消毒試驗(yàn)要求一培養(yǎng)基選擇相應(yīng)培養(yǎng)基和試劑進(jìn)行菌種的傳代和培養(yǎng)，消毒試驗(yàn)所需培養(yǎng)基和試劑。實(shí)驗(yàn)室自行制備的固體斜面培養(yǎng)基和平板冷藏保存，保存期不超過(guò)3個(gè)月，如出現(xiàn)缺水、干裂等情況，滅菌處理后銷(xiāo)毀。實(shí)驗(yàn)室自行制備的液體培養(yǎng)基密封冷藏保存，保存期不超過(guò)3個(gè)月，如出現(xiàn)渾濁，滅菌處理后銷(xiāo)毀。商品化平板、斜面和培養(yǎng)基按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存并在有效期內(nèi)使用。復(fù)蘇與傳代1以無(wú)菌操作方式開(kāi)啟凍干菌種管，加入適量培養(yǎng)液（按菌種選擇培養(yǎng)液，如細(xì)菌選擇營(yíng)養(yǎng)肉湯、白色念珠菌選擇沙堡液體培養(yǎng)基、分枝桿菌選擇蘇通綜合液體培養(yǎng)基、黑曲霉菌選擇麥芽浸膏營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基），吹吸數(shù)次，使菌種融化分散。取含5.0mL～10.0mL相應(yīng)培養(yǎng)液的試管，滴入少許菌種懸液，在適宜溫度下培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間（一般為36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h、黑曲霉菌為30℃±1℃培養(yǎng)42h～48h），此為第1代培養(yǎng)物。2用接種環(huán)取第1代培養(yǎng)物，或從菌種凍存管中取適量菌液/瓷珠，劃線接種于相應(yīng)培養(yǎng)基平板（按菌種選擇培養(yǎng)基，如細(xì)菌選擇營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、白色念珠菌選擇沙堡瓊脂培養(yǎng)基、分枝桿菌選擇改良羅氏培養(yǎng)基或其他商品化分枝桿菌專用復(fù)合瓊脂培養(yǎng)基、黑曲霉菌選擇麥芽浸膏瓊脂培養(yǎng)基），在適宜溫度下培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間（一般為36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h、分枝桿菌36℃±1℃培養(yǎng)72h、黑曲霉菌30℃±1℃培養(yǎng)42h～48h），此為第2代培養(yǎng)物。3挑取第2代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于相應(yīng)培養(yǎng)基斜面或平板（按菌種選擇培養(yǎng)基斜面，如細(xì)菌選擇營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面、白色念珠菌選擇沙堡瓊脂斜面、分枝桿菌選擇改良羅氏培養(yǎng)基或其他商品化分枝桿菌專用復(fù)合瓊脂斜面、黑曲霉菌選擇麥芽浸膏瓊脂培養(yǎng)基平板），在適宜溫度下培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間（一般為36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h、分枝桿菌36℃±1℃培養(yǎng)72h、黑曲霉菌30℃±1℃培養(yǎng)42h～48h），此為第3代培養(yǎng)物。4取第3代培養(yǎng)物，接種于相應(yīng)培養(yǎng)基斜面，在適宜溫度下培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間，此為第4代培養(yǎng)物。5按上述方法培養(yǎng)至所需代數(shù)，傳代時(shí)在試管上注明菌種名稱、菌種號(hào)、代數(shù)及傳代日期等基本信息。保存1菌種斜面的保存?zhèn)鞔镁N采用斜面冷藏保存。將菌種接種在適宜的固體斜面培養(yǎng)基上，在適宜溫度下培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間，生長(zhǎng)充分后，轉(zhuǎn)移至冰箱冷藏保存，以備實(shí)驗(yàn)傳代用。此法用于實(shí)驗(yàn)用菌種的短期保存，隨時(shí)檢查其污染雜菌和變異等情況，發(fā)現(xiàn)異常，滅菌處理后銷(xiāo)毀。保存時(shí)間與菌種類型有關(guān)，一般存儲(chǔ)時(shí)間不超過(guò)9周，銅綠假單胞菌和分枝桿菌不超過(guò)6周，如保存期內(nèi)，斜面出現(xiàn)缺水、干裂等情況，滅菌處理后銷(xiāo)毀。2菌種凍存管的保存菌種可采用甘油、液體石蠟、瓷珠等方式凍存，根據(jù)其特性選擇適宜凍存方法，凍存管注明菌種名稱、菌種號(hào)、凍存日期等基本信息。菌種凍存管在-80℃保存不宜超過(guò)18個(gè)月?？砷g隔一段時(shí)間，將菌種凍存管復(fù)蘇后，重新凍存。3真空冷凍干