…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年教科新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、關于細胞工程技術在生產實踐中應用的敘述，正確的是（）A.用馬鈴薯幼苗莖尖進行組織培養，可獲得抗病毒新品種B.愈傷組織細胞分裂能力強，可作為體細胞誘變育種材料C.動物細胞經過細胞培養可以直接獲得動物的組織或器官D.動物胚胎細胞分化程度低，可優先作為核移植受體細胞2、基因工程自20世紀70年代興起后得到了飛速發展，目前已經成為生物科學的核心技術，下列有關基因工程的應用的描述正確的是（）A.利用農桿菌轉化法培育得到的轉基因植物，可能會引起基因污染B.從人類基因組文庫中獲得胰島素基因導入大腸桿菌，可獲得具生物學功能的胰島素C.用基因槍法將腸乳糖酶基因導入奶牛受精卵，可培育出產低乳糖牛乳的奶牛D.若將腺苷酸脫氨酶基因轉入淋巴細胞后回輸患者進行基因治療，該基因可遺傳給子代3、基因工程中要使目的基因在受體細胞中穩定存在并能夠表達和發揮作用，需要構建基因農達載體，構建過程如圖。有關說法不正確的是（）

A.構建重組質粒a是基因工程的核心步驟B.重組質粒a形成過程中，需要BamHI酶和DNA連接酶C.用含有氨芐青霉素的培養基篩選轉化成功的大腸桿菌D.圖中大腸桿菌感受態細胞可通過Ca2+處理法獲得4、某生物興趣小組為測定藥物對體外培養細胞的毒性，準備對小鼠肝細胞進行培養。下列說法正確的是（）A.將肝組織剪碎后用胃蛋白酶處理可得到肝細胞懸液B.在培養過程中通常要通入5%的CO2以刺激細胞呼吸C.在持續的培養過程中，肝細胞會出現停止增殖的現象D.該試驗中用到的培養液也能用來培養乙肝病毒5、從紅豆杉細胞中提取的紫杉醇是目前最好的抗腫瘤藥物之一。為提高紅豆杉細胞培養物中紫杉醇的產量；研究人員構建紫杉醇合成關鍵酶基因（Bapt）的超表達載體，并將其導入紅豆杉細胞，具體流程如下圖。相關說法正確的是（）

A.過程①和②使用的酶均為DNA聚合酶B.p1303載體上可能含有增強Bapt基因表達的序列C.可使用Bapt基因制成的探針檢測過程⑤是否成功D.改造的紅豆杉細胞需組織培養至完整植株再進行紫杉醇提取6、下列關于育種的描述中，不正確的是（）A.選擇育種是一種古老的育種方法，它的局限性在于進展緩慢，可選擇的范圍有限B.人工誘變是創造動植物新品種和微生物新類型的重要方法，突出優點是可以提高突變率C.對于基因工程或分子生物學實驗室向外排放轉基因細菌等必須嚴加管制D.將兩匹奔跑速度快、耐力持久的種馬交配，所生小馬一定能繼承“雙親”的特征，不僅跑得快，而且耐力持久評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、下列關于人早期胚胎發育過程中桑椹胚和囊胚的敘述中，正確的是（）A.囊胚與桑椹胚相比，每個細胞內DNA總量增加B.囊胚期出現了細胞分化，但遺傳物質未發生改變C.囊胚期內細胞團和滋養層細胞差異不是復制水平上的差異，而是轉錄水平上的差異引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在輸卵管8、在傳統發酵技術中；果醋的制作往往在果酒制作基礎上進行。下圖甲是醋酸發酵裝置，乙是培養液pH變化曲線圖，下列敘述不正確的是（）

A.發酵初期不通氣，溶液中沒有氣泡產生B.中期可以聞到酒香，說明進行了酒精發酵C.后期接種醋酸菌，適當通氣并保持原有溫度D.圖乙中能正確表示pH變化的曲線是③9、從藍光到紫外線都能使綠色熒光蛋白（GFP）激發；發出綠色螢光。研究人員將某病毒的外殼蛋白（L1）基因與GFP基因連接，獲得了L1-GFP融合基因，并將其插入質粒PO，構建了重組質粒P1。下圖為P1部分結構和限制酶酶切位點的示意圖，相關敘述正確的是（）

