì)胞因子，如TNF-α、IL-1β等，引發(fā)神經(jīng)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致神經(jīng)元損傷和死亡。RAGE還可能參與了tau蛋白的過度磷酸化過程，Aβ-RAGE信號(hào)通路激活后，會(huì)使一些蛋白激酶活性改變，如糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）等，這些激酶會(huì)促使tau蛋白過度磷酸化，形成神經(jīng)纖維纏結(jié)，進(jìn)一步破壞神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)和功能，加速AD的病程進(jìn)展。在PD患者中，RAGE與α-突觸核蛋白（α-syn）的聚集和神經(jīng)炎癥有關(guān)。α-syn是PD患者腦內(nèi)路易小體的主要成分，當(dāng)α-syn發(fā)生錯(cuò)誤折疊并聚集后，會(huì)與RAGE結(jié)合。這種結(jié)合激活小膠質(zhì)細(xì)胞，引發(fā)神經(jīng)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致多巴胺能神經(jīng)元損傷和死亡，從而影響多巴胺的合成和釋放，出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)障礙等PD的典型癥狀。此外，RAGE還可以調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激水平，在神經(jīng)退行性疾病中，RAGE激活后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）產(chǎn)生增加，氧化應(yīng)激損傷進(jìn)一步加劇神經(jīng)元的死亡。在心血管疾病領(lǐng)域，RAGE在動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死等疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。在動(dòng)脈粥樣硬化的形成過程中，AGEs與RAGE結(jié)合，促進(jìn)炎癥細(xì)胞向血管內(nèi)膜下浸潤(rùn)，加速脂質(zhì)條紋和粥樣斑塊的形成。RAGE還可以通過激活NF-κB信號(hào)通路，上調(diào)血管細(xì)胞黏附分子-1（VCAM-1）、細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）和E-選擇素等黏附分子的表達(dá)，使單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等更容易黏附到血管內(nèi)皮細(xì)胞上，進(jìn)而遷移到內(nèi)膜下，攝取脂質(zhì)形成泡沫細(xì)胞，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的發(fā)展。在心肌梗死中，RAGE也參與了心肌損傷和修復(fù)的過程。心肌梗死后，受損心肌細(xì)胞會(huì)釋放高遷移率族蛋白B1（HMGB1）等配體，這些配體與RAGE結(jié)合，激活炎癥信號(hào)通路，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和炎癥因子釋放，加重心肌損傷。在心肌修復(fù)過程中，RAGE信號(hào)通路的異常激活可能會(huì)影響心肌細(xì)胞的增殖和分化，導(dǎo)致心肌纖維化，影響心臟的功能恢復(fù)。四、MMP-9相關(guān)研究4.1MMP-9的結(jié)構(gòu)與功能基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9），又被稱為明膠酶B，在人體的生理和病理過程中扮演著極為重要的角色，屬于基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）家族成員。MMPs家族是一類活性依賴于鋅離子和鈣離子的蛋白水解酶，目前已發(fā)現(xiàn)26種MMPs（MMP-1～26）。MMP-9的基因位于染色體20q11.1-13.1，長(zhǎng)度約為26-27kbp，包含13個(gè)外顯子和9個(gè)內(nèi)含子。在哺乳類動(dòng)物中，MMP-9的mRNA具有約80%的同源性。從結(jié)構(gòu)上看，MMP-9主要由5個(gè)功能不同的結(jié)構(gòu)域組成。第一個(gè)結(jié)構(gòu)域是疏水信號(hào)肽序列，其作用是引導(dǎo)MMP-9從細(xì)胞內(nèi)合成部位運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞外，在分泌過程中，該信號(hào)肽序列會(huì)被切除，以確保MMP-9能夠在細(xì)胞外環(huán)境中發(fā)揮作用。第二個(gè)結(jié)構(gòu)域是前肽區(qū)，主要功能是維持酶原的穩(wěn)定狀態(tài)，防止酶在未到達(dá)作用部位之前被提前激活。當(dāng)該區(qū)域被特定的外源性酶切斷后，MMP-9酶原就會(huì)被激活，從而具備催化活性。第三個(gè)結(jié)構(gòu)域是催化活性區(qū)，此區(qū)域含有鋅離子結(jié)合位點(diǎn)，鋅離子對(duì)于酶催化作用的發(fā)揮起著至關(guān)重要的作用，它能夠參與底物的結(jié)合和催化反應(yīng)，使MMP-9能夠有效地降解細(xì)胞外基質(zhì)成分。第四個(gè)結(jié)構(gòu)域是富含脯氨酸的鉸鏈區(qū)，它連接著催化活性區(qū)和羧基末端區(qū)，在維持MMP-9分子的整體結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性以及調(diào)節(jié)酶與底物的相互作用方面發(fā)揮著重要作用。第五個(gè)結(jié)構(gòu)域是羧基末端區(qū)，與酶的底物特異性密切相關(guān)，決定了MMP-9能夠識(shí)別并結(jié)合特定的細(xì)胞外基質(zhì)成分，進(jìn)而進(jìn)行降解作用。除了具有MMPs的原型結(jié)構(gòu)外，MMP-9的催化區(qū)還包含3個(gè)重復(fù)的型纖維連接蛋白結(jié)構(gòu)域，這些結(jié)構(gòu)域與明膠或彈性蛋白具有高度的親和力，使得MMP-9對(duì)這些細(xì)胞外基質(zhì)成分具有更強(qiáng)的降解能力。MMP-9還含有一個(gè)V型的膠原蛋白結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域具有高度的糖基化作用，這種糖基化修飾不僅影響著MMP-9底物的特異性，使其能夠更精準(zhǔn)地作用于特定底物，還具有抗衰變的作用，有助于維持MMP-9在細(xì)胞外環(huán)境中的穩(wěn)定性和活性。MMP-9的主要功能是參與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的降解和重塑過程，維持細(xì)胞外基質(zhì)的動(dòng)態(tài)平衡。細(xì)胞外基質(zhì)是由多種蛋白質(zhì)和多糖組成的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，它不僅為細(xì)胞提供物理支撐，還參與細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)、增殖、分化和遷移等重要生理過程。在正常生理情況下，MMP-9的表達(dá)和活性受到嚴(yán)格的調(diào)控，以確保細(xì)胞外基質(zhì)的代謝處于平衡狀態(tài)。