…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷323考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、研究人員用下圖1中質(zhì)粒和圖2中含目的基因的片段構(gòu)建重組質(zhì)粒（圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶切割位點(diǎn)）；將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后進(jìn)行篩選及PCR鑒定。以下敘述不正確的是（）

A.構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程應(yīng)選用BclⅠ和HindⅠ兩種限制酶B.使用DNA連接酶將酶切后的質(zhì)粒和目的基因片段進(jìn)行重組C.能在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的一定是含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌D.利用PCR鑒定含目的基因的大腸桿菌時(shí)應(yīng)選用引物甲和引物丙2、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般也需要脫分化過程B.培養(yǎng)胚胎細(xì)胞時(shí)，原代和傳代培養(yǎng)均可出現(xiàn)接觸抑制C.對(duì)動(dòng)物組織塊和分散的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，效果基本相同D.可以通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得完整的動(dòng)物個(gè)體3、下圖為制備人工種子部分流程示意圖；下列敘述正確的是（）

A.胚狀體是外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的一團(tuán)愈傷組織B.該過程以海藻酸鈉作為營養(yǎng)成分，以CaCl2溶液作為凝固劑C.可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖，為胚狀體的發(fā)育提供營養(yǎng)D.包埋胚狀體的凝膠珠能夠隔絕空氣，有利于人工種子的儲(chǔ)藏4、下列DNA片段中，加入T4DNA連接酶后，在適宜的條件下不可以連接在一起的組合選項(xiàng)是（）。選項(xiàng)片段1片段2A

BCD

A.AB.BC.CD.D5、下圖表示改造哺乳動(dòng)物遺傳特性的兩種途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞使用了顯微注射法B.獲得動(dòng)物1的受體細(xì)胞是受精卵細(xì)胞C.獲得動(dòng)物2的過程體現(xiàn)了受體細(xì)胞具有全能性D.動(dòng)物1和2的獲得過程均運(yùn)用了胚胎移植技術(shù)6、下圖表示牛胚胎移植的流程，其中①～④表示相應(yīng)的操作過程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過程①注射相關(guān)激素，使供、受體同期發(fā)情B.過程②注射促性腺激素，達(dá)到超數(shù)排卵的目的C.過程③主要涉及體內(nèi)受精和從卵巢中沖取胚胎D.過程④的主要目的是選擇適合移植的胚胎7、甲植物具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀；乙植物細(xì)胞質(zhì)中存在抗蟲基因；但與甲植物存在生殖隔離。現(xiàn)欲將乙植物細(xì)胞質(zhì)中的抗蟲基因引入甲植物，科學(xué)家進(jìn)行了如圖所示的實(shí)驗(yàn)。若只考慮細(xì)胞的兩兩融合，則下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是。

A.取甲、乙植株頂芽細(xì)胞的原因是頂芽細(xì)胞生長旺盛，分裂能力強(qiáng)B.B過程可以實(shí)現(xiàn)任意兩種生物細(xì)胞的融合并成功表達(dá)C.原生質(zhì)體成功融合的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁D.C過程篩選的目的是除去由同型細(xì)胞融合成的雜交細(xì)胞8、閱讀下列材料；回答下列題：

材料一1962年下村修在普林斯頓大學(xué)做研究的時(shí)候從某種發(fā)光水母中分離出綠色熒光蛋白（GFP）；GFP在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光。

材料二1992年科學(xué)家克隆出了GFP基因；隨后馬丁·沙爾菲成功地讓GFP基因在大腸桿菌和線蟲中表達(dá)。之后，會(huì)發(fā)光的鼠；豬、貓、兔、蝌蚪、魚也相繼問世。下圖是轉(zhuǎn)基因綠色熒光鼠的培育過程。

