PAGEPAGE6課時作業16生物技術實踐時間：45分鐘分值：135分非選擇題(每小題15分，共135分)1．(2024·廣西柳州質檢)下面是果酒和果醋制作的試驗流程和發酵裝置。依據圖示回答下列問題：(1)完成圖1中的試驗流程醋酸發酵。(2)圖2裝置中的充氣口在酒精發酵過程中要關閉，否則可能發生使發酵液變酸的反應C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O(寫出該反應式)，而排氣口在該過程中應開放，排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，目的是避開空氣中其他微生物進入發酵裝置(防止空氣中的微生物污染)。(3)葡萄酒呈現紅色的緣由是紅色葡萄皮中的色素溶解在發酵液中，重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精反應呈灰綠色。(4)果酒和果醋的制作分別利用了酵母菌和醋酸菌兩種微生物的發酵原理，后者在結構上的主要特點是無以核膜為界限的細胞核。解析：在酒精發酵階段，充氣口應關閉，否則醋酸菌會將乙醇氧化為醋酸，從而使發酵液變酸。酵母菌為真菌，屬于真核生物，醋酸菌為細菌，屬于原核生物，兩者在結構上的主要區分是有無以核膜為界限的細胞核。2．回答與泡菜腌制和亞硝酸鹽測定有關的問題：(1)制作泡菜時，為縮短發酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取適量酸奶，用無菌蒸餾水稀釋后，再用接種環蘸取少量的稀釋液，在MRS乳酸菌專用培育基的平板上劃線，以獲得乳酸菌單菌落。如圖所示的劃線分別操作，正確的是B。(2)泡菜腌制過程中，會產生有機酸、醇類和亞硝酸鹽，其中醇類物質是由假絲酵母進行厭氧呼吸產生。亞硝酸鹽對人體有害，為測定泡菜中亞硝酸鹽的含量，從泡菜中提取亞硝酸鹽，與對氨基苯磺酸發生重氮化反應，再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合，形成玫瑰紅色染料。(3)已知乳酸菌中的亞硝酸還原酶能降解亞硝酸鹽。在肯定的腌制時間內，隨著腌制時間的延長，泡菜中亞硝酸鹽含量漸漸降低，是由于在厭氧和酸性環境下亞硝酸鹽被亞硝酸還原酶降解。解析：(1)制作泡菜時，為縮短發酵周期，腌制前可加入乳酸菌。本題中，乳酸菌的接種方法為平板劃線法。平板劃線法中用接種環蘸取菌液進行劃線。第一次劃三至五條平行線，然后灼燒接種環，待其冷卻后，從第一區域劃線的末端起先往其次區域內劃線。重復以上操作，在三、四、五區域內劃線，要留意不要將最終一區的劃線與第一區相連，因此正確的操作是B。(2)厭氧條件下假絲酵母厭氧呼吸產生醇類物質。檢測亞硝酸鹽的含量通常采納比色法，原理是亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應，再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合，形成玫瑰紅色染料。(3)亞硝酸還原酶在厭氧和酸性環境下能夠降解亞硝酸鹽，故在肯定的腌制時間內，泡菜中亞硝酸鹽含量漸漸降低。3．(2024·黃岡二模)微博傳言手機上的細菌比馬桶多。如圖，央視和北京衛視通過試驗展示調查結果?；卮鹣铝邢嚓P問題：(1)配制培育基時，除了滿意基本的養分條件外，還須要滿意微生物生長對特別養分物質、pH、O2(氧氣)的要求。(2)據圖，兩電視臺均采納稀釋涂布平板法接種，該方法須要B、C、D、E(多選)。A．接種環B．酒精燈C．移液管D．涂布器E．無菌水(3)通過視察菌落的形態、大小、隆起程度、顏色、光澤度、邊緣形態(寫出兩種)，可知手機屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。(4)按圖操作的取樣面積取樣，試驗員測定某手機屏幕的細菌數量。