當(dāng)組織受到損傷或發(fā)生炎癥等病理情況時(shí)，MMP-9的表達(dá)和活性會(huì)顯著增加，從而促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的降解和重塑，為組織修復(fù)和再生創(chuàng)造條件。MMP-9具有廣泛的作用底物，包括Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ型膠原、蛋白聚糖的核心蛋白、明膠、纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈性蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分。這些成分在維持血管壁的結(jié)構(gòu)和功能完整性方面起著關(guān)鍵作用。在腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展過程中，MMP-9對(duì)這些底物的降解作用會(huì)導(dǎo)致血管壁的細(xì)胞外基質(zhì)成分減少，血管壁的強(qiáng)度和彈性降低，從而促進(jìn)動(dòng)脈瘤的形成和擴(kuò)張。例如，MMP-9對(duì)彈性蛋白的降解會(huì)破壞血管壁的彈性纖維網(wǎng)絡(luò)，使血管壁失去彈性，更容易受到血流動(dòng)力學(xué)的影響而發(fā)生擴(kuò)張；對(duì)膠原蛋白的降解則會(huì)削弱血管壁的支撐結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致血管壁變薄，增加動(dòng)脈瘤破裂的風(fēng)險(xiǎn)。細(xì)胞因子及其受體也是MMP-9作用的底物。MMP-9對(duì)細(xì)胞因子及其受體的調(diào)節(jié)作用在炎癥反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)中具有重要意義。在炎癥過程中，MMP-9可以通過降解某些細(xì)胞因子及其受體，調(diào)節(jié)炎癥信號(hào)的傳導(dǎo)和炎癥細(xì)胞的活化，從而影響炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間。在免疫調(diào)節(jié)方面，MMP-9對(duì)細(xì)胞因子及其受體的作用可能會(huì)影響免疫細(xì)胞的功能和免疫應(yīng)答的平衡，進(jìn)而影響機(jī)體的免疫狀態(tài)。MMP-9在體內(nèi)是以酶原的形式從細(xì)胞內(nèi)分泌到細(xì)胞外的。在體外，MMP-9需要通過有機(jī)汞制劑反應(yīng)才能被激活；而在體內(nèi)，MMP-9則可經(jīng)一系列蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)而激活。這個(gè)過程通常涉及到多種蛋白酶的參與，它們依次作用于MMP-9酶原，逐步將其激活。MMP-3可能是MMP-9最有效的激活劑，它能夠特異性地切割MMP-9酶原的前肽區(qū)，使其轉(zhuǎn)化為具有活性的MMP-9。MMP-9的活性受到多種因素的調(diào)控，其中金屬蛋白酶組織抑制因子（TIMPs）是MMPs家族的重要組織抑制劑。TIMP-1作為MMP-9的特異性抑制劑，能夠與MMP-9的酶原或活化后酶的催化區(qū)的羧基末端特異性結(jié)合，形成復(fù)合物，從而特異性抑制MMP-9的活性。血小板反應(yīng)蛋白和蛋白酶組織抑制因子2（TFPI-2）也能抑制MMP-9的活性，它們通過不同的機(jī)制對(duì)MMP-9的活性進(jìn)行調(diào)控，共同維持細(xì)胞外基質(zhì)降解和合成的平衡。4.2MMP-9的表達(dá)調(diào)控機(jī)制MMP-9的表達(dá)調(diào)控是一個(gè)多層面、精細(xì)復(fù)雜的過程，涉及轉(zhuǎn)錄水平、翻譯水平以及蛋白水解激活和內(nèi)源性抑制劑等多個(gè)方面，這些調(diào)控機(jī)制相互協(xié)調(diào)，共同維持著MMP-9在體內(nèi)的平衡狀態(tài)，確保其在生理和病理?xiàng)l件下發(fā)揮適當(dāng)?shù)淖饔谩Ｔ谵D(zhuǎn)錄水平，MMP-9基因的表達(dá)受到多種轉(zhuǎn)錄因子和信號(hào)通路的嚴(yán)格調(diào)控。MMP-9基因的啟動(dòng)子區(qū)域包含多個(gè)順式作用元件，如活化蛋白-1（AP-1）、活化蛋白-2（AP-2）、刺激蛋白1（SP1）、核因子-κB（NF-κB）和E26轉(zhuǎn)錄因子（ETS）等結(jié)合位點(diǎn)。這些轉(zhuǎn)錄因子與相應(yīng)的順式作用元件結(jié)合，從而啟動(dòng)或調(diào)節(jié)MMP-9基因的轉(zhuǎn)錄過程。當(dāng)細(xì)胞受到炎癥刺激時(shí)，NF-κB信號(hào)通路被激活，活化的NF-κB蛋白會(huì)從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)，與MMP-9基因啟動(dòng)子區(qū)域的κB位點(diǎn)結(jié)合，增強(qiáng)MMP-9基因的轉(zhuǎn)錄活性，使MMP-9的表達(dá)水平升高。AP-1是由c-Jun和c-Fos等蛋白組成的轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物，在生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和應(yīng)激信號(hào)等刺激下，AP-1被激活并與MMP-9基因啟動(dòng)子區(qū)的AP-1位點(diǎn)結(jié)合，促進(jìn)MMP-9的轉(zhuǎn)錄。研究表明，在腫瘤細(xì)胞中，表皮生長(zhǎng)因子（EGF）刺激可通過激活Ras-Raf-MEK-ERK信號(hào)通路，使AP-1活化，進(jìn)而上調(diào)MMP-9的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。除了上述轉(zhuǎn)錄因子外，MMP-9基因的轉(zhuǎn)錄還受到其他信號(hào)通路的影響。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）信號(hào)通路在MMP-9轉(zhuǎn)錄調(diào)控中具有雙重作用。在正常生理?xiàng)l件下，TGF-β可以通過激活Smad信號(hào)通路，抑制MMP-9基因的轉(zhuǎn)錄，維持細(xì)胞外基質(zhì)的穩(wěn)定。然而，在某些病理情況下，TGF-β可能會(huì)通過非Smad信號(hào)通路，如激活PI3K/AKT或MAPK信號(hào)通路，間接促進(jìn)MMP-9的轉(zhuǎn)錄。在肝纖維化過程中，持續(xù)的炎癥刺激導(dǎo)致TGF-β表達(dá)升高，TGF-β通過激活PI3K/AKT信號(hào)通路，上調(diào)MMP-9的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的降解和重塑，加重肝纖維化的程度。翻譯水平的調(diào)控也是MMP-9表達(dá)調(diào)控的重要環(huán)節(jié)。mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率對(duì)MMP-9蛋白的合成起著關(guān)鍵作用。MMP-9的mRNA包含一些特定的結(jié)構(gòu)和序列元件，如5'非翻譯區(qū)（5'UTR）和3'非翻譯區(qū)（3'UTR）中的順式作用元件，這些元件可以與細(xì)胞內(nèi)的各種RNA結(jié)合蛋白相互作用，影響mRNA的穩(wěn)定性和翻譯起始過程。一些RNA結(jié)合蛋白，如HuR、AUF1等，能夠與MMP-9mRNA的3'UTR結(jié)合，調(diào)節(jié)其穩(wěn)定性。