A.將L1-GFP融合基因插入質粒PO時，使用了E1、E2和E4三種限制性核酸內切酶B.可借助基因工程、核移植技術、早期胚胎培養及胚胎移植技術獲得轉基因的克隆牛C.可采用抗原-抗體雜交技術檢測該融合基因是否存在于轉基因牛的不同組織細胞中D.若在某轉基因牛皮膚細胞中觀察到綠色熒光，則說明L1基因在該細胞中完成表達10、下圖1表示的是某DNA分子上的一些限制性內切酶的酶切位點。用XhoI和SalI兩種限制酶分別處理該DNA分子；經電泳分離結果如圖2。以下敘述正確的是（）

A.所用兩種限制性核酸內切酶識別的核苷酸序列可能相同B.限制酶通過作用于磷酸二酯鍵和氫鍵得到相應產物C.根據泳道②電泳示意圖可知使用的限制性內切酶為XhoID.用兩種限制酶同時處理后進行電泳，條帶可多于6條11、下圖為科學家在實驗室中培養“人造牛肉”的簡要過程；下列相關敘述正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理牛肌肉組織，獲得分裂能力強的肌肉母細胞B.生物反應器內應控制好適宜的溫度，并沖入純氧保證細胞呼吸C.培養液中的支架提供了更多的細胞吸附面積，有利于細胞貼壁生長D.“人造牛肉”的培養有利于牛肉的工廠化生產，減少環境污染12、聚羥基脂肪酸酯(PHA)是由嗜鹽細菌合成的一種胞內聚酯，它具有類似于合成塑料的理化特性，且廢棄后易被生物降解，可用于制造無污染的“綠色塑料”。科學家從某咸水湖中尋找生產PHA菌種的流程圖如下。下列敘述錯誤的是（）

A.步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含合成塑料的選擇培養基上B.步驟③所用的培養基中營養物質濃度越高，對嗜鹽細菌的生長越有利C.步驟④所用到的培養基應加入瓊脂，以便挑取單菌落獲得純化菌株D.挑取菌落時，應挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細菌的PHA含量13、勤洗手是預防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果；研究人員檢測了用凝膠洗手前后手部細菌的含量。凝膠洗手前的檢測流程見下圖。下列敘述錯誤的是（）

A.統計洗手前手部細菌的數量，選擇的接種方法是平板劃線法B.除圖中操作外，還需要設置一組未接種的空白培養基進行培養C.培養基上的一個菌落只可能來源于樣品稀釋液中的一個活菌D.初步判斷培養基上菌種的類型，需要用顯微鏡觀察菌體的形狀14、下列有關動物細胞培養的表述錯誤的是（）A.培養環境中需要O2，不需要CO2B.細胞要經過脫分化形成愈傷組織C.培養液通常含有糖類，氨基酸，無機鹽，維生素和動物血清D.培養瓶中的細胞培養到一定階段后分瓶后才能繼續增殖15、全球首個鼻噴新冠肺炎疫苗已獲準臨床試驗，該疫苗是在流感病毒載體上，插入新冠病毒基因片段，制成活病毒載體疫苗，模擬呼吸道病毒天然感染途徑，激活局部免疫應答和全身性免疫應答，從而發揮保護作用。下列相關敘述正確的是（）A.疫苗制備過程中，對流感病毒進行改造利用的原理是基因突變B.從接種方式來看，該疫苗的優點是通過鼻噴接種，無針、無痛C.該疫苗需侵入人體細胞中經基因表達后才能發揮作用D.該疫苗可通過激活淋巴細胞，產生細胞免疫和體液免疫評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)16、動物細胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。17、功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中______部位的兩個核苷酸之間的______斷開，因此具有______。18、酵母菌是______________微生物。酵母菌進行有氧呼吸的反應式如下：______________________；酵母菌進行無氧呼吸的反應式如下：_________________。19、隨著現代生物技術的飛速發展；轉基因動物；克隆動物和試管動物相繼問世，請回答下列問題：