將10mL菌懸液進行濃度梯度稀釋，分別取0.1mL稀釋倍數為102的樣品液接種到三個培育基上。培育一段時間后，統計菌落數分別為48、50、52，則該手機屏幕的細菌數為2×104個/平方厘米。該試驗比照組應如何設置取培育基涂布0.1_mL無菌水，放置于和試驗組相同的條件下進行培育；或取未接種的空白培育基，放置于和試驗組相同的條件下進行培育。解析：(1)配制培育基時，除了滿意基本的養分條件外，還須要滿意微生物生長對特別養分物質、pH以及O2(氧氣)的要求。(2)依據培育的效果圖可以推斷：兩電視臺均采納的接種方法是稀釋涂布平板法。該方法在將菌液進行一系列濃度梯度稀釋時，需運用E無菌水，用C移液管吸取1mL培育的菌液或稀釋液；涂布操作的流程為：將D涂布器浸在盛有酒精的燒杯中；取少量菌液(不超過0.1mL)滴加到培育基表面；將沾有少量酒精的涂布器在B酒精燈火焰上引燃；待酒精燃盡后，冷卻8～10s；用涂布器將菌液勻稱地涂布在培育基表面，涂布時可轉動培育皿，使菌液分布勻稱。(3)通過視察菌落的形態、大小、隆起程度、顏色、光澤度、邊緣形態等菌落特征，可知手機屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。(4)按圖操作的取樣面積為5×5＝25平方厘米。試驗員測定某手機屏幕的細菌數量，將10mL菌懸液進行濃度梯度稀釋，分別取0.1mL稀釋倍數為102的樣品液接種到三個培育基上，培育一段時間后，統計菌落數分別為48、50、52，則1mL菌懸液的細菌數為(48＋50＋52)÷3÷0.1×102＝5×104個/mL，因此該手機屏幕的細菌數為5×104個/mL×10mL÷25平方厘米＝2×104個/平方厘米。為了解除無菌水或空白培育基被雜菌污染，確保平板上長出的菌落來自取樣的手機和馬桶，該試驗比照組的設置為：培育基涂布0.1mL無菌水放置于和試驗組相同的條件下進行培育，或取未接種的空白培育基放置于和試驗組相同的條件下進行培育。4．(2024·山西臨汾一中高二期末)植物芳香油具有抗菌、促進細胞新陳代謝及細胞再生功能，而某些芳香油能調整人體的生理及心理活動。請回答下列問題：(1)植物芳香油的提取可采納的方法有蒸餾法、萃取法和壓榨法。(2)玫瑰精油稱為“液體黃金”，多用于制造高級香水等化妝品。提取出的玫瑰精油不含有任何添加劑或化學原料，主要是通過水蒸氣蒸餾法提取。蒸餾時收集的蒸餾液不是純玫瑰精油，緣由是玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來，所得到的是油水混合物。(3)用壓榨法提取柚皮精油，得到的糊狀液體可通過過濾除去其中的固體雜質。(4)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，干燥過程應限制好溫度和時間以防止胡蘿卜素分解；萃取過程中宜采納水浴方式加熱以防止溫度過高。常用紙層析法鑒定所提取的胡蘿卜素。解析：(1)蒸餾法、萃取法、壓榨法是常用的提取植物芳香油的方法。(2)玫瑰精油的化學性質穩定，難溶于水，易溶于有機溶劑，可通過水蒸氣蒸餾法提?。徽麴s法提取玫瑰精油過程中由于玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來，因此所收集的蒸餾液不是純玫瑰精油而是油水混合物，要得到較純的玫瑰精油還需將玫瑰精油和水分開。(3)采納壓榨法提取芳香油時獲得的糊狀液體，可先用一般布袋過濾除去固體殘渣。(4)胡蘿卜素不是很穩定，溫度過高、干燥時間過長會導致其分解，所以在提取胡蘿卜素時，干燥過程應限制好溫度和時間以防止胡蘿卜素分解；萃取劑一般屬于易燃、易爆物，所以萃取過程中宜采納水浴方式加熱以防止溫度過高；常用紙層析法鑒定所提取的胡蘿卜素。5．(2024·西藏日喀則一中第一次月考)紅細胞含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶O2和CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行試驗，來提取和分別血紅蛋白。