材料三錢永健通過改造GFP基因；相繼制造出了藍(lán)色熒光蛋白（BFP）和黃色熒光蛋白（YFP）。

(1)若將GFP基因與目的基因連接起來組成一個(gè)融合基因，再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可被激發(fā)出綠色熒光。下列敘述錯(cuò)誤的是。A．構(gòu)建的“融合基因”無需與其它DNA片段相連，可直接導(dǎo)入受體細(xì)胞B．基因表達(dá)載體的制備需利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶C．導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)的“融合基因”可視為一個(gè)獨(dú)立的遺傳單位D．利用該技術(shù)可以追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布(2)下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因綠色熒光鼠培育過程的敘述，錯(cuò)誤的是。A．基因表達(dá)載體應(yīng)具有復(fù)制能力和表達(dá)能力B．受體細(xì)胞應(yīng)具有良好的全能性表達(dá)能力C．早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液由于含有高溫下易失活的有機(jī)成分，無需滅菌D．代孕母鼠身體各系統(tǒng)的發(fā)育狀況應(yīng)健康，必要時(shí)還需對(duì)其作同期發(fā)情處理(3)錢永健制造出藍(lán)色熒光蛋白（BFP）、黃色熒光蛋白（YFP），這種技術(shù)稱蛋白質(zhì)工程。下列敘述正確的是。A．能定向改造蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)，使之符合人類需要B．由于其操作對(duì)象是蛋白質(zhì)，因此無需構(gòu)建基因表達(dá)載體C．實(shí)質(zhì)是通過改變氨基酸的空間結(jié)構(gòu)從而改造蛋白質(zhì)的功能D．核心操作是對(duì)DNA上的基因進(jìn)行增添、替換、刪除評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)9、2019年，中國科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)，用基因敲除的猴的體細(xì)胞通過克隆技術(shù)培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)藥物D.可以運(yùn)用該基因編輯技術(shù)進(jìn)行生殖性克隆人的研究10、微衛(wèi)星DNA是廣泛分布于真核生物基因組中的簡單重復(fù)序列。由于重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富，因此，微衛(wèi)星DNA可以作為分子標(biāo)記，并有著廣泛應(yīng)用。根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點(diǎn)判斷，這種分子標(biāo)記可應(yīng)用于（）A.人類親子鑒定B.種群遺傳多樣性研究C.誘導(dǎo)基因突變D.冠狀病毒遺傳物質(zhì)測序11、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述正確的是（）A.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織B.將所取的組織先用胃蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞C.在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細(xì)胞全部衰老死亡12、我國的釀酒技術(shù)歷史悠久，古人在實(shí)際生產(chǎn)中積累了很多經(jīng)驗(yàn)?！洱R民要術(shù)》記載：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲勢(shì)盡?！币馑际钱Y中酒液涼了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用盡了。下列敘述正確的是（）A.用酒曲釀酒過程中，為加快微生物代謝需不斷通入O2B.酒液溫度的變化與酒曲中微生物呼吸作用釋放熱量有關(guān)C.起泡是由微生物進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放形成的D.“曲勢(shì)盡”可能是甕中液體pH降低、酒精濃度過高導(dǎo)致13、為探究某物種的等位基因“CST1”與“cst1E81K”的功能，科研人員將表達(dá)CST1和cst1E81K的質(zhì)粒分別導(dǎo)入無法吸收葡萄糖的酵母菌（以麥芽糖為碳源），經(jīng)處理后再將其接種在含不同碳源的培養(yǎng)基上，結(jié)果如下圖所示，下列說法正確的是（）

A.上述酵母菌在接種前的處理是對(duì)其進(jìn)行等濃度梯度的稀釋B.在含葡萄糖類似物的培養(yǎng)基上，導(dǎo)入CST1的酵母菌存活率最高C.據(jù)圖推測，CST1的功能可能是轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞D.導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率大于導(dǎo)入CST1的酵母菌14、基因敲除技術(shù)針對(duì)某個(gè)序列已知但功能未知的序列，通過改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進(jìn)一步對(duì)生物體造成影響，進(jìn)而推測出該基因的生物學(xué)功能。研究人員將某實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的第5號(hào)染色體上的一段DNA敲除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液甘油三酯極高，具有動(dòng)脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)B.動(dòng)脈硬化的產(chǎn)生與遺傳物質(zhì)發(fā)生基因重組有關(guān)C.控制甘油三酯合成的基因就位于第5號(hào)染色體上D.利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能15、用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用和培養(yǎng)基是否被污染需要設(shè)置的對(duì)照組分別是（）A.接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B.未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C.未接種的該選擇培養(yǎng)基D.接種了的該選擇培養(yǎng)基16、大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時(shí)間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述正確的是（）

A.提取DNA時(shí)可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B.將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定C.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理D.根據(jù)電泳結(jié)果，質(zhì)粒上一定沒有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位點(diǎn)，而有限制酶Ⅲ的切割位點(diǎn)17、為了獲得抗蚜蟲棉花新品種，研究人員將雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗莧凝集素基因（ACA）與載體（pBI121）結(jié)合，然后導(dǎo)入棉花細(xì)胞（如下圖所示）。下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康南喾氖牵ǎ?/p>

