課時把關(guān)練第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應用1．土壤中含有能將難溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)變成植物可以吸收和利用的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株Q。圖1是某同學利用平板劃線法分離菌株Q的示意圖，圖2是分離鑒別菌株Q的結(jié)果。固體培養(yǎng)基中難溶性磷酸鹽在菌株Q的作用下溶解，會在菌落周圍形成透明圈，透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解難溶性磷酸鹽的能力大小。如表是初步篩選出的三種優(yōu)良解磷菌株。下列說法正確的是（）菌株透明圈直徑（D）菌落直徑（d）M﹣3﹣0118.812.3B3﹣5﹣620.78.0T﹣4﹣019.16.5A．劃線時將沾有菌種的接種環(huán)插入培養(yǎng)基 B．圖1只有在第5區(qū)域中才能得到所需菌落 C．圖1中，整個過程需要對接種環(huán)至少進行6次灼燒D．根據(jù)實驗結(jié)果分析溶解難溶性磷酸鹽能力最強的菌株是T﹣4﹣012．去掉可回收的、不易降解的物質(zhì)，可以減少垃圾數(shù)量達60%以上，從而減少污染。處理生活垃圾的有效方法之一是用微生物對其進行降解，下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過程。相關(guān)敘述正確的是（）A．乳制品廠廢水中含有大量淀粉，該廢水是分離高效降解淀粉菌種的首選樣品 B．該實驗中菌液接種到培養(yǎng)基上所用的接種工具只能選擇火焰灼燒過的接種環(huán) C．稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外，也常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目 D．由于菌種對碘的分解能力不同，所以菌落①與菌落②產(chǎn)生透明圈的大小不同3．在做分離“分解尿素的細菌”實驗時，A同學從對應10﹣6培養(yǎng)基中篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。下列有關(guān)敘述不正確的是（）A．A同學出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是土樣不同 B．可以將A同學配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進行培養(yǎng)作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染 C．讓其他同學用與A同學一樣的土壤進行實驗，如果結(jié)果與A同學一樣，則可證明A同學無誤D．B選項的實驗思路都遵循了實驗的對照原則，而C選項的沒有4．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應用的說法不正確的是（）A．微生物接種的方法不同其核心相同都是防止雜菌的污染 B．接種前需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手等進行嚴格的滅菌處理 C．大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段 D．培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素5．某種物質(zhì)X（一種含有C、H、O、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解X。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解X的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和X，乙的組分為無機鹽、水、X和Y。下列相關(guān)敘述中錯誤的是（）A．甲、乙培養(yǎng)基均屬于選擇培養(yǎng)基，乙培養(yǎng)基中Y物質(zhì)是瓊脂 B．若要篩選高效降解X的細菌菌株，甲、乙培養(yǎng)基中X是唯一的碳源 C．步驟③后統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要高 D．步驟⑤的篩選過程中，若培養(yǎng)基中的X濃度過高，某菌株對X的降解量可能下降6．某大腸桿菌能在基本培養(yǎng)基上生長，其突變體M和N均不能在基本培養(yǎng)基上生長，但M可在添加了氨基酸甲的基本培養(yǎng)基上生長，N可在添加了氨基酸乙的基本培養(yǎng)基上生長。將M和N在同時添加氨基酸甲和乙的基本培養(yǎng)基中混合培養(yǎng)一段時后，再將菌體接種在基本培養(yǎng)基平板上，發(fā)現(xiàn)長出了大腸桿菌（X）的菌落。據(jù)此判斷，下列說法不合理的是（）A．突變體M催化合成氨基酸甲所需酶的活性喪失 B．突變體M和N都是由于基因發(fā)生突變而得來 C．突變體M的RNA與突變體N混合培養(yǎng)能得到X D．突變體M和N在混合培養(yǎng)期間發(fā)生了DNA轉(zhuǎn)移7．科學家構(gòu)建了一種嗜鹽、酸堿耐受能力強的單胞菌，在一個不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng)中，其培養(yǎng)基鹽濃度和pH均較高，以蔗糖為主要原料，使得該菌持續(xù)發(fā)酵數(shù)小時，收集其發(fā)酵產(chǎn)物。