請回答下列有關問題：(1)血紅蛋白的提取和分別一般可分為四步：樣品處理、粗分別、純化和純度鑒定。(2)試驗前取簇新的血液，要切記在采血容器中預先加入檸檬酸鈉，取血回來，立刻進行離心，收集血紅蛋白溶液。①加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固。②以上所述的過程即是樣品處理，它包括紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分別血紅蛋白溶液。(3)收集的血紅蛋白溶液要進行粗分別，其方法是透析。(4)然后通過凝膠色譜法將樣品純化，樣品純化的目的是去除大分子雜質蛋白。最終經SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。(5)電泳利用了待分別樣品中各種分子帶電性質的差異以及分子的大小、形態的不同，使帶電分子產生不同的遷移速率，從而實現樣品中各種分子的分別。解析：(1)血紅蛋白提取和分別一般分為四步：樣品處理、粗分別、純化和純度鑒定。(2)①實行血液時要在采血容器中預先加入檸檬酸鈉，以防止血液凝固。②樣品處理包括紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分別血紅蛋白溶液。(3)將收集的血紅蛋白溶液在透析袋中透析進行樣品的粗分別。(4)通過凝膠色譜法將樣品純化，純化的目的是去除大分子雜質蛋白，最終經SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。(5)電泳利用了待分別樣品中各種分子帶電性質的差異以及分子的大小、形態的不同，使帶電分子產生不同的遷移速率，從而實現樣品中各種分子的分別。6．(2024·湖南衡陽二模)已知青蒿素，無色針狀晶體，易溶于有機溶劑，不易揮發；而玫瑰精油化學性質穩定，難溶于水，易溶于有機溶劑，易揮發。依據生物相關學問，回答下列問題。(1)從黃花蒿中提取青蒿素時，應采納萃取法。理由是青蒿素為非揮發性物質，不能隨水蒸氣蒸餾出，但易溶于有機溶劑；并且通常在提取前將黃花蒿莖葉進行粉碎和干燥，以提高效率；干燥過程應限制好溫度和時間，以防止青蒿素分解。(2)提取過程中宜采納水浴加熱以防止燃燒、爆炸；所得液體濃縮前需進行過濾。(3)玫瑰精油化學性質穩定，難溶于水，易溶于有機溶劑，簡便易行的提取方法是水蒸氣蒸餾中的水中蒸餾法，在提取過程中分別加入NaCl(目的是增加水的比重，使油水分層)、Na2SO4；要提高玫瑰精油的產品質量，應采納的措施是(嚴格限制蒸餾溫度)延長蒸餾時間。解析：(1)青蒿素為非揮發性物質，不能隨水蒸氣蒸餾出，但易溶于有機溶劑，所以從黃花蒿中提取青蒿素時，應采納萃取法；為提高效率，在用萃取法提取青蒿素前，通常將黃花蒿莖葉進行粉碎和干燥處理；干燥過程應限制好溫度和時間，以防止青蒿素分解。(2)提取過程中所得的液體濃縮前需進行過濾。(3)玫瑰精油化學性質穩定，難溶于水，易溶于有機溶劑，常用水蒸氣蒸餾中的水中蒸餾法提?。粸樵黾铀谋戎?，使油水分層，可在提取過程中加入NaCl；要提高玫瑰精油的產品質量，應嚴格限制蒸餾溫度，延長蒸餾時間。7．“樹橘柚者，食之則甘，嗅之則香”。橘子全部都是寶；不僅果肉的養分價值高，藥物價值較高，其皮、核、絡、葉都是“地道藥材”。請回答下列問題：(1)橘皮精油是一種廣譜性的殺蟲劑，具有很高的經濟價值，常采納壓榨法提取橘皮精油。若實行水中蒸餾法提取，橘皮精油的有效成分會發生部分水解和產生原料焦糊的問題。(2)如圖是提取橘皮精油的試驗流程示意圖：圖中①過程處理的作用是破壞細胞結構，分解果膠，防止橘皮壓榨時滑脫，提高出油率；③過程一般加入相當于橘皮質量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，其目的是使橘皮精油易于與水分別。