（1）轉基因動物、克隆動物和試管動物培育過程中都要用到的生物技術包括______。

（2）核移植是動物克隆的第一步，包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用處于______（填時期）的______為受體細胞。

（3）在“試管動物”的培育過程中，常采用______（填激素名稱）處理可使雌性個體一次排出多枚卵母細胞。從雄性個體采集的精子需______后才能進行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為______；卵細胞膜反應。

（4）若考慮環境承載力，轉基因動物、克隆動物和試管動物不宜放置到自然環境中，這遵循了生態工程的______原理。20、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就______，稱為______。細胞數目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面______時，細胞就會_____，這種現象稱為______。21、概念：動物細胞培養就是從動物機體中取出相關的______，將它分散成______，然后放在適宜的______中，讓這些細胞______。22、動物細胞培養的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉入培養瓶中進行______培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續_____培養。23、基因工程是蛋白質工程的關鍵技術；蛋白質工程是基因工程的延伸。有人對基因工程和蛋白質工程的關系進行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質工程的比較。比較項目蛋白質工程蛋白質工程原理中心法則中心法則區別過程獲取目的基因→構建表達載體→導入受體細胞→目的基因的檢測與鑒定預期蛋白質功能→設計蛋白質結構→推測氨基酸序列→合成DNA→表達出蛋白質實質定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需要的生物類型或生物產品（基因的異體表達）定向改造蛋白質的分子結構以生產人類所需要的蛋白質定向改造蛋白質的分子結構以生產人類所需要的蛋白質結果生產自然界中已有的蛋白質生產自然界中已有的蛋白質生產自然界中已有的蛋白質聯系蛋白質工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進行修改。_________24、最后檢測目的基因是否翻譯成______，方法是從轉基因生物中提取______，用相應的______進行______。評卷人得分四、判斷題(共2題，共12分)25、胚胎發育早期，細胞的數量不斷增加，胚胎的總體積也增加。()A.正確B.錯誤26、基因工程技術已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產品的產量等方面。（選擇性必修3P87）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共1題，共7分)27、為生產具有特定性能的α-淀粉酶；研究人員從某種海洋細菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656個堿基對），利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶，實驗流程見下圖。請回答下列問題：

（1）利用PCR技術擴增α-淀粉酶基因前；需先獲得細菌的_________。

（2）為了便于擴增的DNA片段與表達載體連接；需在引物的____端加上限制性酶切位點，且常在兩條引物上設計加入不同的限制性酶切位點，主要目的是________________。

（3）進行擴增時；反應的溫度和時間需根據具體情況進行設定，下列選項中_______的設定與引物有關，________的設定與擴增片段的長度有關。（填序號）

①變性溫度②退火溫度③延伸溫度④變性時間⑤退火時間⑥延伸時間。

（4）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：

圖中虛線框內mRNA片段包含___個密碼子；如虛線框后的序列未知，預測虛線框后的第一個密碼子最多有__種。

（5）獲得工程菌表達的α-淀粉酶后；為探究影響酶活性的因素，以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測定酶活性，結果如下：

。緩沖液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相對活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根據上述實驗結果，初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為______。評卷人得分六、綜合題(共3題，共12分)28、某地利用胚胎工程實現良種肉牛產業化生產；請結合胚胎工程相關知識回答下列問題：

（1）胚胎工程是指對動物_____所進行的多種顯微操作和處理技術。體外受精對精子和卵細胞的具體要求是_____。

（2）早期胚胎培養時_____（填“需要”或“不需要”）用胰蛋白酶進行處理，原因是_____。

（3）胚胎工程技術的終端環節是_____，其最顯著的意義在于_____；在胚胎移植過程中，外來胚胎能在受體內存活的生理學基礎是_____。

（4）如果供體母牛具有很多優良性狀，可利用體細胞克隆技術加速遺傳改良進程。用于核移植的體細胞一般選用10代以內的細胞，原因是_____。29、某女性的線粒體攜帶某種嚴重致病基因；她的前兩個孩子因患該病夭亡，后來她接受一個健康女性捐贈的卵母細胞，生有了一個擁有“三父母”的嬰兒，培育過程如圖所示。