結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌株增殖和發(fā)酵產(chǎn)物均未達到預期，并產(chǎn)生了少量乙醇等物質(zhì)。下列說法正確的是（）A．為提高菌株的耐蔗糖能力和利用效率，可將蔗糖作為唯一碳源培養(yǎng)并不斷提高其濃度 B．采用平板劃線法來檢測該菌株增殖情況 C．該系統(tǒng)不需要滅菌的原因是高鹽使得細菌滲透失水，高堿使得雜菌蛋白質(zhì)失活 D．高密度培養(yǎng)的限制因素是營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和溫度8．如圖表示培養(yǎng)和分離某種細菌的部分操作步驟，下列敘述錯誤的是（）A．步驟①倒平板操作時，倒好后應立即將其倒過來放置 B．步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后迅速蘸取菌液后劃線 C．步驟③應多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落 D．步驟④恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對大腸桿菌進行計數(shù)9．硝化細菌可將氨或銨鹽氧化為易被植物吸收的硝酸鹽，釋放的能量可用于將二氧化碳和水轉(zhuǎn)化成有機物。如圖為從土壤中分離硝化細菌菌株的過程示意圖。有關(guān)說法錯誤的是（）A．制作該固體培養(yǎng)基時應先滅菌再調(diào)pH B．Ⅰ號培養(yǎng)基在功能上屬于選擇培養(yǎng)基 C．要篩選硝化細菌，Ⅰ號培養(yǎng)基的成份應不含C源、N源 D．接種后的Ⅱ號培養(yǎng)基在恒溫箱中通常需要倒置培養(yǎng)10．某興趣小組按如圖方法對沒有加工的鮮奶進行細菌檢測。有關(guān)敘述正確的是（）A．鮮奶常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌 B．配制圖中的培養(yǎng)基時，一般需要加入適量的瓊脂 C．對鮮奶中細菌計數(shù)，常采用稀釋涂布平板法，統(tǒng)計的結(jié)果往往比實際值偏高 D．若3個培養(yǎng)皿中菌落數(shù)為35、33、34，則鮮奶中細菌數(shù)為3.4×106個/mL11．如圖是分離微生物時的平板劃線示意圖，劃線的順序為1﹣5。下列操作方法正確的是（）A．制備該平板的主要步驟有：計算→稱量→融化→滅菌→調(diào)pH→倒平板 B．整個劃線操作的過程都必須在酒精燈火焰旁進行 C．除第一次劃線外，以后的每一次劃線的起點是上一次劃線的末端 D．整個操作過程中總共灼燒滅菌了4次12．科學家從長期受到廢棄油脂污染的淤泥中得到兩種油脂降解菌A和B，現(xiàn)對兩種油脂降解菌進行培養(yǎng)分析，請回答下列問題：（1）科學家配置了含有NH4NO30.3%、KH2PO40.05%、K2HPO40.05%、MgSO40.02%、微量元素液和含廢棄油脂等的培養(yǎng)基，從功能上來看，該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基，加入KH2PO40.05%和K2HPO40.05%的目的是。（2）如圖1所示，科學家稱取了5g淤泥樣品，將其加入45mL無菌水中，進行梯度稀釋，在5個平板上分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當培養(yǎng)后，5個平板上的菌落數(shù)分別為155、175、150、41、160個，則1g淤泥中的活菌數(shù)約為個（保留小數(shù)點后兩位）。用這種方法統(tǒng)計得到的數(shù)值往往（填“偏大”或“偏小”）。（3）廢棄油脂具有污染與資源兩重性，A、B兩種細菌在降解廢棄油脂的同時還能獲得高附加值的次生代謝產(chǎn)物鼠李糖脂。為評價A、B兩種細菌的相關(guān)性能，對A、B兩種細菌進行分別培養(yǎng)，得到如下結(jié)果。由圖2可知兩種菌株在培養(yǎng)過程中都出現(xiàn)了型增長，且菌株更適合用于分解油脂。（4）利用能降解廢棄油脂的微生物降解廢棄油脂時需要多步化學反應，因此在生產(chǎn)中常用

（填“固定化細胞”或“固定化酶”）技術(shù)，該技術(shù)多采用法固定化。13．為了分離和純化高效分解石油的細菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進行如圖A所示的實驗。請回答以下相關(guān)問題：（1）配制好的培養(yǎng)基通常使用法滅菌。步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分相比，最大的區(qū)別是。與步驟③培養(yǎng)基相比，步驟④加入了凝固劑。（2）進行步驟④的操作，其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示，該接種方法是，出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的操作失誤是。（3）對步驟⑤中某瓶細菌計數(shù)的方法有兩種，一種方法統(tǒng)計出的菌落數(shù)可代表活菌數(shù)；另一種方法是，該方法需要借助血細胞計數(shù)板，但此法得出的結(jié)果會偏高，原因是。

（4）步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是。步驟⑤需要振蕩培養(yǎng)，原因是（答兩點）。課時把關(guān)練第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應用參考答案1．C2．C3．D4．B5．C6．C7．AC8．ABD9．AC10．BD11．BC12．（1）選擇調(diào)