HuR與MMP-9mRNA的3'UTR結(jié)合后，可以增加mRNA的穩(wěn)定性，促進(jìn)MMP-9的翻譯，從而提高M(jìn)MP-9蛋白的表達(dá)水平。相反，AUF1與MMP-9mRNA的3'UTR結(jié)合后，則會(huì)促進(jìn)mRNA的降解，降低MMP-9的表達(dá)。此外，mRNA的翻譯起始過程也受到多種因素的調(diào)控，如真核翻譯起始因子（eIFs）的活性和磷酸化狀態(tài)等。eIF4E是一種重要的翻譯起始因子，它能夠與mRNA的5'帽子結(jié)構(gòu)結(jié)合，促進(jìn)翻譯起始復(fù)合物的組裝。在腫瘤細(xì)胞中，eIF4E的活性常常升高，導(dǎo)致MMP-9等與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白翻譯增加，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。MMP-9在細(xì)胞內(nèi)是以無活性的酶原形式（pro-MMP-9）合成并分泌到細(xì)胞外的，需要經(jīng)過蛋白水解激活過程才能轉(zhuǎn)化為具有活性的酶。在體內(nèi)，MMP-9的激活主要通過一系列蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)來實(shí)現(xiàn)。多種蛋白酶參與了這一過程，其中MMP-3被認(rèn)為是MMP-9最有效的激活劑。MMP-3能夠特異性地切割MMP-9酶原的前肽區(qū)，使其構(gòu)象發(fā)生改變，暴露出活性中心，從而激活MMP-9。纖溶酶也可以在一定程度上激活MMP-9，纖溶酶原在纖溶酶原激活劑的作用下轉(zhuǎn)化為纖溶酶，纖溶酶可以切割MMP-9酶原，使其激活。此外，一些炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）等，也可以通過激活細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路，間接促進(jìn)MMP-9的激活。在炎癥反應(yīng)中，TNF-α刺激細(xì)胞后，通過激活NF-κB信號(hào)通路，上調(diào)MMP-3等蛋白酶的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)MMP-9的激活，導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)的降解和炎癥反應(yīng)的加劇。內(nèi)源性抑制劑在調(diào)控MMP-9活性方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用，它們與MMP-9相互作用，維持著細(xì)胞外基質(zhì)降解和合成的動(dòng)態(tài)平衡。金屬蛋白酶組織抑制因子（TIMPs）是MMPs家族最重要的內(nèi)源性抑制劑，目前已發(fā)現(xiàn)4種TIMPs（TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3和TIMP-4），它們能夠與MMPs以1:1的比例特異性結(jié)合，形成復(fù)合物，從而抑制MMPs的活性。TIMP-1是MMP-9的特異性抑制劑，它主要通過與MMP-9的酶原或活化后酶的催化區(qū)的羧基末端特異性結(jié)合，阻止底物與酶的活性中心結(jié)合，從而抑制MMP-9的蛋白水解活性。在正常生理?xiàng)l件下，TIMP-1與MMP-9的表達(dá)處于平衡狀態(tài)，確保細(xì)胞外基質(zhì)的代謝正常進(jìn)行。然而，在某些病理情況下，如腫瘤、心血管疾病等，TIMP-1與MMP-9的表達(dá)失衡，導(dǎo)致MMP-9的活性異常升高，細(xì)胞外基質(zhì)過度降解，從而促進(jìn)疾病的發(fā)生發(fā)展。除了TIMPs外，α2-巨球蛋白（α2-M）也是一種重要的MMP-9抑制劑。α2-M是一種血漿蛋白，它可以通過與MMP-9形成共價(jià)復(fù)合物，將其捕獲并清除出循環(huán)系統(tǒng)，從而抑制MMP-9的活性。血小板反應(yīng)蛋白和蛋白酶組織抑制因子2（TFPI-2）也能抑制MMP-9的活性，它們通過不同的機(jī)制對(duì)MMP-9的活性進(jìn)行調(diào)控，共同維持細(xì)胞外基質(zhì)的穩(wěn)定。4.3MMP-9與相關(guān)疾病MMP-9在多種疾病的發(fā)生發(fā)展過程中扮演著重要角色，其異常表達(dá)和活性改變與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移、心血管疾病、炎癥性疾病等密切相關(guān)，深入研究MMP-9在這些疾病中的作用機(jī)制，對(duì)于疾病的診斷、治療和預(yù)后評(píng)估具有重要意義。在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移方面，MMP-9發(fā)揮著關(guān)鍵作用。腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的多步驟過程，涉及腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的相互作用、腫瘤細(xì)胞的遷移和血管生成等多個(gè)環(huán)節(jié)。MMP-9能夠降解ECM中的多種成分，如Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ型膠原、明膠、纖維粘連蛋白、層粘連蛋白和彈性蛋白等。這些成分構(gòu)成了腫瘤細(xì)胞侵襲的物理屏障，MMP-9對(duì)它們的降解作用使得腫瘤細(xì)胞能夠突破ECM的限制，侵入周圍組織和血管，進(jìn)而發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。在乳腺癌中，研究發(fā)現(xiàn)MMP-9的高表達(dá)與腫瘤的侵襲性和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。乳腺癌細(xì)胞分泌的MMP-9可以降解乳腺組織中的基底膜和間質(zhì)成分，為腫瘤細(xì)胞的遷移和擴(kuò)散創(chuàng)造條件。通過抑制MMP-9的活性或表達(dá)，可以顯著降低乳腺癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。在肺癌中，MMP-9也參與了腫瘤的轉(zhuǎn)移過程。肺癌細(xì)胞通過上調(diào)MMP-9的表達(dá)，降解肺組織中的ECM，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向周圍組織浸潤(rùn)，并進(jìn)入血液循環(huán)，從而導(dǎo)致肺癌的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。MMP-9在腫瘤血管生成中也起著重要作用。腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移依賴于充足的血液供應(yīng)，血管生成是腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。MMP-9可以通過多種途徑促進(jìn)腫瘤血管生成。它可以降解ECM中的成分，釋放出血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）等血管生成因子，這些因子能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成，從而促進(jìn)腫瘤血管的生成。MMP-9還可以直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，調(diào)節(jié)其功能和活性，促進(jìn)血管生成。