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ兩種酶處理融合基因和載體可保證基因轉(zhuǎn)錄方向正確C.將棉花細(xì)胞接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉(zhuǎn)基因細(xì)胞D.用PCR技術(shù)可檢測GNA和ACA基因是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)18、一般包括______、______等技術(shù)19、通過統(tǒng)計(jì)平板上的________________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。20、載體具備的條件：①_____。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③______。21、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。22、DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，二苯胺要___________。23、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。24、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共10分)25、研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白質(zhì)）均有抑菌作用；兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，該過程得到的糊狀液體可通過___________除去其中的固體雜質(zhì)。

（2）篩選乳酸菌A時(shí)可選用平板劃線法或____________接種。對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是_______________。實(shí)驗(yàn)前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行____________處理。

（3）培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長提供______________。電泳法純化乳酸菌素時(shí)，若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子量越大，電泳速度___________。

（4）抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在長滿致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈?？赏ㄟ^測定透明圈的______________來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果評(píng)卷人得分五、綜合題(共3題，共18分)26、科研人員在雜交瘤細(xì)胞的基礎(chǔ)上；獲得了雙雜交瘤細(xì)胞，能夠產(chǎn)生雙特異性抗體，該抗體可以同時(shí)結(jié)合兩種抗原。

(1).科研人員獲得上述小鼠的脾臟細(xì)胞；制備兩種雜交瘤細(xì)胞。每種雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體結(jié)構(gòu)；與抗原結(jié)合的情況如圖1所示。

①制備雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需將上述小鼠的脾臟組織，用有關(guān)酶處理獲得單細(xì)胞后，再與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細(xì)胞。將兩種雜交瘤細(xì)胞用_____試劑處理促進(jìn)其融合，在培養(yǎng)基中加入_____（天然成分）培養(yǎng)。如果兩種細(xì)胞成功融合，則會(huì)同時(shí)表達(dá)出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b；這種細(xì)胞稱作雙雜交瘤細(xì)胞。

②抗體由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈和輕鏈均分為恒定區(qū)和可變區(qū)，兩條重鏈依賴于A1或B1進(jìn)行組裝（A1與B1相同），重鏈與輕鏈的組裝依賴于恒定區(qū)A2、a或B2、b（a與b相同）。因此，雙雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體種類較多，其中有一種抗體能同時(shí)與抗原α、β結(jié)合稱為雙特異性抗體，如圖2請(qǐng)將A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中。123456A2B2______α___

③為使雙雜交瘤細(xì)胞只產(chǎn)生圖2所示雙特異性抗體，降低純化分離成本，科研人員對(duì)重鏈、輕鏈的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定區(qū)通過改變_____，進(jìn)而改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)“榫卯”式互補(bǔ)組裝的唯一性，這種改造屬于現(xiàn)代生物技術(shù)中的_____工程。

(2).結(jié)合雙特異性抗體特點(diǎn)，請(qǐng)分析其在腫瘤治療方面的應(yīng)用前景：_____。27、果莢開裂并釋放種子；是植物繁衍后代的重要途徑。模式植物擬南芥果莢的開裂與傳統(tǒng)油料作物具有相似的調(diào)控機(jī)制。研究者對(duì)擬南芥果莢開裂機(jī)理進(jìn)行了系列研究。

（1）植物果莢開裂區(qū)域細(xì)胞的細(xì)胞壁在_______________等酶的作用下被降解；導(dǎo)致果莢開裂。野生型擬南芥果莢成熟后會(huì)完全開裂，以便種子傳播。

（2）研究者通過篩選擬南芥T-DNA插入突變體庫，獲得兩個(gè)果莢不開裂的突變體甲和乙。檢測發(fā)現(xiàn)突變體甲的M酶活性喪失，推測編碼M酶的M基因由于插入T-DNA，突變?yōu)閙基因。研究者利用不同的引物對(duì)，分別進(jìn)行PCR，檢測野生型擬南芥及突變體甲的基因型，結(jié)果如圖1所示，驗(yàn)證了上述推測。在圖2中標(biāo)出引物1、2的位置及方向_____。

（3）進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)突變體乙的E酶活性喪失。另有一突變體丙的果莢開裂程度介于不開裂與完全開裂之間（中等開裂）。突變體乙、丙的果莢開裂程度分別由E/e、A/a基因控制。將上述突變體進(jìn)行雜交，后代表型及比例如下表所示。雜交組合F1表現(xiàn)型F2表現(xiàn)型及比例乙×丙完全開裂完全開裂:中等開裂:不開裂＝9:3:4甲×丙完全開裂完全開裂:中等開裂:不開裂＝2:1:1

