DB62/T4903—2024櫻桃無病毒苗木繁育技術規程2024-07-24實施2024-07-24實施本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件由甘肅省農業農村廳提出并監督實施。本文件由甘肅省果樹果品標準化技術委員會歸口。本文件起草單位：甘肅農業大學、蘭州市副食品基地建設中心、寧縣果業發展中心、天水師范學院、天水市麥積區果業發展中心、禮縣蘋果研究所、靜寧縣李店鎮農業農村綜合服務中心、臨夏州農業技術推廣服務中心。本文件主要起草人：馬宗桓、梁國平、劉軍德、陳佰鴻、毛娟、楊少華、王雄偉、郭志剛、高永新、李玉濤。本文件由甘肅農業大學負責解釋。I本文件規定了櫻桃無病毒苗木繁育技術中的術語和定義、脫毒苗獲得、無病毒苗木采穗圃、無病毒無性系砧木圃、無病毒苗木繁育、出圃苗木的規格要求、苗木出圃及檔案記錄。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB9847蘋果苗木NY/T393綠色食品農藥使用準則NY/T1085蘋果苗木繁育技術規程NY/T2281蘋果病毒檢測技術規范3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。櫻桃無病毒苗不攜帶李矮縮病莓(prunedwarfvirus,PDV)、李屬壞死環斑病毒(Prunusnecroticringspotvirus,CGRIMV)、櫻桃病毒A(CherryvirusA,CVA)、櫻桃壞死銹斑病毒(Cherrynecroticrustymottlevirus,櫻桃無病毒母本圃用于提供櫻桃品種及砧木無病毒枝條的圃地。4脫毒苗獲得4.1脫毒材料外觀無異常的母本樹枝條作待脫毒材料。4.2脫毒處理4.2.1熱處理脫毒無菌外植體獲得12翌年2月上中旬，將待脫毒盆栽苗移入溫室，將1a生接穗枝條剪截留3個～5個飽滿芽，待萌動、長出幼葉后，移于恒溫熱處理箱，溫度控制至28℃~30℃。5d～7d盆栽苗長至3片～5片新葉時，將溫度調實生砧木，用塑料薄膜包扎，套白色透明塑料袋保濕，置于陰涼處，12d～16d除塑料袋，8d～12d移入溫室內陽光處，待長出3片～5片新葉，移至室外煉苗10d～15d,再移入苗圃，按正常苗進行管理。選取生長健壯、無病蟲害的幼嫩新梢，去掉葉片，保留新梢頂尖。用流水沖洗1h下，采用75%酒精對新梢帶芽莖段表面消毒20s,用0.1%HgCl2消毒4min～6min,無菌水沖洗4次～6次。糖25g/L、瓊脂6.5g/L、6-BA0.8mg2000Lx～2500Lx,14h～18h/光照，6h～10h/黑暗，空氣相對濕度60%～75%,培養溫度25℃±2℃。間隔試管苗生長至高2cm～4cm,生有3條～4條1cm新根時，自然光下閉瓶馴化煉苗5d行透氣鍛煉。噴清水2次/d～3次/d,48h～72h從瓶中取出幼苗，于清水中洗凈附著根系同。同。同。同。同。4.2.4病毒檢測具體操作步驟見NY/T2281。酶聯免疫吸附法(ELISA)無病毒原種樹栽植在土壤經過消毒、不重茬的園地，與其他果園或苗圃相距200m以上，須搭建人工網室進行隔離。每個品種保存10株以上。每2a進行1次病毒檢測組織培養獲得無病毒原種保留在瓶內繼代培養。每2a進行病毒檢測1次，發現問題株隨即淘汰。34選擇地勢平坦，有灌溉條件，土壤肥沃，有機質含量2%以上，pH6.0~7.5,未栽植過其他果樹的園地，土壤施用殺菌劑和殺蟲劑進行消毒，單株施入有機肥5kg。苗圃應距離其他果園、苗圃100m以上，(品系)名稱、采集時間。秋季宜采用芽接法，春季宜采用枝接法，接后要按品種、品系分別記載。補接時，須保證與原來嫁接的母株品種相同。嫁接苗管理嫁接苗管理按照NY/T1085執行。8出圃苗木的規格要求8.1喬化砧木苗基砧長度12cm~15cm,粗度≥0.2cm、長度≥20cm的側根數量10條以上，整形帶飽滿葉芽樹6個以上，嫁接口完全愈合。8.2矮化砧木苗基砧長度10cm~12cm,粗度≥0.2cm、長度≥20cm的側根數量8條以上，整形帶飽滿葉芽樹6個以上，嫁接口完全愈合。9苗木出圃秋季落葉后至春季萌芽前起苗，起苗時減少對根系的損傷，起苗后剔除病蟲苗。具體按GB9847規定執行。10檔案記錄建立完整的苗木脫毒、檢測和育苗檔案，包括品種名稱、脫毒方法、脫除病毒種類、脫毒率、嫁接時間、接