紫外-可見分光光度法UV-visibleSpectrophotometerIodometry廣州衛生職業技術學院PART02紫外可見-分光光度法Iodometry紫外可見-分光光度法基于物質吸收紫外或可見光引起分子中價電子躍遷、產生分子吸收光譜與物質組分之間的關系建立起來的分析方法，稱為紫外可見分光光度法（UV-vis）。01選擇性高020304測量可以精確到10-7g/ml。快速簡便能進行微量組分測定。準確度好多種組分共存，無需分離直接測定某物質。選擇性好特點儀器設備便宜，應用廣泛，無機、有機物均可測定。Iodometry紫外可見-分光光度法一、基本原理1.透光率T光源I0透過光It吸收光Ia反射光IrI0=It+Ia+Ir計算公式：T=ItI0×100%T取值為0.0%~100.0%T=0.0%：光全吸收T=100.0%：光全透過Iodometry紫外可見-分光光度法一、基本原理2.吸光度AT與A關系：A∝1/T，T=0，A=∞，T=100%，A=0計算公式：A=lg1T=-lgT=lgI0ItA=-lgT,T=10-A二、光的吸收定律朗伯定律（1760年）Iodometry紫外可見-分光光度法A=k×L（液層厚度）比爾定律（1852年）A=k×c（溶液濃度）朗伯比爾定律：A=kcL一束平行單色光通過一均勻、非散射的吸光物質溶液時，在入射光的波長、強度以及溶液溫度等保持不變時，該溶液的吸光度A與其濃度C及液層厚度L的乘積成正比。吸光系數k吸光系數：k=A/cL摩爾吸光系數

在一定λ下，c=1mol/L，L=1cm時的吸光度。百分吸光系數/比吸光系數E1cm1%一定λ下,c=1%(W/V)即1g/100ml，L=1cm時的吸光度。兩者關系Iodometry紫外可見-分光光度法吸光系數的特別說明摩爾吸光系數

A=kcL就轉變為A=

cL注意：濃度C的單位必須是mol/l百分吸光系數EA=kcL就可以轉變為A=EcL注意：濃度的單位必須是g/100mlIodometry紫外可見-分光光度法吸光系數的意義

一定條件下是一個特征常數。溫度和波長一定時。ε僅與物質本身的性質有關，與待測物濃度c和液層厚度L無關；Iodometry紫外可見-分光光度法

可作為定性和定量分析依據：同一物質在不同波長時ε值不同。不同物質在同一波長時ε值不同。12練一練Iodometry紫外可見-分光光度法1.某物質的摩爾濃度為C，在一定條件下用1cm的吸收池測得吸光度為A，則摩爾吸光系數為：（

）CaB.A/cC.c/A

D.cM2.某物質的吸光系數與（）有關。A該物質溶液的濃度B.物質溶液的密度C.液層厚度D.該物質本身的性質BD練一練Iodometry紫外可見-分光光度法安絡血的摩爾質量為236g/mol，將其配成100ml含0.4962mg的溶液，盛于1cm的吸收池中，在λmax處測定得A值為0.557，試求安絡血的

和。Iodometry紫外可見-分光光度法吸收光譜（吸收曲線）定義以A為縱坐標，λ為橫坐標，繪制的λ~A曲線。術語①吸收峰：λmax②吸收谷：λmin③肩峰：λsh④末端吸收Iodometry紫外可見-分光光度法吸收曲線的移動λmax向長波方向移動稱為紅移，或長移。λmax向短波方向移動稱為藍移(或紫移)或短移。吸收強度即摩爾吸光系數ε增大或減小的現象分別稱為增色效應或減色效應Iodometry紫外可見-分光光度法吸收曲線的應用用作定性定量分析。不同物質相同濃度，其吸收曲線形狀,λmax不同同一物質的吸收光譜特征值相同；同一物質相同濃度的吸收曲線重合；同一物質不同濃度，吸收曲線形狀相似，λmax相同Iodometry紫外可見-分光光度法偏離光的吸收定律的原因依據光的吸收定律，A