圖3為甲與丙雜交所得F1的部分染色體示意圖，基因M、m的位置已標(biāo)出，在圖3中標(biāo)出基因E/e、A/a可能的位置________。

據(jù)上述信息，預(yù)測甲與乙雜交所得F1的表現(xiàn)型及比例為______________，F(xiàn)1自交所得F2的表現(xiàn)型及比例為_________________。

（4）突變體丙體內(nèi)的A蛋白缺失。為確定A蛋白的功能；研究者檢測了野生型及突變體丙體內(nèi)E基因及M基因的轉(zhuǎn)錄量，結(jié)果如圖4所示。

根據(jù)圖4數(shù)據(jù)推測A蛋白的功能是_________，突變體丙果莢開裂程度下降的原因是__________。28、已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)（P），該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，由305個(gè)氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)（P1）不但保留P的功能；而且具有了酶的催化活性。

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)_______________知道基因的全部序列。在PCR體系中除了模板、原料外，還應(yīng)加入_____________________________________________。

（2）蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過_______________和_______________；進(jìn)而確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得基因，再經(jīng)表達(dá)；純化獲得蛋白質(zhì)，之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物功能進(jìn)行鑒定。

（3）“CRISPR/Cas9”技術(shù)是目前常用改造DNA序列的一種方法，下圖為向?qū)NA引導(dǎo)Cas9蛋白切割目標(biāo)DNA示意圖。其中Cas9蛋白是一種_______________酶。Cas9蛋白和特定的向?qū)б龑?dǎo)序列可利用_______________法導(dǎo)入到動(dòng)物受精卵或干細(xì)胞中發(fā)揮基因編輯作用。

（4）經(jīng)改造后的細(xì)胞，若想工業(yè)化大量制備蛋白質(zhì)P1，可利用_______________和_______________技術(shù)將改造細(xì)胞轉(zhuǎn)化為即可產(chǎn)生P1又能無限增殖的細(xì)胞，最后自培養(yǎng)液中可得到目的蛋白質(zhì)。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、C【分析】【分析】

根據(jù)質(zhì)粒的特點(diǎn)確定限制酶的種類。

1；所選限制酶要與切割目的基因的限制酶相一致；以確保具有相同的黏性末端。

2；質(zhì)粒作為載體必須具備標(biāo)記基因等；所以所選擇的限制酶盡量不要破壞這些結(jié)構(gòu)，如果所選酶的切點(diǎn)不止一個(gè)，則切割重組后可能丟失某些片段，若丟失的片段含復(fù)制起點(diǎn)區(qū)，則切割重組后的片段進(jìn)入受體細(xì)胞后不能自主復(fù)制。

【詳解】

A；選擇的限制酶應(yīng)在目的基因兩端存在識(shí)別位點(diǎn)；但BamHⅠ可能使質(zhì)粒中的兩種標(biāo)記基因都破壞，因此只能選BclⅠ和HindⅢ兩種限制酶切割，A正確；

B；酶切后的質(zhì)粒和目的基因片段要用DNA連接酶連接；構(gòu)建重組載體，B正確；

C；能在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的也可能是只含有質(zhì)粒的大腸桿菌；C錯(cuò)誤；

D；PCR技術(shù)要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結(jié)合；沿相反的方向合成子鏈，故所用的引物組成為圖2中引物甲和引物丙，D正確。

故選C。2、B【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2；細(xì)胞系：細(xì)胞株傳到50左右不能再繼續(xù)傳代；部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變，具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn)，可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞系。

【詳解】

A；植物組織培養(yǎng)技術(shù)經(jīng)過脫分化和再分化兩個(gè)過程；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不經(jīng)過脫分化和再分化過程，A錯(cuò)誤；

B；正常的動(dòng)物細(xì)胞無論是原代培養(yǎng)還是傳代培養(yǎng)均會(huì)有接觸抑制；B正確；

C；細(xì)胞生長具有接觸抑制的現(xiàn)象；因此對(duì)動(dòng)物組織塊和分散的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，效果不同，C錯(cuò)誤；

D；動(dòng)物體細(xì)胞不具有全能性；培養(yǎng)高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞一般不能發(fā)育成幼體，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】3、C【分析】【分析】

1、據(jù)圖分析，支柱組織培養(yǎng)誘導(dǎo)形成胚狀體，用海藻酸鈉溶液包埋胚狀體，注射到CaCl2溶液中形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)；用無菌水沖洗形成人工種子。

