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數(shù)字編號

項(xiàng)目批準(zhǔn)號30772568學(xué)科代碼C03020702

項(xiàng)目名稱四磷酸胭腺甘對血管平滑肌及動(dòng)脈粥樣硬化的作用

申請書摘要Jankowski博士發(fā)現(xiàn)四磷酸脈腺甘（Up4A）是一種新的由血管內(nèi)皮

細(xì)胞釋放的血管收縮因子。它能激活P2X1,P2Y2和P2Y4受體使血管收縮及血壓

升高。激活平滑肌細(xì)胞上P2受體還可導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞的增生和移遷。已熟知平

滑肌細(xì)胞的增生是早期動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的關(guān)鍵之一。我們與Jankowski博士合

作主要想解決二個(gè)問題：1）Up4A是否對人體平滑肌細(xì)胞增生具有促進(jìn)作用？如

果有，那么作用機(jī)制是什么？2）Up4A是否促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生及發(fā)展？我

們的初步研究結(jié)果表明Up4A刺激培養(yǎng)的人血管平滑肌細(xì)胞增生。具體工作目標(biāo)

包括1）進(jìn)一步探討Up4A對平滑肌細(xì)胞增生的促進(jìn)作用，并對受體及細(xì)胞內(nèi)信

號傳遞機(jī)理進(jìn)行研究；2）研究Up4A對動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生及發(fā)展的促進(jìn)作用。

主要的實(shí)驗(yàn)手段包括一些酶的抑制劑，P2Y2和P2Y4受體的激活劑及拮抗劑，

siRNA試劑，激光掃描細(xì)胞儀和ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬。

申請書主題詞四磷酸服腺甘；血管平滑肌細(xì)胞；動(dòng)脈粥樣硬化；細(xì)胞周期

項(xiàng)目批準(zhǔn)號30770787學(xué)科代碼C010701

項(xiàng)目名稱血管平滑肌細(xì)胞表型調(diào)制的表觀遺傳學(xué)機(jī)制

申請書摘要在課題組前期發(fā)現(xiàn)KLF5/KLF4-TCE和myocardin/SRF-CArG共同構(gòu)成

VSMC表型調(diào)制分子開關(guān)，以及乙酰化/脫乙酰基修飾調(diào)節(jié)KLF5和KLF4反式激活

作用的基礎(chǔ)上，結(jié)合國外有關(guān)研究成果，提出p300和HDAC作為VSMC表型調(diào)制

分子開關(guān)中不同組分之間的橋連分子，通過與myocardin、KLF5和KLF4相互作

用及對組蛋白、KLF5和KLF4的乙酰化/脫乙酰基修飾，協(xié)同調(diào)節(jié)myocardin、KLF5

和KLF4對VSMC標(biāo)志基因的轉(zhuǎn)錄激活作用的設(shè)想。本項(xiàng)目進(jìn)一步研究并揭示p300

和HDAC在不同表型VSMC中的表達(dá)水平及其與myocardin、KLF5和KLF4的作用

方式，以及組蛋白、KLF5、KLF4乙酰化/脫乙酰基修飾與VSMC標(biāo)志基因表達(dá)和

細(xì)胞表型之間的關(guān)系，證實(shí)上述設(shè)想的正確性，提出和發(fā)展調(diào)制VSMC表型的新

思路和新途徑。

申請書主題詞VSMC;表型調(diào)制;p300;HDAC;表觀遺傳學(xué)

項(xiàng)目批準(zhǔn)號30772281學(xué)科代碼C030313

項(xiàng)目名稱組蛋白乙酰化與miRNA間的作用下調(diào)胰島素介導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞

SM-a基因表達(dá)的機(jī)制

申請書摘要VSMC增殖是血管增殖性疾病的主要病理改變，高胰島素血癥可引起

VSMC增殖。既往研究發(fā)現(xiàn)胰島素介導(dǎo)VSMC增殖主要通過細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中

MAPK的磷酸化，導(dǎo)致與VSMC增殖相關(guān)多基因的差異表達(dá)。進(jìn)而發(fā)現(xiàn)胰島素介導(dǎo)

的VSMC增殖可通過組蛋白乙酰化下調(diào)SM-a,可能是導(dǎo)致VSMC生長失控、表型

改變的原因。推測胰島素介導(dǎo)的VSMC中SM-a表達(dá)下調(diào)與轉(zhuǎn)錄后抑制調(diào)控調(diào)控

元件miRNA特異表達(dá)有關(guān)。本研究在已建立的胰島素介導(dǎo)VSMC增殖模型基礎(chǔ)上,

采用miRNAs基因芯片、ChIP、RT-PCR,免疫印跡等技術(shù)，擬闡明胰島素對VSMC

異常增殖和表型轉(zhuǎn)化中SM-a基因在組蛋白乙酰化后miRNAs對基因表達(dá)的機(jī)制，

擬證實(shí)特異表達(dá)的miRNAs和組蛋白乙酰化對調(diào)控胰島素介導(dǎo)VSMC增殖作用。本

項(xiàng)目將為人們認(rèn)識胰島素介導(dǎo)VSMC增殖中組蛋白乙酰化后的基因下調(diào)分子機(jī)

制、為選擇預(yù)防與治療手段提供理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

申請書主題詞胰島素；miRNAs；血管平滑肌細(xì)胞；組蛋白乙酰化

項(xiàng)目批準(zhǔn)號30700368學(xué)科代碼C03030205

項(xiàng)目名稱高磷酸鹽環(huán)境誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的分子機(jī)制探討

申請書摘要高磷血癥是慢性腎衰竭患者常見的內(nèi)環(huán)境紊亂，能引發(fā)血管平滑肌細(xì)

胞(VSMC)向類似成骨樣細(xì)胞轉(zhuǎn)分化，使鈣鹽和骨基質(zhì)蛋白沉積于血管壁，從而

導(dǎo)致病人出現(xiàn)血管鈣化及心血管并發(fā)癥。本課題組在已有的工作基礎(chǔ)上，提出了

“高磷環(huán)境誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化過程是由TGF-31所介導(dǎo)”的假說，并擬

通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)、在不同的作用環(huán)節(jié)進(jìn)行干預(yù)研究：(1)用特異性的細(xì)胞膜鈉/

磷轉(zhuǎn)運(yùn)體阻斷劑-麟甲酸鈉阻止細(xì)胞外的磷酸鹽進(jìn)入胞內(nèi)；(2)通過RNA干擾抑

制血管平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生活性TGF-B1；(3)用中和抗體阻斷TGF-B1和其細(xì)胞

膜上的受體相結(jié)合；分別觀察在上述條件下，高磷環(huán)境對血管平滑肌細(xì)胞生物學(xué)

特性的影響，從而在多個(gè)層面論證我們的設(shè)想。本課題將進(jìn)一步揭示高磷酸鹽環(huán)

境導(dǎo)致血管平滑肌細(xì)胞向類似成骨樣細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的分子機(jī)制，為尋求防治慢性腎

衰竭患者血管鈣化的新靶點(diǎn)提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)資料。

申請書主題詞慢性腎衰竭；磷酸鹽；血管平滑肌細(xì)胞；鈣化；TGF-B1

30700863惡性膠質(zhì)瘤呈侵襲性生長方式，手術(shù)難以徹底清除侵入周圍腦組織的

腫瘤細(xì)胞，而這些殘留腫瘤細(xì)胞對后續(xù)放療、化療等措施的顯著抵抗性，最終導(dǎo)

致了腫瘤復(fù)發(fā)。前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，惡性膠質(zhì)瘤與周圍腦組織交界區(qū)有CD133+、

nestin+腫瘤細(xì)胞存在；膠質(zhì)瘤干細(xì)胞高表達(dá)反映遷移浸潤能力的蛋白；結(jié)合近

來提出的“遷移的腫瘤干細(xì)胞''的概念，我們推測：“向瘤周腦組織遷移的膠質(zhì)瘤

干細(xì)胞，可能是術(shù)后‘殘留灶’具有放療、化療抵抗性的重要原因，是惡性膠質(zhì)瘤

復(fù)發(fā)的根源本研究擬接種轉(zhuǎn)染熒光蛋白質(zhì)粒的惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞系于裸鼠腦內(nèi)

成瘤，體內(nèi)外觀察膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的空間分布、遷移、浸潤特性及機(jī)制，并探討惡

性膠質(zhì)瘤與腦組織交界區(qū)內(nèi)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞對化療、放療等治療方式的敏感性及分

子機(jī)制，研究結(jié)果可望為提高惡性膠質(zhì)瘤綜合治療的療效，提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

30700287腫瘤間質(zhì)細(xì)胞，特別是間質(zhì)成纖維細(xì)胞在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著

重要作用。它既是細(xì)胞外基質(zhì)的主要生產(chǎn)者，與腫瘤質(zhì)地的軟硬，包膜的形成有

關(guān);又能分泌多種細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)腫瘤內(nèi)血管的新生和免疫細(xì)胞的招募與激活等。

然而，由于成纖維細(xì)胞的多樣化，動(dòng)物模型的不完善，人們對各類成纖維細(xì)胞如

何影響腫瘤的生長，轉(zhuǎn)移與排斥了解甚少。FSP-TK轉(zhuǎn)基因小鼠的出現(xiàn)為成纖維

細(xì)胞的體內(nèi)研究提供了理想的動(dòng)物模型，通過注射化學(xué)藥物GCV可在腫瘤發(fā)生的

不同時(shí)期內(nèi)，特異地清除或抑制體內(nèi)或腫瘤中的成纖維細(xì)胞，進(jìn)而觀察腫瘤生長

的變化。本項(xiàng)目擬采用腫瘤細(xì)胞移植，化學(xué)物致癌等方法從以下3個(gè)方面開展研

究：1）成纖維細(xì)胞對腫瘤包膜形成和腫瘤轉(zhuǎn)移的影響與機(jī)制；2）腫瘤細(xì)胞與成

纖維細(xì)胞之間的相互作用和時(shí)間效應(yīng)；3）纖維化對化學(xué)物致癌過程的影響與機(jī)

制。揭示成纖維細(xì)胞及其產(chǎn)物在腫瘤發(fā)生和生長過程中的作用與機(jī)制，將為腫瘤

的診斷和治療提供新的理論依據(jù)。

30700794腫瘤微環(huán)境和腫瘤細(xì)胞之間是密不可分的功能整體。腫瘤微環(huán)境在癌

癥的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移中的作用日益受到重視，已經(jīng)成為探索預(yù)測腫瘤預(yù)后和防

治腫瘤的新熱點(diǎn)。腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（TAF）是腫瘤微環(huán)境內(nèi)最主要的非炎癥、