請據此回答下列有關問題：

(1)該健康嬰兒培育過程中依次涉及__________、______________；早期胚胎培養和胚胎移植等技術。

(2)圖中取自健康女性的卵母細胞是___________（填“A”或“B”）。取卵之前對該女性需要注射____________（填激素）。

(3)哺乳動物胚胎的培養液成分一般都比較復雜，除一些無機鹽和有機物類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分，以及_____________等物質。

(4)據圖分析，理論上醫療團隊在進行胚胎移植時沒有必要對胚胎的性別進行選擇，理由是________________30、長期高血糖可引發血管細胞衰老。科研人員為研究S蛋白在因高血糖引發的血管細胞衰老中的作用；以腺病毒為載體將編碼S蛋白的S基因導入血管細胞，實現S蛋白在血管細胞中的大量表達。

(1)腺病毒的遺傳物質為DNA，其復制需要E1、E2、E3基因共同完成。為將S基因導入腺病毒，科研人員首先構建了含S基因的重組質粒，如圖1所示。在構建含S基因的重組質粒時，通過_______的方法可鑒定重組質粒是否插入了S基因。將圖1中含S基因的重組質粒用_______酶切割后，獲得改造后的腺病毒DNA；將其導入A細胞(A細胞含有E3基因，可表達E3蛋白)，如圖2所示。腺病毒DNA在A細胞內能夠_______；從而產生大量重組腺病毒，腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上。

(2)綜合上述信息，從生物安全性角度分析重組腺病毒載體的優點：_______(寫出2點)。

(3)用含S基因的重組腺病毒分別感染正常人及糖尿病患者的血管細胞，使S蛋白在血管細胞中大量表達。對正常人、糖尿病患者及二者轉入S基因后血管細胞中能促進細胞衰老的Ⅰ蛋白進行檢測，結果如圖3所示(顏色越深代表表達量越高)。可用_______法檢測Ⅰ蛋白的表達量，實驗結果顯示_______血管細胞中Ⅰ蛋白表達量最高，推測S蛋白對高血糖引發的血管細胞衰老的作用及機制是_______。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

1；作物脫毒材料：分生區（如莖尖）細胞；植物脫毒方法：進行組織培養；結果：形成脫毒苗。

2；突變體的利用（1）原因：在植物組織培養的過程中；由于培養細胞一直處于不斷的分生狀態，因此容易受到培養條件和外界壓力的影響而產生突變。（2）利用：篩選出對人們有利的突變體培育成新品種。

3；若想利用此技術得到細胞產物；只需培養到愈傷組織即可．若想制造人工種子，需要培養到胚狀體。（在胚狀體外包一層人工種皮即可）

【詳解】

A；一定大小的草莓莖尖的病毒極少；甚至無病毒，進行組織培養，可獲得無病毒新品種，A錯誤；

B；愈傷組織細胞分裂能力強；容易受到培養條件和外界壓力的影響而產生突變，可作為體細胞誘變育種材料，B正確；

C；動物細胞經過細胞培養可以直接獲得動物細胞或者細胞產物；不能直接獲得動物的組織或器官，C錯誤；

D；動物胚胎細胞分化程度低；可優先作為核移植供體細胞，而不是受體細胞，D錯誤。

故選B。2、A【分析】【分析】

基因工程是指按照人類的愿望；將不同生物的遺傳物質在體外人工剪切并和載體重組后轉入細胞內進行擴增，并表達產生所需蛋白質的技術，其原理是基因重組。

【詳解】

A；農桿菌轉化法把目的基因導入到受體細胞的染色體DNA上；目的基因有可能通過減數分裂進入精子，若果精子與野生型同種生物的卵細胞受精則會造成基因污染，A正確；

B；從人類基因組文庫中獲得胰島素基因有內含子；在大腸桿菌中，其初始轉錄產物中與內含子對應的RNA序列不能被切除，無法表達出胰島素，B錯誤；

C；動物基因工程常用的是顯微注射技術；基因槍法屬于植物轉基因方法之一，C錯誤；

D；由于此處基因治療是把表達載體導入淋巴細胞；而淋巴細胞不會產生配子，故目的基因不會傳給子代個體，D錯誤。

故選A。3、C【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：(1)目的基因的獲取：從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構建：基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因導入受體細胞。(4)目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；構建重組質粒a——目的基因與運載體的結合是基因工程的核心步驟；A正確；