(3)若想利用橘子生產果醋須要用到醋酸菌，醋酸菌的最適生長溫度為30～35_℃，當氧氣和糖源都足夠時，醋酸菌可將柑橘汁中的糖分解成醋酸。解析：(1)由于橘皮精油的有效成分在水中蒸餾過程中會發生部分水解，同時水中蒸餾會導致原料焦糊問題，因此一般采納壓榨法提取橘皮精油。(2)圖中①過程是將干燥去水的橘皮用石灰水浸泡，該處理的作用是破壞細胞結構，分解果膠，防止橘皮壓榨時滑脫，提高出油率。③過程為壓榨，在壓榨過程中一般加入相當于橘皮質量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4并將pH調至7～8，其目的是使橘皮精油易于與水分別。(3)醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃，當氧氣和糖源都足夠時，醋酸菌可將柑橘汁中的糖分解成醋酸。8．石油是人類重要的化工原料之一，其在給人類生產生活帶來便利的同時也對陸地和海洋造成污染。下面是科研工作者分別能分解石油污染物的假單孢桿菌的過程。請依據流程圖回答下列問題：土壤取樣→A→梯度稀釋→涂布到培育基上→篩選目的菌株(假單孢桿菌)(1)A過程為擴大培育(或選擇培育)，目的是增加假單孢桿菌的濃度，該培育基中應當以石油為唯一碳源。該試驗過程中須要設置完全培育液比照組，將菌液稀釋相同的倍數，比照組培育基上生長的菌落數目應明顯多于(填“多于”或“少于”)選擇培育基上的菌落數目，從而說明選擇培育基具有篩選作用。(2)試驗中須要用無菌水對菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同濃度的菌液分別滴加到固體培育基的表面，用涂布器(填器具)涂布勻稱并進行培育，以便獲得單個菌落。(3)若試驗中用103倍的0.1mL的稀釋液分別涂布三個平板，培育后分別形成了98、100和102個菌落，則每毫升原樣液中含有假單孢桿菌1×106個，實際值一般要比該測量值偏大的緣由是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上視察到的只是一個菌落。解析：(1)流程圖中A過程為擴大培育(或選擇培育)，以增加假單孢桿菌的濃度；由于要分別能分解石油污染物的假單孢桿菌，所以該培育基中應當以石油為唯一碳源；由于完全培育液中任何微生物都可以生長，因此比照組培育基上生長的菌落數目應明顯多于選擇培育基上的菌落數目，從而說明選擇培育基具有篩選作用。(2)依據流程圖可知本試驗采納稀釋涂布平板法接種，包括系列稀釋和涂布平板兩個過程，涂布平板之前須要用無菌水將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋，然后將不同濃度的菌液分別滴加到固體培育基的表面，用涂布器涂布勻稱并進行培育。(3)依據題意可知，三個平板上生長的平均菌落數C＝(98＋100＋102)÷3＝100個，涂布平板時所用的稀釋液的體積V＝0.1mL，稀釋倍數M＝103倍，所以每毫升原樣液中含有假單孢桿菌數＝(C÷V)×M＝(100÷0.1)×103＝1×106個；當兩個或多個細胞連在一起時，平板上視察到的只是一個菌落，所以實際值一般要比該測量值大。9．青霉素是抗菌素的一種，是指分子中含有青霉烷、能破壞細菌的細胞壁并在細菌細胞的繁殖期起殺菌作用的一類抗生素，是從青霉菌中提取的抗生素。青霉是生產青霉素的主要菌種，廣泛分布于土壤、空氣及腐敗的有機材料中?；卮鹣铝杏嘘P問題：牛肉膏蛋白胨培育基的養分構成和含量培育基成分含量牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5gH2O定容至1000mL(1)上表培育基可為微生物供應的養分成分有碳源、氮源、水、無機鹽、維生素(缺一不行)。若要培育獲得點青霉的單菌落，還需在上述成分的基礎上加入瓊脂、青霉素。(2)除了供應微生物生長所需的各種養分成格外，培育基還須要滿意微生物生長