免疫細(xì)胞成分，在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移中均具有重要作用，但在肝癌方

面的研究還比較零星。我們擬在既往對肝癌微環(huán)境系列研究的基礎(chǔ)上，深入研究

TAF與肝癌侵襲、轉(zhuǎn)移潛能的關(guān)系；利用組織細(xì)胞原代培養(yǎng)法和我所擁有的轉(zhuǎn)移

潛能不同的肝癌細(xì)胞系，研究TAF與肝癌細(xì)胞之間的相互作用；利用信號傳導(dǎo)分

類基因芯片，篩選肝癌細(xì)胞與TAF相互作用的信號傳導(dǎo)通路，以探索肝癌細(xì)胞與

TAF相互作用的可能機(jī)制，為將來設(shè)計(jì)阻斷''肝癌細(xì)胞與TAF相互作用促進(jìn)肝癌

侵襲、轉(zhuǎn)移''的藥物提供新的靶點(diǎn)，為探索新的預(yù)防肝癌根治性切除術(shù)后復(fù)發(fā)、

轉(zhuǎn)移的方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

30771958共刺激分子B7-H3兩種異構(gòu)體的生物學(xué)特性及其在誘導(dǎo)Th細(xì)胞分化中

的作用和機(jī)制

T輔助淋巴細(xì)胞（Th）在免疫調(diào)節(jié)中居于中心環(huán)節(jié)。共刺激分子在Th細(xì)胞分化

過程中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。本項(xiàng)研究以共刺激分子B7-H3為切入點(diǎn)，圍繞

B7-H3有兩種異構(gòu)體（2IgB7-H3和41gB7-H3）及存在可溶性和膜型（2IgB7-H3

和4IgB7-H3-H3和mB7-H3）兩種表現(xiàn)形式，系統(tǒng)和動(dòng)態(tài)分析該分子在免疫細(xì)胞特

別是髓系DC上表達(dá)特性，進(jìn)而研究2IgB7-H3和4IgB7-H3兩種異構(gòu)體在誘導(dǎo)Th

細(xì)胞分化過程中的作用及其涉及的分子機(jī)理；同時(shí)，分析Thl/Th2免疫功能紊亂

性疾病患者體內(nèi)2IgB7-H3和4IgB7-H3的表達(dá)，比較觀察2IgB7-H3和4IgB7-H3

與IL-4、IL-10,ILT2、IFN-Y和ILT7等細(xì)胞因子的相關(guān)性，結(jié)合臨床病例

資料，探討分析2IgB7-H3和4IgB7-H3在Thl/Th2亞群變化以及免疫病理改變中

的機(jī)制和作用，為探討Thl/Th2失衡所導(dǎo)致的免疫應(yīng)答機(jī)制和免疫干預(yù)治療開拓

新的思路和途徑。

30771968B7-H1/B7-DC--PD-1共刺激信號途徑對抗腫瘤免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用

研究

共刺激信號途徑對免疫反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展具有關(guān)鍵性調(diào)節(jié)作用，新近鑒定的

B7-H1/B7-DC--PD-1共刺激信號途徑，在抗腫瘤免疫反應(yīng)中發(fā)揮多重調(diào)控作用。

人腫瘤組織高表達(dá)B7-H1被認(rèn)為是腫瘤的免疫逃逸機(jī)制之一，對腫瘤免疫耐受可

能具有重要作用，但是其對抗腫瘤免疫反應(yīng)的調(diào)控作用及其機(jī)制還不清楚。我們

在以前工作中獲得了不結(jié)合PD-1抑制性受體，而仍具有生物學(xué)功能的B7-H1、

B7-DC突變體，本課題利用能單向調(diào)控T細(xì)胞反應(yīng)的B7-H1和B7-DC突變體這一

有力工具，通過建立表達(dá)B7-H1、B7-DC及其突變體的腫瘤動(dòng)物模型，以及MCA

誘發(fā)的原發(fā)腫瘤模型，結(jié)合具有不同功能的抗B7-H1、B7-DC、PDT抗體，來研

究B7-H1、B7-DC共刺激信號對腫瘤免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用及其調(diào)控途徑，以期發(fā)

展出以定向調(diào)控B7-H1/B7-DC--PD-1共刺激信號途徑為基礎(chǔ)的腫瘤免疫治療新

途徑。

30771953特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞抗原提呈系統(tǒng)的研究及應(yīng)用

細(xì)胞毒T細(xì)胞是通過T細(xì)胞受體與抗原提呈細(xì)胞表面表達(dá)的嵌入異己多肽的主要

相容性復(fù)合物(MHC)之間的相互作用刺激增殖生成的。而嵌入多肽的主要組織

相容性復(fù)合物是由胞內(nèi)蛋白降解成短鏈后，由一種稱作抗原加工相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白

(TAP)運(yùn)至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)，并和MHC組裝而成。本項(xiàng)目旨在抑制TAP功能，阻斷內(nèi)

源性多肽的來源，抑制內(nèi)源性多肽MHC復(fù)合物生成。同時(shí)繞過TAP,直接給內(nèi)質(zhì)

網(wǎng)輸入外源性的多肽，和MHC組裝從而增強(qiáng)外源性的特異性抗原多肽-MHC在細(xì)

胞表面的表達(dá)，達(dá)到高效刺激特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞的產(chǎn)生，用于疫苗設(shè)計(jì)和免疫

治療的目的。

項(xiàng)目批準(zhǔn)號30471986學(xué)科代碼C03031906

項(xiàng)目名稱大腸癌發(fā)生和侵襲轉(zhuǎn)移過程中RON受體酪氨酸激酶激活機(jī)制的研究

申請書摘要檢測大腸原發(fā)腫瘤的不同階段中RON及其變異體的表達(dá)情況，闡明

RON及其變異體的表達(dá)與大腸腫瘤臨床病理分期之間的關(guān)系；建立以RON表達(dá)水

平為基礎(chǔ)的評價(jià)大腸癌浸潤、轉(zhuǎn)移能力的臨床檢測方法；建立在正常大腸細(xì)胞中

過度表達(dá)RON或其變異體的細(xì)胞系，用播散測定試驗(yàn)、移動(dòng)測定試驗(yàn)以及基質(zhì)浸

潤測定試驗(yàn)測定所建立細(xì)胞系的播散和浸潤能力；應(yīng)用RNAi技術(shù)，敲除RON表

達(dá)后檢測腫瘤細(xì)胞的生長、凋亡、集落形成及浸潤能力；

項(xiàng)目批準(zhǔn)號30771069學(xué)科代碼C0109

項(xiàng)目名稱受體酪氨酸激酶Tiel介導(dǎo)的信號途徑在淋巴管與血管網(wǎng)絡(luò)重塑與成

熟過程中的作用及機(jī)制

申請書摘要受體酪氨酸激酶Tiel在血管及淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞中都有表達(dá)，并參與

調(diào)節(jié)血管的完整性，但對其作用機(jī)制及在淋巴管形成中的作用還不清楚。本課題

將建立條件性基因敲除小鼠模型(Tielflox/flox)及淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)Cre

重組酶的轉(zhuǎn)基因小鼠(VEGFR3/CreERT2),以研究胚胎發(fā)育過程中淋巴管內(nèi)皮細(xì)

胞特異性敲除Tiel基因?qū)α馨凸苄纬傻挠绊憽Ｎ覀冞€將研究血管內(nèi)皮細(xì)胞特異

性敲除Tiel基因?qū)ρ苄纬傻挠绊懀约癟iel信號途徑在成鼠血管及淋巴管完

整性維持中的作用。利用分選的野生型及Tiel基因敲除的血管內(nèi)皮細(xì)胞及淋巴

管內(nèi)皮細(xì)胞，結(jié)合Microarray技術(shù)，我們將分析Tiel的下游信號通路、及Tiel

與Tie2之間是否存在協(xié)同或頡抗關(guān)系。此研究有助于闡述Tiel信號途徑在淋巴

管與血管重塑、成熟及完整性維持中的作用，為調(diào)控血管與淋巴管新生提供新的

靶點(diǎn)。

目批準(zhǔn)號30670643學(xué)科代碼C010601

項(xiàng)目名稱受體酪氨酸激酶表達(dá)缺陷在帕金森病發(fā)病中的作用及機(jī)制研究

申請書摘要帕金森病是臨床上最常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病之一，目前該病

的病因和發(fā)病機(jī)制不明。以往的研究表明，在環(huán)境和遺傳因素的共同作用下，氧

化應(yīng)激、線粒體功能缺陷、蛋白過量表達(dá)和聚集、炎癥和免疫異常以及神經(jīng)營養(yǎng)

因子缺乏等在黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元變性死亡中均參與了致病過程。，但究竟這些

因素是如何被介導(dǎo)以致引起上述變化并最終影響多巴胺神經(jīng)元的生存狀態(tài)仍不

清楚。本研究擬通過敲除小鼠TAM(Tyro3,Axl,me

30770718

項(xiàng)目名稱細(xì)胞因子在應(yīng)激所致抑郁行為中的作用

申請書摘要抑郁癥是目前危害人類健康的主要疾病,其發(fā)病率正迅速攀升，而抑

郁癥的發(fā)病機(jī)制至今不明。細(xì)胞因子假說是一較為前瞻、具有潛力的研究方向。

細(xì)胞因子是由免疫活性細(xì)胞分泌的信號分子，也能被神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞合

成和分泌。它不僅能協(xié)調(diào)免疫反應(yīng)，而且參與重要的生理心理反應(yīng)，并被認(rèn)為與

抑郁癥的發(fā)生有關(guān)。為系統(tǒng)地探討細(xì)胞因子與抑郁行為的關(guān)系，本項(xiàng)目提出了細(xì)

胞因子與慢性應(yīng)激交互作用的新思路，擬分別考察促炎性細(xì)胞因子、抗炎性細(xì)胞

因子、與應(yīng)激所致抑郁行為的關(guān)系。并比較抗抑郁藥物和抗炎性細(xì)胞因子對抑郁

的拮抗作用及與體內(nèi)細(xì)胞因子含量的關(guān)系。這一研究可能會在揭示抑郁障礙機(jī)制

上有新突破，并有望從心理神經(jīng)免疫學(xué)思路為抑郁癥的預(yù)防和治療提供新途徑。

項(xiàng)目名稱細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶在應(yīng)激所致抑郁行為中的作用