B；重組質粒a形成過程中；需要BamHI酶切割質粒獲得黏性末端，需要DNA連接酶把目的基因與載體黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來，B正確；

C；質粒中有抗氨芐青霉素基因；用含有氨芐青霉素的培養基能篩選導入了質粒的大腸桿菌，但該大腸桿菌有可能導入的是空質粒，C錯誤；

D、圖中大腸桿菌感受態細胞可通過Ca2+處理法獲得；D正確。

故選C。4、C【分析】【分析】

1.動物細胞培養的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養；

2.細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上；稱為細胞貼壁．細胞數目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制。

【詳解】

A；處理肝組織塊獲得到肝細胞懸液用胰蛋白酶；不能用胃蛋白酶，A錯誤；

B、在培養過程中加入5%的CO2是為了維持培養液pH的相對穩定；B錯誤；

C；正常細胞不具有無限增殖能力；培養一段時間后會停止分裂，C正確；

D；病毒只能寄生在活細胞中；不能用培養液直接培養，D錯誤。

故選C。5、B【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成；

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等；

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA—分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質：分子水平鑒定用抗原—抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；①為逆轉錄過程；需要逆轉錄酶的催化；②為PCR擴增過程，該過程需要使用Taq酶，A錯誤；

B；根據題干信息“研究人員構建紫杉醇合成關鍵酶（Bapt）基因的超表達載體來提高紫杉醇產量”可知；p1303載體上可能含有增強子序列，作用是促進Bapt基因的表達，B正確；

C；因為紅豆杉細胞中本身存在Bapt基因；不管超表達載體是否成功導入，都能與Bapt基因探針形成雜交分子，因此不能通過Bapt基因探針來檢測步驟⑤是否成功，C錯誤；

D；要獲得細胞產物；只需要培養到愈傷組織階段即可，不需要培育成完整的紅豆杉植株，D錯誤。

故選B。6、D【分析】【分析】

1；四種育種方法：

。

雜交育種。

誘變育種。

單倍體育種。

多倍體育種。

方法。

（1）雜交→自交→選優。

輻射誘變；激光誘變、化學藥劑處理。

花藥離體培養；秋水仙素誘導加倍。

秋水仙素處理萌發的種子或幼苗。

原理。

基因重組。

基因突變。

染色體變異（染色體組先成倍減少；再加倍，得到純種）

染色體變異（染色體組成倍增加）

2；轉基因技術是指按照人們的意愿；進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉基因等技術，賦予生物以新的遺傳特性，從而創造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品。

【詳解】

A；選擇育種是一種古老的育種方法；它的局限性在于進展緩慢，可選擇的范圍有限，A正確；

B；由于基因突變能產生新的基因；所以人工誘變是創造動植物新品種和微生物新類型的重要方法，它突出的優點是可以提高突變率，加速育種工作的進程，B正確；

C；轉基因生物的外源基因與細菌或病毒雜交；重組出有害的病原體，故對于基因工程或分子生物學實驗室向外排放轉基因細菌等必須嚴加管制，C正確；

D；將兩匹奔跑速度快、耐力持久的種馬交配；其原理是基因重組，變異是不定向的，所以不一定能夠獲得跑得快、耐力持久的小馬，D錯誤。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)7、B:C【分析】【分析】

胚胎發育過程：（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂；數量增加，胚胎總體積不增加；（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎；（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發育成胎兒的各種組織；而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現囊胚腔；（4）原腸胚：內細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內胚層，由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔。