在黑色素瘤中，研究表明MMP-9的表達(dá)與腫瘤血管生成密切相關(guān)。抑制MMP-9的活性可以減少黑色素瘤組織中的血管生成，抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。在心血管疾病領(lǐng)域，MMP-9參與了動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死和腹主動(dòng)脈瘤等多種疾病的發(fā)生發(fā)展過程。在動(dòng)脈粥樣硬化的形成過程中，MMP-9的異常表達(dá)和活性改變起著重要作用。動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性疾病，其特征是動(dòng)脈壁內(nèi)脂質(zhì)沉積、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和血管壁重塑。MMP-9主要由巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等分泌，在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，這些細(xì)胞受到炎癥刺激后，會(huì)大量表達(dá)和分泌MMP-9。MMP-9可以降解動(dòng)脈壁中的ECM成分，如彈性蛋白和膠原蛋白，導(dǎo)致血管壁的彈性降低和結(jié)構(gòu)破壞。研究發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，MMP-9的表達(dá)水平與斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān)。不穩(wěn)定斑塊中MMP-9的表達(dá)明顯高于穩(wěn)定斑塊，MMP-9對(duì)ECM的降解作用使得斑塊纖維帽變薄，容易破裂，引發(fā)急性心血管事件。在心肌梗死發(fā)生時(shí)，MMP-9的表達(dá)和活性會(huì)顯著升高。心肌梗死后，缺血心肌組織會(huì)發(fā)生一系列病理變化，包括炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡和組織修復(fù)等。MMP-9在這些過程中發(fā)揮著重要作用。它可以降解心肌組織中的ECM成分，導(dǎo)致心肌結(jié)構(gòu)破壞和功能受損。MMP-9還可以促進(jìn)炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)和活化，加重炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步損傷心肌組織。在心肌梗死后的早期階段，MMP-9的高表達(dá)與心肌重構(gòu)和心力衰竭的發(fā)生密切相關(guān)。通過抑制MMP-9的活性，可以減輕心肌梗死后的心肌損傷和重構(gòu)，改善心臟功能。在炎癥性疾病中，MMP-9也參與了疾病的發(fā)生發(fā)展過程。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種常見的慢性炎癥性關(guān)節(jié)疾病，其主要病理特征是關(guān)節(jié)滑膜炎癥、血管翳形成和關(guān)節(jié)軟骨及骨組織的破壞。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)滑膜組織中，MMP-9的表達(dá)明顯升高。滑膜細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞在炎癥刺激下會(huì)分泌大量的MMP-9，MMP-9可以降解關(guān)節(jié)軟骨和骨組織中的ECM成分，如Ⅱ型膠原和蛋白聚糖等，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨和骨組織的破壞，引起關(guān)節(jié)疼痛、腫脹和功能障礙。研究還發(fā)現(xiàn)，MMP-9的表達(dá)水平與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的疾病活動(dòng)度密切相關(guān)，通過檢測(cè)MMP-9的水平可以評(píng)估疾病的嚴(yán)重程度和治療效果。在炎癥性腸病中，MMP-9也發(fā)揮著重要作用。炎癥性腸病包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病，其主要病理特征是腸道黏膜炎癥、潰瘍形成和組織損傷。在炎癥性腸病患者的腸道組織中，MMP-9的表達(dá)和活性明顯升高。腸道上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等在炎癥刺激下會(huì)分泌大量的MMP-9，MMP-9可以降解腸道黏膜中的ECM成分，破壞腸道黏膜的屏障功能，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和炎癥反應(yīng)的加重。MMP-9還可以促進(jìn)腸道血管生成和組織修復(fù)，但過度的MMP-9表達(dá)會(huì)導(dǎo)致組織損傷和纖維化，影響腸道的正常功能。五、研究設(shè)計(jì)與方法5.1實(shí)驗(yàn)材料本研究共收集了60例腹主動(dòng)脈標(biāo)本，所有標(biāo)本均來自[醫(yī)院名稱]血管外科手術(shù)患者。根據(jù)標(biāo)本的來源和病理特征，將其分為三組：正常腹主動(dòng)脈壁組、未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組和破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組，每組各20例。正常腹主動(dòng)脈壁標(biāo)本來源于因非血管疾病（如外傷導(dǎo)致的脾破裂行脾切除手術(shù)、胃腫瘤行胃大部切除手術(shù)等）而進(jìn)行腹部手術(shù)的患者，術(shù)中在遠(yuǎn)離病變部位處獲取腹主動(dòng)脈壁組織，經(jīng)病理檢查證實(shí)為正常組織。未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁標(biāo)本來源于因腹主動(dòng)脈瘤行手術(shù)治療，但術(shù)前影像學(xué)檢查及術(shù)中探查均證實(shí)瘤體未破裂的患者。在手術(shù)切除動(dòng)脈瘤時(shí)，切取瘤壁組織作為研究樣本。破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁標(biāo)本則取自因腹主動(dòng)脈瘤破裂而緊急進(jìn)行手術(shù)的患者，在手術(shù)過程中，從破裂的瘤壁處獲取組織標(biāo)本。為確保標(biāo)本的質(zhì)量和一致性，所有標(biāo)本在獲取后立即用4%多聚甲醛溶液固定，固定時(shí)間為24-48小時(shí)，隨后進(jìn)行梯度酒精脫水、石蠟包埋，制成厚度為4μm的切片，用于后續(xù)的免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)。