申請書摘要抑郁癥是目前危害人類健康的主要疾病。眾多的研究指出慢性應(yīng)激是

導(dǎo)致行為障礙特別是抑郁癥的重要因素，但應(yīng)激轉(zhuǎn)化為抑郁癥的腦機(jī)制存在很多

謎團(tuán)。近幾年來，研究熱點(diǎn)逐漸由腎上腺素能系統(tǒng)，5—羥色胺能系統(tǒng)等轉(zhuǎn)向腦

內(nèi)高度表達(dá)的蛋白質(zhì)及其信號傳遞通路。細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶

(Extracellularsignal-regulatedproteinkinase,ERK)通路是細(xì)胞內(nèi)功能

強(qiáng)大的信號通路，它參與了突觸可塑性機(jī)制及腦的高級認(rèn)知功能的調(diào)節(jié)，并可能

與抑郁行為有關(guān)。為系統(tǒng)地探討ERK與抑郁行為的關(guān)系，本項(xiàng)目擬采用多種不同

的抑郁模型(強(qiáng)迫游泳應(yīng)激模型、不確定性空瓶飲水模型和免疫抑郁模型)來考察

行為與ERK的關(guān)系，并通過抗抑郁藥物和ERK信號通路抑制劑的干預(yù)來驗(yàn)證ERK

與抑郁行為的關(guān)系。這一開創(chuàng)性工作可能會在揭示應(yīng)激性抑郁障礙機(jī)制上有所突

破，并為抗抑郁治療尋求新靶點(diǎn)。

30772668項(xiàng)目名稱眼視網(wǎng)膜靶向給藥系統(tǒng)及其藥物轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)理的研究

申請書摘要擬在證實(shí)和利用洋地黃首的視網(wǎng)膜趨向性基礎(chǔ)上，制備溫敏型殼聚糖

原位凝膠給藥系統(tǒng)，引導(dǎo)模型藥物進(jìn)入病變部位，解決藥物不經(jīng)注射到達(dá)眼內(nèi)部

以及靶向于視網(wǎng)膜釋藥兩大難題。通過對殼聚糖溫度敏感原位凝膠的制備工藝，

穩(wěn)定性影響因素，離體角膜透過規(guī)律，以及對眼視網(wǎng)膜靶向性和藥動(dòng)學(xué)過程，模

型藥物的類似藥物藥動(dòng)學(xué)藥效學(xué)等進(jìn)行系統(tǒng)研究，探討藥物進(jìn)入眼底視網(wǎng)膜的靶

向給藥機(jī)理和以原位凝膠為載體對藥物進(jìn)入眼底的促滲作用等藥物轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)理和

規(guī)律，考察具有眼視網(wǎng)膜定向性的洋地黃昔對模型藥物靶向視網(wǎng)膜黃斑的導(dǎo)向作

用。首次提出了無創(chuàng)條件下跨角膜和血視網(wǎng)膜屏障的視網(wǎng)膜靶向給藥，是對眼后

段靶向給藥系統(tǒng)設(shè)計(jì)有益的嘗試和新的突破，為豐富和完善中醫(yī)藥''引經(jīng)”理論提

供參考和借鑒,有重要的科學(xué)意義；同時(shí)為視網(wǎng)膜疾病治療提供新技術(shù)和新制劑,

其成果可用于指導(dǎo)進(jìn)一步開發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的以洋地黃首視網(wǎng)膜趨向性為

導(dǎo)向的眼靶向制劑，有良好的應(yīng)用前景。

30701060項(xiàng)目名稱防御素介導(dǎo)的生物黏附脂質(zhì)體用于非損傷性眼內(nèi)遞藥研究

申請書摘要液體型眼用制劑使用方便舒適，但生物利用度低，藥物不易到達(dá)眼內(nèi)

的靶部位，而新一代生物黏附材料植物凝集素對眼組織具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性。針

對上述問題，本課題首次提出將防御素的凝集素樣作用應(yīng)用于藥物傳遞，設(shè)計(jì)一

種即安全舒適又能夠有效定位于結(jié)膜囊內(nèi)釋藥的新型生物黏附脂質(zhì)體，利用修飾

在脂質(zhì)體表面的防御素與黏膜黏蛋白以及細(xì)胞膜糖蛋白與糖脂間的特異性結(jié)合，

將脂質(zhì)體錨定于眼組織表面，使其作為藥物貯庫在結(jié)膜囊內(nèi)緩慢釋放，為藥物吸

收入眼提供持久的驅(qū)動(dòng)力。借助生物黏附脂質(zhì)體延緩消除和生物融合的雙重作用

提高模型藥物5-Fu的眼部生物利用度，為青光眼濾過術(shù)后的瘢痕化提供-?種非

損傷性的防治方法，同時(shí)也對防御素的體內(nèi)應(yīng)用進(jìn)行有益探索和嘗試。

30500638項(xiàng)目名稱陽離子脂質(zhì)體眼部傳遞系統(tǒng)及作用機(jī)制的研究

申請書摘要陽離子脂質(zhì)體表面荷正電，與角膜表面荷帶的負(fù)電產(chǎn)生靜電作用，將

具有抗白內(nèi)障活性的硫醇衍生物或沙星類藥物包裹于陽離子脂質(zhì)體，可提高藥物

的溶解度和角膜透過性、增加制劑與角膜表面的相互作用，延長制劑角膜前滯留

時(shí)間。本課題首次將細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)用于該類藥物制劑作用機(jī)制的研究，以培

養(yǎng)的角膜上皮和晶體上皮細(xì)胞為工具，研究硫醇衍生物對晶體上皮細(xì)胞中iNOS

的誘導(dǎo)表達(dá)的作用機(jī)制；使用培養(yǎng)的單層角膜上皮細(xì)胞模型對硫醇衍生物或沙星

類藥物脂質(zhì)體與生物膜的相互作用以及透過生物膜的轉(zhuǎn)化機(jī)制進(jìn)行研究；試圖解

釋硫醇衍生物是否作為前體藥物，經(jīng)生物轉(zhuǎn)化為共同的生物活性物質(zhì)而發(fā)揮作

用，同時(shí)研究上皮細(xì)胞對藥物和含藥脂質(zhì)體的攝取過程。通過本課題的實(shí)施，為

細(xì)胞生物學(xué)理論和研究方法在藥劑學(xué)研究中的應(yīng)用做有益探索，為建立制劑評價(jià)

的細(xì)胞模型奠定一定基礎(chǔ)，通過相關(guān)學(xué)科知識的交叉運(yùn)用促進(jìn)藥劑學(xué)的發(fā)展，推

動(dòng)新藥開發(fā)和藥物作用機(jī)理的研究。

20775083基于HPLC技術(shù)的代謝組學(xué)方法篩選中藥青龍衣抗癌活性物質(zhì)

申請書摘要以青龍衣活性部位(AE)為研究對象，以HPLC-DAD-MS為技術(shù)平臺，采

用代謝組學(xué)(metabonomics)的研究方法，通過對生物樣品(如尿液、血清和組

織)代謝物的分析，對應(yīng)于體內(nèi)抗腫瘤動(dòng)物模型的藥理學(xué)檢測指標(biāo)，從代謝物中

篩選與抗癌活性有相關(guān)性的代謝物靶標(biāo)(metabolitetarget)和代謝輪廓

(metabolicprofiIng)0以代謝物靶標(biāo)分析和代謝輪廓分析為指導(dǎo)，開展中藥青

龍衣抗癌活性物質(zhì)的追蹤、篩選，研究青龍衣中具有抗癌活性的有效成分(群)

及作用機(jī)理,解決目前中藥青龍衣及其制劑中抗癌作用的物質(zhì)基礎(chǔ)不明確，作用

機(jī)理不清楚的問題,為進(jìn)一步開發(fā)以青龍衣為原料的抗癌新藥奠定理論基礎(chǔ)。本

項(xiàng)目利用代謝組學(xué)的研究思路和研究方法，建立了從中藥復(fù)雜的'‘黑色"或"灰色"

多組分體系中篩選抗癌活性物質(zhì)新模式。

30701104基于代謝組學(xué)的千里光和歐洲千里光中毗咯里西喘生物堿的毒性比較

研究

申請書摘要口比咯里西喘生物堿(pyrrolizidinealkaloids,PAs)廣泛分布于千

里光等多種草藥中，因服用含PAs的草藥或制品如歐洲千里光Seneci。vulgaris

導(dǎo)致中毒的事件在許多國家均有報(bào)道。國內(nèi)使用的千里光藥材的主要來源為千里

光S.scandens,到目前尚未見中毒報(bào)道。我們在前期研究中，對歐洲千里光和

千里光進(jìn)行化學(xué)和毒性比較，發(fā)現(xiàn)前者含有毒性較強(qiáng)的千里光堿(senecionine),

后者不含千里光堿，而含有另一種生物堿adonifoline,毒性較弱。本課題擬采

用化學(xué)及代謝組學(xué)結(jié)合的方法對歐洲千里光和千里光的肝毒性進(jìn)行比較研究，分

析兩種千里光的所含生物堿的結(jié)構(gòu)、含量和毒性的差異，從內(nèi)嫄性代謝物中尋找

與PAs毒性相關(guān)的生物標(biāo)識物,揭示PAs致毒的科學(xué)本質(zhì),并結(jié)合生物效應(yīng)研究,

建立PAs毒性檢測方法及含PAs中草藥的安全性評價(jià)方法，為中草藥的安全用藥

研究提供思路和方法。

60773164基于模式識別的青蒿代謝組學(xué)研究

申請書摘要青蒿素是從青蒿中分離到的目前最有效的抗瘧疾藥物，然而青蒿中的

青蒿素含量極低，嚴(yán)重限制了青蒿素的大范圍應(yīng)用。因此，如何提高青蒿素的含

量是國內(nèi)外研究人員關(guān)注的熱點(diǎn)。本研究旨在利用先進(jìn)的模式識別和機(jī)器學(xué)習(xí)技

術(shù)，研究青蒿素的生物合成與青蒿菇類代謝之間的定性和定量關(guān)系，探明主要影

響因子，并建立相關(guān)的數(shù)學(xué)模型，為進(jìn)一步利用代謝工程調(diào)控青蒿素的生物合成

奠定基礎(chǔ)。研究內(nèi)容包括：1)通過轉(zhuǎn)基因等手段對青蒿進(jìn)行代謝擾動(dòng)，改變青

蒿中的菇類化合物，建立菇類代謝存在明顯差異的青蒿菇類代謝組研究體系；2)

建立青蒿菇類代謝組數(shù)據(jù)庫；3)運(yùn)用現(xiàn)代模式識別和機(jī)器學(xué)習(xí)技術(shù)，對檢測到

的代謝組進(jìn)行生物信息學(xué)分析，研究青蒿中主要砧類化合物合成途徑的相互關(guān)