【詳解】

A；由桑椹胚發育到囊胚進行的是有絲分裂；形成的每個細胞內DNA總量不變，A錯誤；

B；囊胚期細胞出現了細胞分化；但細胞分化的實質是基因的選擇性表達，因此其遺傳物質未發生改變，B正確；

C；囊胚期內細胞團和滋養層細胞的差異不是DNA復制水平上的差異；而是轉錄水平上的差異，即基因的選擇性表達，C正確；

D；受精卵在輸卵管中形成；后在子宮中發育，故胚胎發育的早期不可能在卵巢，D錯誤。

故選BC。8、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型。

果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O；

（2）在無氧條件下，反應式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。

【詳解】

A；若發酵初期不通入氣體；由于錐形瓶中含有少量空氣，溶液中酵母菌也可通過有氧呼吸產生二氧化碳，即使沒有空氣，酵母菌也能通過無氧呼吸產生二氧化碳，因此有氣泡產生，A錯誤；

B；中期可以聞到酒香；說明有酒精產生，即進行了酒精發酵，B正確；

C；由于醋酸菌是嗜氧菌；也是嗜溫菌，因此后期接種醋酸菌，需通氣并適當升高溫度，C錯誤；

D；醋酸發酵過程中；發酵液的pH會進一步降低，因此圖乙中能正確表示pH變化的曲線是②，D錯誤。

故選ACD。9、B:D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；將L1-GFP融合基因插入質粒P0時；使用了El和E4兩種限制性核酸內切酶，A錯誤；

B；可借助基因工程、核移植技術、早期胚胎培養及胚胎移植技術獲得轉基因的克隆牛；B正確；

C；可采用DNA分子雜交技術檢測該融合基因是否存在于轉基因牛的不同組織細胞中；抗原-抗體雜交技術用于檢測目的基因是否成功表達，C錯誤；

D；若在某轉基因牛皮膚細胞中觀察到綠色熒光；則說明L1基因在該細胞中完成表達，D正確。

故選BD。10、C:D【分析】【分析】

題圖分析：限制酶SalⅠ有三處切割位點；切割后產生4個DNA片段，泳道①中是用SalⅠ處理得到的酶切產物；限制酶XhoⅠ有2處切割位點，切割后產生3個DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ處理得到的酶切產物。

【詳解】

A；酶具有專一性；不同的限制酶識別并切割不同的核苷酸序列，A錯誤；

B；限制酶通過作用于磷酸二酯鍵得到相應產物；B錯誤；

C；分析圖1；限制酶XhoⅠ有2處切割位點，切割后產生3個DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ處理得到的酶切產物，C正確；

D；用兩種限制酶同時處理后進行電泳；若某些位點未被切割，則條帶可多于6條，D正確。

故選CD。11、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養。動物細胞培養過程中懸液中的細胞會很快貼附在瓶壁上。動物細胞培養的氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培養不僅產量高；并可以減少成本和降低環境污染。

【詳解】

A；胰蛋白酶處理動物組織；可以使組織分散成單個細胞，利于動物細胞培養，A正確。

B、動物細胞培養的氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%CO2；B錯誤。

C；動物細胞培養過程中懸液中的細胞會很快貼附在瓶壁上。所以細胞貼附瓶壁的培養瓶或培養皿的內表面光滑；無毒，易于貼附，如果想得到大量的產物，可以增大細胞吸附面積，有利于細胞貼壁生長，C正確。

D；人造牛肉”的培養有利于牛肉的工廠化生產；同時也可減少對土地、飲用水和飼料的需求，且溫室氣體等其他環境污染物也會減少，D正確。

故選ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由嗜鹽細菌合成的一種胞內聚酯；要從某咸水湖中尋找生產PHA菌種，首先要進行目的菌株的篩選，可將咸湖水接種在含鹽量較高的選擇培養基上，篩選培養得到嗜鹽細菌；然后，從選擇培養基上挑選多個單菌落分別進行擴大培養，擴大培養的培養基是液體培養基；最后檢測嗜鹽細菌的數目和PHA的產量，選擇PHA產量最高的嗜鹽細菌作為目的菌株。

【詳解】

A；PHA是由嗜鹽細菌合成的一種胞內聚酯；要篩選嗜鹽細菌，步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含鹽量較高的選擇培養基上，A錯誤；