2；人工種子是指通過植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料；通過人工薄膜包裝得到的種子。

3；人工種子包括胚狀體、人工胚乳和人工種皮；其中胚狀體是通過脫分化和再分化過程形成的；人工胚乳可為種子提供營養(yǎng)；人工種皮具有保護(hù)作用（可添加植物生長調(diào)節(jié)劑以調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育。）

【詳解】

A；外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的愈傷組織；再分化才能形成胚狀體，A錯(cuò)誤；

B、該過程以海藻酸鈉作為包埋材料，以CaCl2溶液作為凝固劑；B錯(cuò)誤；

C；可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖；為胚狀體提供碳源和能量，C正確；

D；包埋胚狀體的凝膠珠能夠保護(hù)胚狀體；有利于人工種子的儲(chǔ)藏，D錯(cuò)誤。

故選C。4、A【分析】【分析】

根據(jù)酶的來源不同，可以將DNA連接酶分為兩類：一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E·coliDNA連接酶；另一類是從T4噬菌體中分離出來的，稱為T4DNA連接酶。這兩類酶都是將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，但這兩種酶的作用有所差別：E·coliDNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來，不能將雙鏈DNA片段平末端之間進(jìn)行連接；而T4DNA連接酶既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端；又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端，但連接平末端之間的效率比較低。

【詳解】

A；片段1、2為不互補(bǔ)的黏性末端；不可以連接在一起，A錯(cuò)誤；

BC；片段1、2為均為平末端；可以連接在一起，BC正確；

D；片段1、2為互補(bǔ)的黏性末端；可以連接在一起，D正確。

故選A。5、C【分析】【分析】

分析題圖：動(dòng)物1是含有外源基因的受體細(xì)胞直接發(fā)育而來的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；動(dòng)物2是采用基因工程；核移植技術(shù)培養(yǎng)形成的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞時(shí)；將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞使用了顯微注射法，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的獲得需將目的基因?qū)胧芫眩还诗@得動(dòng)物1的受體細(xì)胞是受精卵細(xì)胞，因?yàn)槭芫训娜苄愿?，B正確；

C；由重組細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)完整的生物體動(dòng)物2依據(jù)的原理是全能性；受體細(xì)胞不具有全能性，C錯(cuò)誤；

D；兩種動(dòng)物的獲得均運(yùn)用了胚胎移植技術(shù)（分別需要移植到動(dòng)物1和動(dòng)物2體內(nèi)）；D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供；受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用孕激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

題圖分析：圖示為牛胚胎移植的流程；其中①表示同期發(fā)情處理；②表示超數(shù)排卵；③表示沖卵；④表示胚胎的收集；檢查、培養(yǎng)。

【詳解】

A；圖中過程①表示供、受體同期發(fā)情處理；該過程可通過注射孕激素實(shí)現(xiàn)，A正確；

B；過程②是注射促性腺激素；達(dá)到超數(shù)排卵，從而獲得較多的卵母細(xì)胞，B正確；

C；過程③為體內(nèi)受精和從輸卵管中沖取胚胎；C錯(cuò)誤；

D；過程④的主要目的是選擇適合移植的胚胎；如可選擇健康的桑葚胚和囊胚，D正確。

故選C。7、B【分析】【分析】

題圖分析：該圖為體細(xì)胞雜交過程；其中A為去除細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體，可以酶解法，B為誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，可以用聚乙二醇處理，融合的雜種細(xì)胞應(yīng)該具備乙品種細(xì)胞質(zhì)中的抗性基因和甲品種的控制多種優(yōu)良性狀的核基因。

【詳解】

A；頂芽細(xì)胞分化程度低；分裂能力強(qiáng)，生長旺盛，因此該實(shí)驗(yàn)取甲、乙植株頂芽細(xì)胞，A正確；

B；B過程不能實(shí)現(xiàn)任意兩種生物細(xì)胞的融合并成功表達(dá)；融合后細(xì)胞中常常會(huì)有染色體的部分丟失，可能導(dǎo)致某些基因不能表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C；植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是融合的原生質(zhì)體形成新的細(xì)胞壁；進(jìn)而成為雜種細(xì)胞，C正確；

D；甲原生質(zhì)體和乙原生質(zhì)體融合時(shí)；會(huì)出現(xiàn)甲與甲、乙與乙、甲與乙融合，而C過程篩選的目的是除去由同型細(xì)胞融合成的雜交細(xì)胞，D正確。

故選B。8、略

【分析】【分析】

圖中①為表達(dá)載體的構(gòu)建；②為目的基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，③為早期胚胎的發(fā)育（體外培養(yǎng)），④為早已胚胎移植到代孕母體，⑤為胚胎發(fā)育后出生。