系，分析青蒿素含量不同的青蒿間菇類代謝組的差異，解析差異原因，探明影響

青蒿素生物合成的主要因素，建立青蒿素含量與青蒿菇類代謝之間的定量關(guān)系，

為青蒿素生物合成的分子調(diào)控提供理論基礎(chǔ)。

30772789基于代謝網(wǎng)絡(luò)變化的復(fù)方丹參滴丸整體療效評價(jià)方法的研究

申請書摘要針對中藥復(fù)方療效整體評價(jià)方法研究的難題，在已完成國家自然科學(xué)

基金項(xiàng)目復(fù)方丹參制劑體外釋放多組分樣品和體內(nèi)血清多組分樣品對鈣離子通

道單靶點(diǎn)作用評價(jià)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步提高研究層面，從代謝網(wǎng)絡(luò)角度深入研究，

選擇名優(yōu)產(chǎn)品“復(fù)方丹參滴丸”為樣本，從''心肌缺血”模型大鼠以及冠心病心絞痛

患者兩個(gè)層面入手，采用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析血清，運(yùn)用生物模式識別與數(shù)

據(jù)挖掘等多種生物信息處理技術(shù)，研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人血清內(nèi)源性代謝物整體組成

及動(dòng)態(tài)變化，整體辨識和解析治療過程中生理病理狀態(tài)的變化，發(fā)掘代謝物〃組”

的變化規(guī)律，嘗試對復(fù)方丹參滴丸整體療效進(jìn)行動(dòng)態(tài)評價(jià)，建立治療冠心病心絞

痛中藥復(fù)方療效評價(jià)的新方法。

30700884Profilin-1在原發(fā)性高血壓血管重塑中的作用及機(jī)制研究

申請書摘要血管重塑(VR)是高血壓患者致殘致死的最主要因素，研究作用于

VR通路的靶分子對于干預(yù)VR具有重大意義。本課題組通過前期研究發(fā)現(xiàn)

profilin-1在VR中發(fā)揮了重要作用，目前國際上尚無類似報(bào)道。本項(xiàng)目擬體外

培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞，測定VR相關(guān)因素刺激前后細(xì)胞profilin-1與PKC、NOS、

NO和ET-1表達(dá)改變以及胞內(nèi)Ca2+的動(dòng)態(tài)變化之間的關(guān)系，明確profilin-1作

用的分子機(jī)制；應(yīng)用profilinTsiRNA和鈣通道阻滯劑干預(yù)培養(yǎng)體系，闡明

profilin-1在VR中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路；建立原發(fā)性高血壓大鼠VR模型，評價(jià)VR

性質(zhì)，測定組織profilinT含量；應(yīng)用RNA干擾抑制profilinT表達(dá)，分析干

預(yù)前后VR的變化，確定profilin-1在VR中的關(guān)鍵作用。本課題旨在深入研究

profilin-1在VR中的作用及機(jī)制，為開辟新的VR防治途徑奠定理論基礎(chǔ)。

30670832,脂聯(lián)素受體在血管外膜成纖維細(xì)胞的表達(dá)及功能研究

申請書摘要血管外膜及其周圍脂肪組織在血管重塑中起重要作用o最近研究發(fā)現(xiàn)

外膜成纖維細(xì)胞與其緊鄰脂肪細(xì)胞分泌許多生長因子和脂肪因子參與血管功能

調(diào)節(jié)，但目前報(bào)道的脂肪因子均通過血管內(nèi)皮細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞相應(yīng)受體發(fā)揮作

用。我們假設(shè)脂肪因子也可能作用于血管外膜成纖維細(xì)胞，于是用脂肪細(xì)胞條件

培養(yǎng)液誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞發(fā)現(xiàn)后者遷移活性增強(qiáng)，且這一作用可被外源性脂聯(lián)素預(yù)

處理所干預(yù)，提示成纖維細(xì)胞可能存在脂聯(lián)素受體。進(jìn)?步檢測發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞

表達(dá)脂聯(lián)素受體(AdioRl,R2),外源性脂聯(lián)素可以抑制血管緊張素H誘導(dǎo)的

成纖維細(xì)胞遷移，提示二者作用的信號通路之間有串話(cross-talk)o但脂聯(lián)

素在成纖維細(xì)胞是否還有其他功能，以及體內(nèi)是否存在血管外膜局部脂聯(lián)素/脂

聯(lián)素受體作用尚不清楚。本項(xiàng)目旨在研究：1)脂聯(lián)素在成纖維細(xì)胞的生物學(xué)功

能；2)脂聯(lián)素受體介導(dǎo)的外膜AMPK信號通路及；3)脂聯(lián)素經(jīng)外膜參與血管保

護(hù)的細(xì)胞分子機(jī)制。

30600238,內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量減少及功能失調(diào)與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生關(guān)系的研究

申請書摘要?jiǎng)用}內(nèi)皮損傷是動(dòng)脈粥樣硬化的始動(dòng)因素，內(nèi)皮損傷后能夠再生。研

究表明內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPC)可以促進(jìn)內(nèi)皮再生，對維持內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和功能的完整性

具有重要作用，。目前國內(nèi)外對.EPC的研究主要在EPC的分離、培養(yǎng)及生物學(xué)觀

察等方面，對EPC數(shù)量及功能調(diào)節(jié)與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的關(guān)系和其機(jī)制方面

研究甚少。本研究的目的是建立EPC數(shù)量減少及功能缺損的動(dòng)物模型；闡明EPC

數(shù)量減少及功能失調(diào)與發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，同時(shí)明確eNOS基因與EPC功能的關(guān)系。

研究EPC數(shù)量和功能失調(diào)與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的關(guān)系，不僅為動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)

病機(jī)制提供新的理論基礎(chǔ)，也為進(jìn)一步防治動(dòng)脈粥樣硬化提供新的思路、開拓新

途徑。

30670836,A20干預(yù)動(dòng)脈粥樣硬化炎癥機(jī)制的研究

申請書摘要?jiǎng)用}粥樣硬化是一種慢性炎癥過程，感染、氧化低密度脂蛋白

(ox-LDL)、血管緊張素II(Angll)等使NF-KB等核轉(zhuǎn)錄因子過度活化觸發(fā)炎

癥反應(yīng)而參與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展。介導(dǎo)炎癥和先天免疫反應(yīng)的受體Toll樣

受體4(TLR4)存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和單核細(xì)胞等，TLR4/NF-KB

信號通路在動(dòng)脈粥樣硬化炎癥機(jī)制中可能起重要作用。鋅指蛋白A20是一種泛

素調(diào)節(jié)酶，通過泛素化和去泛素化調(diào)節(jié)TLR4/NF-KB信號。本研究從離體和在體

兩方面，應(yīng)用離體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、單核細(xì)胞及動(dòng)脈段培養(yǎng)和在體動(dòng)脈粥

樣硬化動(dòng)物模型，通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染增強(qiáng)或干擾抑制A20表達(dá)等分子生物學(xué)手段，觀

察A20在血管炎癥損傷反應(yīng)過程中的表達(dá)規(guī)律，探討A20對TLR4/NF-kB信號通

路的調(diào)節(jié)作用和對動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的影響，為直接控制炎癥機(jī)制治療動(dòng)脈

粥樣硬化提供理論和實(shí)踐依據(jù)。

30730043血液血管干細(xì)胞的微環(huán)境調(diào)控

申請書摘要血液血管干細(xì)胞(hemangioblast,簡稱HA)代表一群具有造血和血

管雙向分化潛能的前體。關(guān)于胚胎造血時(shí)期HA的微環(huán)境調(diào)控的認(rèn)識甚少。ES細(xì)

胞分化產(chǎn)生的BL-CFC代表原始造血來源的HA,我們新建立的HPP-HA則揭示AGM

區(qū)存在永久造血相關(guān)的HAo本研究擬優(yōu)化AGM區(qū)BL-CFC和HPP-HA兩個(gè)單克隆

源性模型，分離AGM區(qū)中胚層血管母細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，利用體外

組織塊培養(yǎng)比較它們對HA發(fā)育和分化的影響。繼而，通過內(nèi)皮細(xì)胞特異性缺失

Pten的條件基因敲除小鼠闡明其胚胎血管缺陷是否和HA發(fā)育異常相關(guān)，以及突

變內(nèi)皮細(xì)胞對HA形成的影響和分子調(diào)控機(jī)制。第三,考察小鼠胚胎干細(xì)胞與AGM

區(qū)微環(huán)境共培養(yǎng)或囊胚移植能否誘導(dǎo)產(chǎn)生永久造血特異性的HAoHA的微環(huán)境調(diào)

控是造血發(fā)育的一個(gè)嶄新、活躍的研究方向，上述研究思路和結(jié)論具有顯著的基

礎(chǔ)科學(xué)意義和應(yīng)用價(jià)值。

30771555Pea3、ER81在小鼠精原干細(xì)胞微環(huán)境(niche)中的表達(dá)及其對干細(xì)胞

行為的調(diào)控

申請書摘要精原干細(xì)胞(SSCs)是成體內(nèi)唯一終生增殖分化并向子代傳遞基因的

干細(xì)胞，條件適宜時(shí)能多向分化。但其增殖分化的調(diào)控機(jī)制仍不清楚，這是SSCs

及其它干細(xì)胞生物學(xué)研究急需解決的問題。干細(xì)胞行為的調(diào)控與其內(nèi)在因素及外

在微環(huán)境(niche)密切相關(guān)。已知小鼠SSCs微環(huán)境的主要組分支持細(xì)胞專一表達(dá)

Ets相關(guān)分子(ERM),ERM-/-鼠的生精細(xì)胞最終耗竭而僅存支持細(xì)胞，提示微環(huán)

境對SSCs行為的調(diào)控有賴于ERM的表達(dá)。Ets家族廣泛參與多種細(xì)胞的發(fā)育分

化。Pea3、ER81與ERM同屬一個(gè)亞家族，同源性295%,功能相近，表達(dá)部位廣

泛。二者是否為SSCs微環(huán)境的組分，與其行為有何關(guān)聯(lián)尚不清楚。故假設(shè)Pea3、

ER81也是SSCs微環(huán)境的組分并參與SSCs行為的調(diào)控。基于已建立的轉(zhuǎn)基因ST0

飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系，擬用原位雜交、Real-timePCR等手段驗(yàn)證該假設(shè)，為闡明SSCs