B；步驟③培養基濃度過高；會導致菌體失水死亡，不利于嗜鹽細菌的生長，B錯誤；

C；步驟④擴大培養應選用液體培養基；液體培養基中無需加入瓊脂，C錯誤；

D；要挑選高產聚羥基脂肪酸酯（PHA）的嗜鹽菌；挑取菌落時，應挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細菌的PHA含量，進行比較，D正確。

故選ABC。13、A:C:D【分析】微生物常見的接種方法（稀釋涂布平板法可用于微生物的計數）：

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

【詳解】

A；平板劃線無法得知稀釋倍數；不能用于活菌計數，故統計洗手前手部細菌的數量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯誤；

B；除圖中操作外；還需要設置一組未接種的空白培養基進行培養，以驗證培養基是否被雜菌污染，B正確；

C；由于當兩個或多個細胞連在一起時；平板上顯示的只是一個菌落，故培養基上的一個菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個、甚至幾個活菌，C錯誤；

D；由于菌落肉眼可見；故初步判斷培養基上菌種的類型，可用肉眼觀察菌體的形態特征，D錯誤。

故選ACD。14、A:B【分析】【分析】

動物細胞培養需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環境：培養液應進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素，以防培養過程中的污染。此外，應定期更換培養液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。②營養：合成培養基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度。④氣體環境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A、動物細胞培養中，培養環境中需要O2，也需要CO2（用來維持培養液的pH）；A錯誤；

B；動物細胞培養不需要脫分化；植物細胞要經過脫分化才形成愈傷組織，B錯誤；

C；動物細胞培養中常用含糖類、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清的液體培養基；C正確；

D；動物細胞培養過程中會出現接觸抑制現象而停止分裂增殖；故培養瓶中的細胞培養到一定階段后要用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續增殖，D正確。

故選AB。15、B:C:D【分析】【分析】

分析題文描述：題述的疫苗是借助基因工程研制而成的；改造利用的原理是基因重組。疫苗屬于抗原，在抗原的刺激下，機體可以產生特異性免疫反應。特異性免疫包括體液免疫與細胞免疫。

【詳解】

A；該疫苗是在流感病毒載體上；插入新冠病毒基因片段制成的，改造利用的原理是屬于基因重組，A錯誤；

B；鼻噴疫苗都配有鼻噴裝置；以鼻噴接種方式外用，是一種無針、無痛的接種方式，B正確；

C；該疫苗插入的新冠病毒基因片段；需要在細胞內經表達產生蛋白質后，才能發揮作用，C正確；

D；該疫苗可以侵入到人體細胞中；使機體既能產生細胞免疫，又能產生體液免疫，D正確。

故選BCD。三、填空題(共9題，共18分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠緣雜交的不親和性細胞遺傳細胞免疫、17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】特定磷酸二酯鍵特異性18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO219、略

【分析】【分析】

1；動物核移植的概念：將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體，核移植得到的動物稱克隆動物；

2；早期胚胎培養的培養液成分；除無機鹽和有機鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分，并需添加動物血清等天然成分。

【詳解】

（1）轉基因動物；試管動物和克隆動物分別在體外得到早期胚胎后；都要通過胚胎移植獲得新個體。

（2）核移植包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易，而體細胞分化程度高，全能性不易表達；核移植常用的減數第二次分裂中期的去核卵母細胞作為受體細胞，其中去核的目的是避免原細胞核中遺傳物質對克隆動物的影響，保證克隆動物的核遺傳物質來自供體細胞。

（3）促性腺激素處理可促使雌性個體超數排卵；即使良種母牛一次排出多枚卵母細胞。精子需要經過獲能處理才能受精；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應；卵細胞膜反應。

（4）要考慮環境承載力；處理好生物與環境的協調與平衡，這體現了生態工程的協調與平衡原理。

【點睛】

本題考查細胞工程、胚胎工程和生態工程的有關知識，意在考查考生理解能力、獲取信息的能力和綜合運用能力。【解析】胚胎移植（或胚胎的早期培養和胚胎移植）胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易MⅡ中期去核卵母細胞促性腺激素獲能透明帶反應協調與平衡20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細胞的接觸抑制。21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】組織單個細胞培養基生長和繁殖22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代23、略