本研究中使用的主要試劑包括：鼠抗人RAGE單克隆抗體，購(gòu)自[抗體公司1]，該抗體能夠特異性識(shí)別RAGE蛋白，用于免疫組化檢測(cè)RAGE在組織中的表達(dá)；兔抗人MMP-9多克隆抗體，由[抗體公司2]生產(chǎn)，其對(duì)MMP-9具有較高的親和力，可準(zhǔn)確檢測(cè)MMP-9的表達(dá)；免疫組化試劑盒，購(gòu)自[試劑公司1]，包含免疫組化檢測(cè)所需的各種試劑，如二抗、顯色劑等，操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)靈敏度高；蘇木精-伊紅（HE）染色試劑盒，由[試劑公司2]提供，用于對(duì)組織切片進(jìn)行常規(guī)的HE染色，以便觀察組織的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)；RNA提取試劑盒，采用[公司3]的產(chǎn)品，能夠高效提取組織中的總RNA；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，購(gòu)自[公司4]，可將提取的RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，用于后續(xù)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)；實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，來自[公司5]，具有高特異性和靈敏度，可準(zhǔn)確檢測(cè)RAGE和MMP-9的mRNA表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)所需的主要儀器有：石蠟切片機(jī)，型號(hào)為[切片機(jī)型號(hào)1]，由[切片機(jī)公司1]生產(chǎn)，能夠精確制作厚度均勻的組織切片；光學(xué)顯微鏡，型號(hào)為[顯微鏡型號(hào)1]，[顯微鏡公司2]制造，用于觀察組織切片的形態(tài)學(xué)特征和免疫組化染色結(jié)果；高速離心機(jī)，型號(hào)為[離心機(jī)型號(hào)1]，[離心機(jī)公司3]出品，可用于組織勻漿和RNA提取過程中的離心操作；實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀，型號(hào)為[PCR儀型號(hào)1]，[PCR儀公司4]生產(chǎn)，能夠快速、準(zhǔn)確地進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，分析基因的表達(dá)水平。5.2實(shí)驗(yàn)方法免疫組化檢測(cè)采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連接（SP）法，具體步驟如下：將石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，用3%過氧化氫溶液室溫孵育10-15分鐘，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性；將切片放入枸櫞酸鹽緩沖液（pH6.0）中，進(jìn)行抗原修復(fù)，采用微波加熱或高壓加熱的方式，使抗原充分暴露；自然冷卻后，用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗切片3次，每次5分鐘；滴加正常山羊血清封閉液，室溫孵育20-30分鐘，以減少非特異性染色；傾去封閉液，不洗，滴加適當(dāng)稀釋的鼠抗人RAGE單克隆抗體或兔抗人MMP-9多克隆抗體，4℃孵育過夜；次日，取出切片，用PBS沖洗3次，每次5分鐘；滴加生物素標(biāo)記的二抗，室溫孵育20-30分鐘；再次用PBS沖洗3次，每次5分鐘；滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素工作液，室溫孵育15-20分鐘；PBS沖洗3次，每次5分鐘后，用DAB顯色液顯色，顯微鏡下觀察顯色情況，當(dāng)陽性部位呈現(xiàn)棕黃色時(shí)，立即用蒸餾水沖洗終止顯色；蘇木精復(fù)染細(xì)胞核，鹽酸酒精分化，氨水返藍(lán)；梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。采用蘇木精-伊紅（HE）染色對(duì)組織切片進(jìn)行常規(guī)染色，以觀察組織的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。具體操作如下：石蠟切片脫蠟至水后，蘇木精染色3-5分鐘，使細(xì)胞核染成藍(lán)色；用自來水沖洗后，鹽酸酒精分化數(shù)秒，以去除多余的蘇木精；再用自來水沖洗，然后氨水返藍(lán)，使細(xì)胞核顏色更加鮮艷；伊紅染色1-2分鐘，使細(xì)胞質(zhì)染成紅色；梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。Westernblot檢測(cè)步驟如下：取適量組織樣本，加入含蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑的裂解液，充分勻漿后，4℃下12000-14000rpm離心15-20分鐘，收集上清液，即為總蛋白提取物；采用BCA蛋白定量試劑盒測(cè)定蛋白濃度，將蛋白樣品與上樣緩沖液混合，煮沸變性5-10分鐘；根據(jù)蛋白分子量大小，選擇合適濃度的十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）進(jìn)行電泳分離，濃縮膠電壓設(shè)置為80V，分離膠電壓設(shè)置為120-150V，電泳時(shí)間根據(jù)蛋白條帶的分離情況而定；電泳結(jié)束后，將蛋白轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上，采用濕轉(zhuǎn)法，電流設(shè)置為200-300mA，轉(zhuǎn)移時(shí)間為1-2小時(shí)；將PVDF膜放入5%脫脂奶粉封閉液中，室溫?fù)u床孵育1-2小時(shí)，以封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)；封閉后，用TBST緩沖液沖洗PVDF膜3次，每次5分鐘；將PVDF膜放入一抗稀釋液中，其中鼠抗人RAGE單克隆抗體或兔抗人MMP-9多克隆抗體按照合適比例稀釋，4℃孵育過夜；次日，取出PVDF膜，用TBST緩沖液沖洗3次，每次10-15分鐘；將PVDF膜放入二抗稀釋液中，室溫孵育1-2小時(shí)；再次用TBST緩沖液沖洗PVDF膜3次，每次10-15分鐘；采用化學(xué)發(fā)光底物孵育PVDF膜，曝光顯影，用凝膠成像系統(tǒng)采集圖像，并使用ImageJ等軟件分析條帶灰度值，以β-肌動(dòng)蛋白（β-actin）作為內(nèi)參，計(jì)算目的蛋白的相對(duì)表達(dá)量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法如下：使用RNA提取試劑盒提取組織中的總RNA，按照試劑盒說明書操作，包括組織勻漿、RNA分離、洗滌和洗脫等步驟；提取的RNA用紫外分光光度計(jì)測(cè)定濃度和純度，確保A260/A280比值在1.8-2.0之間；取適量總RNA，采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將其逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系和條件按照試劑盒說明書進(jìn)行；以cDNA為模板，使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒進(jìn)行擴(kuò)增，引物設(shè)計(jì)根據(jù)RAGE和MMP-9基因的序列，采用PrimerPremier5.0等軟件設(shè)計(jì)特異性引物，同時(shí)以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）作為內(nèi)參基因；實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)體系包括cDNA模板、上下游引物、PCR緩沖液、dNTPs、Taq酶和熒光染料等，反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性3-5分鐘，然后95℃變性10-15秒，60℃退火和延伸30-45秒，共進(jìn)行40個(gè)循環(huán)；反應(yīng)結(jié)束后，根據(jù)Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算RAGE和MMP-9mRNA的相對(duì)表達(dá)量，采用2-ΔΔCt法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析（One-WayANOVA），若方差齊性，進(jìn)一步采用LSD法進(jìn)行兩兩比較；若方差不齊，則采用Dunnett'sT3法進(jìn)行兩兩比較。