行為的調(diào)控機(jī)制提供依據(jù)。

30770921PDGF信號介導(dǎo)的血液血管干細(xì)胞發(fā)育調(diào)控

申請書摘要血液血管干細(xì)胞(hemangioblast,簡稱HA)代表造血和血管譜系的

共同前體。胚胎干細(xì)胞來源的BL-CFC為模擬原始卵黃囊造血的HA,而我們新建

的HPP-HA則是首次在胚胎AGM區(qū)發(fā)現(xiàn)的單克隆化HA模型(永久造血)。PDGF

(platelet-derivedgrowthfactor)能招募血管平滑肌和周細(xì)胞促進(jìn)血管成熟；

通過間質(zhì)細(xì)胞刺激骨髓造血，但抑制卵黃囊造血。迄今，PDGF是否在HA水平直

接發(fā)揮調(diào)節(jié)作用并不清楚。本研究擬采用經(jīng)典的BL-CFC和HPP-HA模型，在單克

隆嫄性的HA水平探討原始和永久造血過程中：1、PDGFRB是否是HA的特異性

標(biāo)記；2、PDGF-BB和PDGFRB信號活化和阻斷是否影響其發(fā)育和雙向潛能；3、

PDGF-BB/PDGFRP是否可通過間充質(zhì)干細(xì)胞調(diào)節(jié)HA發(fā)育。本研究思想創(chuàng)新，實(shí)

驗(yàn)體系先進(jìn)合理，技術(shù)保障充分，能完成PDGF信號參與HA調(diào)節(jié)的科學(xué)論證。

30700403BMP信號通路在多潛能干細(xì)胞向前脂肪細(xì)胞定向命運(yùn)決定中的作用機(jī)

制研究

申請書摘要脂肪細(xì)胞發(fā)育分化與肥胖、骨質(zhì)疏松等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。研究脂

肪細(xì)胞分化分子機(jī)理具有重要意義。脂肪細(xì)胞的發(fā)育階段分為：多潛能干細(xì)胞定

向?yàn)榍爸炯?xì)胞階段；前脂肪細(xì)胞的增殖階段和生長抑制階段；前脂肪細(xì)胞分化

為脂肪細(xì)胞階段。目前多潛能干細(xì)胞定向?yàn)榍爸炯?xì)胞分子機(jī)制還不清楚。我們

建立了多潛能干細(xì)胞定向形成前脂肪細(xì)胞的模型，并發(fā)現(xiàn)：①結(jié)構(gòu)和功能相似的

BMP-2和BMP-4濃度依賴的使多潛能干細(xì)胞定向?yàn)榍爸炯?xì)胞,②通過TGFB/BMP

信號通路基因芯片分析,確定了BMP-2和BMP-4作用的共同靶基因。希望進(jìn)一步

研究確定：BMP-2和BMP-4作用的①共同信號通路，和②共同靶基因中哪些對多

潛能干細(xì)胞向前脂肪細(xì)胞定向命運(yùn)決定中起重要作用。最終確定促進(jìn)多潛能干細(xì)

胞定向?yàn)榍爸炯?xì)胞的信號通路和特定基因。通過本課題的研究可為多潛能干細(xì)

胞定向?yàn)榍爸炯?xì)胞的分子機(jī)理和脂肪細(xì)胞發(fā)育分化相關(guān)疾病的防治提供新的

理論基礎(chǔ)。

30730080原發(fā)性肺癌遺傳易感性的分子流行病學(xué)研究

申請書摘要以課題組近年來在國家自然科學(xué)基金資助下所取得的肺癌分子流行

病學(xué)研究成果為理論和技術(shù)基礎(chǔ)，借助人類基因組單體型圖譜(HapMap)數(shù)據(jù)庫

和高通量基因多態(tài)性(SNPs)檢測技術(shù)和其它先進(jìn)的分子生物學(xué)方法，創(chuàng)新性地

采用大樣本兩階段病例-對照研究設(shè)計(jì)，第一階段在人群中篩選外源性代謝、DNA

修復(fù)、凋亡以及激素代謝等生物學(xué)通路上多個(gè)基因的功能性SNPs和標(biāo)簽SNPs,

分析其與肺癌遺傳易感性的關(guān)系，并在第二階段病例對照人群中加以驗(yàn)證；在此

基礎(chǔ)上探討相關(guān)的基因一基因和基因-環(huán)境在肺癌發(fā)生中的交互作用，并驗(yàn)證各

通路聯(lián)合基因型與表型(如DNA修復(fù)能力及凋亡能力等)的相互關(guān)系及其在肺癌

發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)中的作用，進(jìn)行相關(guān)的生物學(xué)功能研究，探索多基因多因素預(yù)測表型及

肺癌風(fēng)險(xiǎn)模型的統(tǒng)計(jì)分析方法。研究成果有望用于篩選肺癌高危人群或易感個(gè)

體，對深入闡釋肺癌發(fā)生發(fā)展的內(nèi)在機(jī)制和遺傳易感性有重要學(xué)術(shù)價(jià)值。

30771184高血壓糖代謝異常的遺傳標(biāo)志和風(fēng)險(xiǎn)因素前瞻性研究

申請書摘要高血壓患者常發(fā)生糖代謝異常，導(dǎo)致心血管并發(fā)癥和死亡率明顯增

高。因此，高血壓糖代謝異常的遺傳標(biāo)志和風(fēng)險(xiǎn)因素研究，對于早期檢出高風(fēng)險(xiǎn)

易感患者及預(yù)防糖尿病發(fā)生具有重要意義。脂聯(lián)素與代謝綜合征及其各個(gè)成分的

發(fā)病有密切關(guān)系，但它是否參與高血壓糖代謝異常的發(fā)生未見報(bào)道。本項(xiàng)目在前

期研究基礎(chǔ)上，開展高血壓隊(duì)列人群的前瞻性研究，通過約3年的隨訪，觀察脂

聯(lián)素基因變異、其它相關(guān)基因-脂聯(lián)素基因、基因-危險(xiǎn)因素相互影響，在糖耐量

正常高血壓患者進(jìn)展為糖代謝異常中的作用；并探討脂聯(lián)素基因-血清脂聯(lián)素

-糖代謝障礙之間的關(guān)系。

30771578表達(dá)纖維素酶玉米青貯用乳酸菌工程菌的構(gòu)建

申請書摘要項(xiàng)目研究內(nèi)容主要包括：采用微生物學(xué)、分子生物學(xué)和酶學(xué)相結(jié)合的

方法，將克隆出的纖維素酶基因轉(zhuǎn)入從天然優(yōu)質(zhì)的玉米青貯中優(yōu)化出的玉米青貯

專用乳酸菌中；首先構(gòu)建出能表達(dá)纖維素酶青貯用乳酸菌工程菌株；同時(shí)進(jìn)行重

組體篩選、DNA序列分析及表達(dá)酶活測定；系統(tǒng)地研究表達(dá)纖維素酶乳酸菌工程

菌質(zhì)粒穩(wěn)定性。本項(xiàng)目的意義在于改善青貯品質(zhì)，提高纖維素降解率，避免纖維

素酶使用過程中失活，降低飼料成本，為奶牛場養(yǎng)殖帶來更大的經(jīng)濟(jì)效益。另外,

對合理地利用自然資源、改善農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境和提高生態(tài)效益具有重要意義。

30771530南方主要栽培牧草青貯發(fā)酵特性及早期調(diào)控機(jī)理研究

申請書摘要深入細(xì)致地研究南方主要栽培牧草青貯過程中生物化學(xué)及微生物學(xué)

動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，以暖季型牧草為研究對象與冷季型牧草作比較，研究它們青貯前

及青貯過程中碳水化合物，蛋白質(zhì)的動(dòng)態(tài)代謝及微生物的變化規(guī)律，分析它們發(fā)

酵途徑和發(fā)酵品質(zhì)的差異及影響其發(fā)酵品質(zhì)的要因，并利用多種類型的添加劑對

發(fā)酵進(jìn)行早期調(diào)控，篩選出最佳添加比例及組合，進(jìn)一步對最佳添加比例和組合

在發(fā)酵過程中的作用機(jī)理進(jìn)行探討及解釋，確立提高兩種類型牧草發(fā)酵品質(zhì)的措

施。同時(shí)根據(jù)研究成果進(jìn)一步從輕工業(yè)，農(nóng)副產(chǎn)品中挖掘與添加劑具有相似功能

的天然物質(zhì)，直接進(jìn)行添加青貯驗(yàn)證，探討其應(yīng)用前景及作用機(jī)理，開辟安全可

靠，價(jià)格低廉，新的天然添加劑材.料，為南方地區(qū)生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)青貯飼料開辟更為廣

闊的途徑，促進(jìn)南方奶牛業(yè)的發(fā)展。

30760313中藥復(fù)方生物粘附型脈沖給藥系統(tǒng)的研究

申請書摘要〃擇時(shí)給藥〃是中醫(yī)辨證用藥特色，限于當(dāng)時(shí)的科技水平，只能根據(jù)

疾病節(jié)律性特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)姆帟r(shí)間，沒有在劑型方面進(jìn)行深入研究，嚴(yán)重影

響了〃擇時(shí)給藥”的優(yōu)勢發(fā)揮。脈沖給藥系統(tǒng)主要是根據(jù)時(shí)辰藥理學(xué)和時(shí)辰藥代動(dòng)

力學(xué)原理，定時(shí)或定位釋放藥物的新型給藥系統(tǒng)，用于治療節(jié)律性明顯的疾病具

有獨(dú)特優(yōu)勢。目前，脈沖制劑在胃腸道的轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間是實(shí)現(xiàn)脈沖〃時(shí)滯〃的主要障礙。

課題組利用生物粘附和衣膜破裂的原理，建立生物粘附型脈沖釋藥系統(tǒng)，以復(fù)方

丹參片為模型藥物，研究生物粘附技術(shù)延長制劑在胃腸滯留時(shí)間和衣膜破裂控制

藥物釋放的處方因素和工藝因素的影響規(guī)律，建立合理的體內(nèi)外評價(jià)方法，闡明

制劑的體內(nèi)外釋藥行為，為研究開發(fā)中藥脈沖制劑提供理論依據(jù)。中藥復(fù)方生物

粘附型脈沖給藥系統(tǒng)有利于拓寬時(shí)滯設(shè)計(jì)范圍，增加時(shí)滯重現(xiàn)性，提高生物利用

度，有利于充分發(fā)揮中醫(yī)“擇時(shí)給藥〃優(yōu)勢，提高中藥療效，提高脈沖制劑的實(shí)際

應(yīng)用價(jià)值，具有很好的應(yīng)用前景。

30772791中藥藥動(dòng)學(xué)中的微透析與穩(wěn)定同位素標(biāo)記聯(lián)用技術(shù)研究

申請書摘要本課題以青藤堿為模型藥物，將國際上先進(jìn)的微透析取樣技術(shù)引入到

中藥的整體和局部藥動(dòng)學(xué)研究中，并利用青藤堿的穩(wěn)定同位素標(biāo)記物作為微透析

取樣研究的內(nèi)標(biāo)物，實(shí)現(xiàn)對體內(nèi)局部藥物濃度的準(zhǔn)確、實(shí)時(shí)的監(jiān)測。課題將進(jìn)行