【分析】【詳解】

蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規律及其生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，其結果是生產自然界沒有的蛋白質。【解析】蛋白質工程的結果是生產自然界沒有的蛋白質24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質蛋白質抗體抗原－抗體雜交四、判斷題(共2題，共12分)25、B【分析】【詳解】

胚胎發育早期；細胞數量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯誤。26、A【分析】【詳解】

目前，基因工程技術已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產品的產量等方面，例如轉基因抗蟲植物；將植物花青素代謝相關的基因導入牽牛花中，使其呈現自然界沒有的顏色，提高了觀賞價值；將外源生長素基因導入鯉魚體內，轉基因鯉魚生長速率加快等，所以正確。五、實驗題(共1題，共7分)27、略

【分析】【分析】據圖分析；圖示為利用基因工程大量制備α-淀粉酶的過程，目的基因是α-淀粉酶基因，與體構建基因表達載體，然后將目的基因導入大腸桿菌，接著對目的基因進行檢測與鑒定，最后利用工程菌培養獲得大量的α-淀粉酶產品。

【詳解】（1）α-淀粉酶基因來自于海洋細菌；因此為了利用PCR技術擴增α-淀粉酶基因，必須先獲得細菌的基因組DNA。

（2）目的基因與運載體結合前需要用限制酶對兩者進行切割；延伸是在引物的3’端延伸，為了保證目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位點，且為了使DNA片段能定向插入表達載體，減少自連，常在兩條引物上設計加入不同的限制性酶切位點。

（3）進行擴增時；退火溫度的設定與引物有關，延伸時間的設定與擴增片段的長度有關。

（4）根據題意分析；虛線框內mRNA片段內含有24個堿基，每3個堿基構成一個密碼子，因此包含24÷3=8個密碼子；構成mRNA的堿基有4種，若虛線框后的序列未知，預測虛線框后的第一個密碼子最多有4×4-3=13種。

（5）根據表格數據分析可知，在pH為8.5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl的條件下；α-淀粉酶相對活性為99.5%，活性最高。

【點睛】解答本題的關鍵是基因工程的四個基本步驟以及PCR技術的過程、條件，回憶相關知識點和注意事項，結合提示分析答題。【解析】基因組DNA5’使DNA片段能定向插入表達載體，減少自連②⑥813pH為8．5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl六、綜合題(共3題，共12分)28、略

【分析】【分析】

胚胎移植；又稱受精卵移植，是指將雌性動物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植雌性動物體內，使之繼續發育為新個體的技術。本質是生產胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過程。其意義為：1.可以充分發揮雌性優良個體的繁殖能力。2.大大縮短了供體本身的繁殖周期。3.增加了供體一生繁殖后代的數量。胚胎移植的生理學基礎：（1）同種動物的供，受體的生殖器官的生理變化是相同的，為供體胚胎移入受體提供相同的生理環境。（2）早期胚胎在一定時間內處于游離狀態，為胚胎的收集提供了可能。（3）受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應，為胚胎在受體內的存活提供了可能。（4）供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受任何影響。

（1）

胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術；如體外受精；胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細胞培養等技術。體外受精時，精子必須進行獲能處理，卵細胞培養到減數第二次分裂中期，才能使精卵細胞具備受精能力。

（2）

由于早期胚胎培養最終得到的是胚胎；不是游離的細胞，所以早期胚胎培養時不需要用胰蛋白酶進行處理使之成為游離的細胞。

（3）

胚胎移植是胚胎工程技術的終端環節；其意義為：可以充分發揮雌性優良個體的繁殖能力，大大縮短了供體本身的繁殖周期，增加了供體一生繁殖后代的數量。由于受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應，為外來胚胎能在受體內存活提供了生理學基礎。

（4）

由于10代以內的細胞一般能保證正常的二倍體核型；沒有發生遺傳物質的改變，可保持親本的優