《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》課件-肥達(dá)試驗(yàn)_第1頁
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文檔簡介

抗原構(gòu)造復(fù)雜鞭毛抗原(H):為鞭毛抗原,是鞭毛中的蛋白質(zhì)。不耐熱,60℃30分鐘被破壞。K或Vi抗原:為多糖類物質(zhì),位于O抗原外圍,與毒力有關(guān)。重要的K抗原有傷寒沙門菌的Vi抗原、大腸埃希菌的K抗原等。菌體抗原(O):為菌體抗原,是細(xì)胞壁的脂多糖成分,耐熱,100℃數(shù)小時(shí)不被破壞。原理將已知的傷寒桿菌“O”抗原、“H”抗原和甲型、乙型副傷寒桿菌“H”抗原與病人血清混合作試管定量凝集試驗(yàn),以檢測病人血清中的相應(yīng)抗體,臨床上作為診斷傷寒和副傷寒的參考依據(jù)。材料與儀器待檢血清診斷菌液蒸餾水試管試管架微量移液器吸管水浴箱1.將大小一致的小試管放置試管架,4排,每排8支,作好標(biāo)記。2.在所有32支試管中分別加入生理鹽水0.5ml。3.另取1支試管,加生理鹽水1.8ml和病人血清0.2ml,充分混勻,得到1:10稀釋血清。在每排第1管中分別加入該1:10稀釋血清0.5ml,充分混勻,即得1:20稀釋血清。4.倍比稀釋病人血清:分別從每排第1管中取0.5ml血清加入本排第2管,混勻,再從第2管吸取0.5ml血清加入第3管,混勻。依次類推,直至每排第7管中加入稀釋血清0.5ml,混勻后從每排第7管中吸取0.5ml丟棄。從而每排1~7管得到1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、1:640、1:1280的對倍稀釋血清。第8管不加血清,只加生理鹽水作陰性對照。試驗(yàn)步驟5.加入菌液:各排從第8管開始,由后往前每管加入診斷菌液0.5ml。第1排各管加入傷寒桿菌“H”菌液。

第2排各管加入傷寒桿菌“O”菌液。

第3排各管加入甲型副傷寒桿菌“H”菌液。

第4排各管加入乙型副傷寒桿菌“H”菌液。根據(jù)凝集反應(yīng)的強(qiáng)弱,分別用“++++”、“+++”、“++”、“+”和“-”表示。

1.++++:完全凝集,上層液體清澈透亮,細(xì)菌完全凝集沉淀于管底。

2.+++:大部分凝集,上層液體基本透明,細(xì)菌大部分(75%)凝集沉淀于管底。

3.++:中度凝集,上層液體半透明,管底有明顯凝集沉淀物。

4.+:

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