探針回收率體內(nèi)外研究、青藤堿體內(nèi)過程及分布研究、生物利用度及生物有效性

研究、PK-PD模型研究等研究內(nèi)容，通過系統(tǒng)、全面的研究，建立基于微透析與

穩(wěn)定同位素標(biāo)記聯(lián)用技術(shù)的中藥的整體和局部藥動(dòng)學(xué)研究方法，為藥理學(xué)、藥物

動(dòng)力學(xué)等相關(guān)學(xué)科的研究建立不干撓正常生命過程的在體、實(shí)時(shí)和在線取樣研究

平臺。由于穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)的引入，使得本課題的研究結(jié)果，意義不僅僅在

中藥藥動(dòng)學(xué)研究本身，而且對于國際上藥學(xué)領(lǐng)域的微透析相關(guān)研究，也有巨大的

推動(dòng)意義，并將使中藥藥動(dòng)學(xué)的研究水平，躋身于世界前沿！

30772793神經(jīng)毒素納米粒鼻腔給藥的腦藥動(dòng)一藥效學(xué)研究

申請書摘要本項(xiàng)目在國家自然科學(xué)基金〃神經(jīng)毒素鼻腔吸收的腦藥物動(dòng)力學(xué)研究

”(30371781)基礎(chǔ)上，創(chuàng)新地采用小鼠微透析技術(shù)同步研究神經(jīng)毒素納米粒

（NT-NP）鼻腔給藥的腦PK-PD（B/PK-PD）行為。乳化聚合法分別制備不同表面

修飾（聚山梨酯80或MePEG）和粒徑大小的NT-NP,小鼠鼻腔給藥后將鎮(zhèn)痛靶部

位中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)（PAG）透析液中的NT作為PK指標(biāo)，同步進(jìn)行小鼠熱板

法鎮(zhèn)痛藥效實(shí)驗(yàn)，以痛閾提高百分率為PD指標(biāo)。與此平行，收集PAG透析液中

的NT作為PK指標(biāo)，透析液中的GABA和GLU作為PD指標(biāo)。WinNonlin4.1軟件

擬合兩組PK-PD模型，繪制藥物濃度及其效應(yīng)經(jīng)時(shí)曲線，建立方程并求出相關(guān)參

數(shù)。本項(xiàng)目研究可為正確評價(jià)制劑質(zhì)量，優(yōu)化工藝，指導(dǎo)臨床合理用藥提供科學(xué)

依據(jù)，同時(shí)可為多肽和蛋白質(zhì)類藥物鼻腔給藥系統(tǒng)的開發(fā)提供重要的理論和實(shí)踐

參考。

30701111復(fù)合磷脂脂質(zhì)體作為中藥抗腫瘤有效部位馬錢子總生物堿載體的研究

申請書摘要脂質(zhì)體用作為抗腫瘤藥物載體可以顯著增強(qiáng)療效降低毒性，但由于載

藥量有限，脂質(zhì)體大多只能包裹中藥有效單體成分，不利于中藥治療腫瘤多成分

多靶點(diǎn)共同起效優(yōu)勢的發(fā)揮。本課題在前期研究的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)采用復(fù)合磷脂脂

質(zhì)體技術(shù)大幅度提高抗腫瘤作用確切的馬錢子生物堿的載藥量，實(shí)現(xiàn)對整個(gè)總生

物堿有效部位的包裹，并對復(fù)合磷脂脂質(zhì)體提高載藥量的機(jī)制、規(guī)律、影響因素

進(jìn)行深入系統(tǒng)的考察，對復(fù)合磷脂脂質(zhì)體與普通單一磷脂脂質(zhì)體抗腫瘤作用的特

點(diǎn)及體內(nèi)性質(zhì)進(jìn)行系統(tǒng)比較，力求研制出既能提高載藥量又能增強(qiáng)抗腫瘤效果的

復(fù)合磷脂脂質(zhì)體制劑技術(shù)，該技術(shù)將能夠解決中藥生物堿類抗腫瘤有效部位的載

藥問題。

30772790酶促甘草次酸磷脂化修飾脂質(zhì)體及肝靶向定位給藥體系研究

申請書摘要首次利用酶催化甘草次酸（GA）中的竣基與磷脂酰膽堿脂質(zhì)表面的磷

脂羥基經(jīng)過酶促發(fā)生磷脂化反應(yīng)而形成甘草次酸修飾的受體脂質(zhì)體的設(shè)計(jì)理論，

通過酶催化研究和凝膠分子篩分離、再接載腫瘤藥物形成受體脂質(zhì)體靶向給藥體

系。肝癌細(xì)胞比正常細(xì)胞含有濃度較高的磷酸酯酶及選擇性與GA結(jié)合的親環(huán)素

A殘基，是甘草次酸磷酯化受體脂質(zhì)體的特異性結(jié)合部位，而能夠介導(dǎo)藥物在肝

靶向親和定位，降低體內(nèi)藥物表觀容積，因而降低藥物對正常細(xì)胞的殺傷力。酶

促催化形成甘草次酸磷脂化受體脂質(zhì)體具有高度結(jié)合率、反應(yīng)專一、反應(yīng)條件溫

和，綠色環(huán)保。國內(nèi)尚無此報(bào)導(dǎo)，目前國內(nèi)僅有極少普通滲入法制備初步研究，

極不穩(wěn)定，滲入低，靶向性差。本研究內(nèi)容包括酶促法修飾形成的甘草次酸受體

脂質(zhì)體的設(shè)計(jì)及制備機(jī)理、技術(shù)關(guān)鍵、分離純化、體內(nèi)分布吸收及定位靶向藥效

量效關(guān)系，同時(shí)闡明甘草次酸介導(dǎo)脂質(zhì)體靶向和增效的協(xié)同作用。本研究將填補(bǔ)

酶促受體脂質(zhì)體研究領(lǐng)域上一項(xiàng)創(chuàng)新研究空白

30772792中藥復(fù)方多組分配伍體內(nèi)協(xié)同吸收機(jī)理研究

申請書摘要中藥復(fù)方組成藥物及其組分在體內(nèi)的相互作用對活性成分的轉(zhuǎn)化、吸

收、轉(zhuǎn)運(yùn)、分布、代謝、解毒等各個(gè)環(huán)節(jié)都有影響。口服藥物吸收是關(guān)鍵，只有

被吸收的成分才可能發(fā)揮其生物效應(yīng)。已有研究表明，單體化合物與含有此化合

物的復(fù)方給藥，其體內(nèi)吸收有明顯差異。據(jù)此，提出''藥輔共生假設(shè)和中藥復(fù)方

藥物體內(nèi)的多組分協(xié)同吸收轉(zhuǎn)運(yùn)假設(shè)〃。研究以中藥復(fù)方中多組分體內(nèi)吸收為切

入點(diǎn)，采用多學(xué)科結(jié)合的現(xiàn)代分析檢測手段，研究進(jìn)入體內(nèi)各藥物群的組成結(jié)構(gòu)

與相互間的關(guān)系，避免由于單純研究有效成分而法說明中藥的作用的特點(diǎn)，為闡

明中藥作用的整體性和物質(zhì)基礎(chǔ)提供新的研究方法，為從體內(nèi)層次探索復(fù)方中多

組分配伍與配伍規(guī)律的研究提供新的思路，從藥物學(xué)角度挖掘復(fù)方配伍的藥學(xué)科

學(xué)內(nèi)涵。

30701054具有腸道內(nèi)CYP3A4代謝酶抑制作用的新型口服納米脂質(zhì)微粒的設(shè)計(jì)

及吸收機(jī)理研究

申請書摘要本研究擬設(shè)計(jì)構(gòu)建一種具有腸道CYP3A4代謝酶抑制作用的新型口服

納米脂質(zhì)微粒。通過對具有一定CYP3A4酶和P-gp抑制效果輔料的篩選和分類，

結(jié)合化合物自身的理化性質(zhì)以及代謝特點(diǎn)，采用高壓乳化-噴霧干燥法制備口服

納米脂質(zhì)微粒。這種特殊設(shè)計(jì)的納米級口服微粒在與消化道粘膜接觸時(shí)，可以在

腸道局部通過輔料作用短暫有效地抑制CYP3A4酶和P-gp的作用，從而有效保護(hù)

了所包載的藥物，避免了其被腸內(nèi)CYP3A4代謝酶大量代謝，實(shí)現(xiàn)促進(jìn)藥物的吸

收、有效提高藥物生物利用度的目的。此外，通過建立客觀、有效的CYP3A4酶

及P-gp抑制效果體外評價(jià)方法，還從微觀角度研究了設(shè)計(jì)的納米脂質(zhì)微粒及輔

料對于藥物吸收和代謝影響的作用機(jī)理，以期對后續(xù)的研究提供指導(dǎo)。

30772670自組裝有機(jī)原位注射植入凝膠長效傳遞系統(tǒng)的研究

申請書摘要將氨基酸進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造后，使其具有強(qiáng)大的膠凝能力，再與注射用油

和蛋白類藥等物質(zhì)混合，注射入生物體內(nèi)后即可形成可生物降解的溫敏有機(jī)原位

凝膠。通過研究有機(jī)原位凝膠的膠凝過程，特別是各種因素對膠凝溫度的影響，

探索凝膠的膠凝能力、膠凝機(jī)理并揭示影響凝膠相轉(zhuǎn)變溫度的規(guī)律。分別利用

DSC、FTIR、動(dòng)態(tài)流變儀和NMR等現(xiàn)代方法和手段評價(jià)有機(jī)原位凝膠的膠凝熱力

學(xué)和動(dòng)力學(xué)性質(zhì)；將有機(jī)原位凝膠植入體內(nèi)后，研究有機(jī)原位凝膠的體內(nèi)膠凝過

程、組織相容性、生物降解及其吸收、分布、生物轉(zhuǎn)化和消除等過程，尋找其內(nèi)