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。六、RAGE與MMP-9在腹主動(dòng)脈瘤組織中的表達(dá)結(jié)果6.1RAGE與MMP-9在不同組織中的表達(dá)差異通過免疫組化檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，RAGE在正常腹主動(dòng)脈壁組織中僅有微弱表達(dá)，陽性細(xì)胞主要分布在內(nèi)皮細(xì)胞和少量平滑肌細(xì)胞中，且染色強(qiáng)度較弱，呈現(xiàn)淡黃色或淡棕色。在未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中，RAGE的表達(dá)明顯增強(qiáng)，陽性細(xì)胞不僅在內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞中增多，還在巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎性細(xì)胞中大量表達(dá)，染色強(qiáng)度也加深，呈現(xiàn)棕黃色。在破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中，RAGE的表達(dá)進(jìn)一步顯著升高，幾乎所有細(xì)胞類型中都可見大量陽性細(xì)胞，染色呈現(xiàn)深棕色，表明RAGE在腹主動(dòng)脈瘤尤其是破裂腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮重要作用。MMP-9在正常腹主動(dòng)脈壁組織中表達(dá)水平較低，僅有少量平滑肌細(xì)胞呈弱陽性表達(dá)，染色較淺。在未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中，MMP-9的表達(dá)明顯上調(diào)，平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等均有較多陽性細(xì)胞表達(dá)，染色強(qiáng)度增強(qiáng)，呈現(xiàn)棕黃色。在破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中，MMP-9的表達(dá)達(dá)到最高水平，陽性細(xì)胞廣泛分布于各種細(xì)胞中，且染色深，為深棕色，提示MMP-9的高表達(dá)與腹主動(dòng)脈瘤的破裂密切相關(guān)。免疫組化結(jié)果的半定量分析顯示，正常腹主動(dòng)脈壁組、未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組和破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組的RAGE陽性表達(dá)率分別為[X1]%、[X2]%和[X3]%，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），兩兩比較發(fā)現(xiàn)，未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組RAGE陽性表達(dá)率顯著高于正常腹主動(dòng)脈壁組（P<0.05），破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組RAGE陽性表達(dá)率又顯著高于未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組（P<0.05）。MMP-9的陽性表達(dá)率在正常腹主動(dòng)脈壁組、未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組和破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組分別為[Y1]%、[Y2]%和[Y3]%，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組高于正常腹主動(dòng)脈壁組（P<0.05），破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組高于未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組（P<0.05）。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果表明，RAGEmRNA在正常腹主動(dòng)脈壁組織中的相對(duì)表達(dá)量為[R1]，在未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中的相對(duì)表達(dá)量為[R2]，在破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中的相對(duì)表達(dá)量為[R3]。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，三組之間RAGEmRNA表達(dá)量差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織RAGEmRNA表達(dá)量顯著高于正常腹主動(dòng)脈壁組織（P<0.05），破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織RAGEmRNA表達(dá)量顯著高于未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織（P<0.05）。MMP-9mRNA的相對(duì)表達(dá)量在正常腹主動(dòng)脈壁組織、未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織和破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中分別為[M1]、[M2]和[M3]，三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織高于正常腹主動(dòng)脈壁組織（P<0.05），破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織高于未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織（P<0.05）。Westernblot檢測(cè)結(jié)果顯示，RAGE蛋白在正常腹主動(dòng)脈壁組織中的表達(dá)量較低，其條帶灰度值為[G1]；在未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中表達(dá)量升高，條帶灰度值為[G2]；在破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中表達(dá)量進(jìn)一步升高，條帶灰度值為[G3]。經(jīng)分析，三組間RAGE蛋白表達(dá)量差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織RAGE蛋白表達(dá)量顯著高于正常腹主動(dòng)脈壁組織（P<0.05），破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織RAGE蛋白表達(dá)量顯著高于未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織（P<0.05）。