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SZDB/ZSZDB/Z335—2018轉基因玉米Bt176及其產品微滴式數字PCR定量檢測方法Detectionofinsect-resistantmaizeBt176anditsderivatesproductsusingdropletdigitalPCRmethod2018-12-05發布2018-12-30實施深圳市市場和質量監督管理委員會發布 1農業部2031號公告—19—2013轉基因植物及其產品農業部1485號公告—4—2010轉基因植物及其產品成Bt176結構特異性序列structure-specifi性對照及空白對照進行微滴式數字PCR擴增，根據陽性對照、陰性對照和空白對照2AAAGGGCCAGGTTCATTATCHEX-TAAGGAGCACTCGCCGCCGCATCTG-ACTCCACTTTGTGCAGAACAGAFAM-CCGACGTGACCGACTACCACATCG分析天平（0.0001g）、離心機、超微量紫外分光光度計、微滴發生器、微滴讀取儀、普通P按照表2配制微滴式數字PCR反應體系，本文件用水符合GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方微滴式數字PCR擴增程序：1、95℃,5min（Ramp2℃/s2、95℃,30s（Ramp2℃/s-----3微滴式數字PCR的操作按照《InstructionManual,QX100?DropletManual,QX100?Dropl）；Ⅱb基因和Bt176結構特異性序列的每微升體系所含拷貝數（拷貝數濃度copies/μL）轉基因含量=（Bt176

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