在規(guī)律，特別是生物降解規(guī)律。對篩選出的新材料進(jìn)行安全性研究，為其載藥奠

定基礎(chǔ)。選擇系列具有不同分子量或不同性質(zhì)的蛋白或肽類藥物作為模型，通過

體外模擬釋放和體內(nèi)吸收、分布、消除特征，探索有機(jī)原位凝膠中蛋白類藥物的

釋放與凝膠生物降解的關(guān)系及其規(guī)律，闡明凝膠控制釋放的機(jī)制，為蛋白類大分

子藥物長效傳遞提供一個(gè)新的思路。

30300396從骨橋蛋白深入探討吸煙導(dǎo)致骨丟失的分子機(jī)理

申請書摘要原發(fā)性骨質(zhì)疏松是一種很常見的嚴(yán)重影響老年人身心健康的衰老性

疾病，近年來，吸煙與骨質(zhì)疏松的關(guān)系及其危害的嚴(yán)重性已經(jīng)引起了學(xué)者們的高

度關(guān)注，但其作用機(jī)理尚不清楚。本課題首次對吸煙導(dǎo)致骨丟失的分子機(jī)理進(jìn)行

深入研究，試圖揭示吸煙對骨組織和成骨細(xì)胞表達(dá)骨橋蛋白的影響以及骨橋蛋白

在吸煙導(dǎo)致骨吸收中的作用，并進(jìn)一步明確吸煙影響骨橋蛋白的表達(dá)是通過尼古

丁直接作用于成骨細(xì)胞還是通過腫瘤壞死因子介導(dǎo)，同時(shí)探討利用尼古

結(jié)題中文摘要本研究檢測了吸煙對大鼠和人的骨組織及成骨細(xì)胞骨橋蛋白（0PN）

的表達(dá)和功能的影響；結(jié)果顯示：吸煙可導(dǎo)致大鼠和人骨組織0PN基因與蛋白表

達(dá)增加、蛋白磷酸化程度增強(qiáng)。觀察了0PN基因反義寡核甘酸對大鼠被動(dòng)吸煙所

致骨質(zhì)疏松的影響；結(jié)果顯示：OPN基因反義寡核甘酸可抑制吸煙所致的高骨轉(zhuǎn)

換率、增加骨小梁厚度、增強(qiáng)被動(dòng)吸煙實(shí)驗(yàn)大鼠骨骼的力學(xué)性能、提高被動(dòng)吸煙

實(shí)驗(yàn)大鼠骨骼的骨密度。還觀察了尼古丁、腫瘤壞死因子對體外培養(yǎng)人成骨細(xì)胞

骨橋蛋白基因、蛋白的表達(dá)和磷酸化程度的影響以及尼古丁拮抗劑和腫瘤壞死因

子結(jié)合蛋白的阻斷作用。結(jié)果顯示：尼古丁、腫瘤壞死因子可導(dǎo)致體外培養(yǎng)人成

骨細(xì)胞OPN基因與蛋白表達(dá)增加、蛋白磷酸化程度增強(qiáng)，尼古丁拮抗劑和腫瘤壞

死因子結(jié)合蛋白可相應(yīng)阻斷其作用。本研究提示OPN可能在吸煙引起骨質(zhì)疏松中

起重要作用，煙氣中的主要成份尼古丁通過腫瘤壞死因子誘導(dǎo)或直接誘導(dǎo)骨組織

中OPN高表達(dá)可能是吸煙導(dǎo)致骨質(zhì)疏松的主要機(jī)理之一，且OPN基因反義寡核首

酸、尼古丁拮抗劑和腫瘤壞死因子結(jié)合蛋白可以拮抗吸煙所致的可能由OPN介導(dǎo)

的骨吸收。

30600301工程化間質(zhì)干細(xì)胞低表達(dá)V型膠原促損傷肌腱完全再生研究

申請書摘要肌腱損傷的臨床治療手段有限，治療后的肌腱常由小直徑膠原纖維組

成，力學(xué)性能低下而導(dǎo)致重復(fù)斷裂。如何讓損傷肌腱再生大直徑膠原纖維是目前

肌腱修復(fù)研究的根本性難題。前期試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)間質(zhì)干細(xì)胞移植促進(jìn)I型膠原合成，

但無法促成大直徑膠原纖維再生。另外體外實(shí)驗(yàn)顯示過多V型膠原抑制I型膠原

纖維自聚生長。所以本項(xiàng)目將有機(jī)地結(jié)合干細(xì)胞和基因抑制技術(shù)的優(yōu)勢，即利用

間質(zhì)干細(xì)胞作為肌腱修復(fù)的種子細(xì)胞生產(chǎn)I型膠原；亦利用基因抑制技術(shù)降低間

質(zhì)干細(xì)胞中V型膠原的合成。然后比較研究用被抑制或正常的干細(xì)胞在體內(nèi)和體

外所工程化的肌腱的組成成分，I型膠原纖維的密度，直徑和力學(xué)性能。本項(xiàng)目

創(chuàng)新性地運(yùn)用組織工程技術(shù)探求V型膠原對體內(nèi)大直徑I型膠原纖維生成的影響,

為促進(jìn)損傷肌腱再生大直徑I型膠原纖維，達(dá)到結(jié)構(gòu)和功能的完全恢復(fù)獲得有用

的基礎(chǔ)生物學(xué)信息和帶來有效的治療手段。

30730095多種生物因素介入椎間盤移植治療椎間盤退變疾病的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)研究

申請書摘要椎間盤退變是引起成人腰腿痛、頸肩痛的主要原因。隨著人均壽命的

延長，椎間盤退變性疾病的發(fā)病率明顯升高；另一方面，現(xiàn)代社會工作壓力大，

生活節(jié)奏快又使頸腰痛有年輕化的趨勢。目前常規(guī)的外科治療，包括髓核摘除及

脊柱融合并不能解決椎間盤退行性疾病的全部問題，怎樣在去除病變椎間盤的同

時(shí)重建脊柱穩(wěn)定性與活動(dòng)度是人們探索的目標(biāo)之一。椎間盤移植的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨

床初步應(yīng)用證明，椎間盤移植后可以存活，在生化代謝及組織學(xué)上有退行性改變，

但生物力學(xué)上可滿足生理活動(dòng)需要。運(yùn)用生物技術(shù)修復(fù)退變椎間盤是近年來脊柱

外科領(lǐng)域重要的發(fā)展方向，目的是通過影響細(xì)胞代謝調(diào)整水、蛋白多糖及膠原含

量，從而延緩椎間盤的退變過程。本課題旨在椎間盤移植的基礎(chǔ)研究與臨床應(yīng)用

的基礎(chǔ)上，通過生長因子摻入、基因治療、細(xì)胞移植等生物學(xué)技術(shù)的介入，以恒

河猴等多種動(dòng)物為模型，探討椎間盤移植加生物技術(shù)修復(fù)椎間盤退行性疾病的基

本科學(xué)問題及臨床應(yīng)用前景。

30471750CTGF和TIMP-1雙基因共轉(zhuǎn)染逆轉(zhuǎn)猴腰椎間盤退變的實(shí)驗(yàn)研究

申請書摘要腰椎間盤突出癥是以椎間盤退變?yōu)樘卣鳌⒁鹣卵吹闹饕蛑?/p>

一。椎間盤的退變主要表現(xiàn)為椎間盤細(xì)胞數(shù)量的減少和細(xì)胞基質(zhì)成分的降解，本

研究試圖應(yīng)用基因治療的方法，應(yīng)用腺相關(guān)病毒(AAV)作為載體,把CTGF和

TIMP-1共同連接在AAV上,聯(lián)合應(yīng)用CTGF促進(jìn)細(xì)胞合成代謝和TIMP-1抑制基質(zhì)

降解的作用。首先進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn),應(yīng)用AAV-CTGF-TIMP1感染髓核細(xì)胞和纖維環(huán)細(xì)

胞,檢測其對II型膠原和蛋白多糖的調(diào)控,然后進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn),應(yīng)用和人類最相近

的恒河猴作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,制作椎間盤退變模型，將AAV-CTGF-TIMP1病毒顆粒注入

退變椎間盤內(nèi)，亦檢測II膠原和蛋白多糖,并應(yīng)用MRI觀察椎間盤形態(tài)和信號的

變化，從而證實(shí)CTGF和TIMP-1對椎間盤細(xì)胞的正向調(diào)控作用，恢復(fù)椎間盤細(xì)

胞的數(shù)量和功能,延緩或逆轉(zhuǎn)椎間盤的退變。如果本研究成功，可為腰椎間盤突

出癥的治療提供新的理論依據(jù)。

負(fù)責(zé)人李范珠項(xiàng)目批準(zhǔn)號30772793學(xué)科代碼C03050207

項(xiàng)目名稱神經(jīng)毒素納米粒鼻腔給藥的腦藥動(dòng)一藥效學(xué)研究

申請書摘要本項(xiàng)目在國家自然科學(xué)基金〃神經(jīng)毒素鼻腔吸收的腦藥物動(dòng)力學(xué)研究

”（30371781）基礎(chǔ)上，創(chuàng)新地采用小鼠微透析技術(shù)同步研究神經(jīng)毒素納米粒

（NT-NP）鼻腔給藥的腦PK-PD（B/PK-PD）行為。乳化聚合法分別制備不同表面

修飾（聚山梨酯80或MePEG）和粒徑大小的NT-NP,小鼠鼻腔給藥后將鎮(zhèn)痛靶部

位中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)（PAG）透析液中的NT作為PK指標(biāo)，同步進(jìn)行小鼠熱板

法鎮(zhèn)痛藥效實(shí)驗(yàn)，以痛閾提高百分率為PD指標(biāo)。與此平行，收集PAG透析液中

的NT作為PK指標(biāo)，透析液中的GABA和GLU作為PD指標(biāo)。WinNonlin4.1軟件

擬合兩組PK-PD模型，繪制藥物濃度及其效應(yīng)經(jīng)時(shí)曲線，建立方程并求出相關(guān)參

數(shù)。本項(xiàng)目研究可為正確評價(jià)制劑質(zhì)量，優(yōu)化工藝，指導(dǎo)臨床合理用藥提供科學(xué)

依據(jù)，同時(shí)可為多肽和蛋白質(zhì)類藥物鼻腔給藥系統(tǒng)的開發(fā)提供重要的理論和實(shí)踐

參考。

負(fù)責(zé)人凌家俊項(xiàng)目批準(zhǔn)號30772791學(xué)科代碼C03050207

項(xiàng)目名稱中藥藥動(dòng)學(xué)中的微透析與穩(wěn)定同位素標(biāo)記聯(lián)用技術(shù)研究

申請書摘要本課題以青藤堿為模型藥物，將國際上先進(jìn)的微透析取樣技術(shù)引入到

中藥的整體和局部藥動(dòng)學(xué)研究中，并利用青藤堿的穩(wěn)定同位素標(biāo)記物作為微透析

取樣研究的內(nèi)標(biāo)物，實(shí)現(xiàn)對體內(nèi)局部藥物濃度的準(zhǔn)確、實(shí)時(shí)的監(jiān)測。課題將進(jìn)行