(1)

A；構(gòu)建的“融合基因”需與運(yùn)載體（一般為質(zhì)粒DNA片段）一起構(gòu)建表達(dá)載體后才可導(dǎo)入受體細(xì)胞；A錯(cuò)誤；

B；基因表達(dá)載體的制備需利用限制性核酸內(nèi)切酶（產(chǎn)生相同的黏性末端）和DNA連接酶（將目的基因與與載體的DNA片段連接起來）；B正確；

C；導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)的“融合基因”可視為一個(gè)獨(dú)立的遺傳單位；其有自己的啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，C正確；

D；利用該技術(shù)可以通過熒光顯示位置；追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布，D正確。

故選A。

(2)

A；基因表達(dá)載體應(yīng)具有復(fù)制能力和表達(dá)能力；以保證能夠正常表達(dá)出熒光蛋白，A正確；

B；受體細(xì)胞應(yīng)具有良好的全能性表達(dá)能力；以保證目的基因能正常表達(dá)，B正確；

C；早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液需滅菌；以保證早期胚胎不被雜菌污染，C錯(cuò)誤；

D；代孕母鼠身體各系統(tǒng)的發(fā)育狀況應(yīng)健康；必要時(shí)還需對(duì)其作同期發(fā)情處理，以保證胚胎移植后能夠正常發(fā)育，D正確。

故選C。

(3)

A；認(rèn)為制造出不同的熒光擔(dān)保；說明該技術(shù)能定向改造蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)，使之符合人類需要，A正確；

B；由題意可知；通過改造GFP基因，制造出對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，B錯(cuò)誤；

C；實(shí)質(zhì)是通過改變基因的堿基排列順序從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)；影響蛋白質(zhì)的功能，C錯(cuò)誤；

D；核心操作是對(duì)基因表達(dá)載體的構(gòu)建；D錯(cuò)誤。

故選A?！窘馕觥?1)A

(2)C

(3)A二、多選題(共9題，共18分)9、B:D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細(xì)胞通過克隆技術(shù)（屬于無性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，A正確；

B；經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯(cuò)誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)藥物；C正確；

D；不能利用該技術(shù)進(jìn)行克隆人的研究；D錯(cuò)誤。

故選BD。

【點(diǎn)睛】10、A:B【分析】【分析】

微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡單重復(fù)序列；由于重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富，可以作為分子標(biāo)記應(yīng)用于人類親子鑒定；種群遺傳多樣性研究。

【詳解】

AB；微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡單重復(fù)序列；且重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間呈高度特異性，因此可用于人類親子鑒定、物種間親緣關(guān)系鑒定、物質(zhì)和遺傳多樣性的研究等，AB正確；

C；誘導(dǎo)基因突變的因素有物理因素、化學(xué)因素和生物因素；與微衛(wèi)星DNA的特性無關(guān)，C錯(cuò)誤；

D；冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是RNA；其測序與微衛(wèi)星DNA的特性無關(guān)，D錯(cuò)誤。

故選AB。11、A:C【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和pH。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

【詳解】

A；用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織；因?yàn)榕咛セ蛴g動(dòng)物的器官或組織分裂能力旺盛，A正確；

B；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中需先用胰蛋白酶使所取的組織分散成單個(gè)細(xì)胞；胃蛋白酶的最適pH值呈酸性，而細(xì)胞培養(yǎng)液的pH大多數(shù)是7.2-7.4，B錯(cuò)誤；

C；細(xì)胞存在接觸抑制；因此在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液進(jìn)行傳代培養(yǎng)，C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)傳到50左右不能再繼續(xù)傳代；部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變，具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn)，可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，D錯(cuò)誤。

故選AC。

【點(diǎn)睛】12、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲釀酒菌種是酵母菌；代謝類型是兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【詳解】

A、用酒曲釀酒是利用了微生物細(xì)胞呼吸的原理，進(jìn)行的是酵母菌的無氧發(fā)酵，不能一直通入O2；A錯(cuò)誤；

B；由于呼吸作用會(huì)產(chǎn)熱；故會(huì)導(dǎo)致酒液溫度產(chǎn)生變化，B正確；

C、起泡是由微生物進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放到發(fā)酵液中形成的；C正確；

