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文檔簡介

高中生物實驗DNA的粗提取與鑒定

高中生物學習中掌握重點實驗是生物學習方法中最有效的

一種，生物實驗掌握之后在學習起來會變的輕松很多，下面

是整埋的高中生物實驗之DNA的粗提取與鑒定，希望對高中

生的生物學習有幫助。

高中生物實驗：DNA的粗提取與鑒定

DNA的粗提取與鑒定知識

1.DNA的粗提取與鑒定實驗原理

⑴粗提取原理：在NaCI溶液濃度低于0.14mol/L時、DNA的

溶解度隨NaCI溶液濃度的增加而降低;在0.14mol/L時，DNA

的溶解度最小;當NaCI溶液濃度繼續增加時，DNA溶解度又

增大。

⑵純化原理：DNA不溶于酒精，但細胞中的某些蛋白質溶于

酒精。

⑶鑒定DNA原理：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染

成藍色。

2.實驗材料的選擇及處理

⑴不選擇豬血等哺乳動物的血液，因為哺乳動物成熟的紅細

胞無細胞核。

⑵需要在雞血中加入抗凝劑一一檸檬酸鈉溶液，防止血液凝

固。

⑶需除去雞血中的血漿，因為血漿中無DNA。

特別提醒：不同生物的組織中DNA含量不同在選取材料時,

應本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。

3,生物實驗過程

步驟：提取細胞核物質一溶解核內DNA-＞析出DNA粘稠物一

濾取含DNA的粘稠物一DNA粘稠物的再溶解f過濾含有

DNA的氯化鈉溶液f提取含雜質較少的DNA-DNA的鑒定。

操作要點：（1）2次加蒸儲水：第一次是在是為了使血細胞吸

水膨脹破裂，加水后必須充分攪拌使血細胞充分破裂;第二次

加蒸儲水是為了稀釋氯化鈉溶液。

(2)3次加氯化鈉溶液：第一次加氯化鈉后，必須充分晃動燒

杯，使二者混合均勻，加速染色質中DNA與蛋白質分離，使

DNA充分游離并溶解在氯化鈉溶液中;第二次加氯化鈉溶液

也是為了DNA的再溶解，這時溶液中的蛋白質含量已很少;

第三次加氯化鈉溶液還是為溶解DNAo

(3)6次攪拌：除最后一次攪拌外前5次攪拌均朝一個方向:,

并且在析出DNA、DNA再溶解和提取中，各步攪拌都要輕緩

玻璃棒，不要直插燒杯底部防止DNA分子斷裂。

(4)3次過濾：第一次過濾，留濾液;第二次過濾，留粘稠物;

第三次過濾，留濾液。注意這3次過濾都用紗布，獲得沉淀

物或粘稠物的通常為多層，獲得濾液的紗布層數適當減少。

特別提醒：若以植物為實驗材料，步驟上大致相同，在材料

的處理上有幾點不同：一是增加研磨步驟，目的是破壞細胞

壁;二是加入洗滌劑，目的是溶解細胞膜及核膜;三是加食鹽,

可加速細胞膜及核膜的破裂。

4.DNA的粗提取與鑒定實驗注意事項

⑴用冷酒精濃縮和沉淀DNA時所用的95%酒精，必須經過充

分預冷后才能使用，冷酒精與含DNA的氯化鈉溶液體積比

是2：1。如果用冷酒精處埋后，懸浮于溶液中的絲狀物較

少，可將混合液放于冰箱中再冷卻幾分鐘，然后再用玻璃棒

卷起絲狀物。

⑵雞血細胞破碎以后釋放的DNA,容易被玻璃容器吸附，由

于細

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