探針回收率體內(nèi)外研究、青藤堿體內(nèi)過程及分布研究、生物利用度及生物有效性

研究、PK-PD模型研究等研究內(nèi)容，通過系統(tǒng)、全面的研究，建立基于微透析與

穩(wěn)定同位素標(biāo)記聯(lián)用技術(shù)的中藥的整體和局部藥動(dòng)學(xué)研究方法，為藥理學(xué)、藥物

動(dòng)力學(xué)等相關(guān)學(xué)科的研究建立不干撓正常生命過程的在體、實(shí)時(shí)和在線取樣研究

平臺。由于穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)的引入，使得本課題的研究結(jié)果，意義不僅僅在

中藥藥動(dòng)學(xué)研究本身，而且對于國際上藥學(xué)領(lǐng)域的微透析相關(guān)研究，也有巨大的

推動(dòng)意義，并將使中藥藥動(dòng)學(xué)的研究水平，躋身于世界前沿！

負(fù)責(zé)人羅曉健項(xiàng)目批準(zhǔn)號30760313學(xué)科代碼C03050207

項(xiàng)目名稱中藥復(fù)方生物粘附型脈沖給藥系統(tǒng)的研究

申請書摘要“擇時(shí)給藥”是中醫(yī)辨證用藥特色，限于當(dāng)時(shí)的科技水平，只能根據(jù)

疾病節(jié)律性特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)姆帟r(shí)間，沒有在劑型方面進(jìn)行深入研究，嚴(yán)重影

響了''擇時(shí)給藥”的優(yōu)勢發(fā)揮。脈沖給藥系統(tǒng)主要是根據(jù)時(shí)辰藥理學(xué)和時(shí)辰藥代動(dòng)

力學(xué)原理，定時(shí)或定位釋放藥物的新型給藥系統(tǒng)，用于治療節(jié)律性明顯的疾病具

有獨(dú)特優(yōu)勢。目前,脈沖制劑在胃腸道的轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間是實(shí)現(xiàn)脈沖“時(shí)滯”的主要障礙。

課題組利用生物粘附和衣膜破裂的原理，建立生物粘附型脈沖釋藥系統(tǒng)，以復(fù)方

丹參片為模型藥物，研究生物粘附技術(shù)延長制劑在胃腸滯留時(shí)間和衣膜破裂控制

藥物釋放的處方因素和工藝因素的影響規(guī)律，建立合理的體內(nèi)外評價(jià)方法，闡明

制劑的體內(nèi)外釋藥行為，為研究開發(fā)中藥脈沖制劑提供理論依據(jù)。中藥復(fù)方生物

粘附型脈沖給藥系統(tǒng)有利于拓寬時(shí)滯設(shè)計(jì)范圍，增加時(shí)滯重現(xiàn)性，提高生物利用

度，有利于充分發(fā)揮中醫(yī)“擇時(shí)給藥”優(yōu)勢，提高中藥療效，提高脈沖制劑的實(shí)際

應(yīng)用價(jià)值，具有很好的應(yīng)用前景。

負(fù)責(zé)人陳軍項(xiàng)目批準(zhǔn)號30701111學(xué)科代碼C03050207

項(xiàng)目名稱復(fù)合磷脂脂質(zhì)體作為中藥抗腫瘤有效部位馬錢子總生物堿載體的研究

申請書摘要脂質(zhì)體用作為抗腫瘤藥物載體可以顯著增強(qiáng)療效降低毒性，但由于載

藥量有限，脂質(zhì)體大多只能包裹中藥有效單體成分，不利于中藥治療腫瘤多成分

多靶點(diǎn)共同起效優(yōu)勢的發(fā)揮。本課題在前期研究的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)采用復(fù)合磷脂脂

質(zhì)體技術(shù)大幅度提高抗腫瘤作用確切的馬錢子生物堿的載藥量，實(shí)現(xiàn)對整個(gè)總生

物堿有效部位的包裹，并對復(fù)合磷脂脂質(zhì)體提高載藥量的機(jī)制、規(guī)律、影響因素

進(jìn)行深入系統(tǒng)的考察，對復(fù)合磷脂脂質(zhì)體與普通單一磷脂脂質(zhì)體抗腫瘤作用的特

點(diǎn)及體內(nèi)性質(zhì)進(jìn)行系統(tǒng)比較，力求研制出既能提高載藥量又能增強(qiáng)抗腫瘤效果的

復(fù)合磷脂脂質(zhì)體制劑技術(shù)，該技術(shù)將能夠解決中藥生物堿類抗腫瘤有效部位的載

藥問題。

30760248Endoglin基因修飾腫瘤/DC雜交細(xì)胞誘生靶向特異性抗人肺癌CTL疫

苗的研究

申請書摘要Endoglin(EDG)是腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞膜表面蛋白，是腫瘤血管生

成的標(biāo)志性分子之一。樹突狀細(xì)胞(DC)是體內(nèi)抗原提呈功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)

胞。本研究擬在完成省自然科學(xué)基金子課題〃抗肺癌DC疫苗研究〃和國家自然科

學(xué)基金項(xiàng)目的子課題“EndoglinDNA疫苗誘導(dǎo)抗癌免疫反應(yīng)〃的基礎(chǔ)上，以體內(nèi)癌

細(xì)胞和腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞為直接目標(biāo)，依據(jù)腫瘤抗原提呈給T細(xì)胞的機(jī)理，

將轉(zhuǎn)染鼠EDG表達(dá)基因的原代培養(yǎng)的肺癌患者癌細(xì)胞與患者的DC融合成雜交細(xì)

胞，該細(xì)胞與患者的T細(xì)胞混合培養(yǎng)誘生特異性CTL,完成體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)。用

原代培養(yǎng)的人肺癌細(xì)胞與重建肺癌病人免疫系統(tǒng)的SCID鼠建立腫瘤動(dòng)物模型，

將轉(zhuǎn)染鼠EDG基因的荷瘤鼠癌細(xì)胞和荷瘤鼠DC融合成雜交細(xì)胞后，再與荷瘤鼠

T細(xì)胞混合培養(yǎng)，誘生擴(kuò)增的CTL回輸至荷人肺癌SCID鼠體內(nèi)，研究其對體內(nèi)

癌細(xì)胞和腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞直接產(chǎn)生〃雙重〃細(xì)胞毒作用所誘導(dǎo)的抗癌效應(yīng)。

30760073重組endoglin與細(xì)菌表面抗原分子疫苗抗腫瘤作用研究

申請書摘要腫瘤血管生成是腫瘤的生長與轉(zhuǎn)移的必要條件，endoglin主要分布

于腫瘤新生血管的內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤周圍組織的細(xì)胞表面，是腫瘤血管生成標(biāo)志性

分子。研究已經(jīng)表明，使用抗endoglin單克隆抗體被動(dòng)免疫治療可以有效抑制

腫瘤生長和轉(zhuǎn)移。但是，單克隆抗體被動(dòng)免疫治療存在許多不足，本研究擬利用

基因工程技術(shù)，將endoglin胞外段基因序列插入大腸埃希氏菌表面抗原蛋白分

子Ag43中，將endoglin作為Ag43分子的一部分(嵌合于Ag43中)讓大腸埃希

氏菌展示于細(xì)菌表面，提取并純化這一嵌合的Ag43-endoglin重組蛋白，然后用

作疫苗主動(dòng)免疫小鼠腫瘤模型，了解是否能誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗endoglin的體

液免疫反應(yīng)，從而達(dá)到主動(dòng)免疫治療腫瘤的目的，進(jìn)而研究其作用機(jī)理，為腫瘤

免疫治療探討一種新的方法。

30772571丹酚酸B抗氧化和抗細(xì)胞凋亡作用的Grp78途徑及其受體分析

申請書摘要丹酚酸B是丹參水溶性成分中最重要的有效成分之一，大量實(shí)驗(yàn)結(jié)果

證明丹酚酸B在心肌保護(hù)、腦保護(hù)、抑制血栓形成等方面具有明顯的作用。本實(shí)

驗(yàn)室在前期工作中曾采用2D電泳結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)研究丹酚酸B抗氧化及保護(hù)內(nèi)皮

細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制和差異蛋白質(zhì)譜，鑒定出一個(gè)明顯變化的蛋白為葡萄糖調(diào)節(jié)

蛋白78CGRP78）,并用其他方法進(jìn)一步證實(shí)丹酚酸B能特異而明確地上調(diào)GPRP78。

GRP78是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的利重要的分子伴侶，是細(xì)胞的一種重要的防御機(jī)制。丹酚

酸B與GRP78的關(guān)系目前在國內(nèi)外無人報(bào)道，本課題擬研究丹酚酸B上調(diào)細(xì)胞內(nèi)

GRP78的分子機(jī)制，并闡明其作用的受體（或稱結(jié)合蛋白）以及相關(guān)信號通路，

包括ATF6、IREI、PERK等可能的調(diào)節(jié)因子，即丹酚酸B上調(diào)GRP78的上、下游

途徑，為丹酚酸B抗氧化和抗凋亡作用機(jī)制給予分子解釋，并為丹酚酸B相關(guān)靶

點(diǎn)的確認(rèn)及新藥的設(shè)計(jì)和發(fā)現(xiàn)提供依據(jù)。

30772330鳥噂吟核昔交換因子Dockl80在卵巢癌侵蝕性行為中的作用研究

申請書摘要我們的前期工作報(bào)道了接合物蛋白Crk在卵巢癌細(xì)胞中的致腫瘤作

用，本課題為進(jìn)一步闡明接合物蛋白Crk的下游結(jié)合分子，鳥喋吟核甘交換因子

Dockl80及其所介導(dǎo)的Crk/Dockl80/Racl信號途徑在卵巢癌侵蝕性生物學(xué)行為

中的作用，擬通過同時(shí)構(gòu)建Dockl80過度表達(dá)型細(xì)胞，以及可控性、特異選擇性

Dockl80表達(dá)缺失型卵巢癌細(xì)胞MCAS,通過對其靶向效應(yīng)酶Rael活性進(jìn)行總體

水平檢測和細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)定位監(jiān)測，同時(shí)觀察該細(xì)胞信號途徑所介導(dǎo)之細(xì)胞活力，

細(xì)胞動(dòng)力和細(xì)胞侵蝕力等生物學(xué)表型，以期能證明我們