D；“曲勢(shì)盡”可能是隨著發(fā)酵的進(jìn)行甕中液體pH降低、酒精濃度過高導(dǎo)致酵母菌大量死亡；D正確。

故選BCD。13、A:C【分析】【分析】

從左圖看出；在添加麥芽糖的培養(yǎng)基中空質(zhì)粒組；導(dǎo)入CST1和導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌的酵母菌菌落數(shù)目相差不大，但在麥芽糖+葡萄糖類似物組中，導(dǎo)入CST1的酵母菌菌落數(shù)目最少，說明吸收葡萄糖類似物最多。

【詳解】

A；從圖中可以看出；后一稀釋濃度是前一稀釋濃度的5倍，所以是進(jìn)行等濃度梯度的稀釋，A錯(cuò)誤；

B；在含葡萄糖類似物的培養(yǎng)基上；導(dǎo)入CST1的酵母菌菌落顏色最淺，說明存活率最低，B錯(cuò)誤；

C；導(dǎo)入CST1的酵母菌在葡萄糖類似物的培養(yǎng)基上菌落數(shù)目降低；由于葡萄糖類似物被吸收后可以殺死酵母菌，因此可以推測CST1能轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖類似物進(jìn)入酵母菌，所以其功能可能是轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞，C正確；

D、在麥芽糖+葡萄糖類似物的培養(yǎng)基中，導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌菌落數(shù)目多，說明其存活率更高，由于葡萄糖類似物被吸收后可以殺死酵母菌，因此可以推測導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率小于導(dǎo)入CST1的酵母菌；D錯(cuò)誤。

故選C。14、B:C【分析】【分析】

根據(jù)題意；將某實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的第5號(hào)染色體上的一段DNA敲除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液甘油三酯極高，具有動(dòng)脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代，說明該變異是一種可遺傳的變異。

【詳解】

A；DNA敲除后結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液甘油三酯極高；具有動(dòng)脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代，說明敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)，A正確；

B；動(dòng)脈硬化的產(chǎn)生與遺傳物質(zhì)發(fā)生可遺傳的變異有關(guān)；不能說明是基因重組，B錯(cuò)誤；

C；上述信息只能表明敲除的DNA片段與甘油三酯代謝有關(guān)；不能表明控制甘油三酯合成的基因就位于第5號(hào)染色體上，C錯(cuò)誤；

D；由題干信息可知；利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能，D正確。

故選BC。15、A:C【分析】【分析】

對(duì)照實(shí)驗(yàn)是指除所控因素外其它條件與被對(duì)照實(shí)驗(yàn)完全對(duì)等的實(shí)驗(yàn)。判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用；則接種了的選擇培養(yǎng)基是實(shí)驗(yàn)組，而接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基屬于對(duì)照組。

【詳解】

根據(jù)單一變量原則；對(duì)照組需要與選擇培養(yǎng)基一樣接種；培養(yǎng)，因此用接種了的普通培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨）和選擇培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基具有選擇的功能，作為選擇培養(yǎng)基合格的依據(jù)；

而培養(yǎng)基是否被污染需要設(shè)置的對(duì)照是相同的選擇培養(yǎng)基但不接種；在相同的條件下培養(yǎng)，觀察是否有菌落產(chǎn)生。AC正確。

故選AC。16、A:B:C【分析】【分析】

DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA時(shí)可加入酒精，是為了讓DNA析出，蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解，A正確；

B；將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑在沸水條件進(jìn)行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，B正確；

C；DNA帶負(fù)電；電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理，C正確；

D；因?yàn)橘|(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個(gè)切割位點(diǎn)，也可能沒有切割位點(diǎn)，D錯(cuò)誤。

故選ABC。17、A:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是Ca2+處理法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；兩個(gè)基因中都有限制酶BsaBⅠ的一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)；用該限制酶切割后再用DNA連接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正確；

B；GNA-ACA融合基因的兩端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn)；而質(zhì)粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn)，但方向不一致，用兩酶切割，正好是反向連接目的基因和運(yùn)載體，B錯(cuò)誤；

C；運(yùn)載體上帶有卡那霉素的抗性基因；沒有氨芐青霉素的抗性基因，轉(zhuǎn)基因細(xì)胞在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能存活，C錯(cuò)誤；

D；用PCR技術(shù)擴(kuò)增GNA和ACA基因后；再通過分子雜交或電泳的方式，可檢測是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中，D正確。

故選AD。三、填空題(共7題，共14分)18、略

【解析】①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30～30020、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩(wěn)定存在遺傳至下一代表達(dá)和發(fā)揮22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現(xiàn)配現(xiàn)用23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）24、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】會(huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共10分)25、略