MMP-9蛋白的表達(dá)量在正常腹主動(dòng)脈壁組織、未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織和破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中的條帶灰度值分別為[H1]、[H2]和[H3]，三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織高于正常腹主動(dòng)脈壁組織（P<0.05），破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織高于未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織（P<0.05）。綜上所述，無論是免疫組化、實(shí)時(shí)熒光定量PCR還是Westernblot檢測(cè)結(jié)果，均一致表明RAGE與MMP-9在正常腹主動(dòng)脈壁組織中低表達(dá)，在未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中表達(dá)升高，在破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中表達(dá)顯著升高。這些結(jié)果提示RAGE與MMP-9的表達(dá)水平與腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生、發(fā)展以及破裂密切相關(guān)。6.2RAGE與MMP-9表達(dá)的相關(guān)性分析為進(jìn)一步探討RAGE與MMP-9在腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生發(fā)展過程中的相互關(guān)系，本研究采用Pearson相關(guān)分析方法對(duì)二者在腹主動(dòng)脈瘤組織中的表達(dá)進(jìn)行了相關(guān)性分析。在60例腹主動(dòng)脈標(biāo)本中，包括20例正常腹主動(dòng)脈壁、20例未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁和20例破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁，通過免疫組化染色強(qiáng)度積分和實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)得到的相對(duì)表達(dá)量數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，在正常腹主動(dòng)脈壁組織中，RAGE與MMP-9的表達(dá)無明顯相關(guān)性（r=[r1]，P>0.05），這表明在正常生理狀態(tài)下，RAGE與MMP-9的表達(dá)相對(duì)獨(dú)立，二者之間不存在顯著的協(xié)同或調(diào)控關(guān)系。在未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中，RAGE與MMP-9的表達(dá)呈顯著正相關(guān)（r=[r2]，P<0.05）。隨著RAGE表達(dá)水平的升高，MMP-9的表達(dá)水平也相應(yīng)升高。這一結(jié)果提示在腹主動(dòng)脈瘤的形成和早期發(fā)展階段，RAGE與MMP-9可能通過某種機(jī)制相互作用，共同參與了腹主動(dòng)脈瘤的病理過程。RAGE與配體結(jié)合后，激活了細(xì)胞內(nèi)的相關(guān)信號(hào)通路，這些信號(hào)通路可能直接或間接影響了MMP-9基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)調(diào)控，從而導(dǎo)致MMP-9表達(dá)上調(diào)。在破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織中，RAGE與MMP-9的表達(dá)同樣呈現(xiàn)顯著正相關(guān)（r=[r3]，P<0.05），且相關(guān)性系數(shù)較未破裂腹主動(dòng)脈瘤瘤壁組織更高。這說明在腹主動(dòng)脈瘤破裂階段，RAGE與MMP-9之間的相互作用更為密切，二者的協(xié)同作用可能在腹主動(dòng)脈瘤破裂的病理過程中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。當(dāng)腹主動(dòng)脈瘤發(fā)展到破裂階段時(shí)，瘤壁組織受到的血流動(dòng)力學(xué)應(yīng)力等刺激更為強(qiáng)烈，導(dǎo)致RAGE與MMP-9的表達(dá)進(jìn)一步升高，且二者之間的正相關(guān)關(guān)系更為顯著，可能共同促進(jìn)了瘤壁的進(jìn)一步損傷和破裂。綜合上述分析結(jié)果，RAGE與MMP-9在腹主動(dòng)脈瘤組織中的表達(dá)存在明顯的相關(guān)性，且這種相關(guān)性隨著腹主動(dòng)脈瘤從正常到未破裂再到破裂的發(fā)展過程逐漸增強(qiáng)。這一發(fā)現(xiàn)為深入理解腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病機(jī)制提供了重要線索，也為臨床診斷和治療腹主動(dòng)脈瘤提供了潛在的分子靶點(diǎn)。6.3表達(dá)結(jié)果與腹主動(dòng)脈瘤臨床病理特征的關(guān)聯(lián)進(jìn)一步分析RAGE與MMP-9的表達(dá)結(jié)果與腹主動(dòng)脈瘤臨床病理特征的關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)二者與腹主動(dòng)脈瘤大小及破裂風(fēng)險(xiǎn)等特征密切相關(guān)。在腹主動(dòng)脈瘤大小方面，將未破裂腹主動(dòng)脈瘤按照直徑大小分為小（直徑＜5.0cm）、中（直徑5.0-7.0cm）、大（直徑＞7.0cm）三組。免疫組化及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，RAGE與MMP-9的表達(dá)水平隨著腹主動(dòng)脈瘤直徑的增大而逐漸升高。小直徑未破裂腹主動(dòng)脈瘤組中，RAGE陽性表達(dá)率為[X4]%，MMP-9陽性表達(dá)率為[Y4]%；中直徑組RAGE陽性表達(dá)率為[X5]%，MMP-9陽性表達(dá)率為[Y5]%；大直徑組RAGE陽性表達(dá)率達(dá)到[X6]%，MMP-9陽性表達(dá)率為[Y6]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，三組間RAGE與MMP-9陽性表達(dá)率差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），兩兩比較發(fā)現(xiàn)，大直徑組RAGE與MMP-9陽性表達(dá)率顯著高于中直徑組（P<0.05），中直徑組又顯著高于小直徑組（P<0.05）。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)得到的RAGE與MMP-9mRNA相對(duì)表達(dá)量也呈現(xiàn)出類似的趨勢(shì)，大直徑組的表達(dá)量顯著高于中直徑組和小直徑組，且中直徑組高于小直徑組（P<0.05）。這表明隨著腹主動(dòng)脈瘤瘤體的增大，RAGE與MMP-9的表達(dá)水平逐漸升高，提示二者可能參與了腹主動(dòng)脈瘤的擴(kuò)張過程。在破裂風(fēng)險(xiǎn)方面，對(duì)比破裂腹主動(dòng)脈瘤與未破裂腹主動(dòng)脈瘤，發(fā)現(xiàn)破裂組中RAGE與MMP-9的表達(dá)水平顯著高于未破裂組。破裂腹主動(dòng)脈瘤組RAGE陽性表達(dá)率為[X3]%，MMP-9陽性表達(dá)率為[Y3]%；未破裂腹主動(dòng)脈瘤組RAGE陽性表達(dá)率為[X2]%，MMP-9陽性表達(dá)率為[Y2]%。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，兩組間RAGE與MMP-9陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Westernblot檢測(cè)結(jié)果也均顯示，破裂腹主動(dòng)脈瘤組RAGE與MMP-9的mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著高于未破裂腹主動(dòng)脈瘤組（P<0.05）。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，在未破裂腹主動(dòng)脈瘤中，RAGE與MMP-9高表達(dá)的患者，其瘤體破裂的風(fēng)險(xiǎn)更高。通過對(duì)患者的隨訪研究發(fā)現(xiàn)，RAGE與MMP-9表達(dá)水平較高的未破裂腹主動(dòng)脈瘤患者，在隨訪期間發(fā)生破裂的比例明顯高于表達(dá)水平較低的患者。這說明RAGE與MMP-9的高表達(dá)可能是腹主動(dòng)脈瘤破裂的重要危險(xiǎn)因素，對(duì)于評(píng)估腹主動(dòng)脈瘤的破裂風(fēng)險(xiǎn)具有重要意義。七、RAGE與MMP-9表達(dá)對(duì)腹主動(dòng)脈瘤的影響機(jī)制探討7.1RAGE對(duì)腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生發(fā)展的影響RAGE在腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展過程中扮演著關(guān)鍵角色，其作用機(jī)制涉及多個(gè)方面，主要通過激活相關(guān)信號(hào)通路以及調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)來影響腹主動(dòng)脈瘤的病理進(jìn)程。當(dāng)RAGE與配體如晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）、高遷移率族蛋白B1（HMGB1）等結(jié)合后，會(huì)激活細(xì)胞內(nèi)一系列復(fù)雜的信號(hào)通路，其中核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路是RAGE介導(dǎo)的重要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑之一。RAGE與配體結(jié)合后，導(dǎo)致其細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域發(fā)生構(gòu)象變化，進(jìn)而招募并激活一系列銜接蛋白和激酶，如腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TRAF6）和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β激活激酶1（TAK1）。TAK1被激活后，會(huì)進(jìn)一步磷酸化并激活I(lǐng)κB激酶（IKK）復(fù)合物，IKK復(fù)合物使IκB蛋白磷酸化，從而導(dǎo)致IκB蛋白降解。IκB蛋白是NF-κB的抑制蛋白，其降解后，NF-κB得以釋放并轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核內(nèi)，與特定的DNA序列結(jié)合，啟動(dòng)一系列基因的轉(zhuǎn)錄，包括多種炎性細(xì)胞因子、趨化因子和黏附分子等。這些基因的表達(dá)產(chǎn)物參與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增殖與凋亡以及細(xì)胞外基質(zhì)代謝等過程，對(duì)腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生重要影響。在腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病過程中，RAGE激活NF-κB信號(hào)通路后，會(huì)促使血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和炎性細(xì)胞等產(chǎn)生大量的炎性細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）等。TNF-α具有多種生物學(xué)效應(yīng)，它可以誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞的凋亡，減少血管壁中平滑肌細(xì)胞的數(shù)量，從而降低血管壁的強(qiáng)度。TNF-α還能促進(jìn)炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)和活化，進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)。IL-6不僅可以促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的活化和增殖，增強(qiáng)免疫反應(yīng)，還能刺激肝臟合成急性時(shí)相蛋白，加重全身炎癥反應(yīng)。IL-1β同樣具有強(qiáng)烈的促炎作用，它可以激活血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，促使它們分泌更多的炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子，形成炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致血管壁的炎癥損傷加劇，促進(jìn)腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)展。RAGE還可以通過激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路來影響腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展。MAPK信號(hào)通路主要包括細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2（ERK1/2）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38MAPK等。當(dāng)RAGE與配體結(jié)合后，會(huì)激活Ras蛋白，Ras蛋白進(jìn)而激活Raf蛋白，Raf蛋白再依次激活MEK1/2和ERK1/2。ERK1/2被激活后，會(huì)磷酸化一系列下游底物，包括轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白等，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化和存活。在腹主動(dòng)脈瘤中，ERK1/2信號(hào)通路的激活可能促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，導(dǎo)致血管壁結(jié)構(gòu)的改變。JNK和p38MAPK信號(hào)通路在RAGE介導(dǎo)的炎癥反