【分析】【詳解】

(1)植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等。具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來決定。柚皮易焦糊，宜采用壓榨法提取柚皮精油。壓榨過程中得到的糊狀液體需用過濾法除去其中固定雜質(zhì)。

(2)篩選、純化培養(yǎng)某一特定微生物時(shí)，常用平板劃線法或稀釋涂布平板法。為防止雜菌的污染，需對(duì)器具培養(yǎng)基等進(jìn)行消毒滅菌處理，培養(yǎng)基宜采用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行高溫滅菌處理，而超凈工作臺(tái)常使用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒處理。

(3)微生物培養(yǎng)過程中為微生物的生長提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮豐富的物質(zhì)。電泳法純化特定生物成分，是利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，這些不同使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中不同分子的分離。當(dāng)待分離分子所帶電荷相同時(shí)，分子量越大，電泳速度越慢。

(4)抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)；在長滿致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。

【點(diǎn)睛】【解析】①.壓榨②.過濾③.稀釋涂布平板法(或：稀釋混合平板法)④.高壓蒸汽滅菌鍋⑤.消毒⑥.氮源⑦.越慢⑧.直徑(或：大小)五、綜合題(共3題，共18分)26、略

【分析】【分析】

1、題圖分析：圖1中是抗原a、β分別注射到小鼠體內(nèi)，小鼠分別產(chǎn)生的a、β的兩種單克隆抗體；圖2中是雙雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的雙特異性抗體。

2、圖中抗體由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈和輕鏈均分為恒定區(qū)和可變區(qū)，兩條重鏈依賴于A1或B1進(jìn)行組裝(A1與B1相同)，重鏈與輕鏈的組裝依賴于恒定區(qū)A2、a或B2、b(a與b相同)。

【詳解】

（1）①制備雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需將上述小鼠的脾臟組織，用胰蛋白酶處理獲得單細(xì)胞后，再與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細(xì)胞。將兩種雜交瘤細(xì)胞用PEG試劑處理促進(jìn)其融合，在培養(yǎng)基中加入動(dòng)物血清等成分培養(yǎng)。如果兩種細(xì)胞成功融合，則會(huì)同時(shí)表達(dá)出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b；這種細(xì)胞稱作雙雜交瘤細(xì)胞。

②由于圖2抗體是雙雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的雙特異性抗體,可變區(qū)的重鏈1和2位置存在A2或B2，1是A2,2為B2,根據(jù)圖1信息判斷(a與A2在可變區(qū)并結(jié)合a,b與B2在可變區(qū)并結(jié)合),圖2中3與1(A2)在可變區(qū)并結(jié)合5,故3對(duì)應(yīng)a,5對(duì)應(yīng)a,同時(shí)4與2(B2)在可變區(qū)并結(jié)合6,故4對(duì)應(yīng)b,6對(duì)應(yīng)β,因此3、4、5、6分別對(duì)應(yīng)a.b、a、β。123456abβ

③使雙雜交瘤細(xì)胞只產(chǎn)生圖2所示雙特異性抗體，降低純化分離成本，科研人員可對(duì)重鏈、輕鏈的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造獲得。改造思路是在A、B、a、b的恒定區(qū)通過改變氨基酸種類；進(jìn)而改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，這種改造屬于現(xiàn)代生物技術(shù)中的蛋白質(zhì)工程。

（2）雙雜交瘤細(xì)胞能夠產(chǎn)生雙特異性抗體；該抗體可以同時(shí)結(jié)合兩種抗原。因此雙特異性抗體在腫瘤治療方面的應(yīng)用前景是：研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，特異性殺死腫瘤細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題考查單克隆抗體的制備過程和動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問題的能力，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查?！窘馕觥俊拘☆}1】①.PEG（或“聚乙二醇”）②.動(dòng)物血清③.a④.b⑤.β⑥.氨基酸種類（或“序列”）⑦.蛋白質(zhì)。

【小題2】研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，特異性殺死腫瘤細(xì)胞27、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣；將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等；

2；基因自由組合定律的內(nèi)容及實(shí)質(zhì)：

（1）自由組合定律：控制不同性狀的遺傳因子的分離和組合是互不干擾的；在形成配子時(shí)；決定同一性狀的成對(duì)的遺傳因子彼此分離，決定不同性狀的遺傳因子自由組合；

（2）實(shí)質(zhì)：位于非同源染色體上的非等位基因的分離或組合是互不干擾的。在減數(shù)分裂過程中；同源染色體上的等位基因彼此分離的同時(shí)，非同源染色體上的非等位基因自由組合；

（3）