…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人民版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、為檢測某藥物X的抗癌活性，在細胞培養板的每個孔中加入相同數量的肝癌細胞，使其貼壁生長，實驗組加入溶于二甲基亞礬的藥物X，培養72小時后進行計數，比較實驗組和對照組每個孔中細胞數目。下列有關敘述錯誤的是（）A.細胞培養液中通常需要加入血清等天然成分B.可用胰蛋白酶處理使肝癌細胞脫落下來并進行計數C.對照組中應加入等體積的無菌蒸餾水，其他條件一致D.若實驗組細胞數遠低于對照組，可初步判斷此藥物有抗癌效果2、由單克隆抗體研制而成的“生物導彈”由兩部分組成，一是“瞄準裝置”，二是殺傷性“彈頭”，下列對此敘述不正確的是（）A.“瞄準裝置”是指識別腫瘤的單克隆抗體B.“彈頭”由放射性同位素、化學藥物等物質構成C.“彈頭”具有選擇性殺傷腫瘤細胞的功能D.“生物導彈”的制備利用了細胞工程技術3、用農作物秸稈等纖維質原料生產的乙醇，經加工可制成燃料乙醇，從而可以減少對石油資源的依賴，如圖為生產燃料乙醇的簡要流程，據圖分析，錯誤的是（）

A.微生物A和微生物B所利用的碳源相同B.圖中過程②常用的微生物B是酵母菌C.要得到微生物A，最好選擇富含纖維素的土壤采集土樣D.微生物A的同化作用類型為異養型4、科學家在蛙的核移植實驗中發現，腸上皮核移植1%-2%形成蝌蚪，囊胚核移植50%形成蝌蚪或成蛙。下列敘述正確的是（）A.實驗中用到核移植、胚胎移植等技術B.該發現說明低等動物細胞的全能性更容易表達C.這種差異與兩種核原先所處的細胞質環境有關D.該發現說明細胞質對異源細胞核的調控具有專一性5、農作物秸稈的回收利用方式很多，其中之一是將秸稈碎化后作為食用菌的栽培基質。碎化秸稈中纖維所起的作用，相當于植物組織培養中固體培養基的（）A.瓊脂+蔗糖B.蔗糖+激素C.激素+無機鹽D.無機鹽+瓊脂6、細菌需要從外界吸收營養物質并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下列與此有關的說法正確的是（）A.乳酸菌與硝化細菌所利用的碳源物質是相同的B.固體培養基中加入少量水即可制成液體培養基C.瓊脂中的多糖是細菌生長和繁殖中不可缺少的一種物質D.以尿素為唯一氮源的培養基上長出的不都是尿素分解菌評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)7、我國的釀酒技術歷史悠久，古人在實際生產中積累了很多經驗。《齊民要術》記載：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲勢盡。”意思是甕中酒液涼了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用盡了。下列敘述正確的是（）A.用酒曲釀酒過程中，為加快微生物代謝需不斷通入O2B.酒液溫度的變化與酒曲中微生物呼吸作用釋放熱量有關C.起泡是由微生物進行呼吸作用產生的CO2釋放形成的D.“曲勢盡”可能是甕中液體pH降低、酒精濃度過高導致8、MIC是指藥敏試驗中某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。某研究小組將含有相同濃度抗生素I~IV的四個大小相同的紙片分別貼在長滿測試菌的瓊脂平板上，進行藥敏試驗以了解病原微生物對四種抗生素的敏感程度，用于指導臨床合理選用抗生素。圖1為實驗器材，圖2為實驗結果。下列敘述正確的是（）

A.為獲得長滿測試菌的瓊脂平板，需要使用圖1中工具①②③B.據圖2可知抗生素I的MIC大于抗生素皿的MICC.圖2抑菌圈中出現菌落的原因可能是病原菌中出現了能抗抗生素IV的突變株D.圖2抑菌圈中離紙片越近的菌落對抗生素IV的抗性越強9、苯丙酮尿癥是一種嚴重的單基因遺傳病。圖1是某患者的家族系譜圖，其中部分成員Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1和Ⅱ2的DNA經限制酶MspⅠ酶切，產生不同的片段，經電泳后與相應探針雜交結果見圖2.下列分析正確的是（）

A.個體Ⅱ1是雜合體的概率為2/3B.個體Ⅱ2與一雜合體婚配生患病孩子的概率為0C.個體Ⅱ3是隱性純合體，有19kb探針雜交條帶D.個體Ⅱ4可能為雜合體，有2個探針雜交條帶10、下圖表示利用細胞融合技術進行基因定位的過程，在人-鼠雜種細胞中人的染色體會以隨機方式丟失，通過分析基因產物進行基因定位。現檢測細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關敘述正確的有（）

A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合B.細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細胞C.芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上D.胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上11、下列有關動物細胞工程操作的敘述，錯誤的是（）A.動物細胞培養是動物細胞工程的基礎，在進行細胞培養時，培養基中除了加入細胞所需的各種營養物質外，還需要加入瓊脂B.動物細胞融合與植物體細胞雜交都能形成雜種個體C.干細胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細胞和成體干細胞等，有著自我更新能力及分化潛能D.動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植12、如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數”實驗中樣品稀釋示意圖。據圖分析正確的是（）

A.某一稀釋度下至少涂3個平板，該實驗方法統計得到的結果常會比實際活菌數目少B.3號試管中的樣品溶液稀釋倍數為104倍C.5號試管的結果表明每克土壤中的菌株數為1.7×108個D.該實驗需設置牛肉膏蛋白胨培養基作對照，用以判斷選擇培養基是否有選擇作用評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)13、本課題對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發酵產纖維素酶的實驗，纖維素酶的發酵方法有___________和___________發酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產生的__________進行________的測定。14、______——“分子手術刀”15、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長和發酵的重要條件，酒精發酵時一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細菌，它的最適生長溫度為_______________，乳酸菌是________細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目___________，這是因為______________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數目可以通過濾膜法來測定，將濾膜放在____________培養基上培養，大腸桿菌的菌落呈現___________；從而計算出水樣中大腸桿菌的數目。

（4）固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內的技術，包括化學結合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細胞多采用___________固定化。16、PCR技術的DNA體外復制環境有DNA解旋酶、耐熱DNA聚合酶、DNA母鏈、4種脫氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能夠從引物的________端開始連接脫氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物長度通常為____個核苷酸。17、概念：動物細胞培養就是從動物機體中取出相關的______，將它分散成______，然后放在適宜的______中，讓這些細胞______。18、生物數據庫的知識與正在迅猛發展的生物信息學有關。什么是生物信息學________？19、基因表達載體的組成及其作用。

一個基因表達載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________20、最后檢測目的基因是否翻譯成______，方法是從轉基因生物中提取______，用相應的______進行______。評卷人得分四、判斷題(共3題，共15分)21、胚胎發育早期，細胞的數量不斷增加，胚胎的總體積也增加。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯誤22、利用基因工程技術建立移植器官工廠是目前基因工程取得實際應用成果非常多的領域。（選擇性必修3P90）()A.正確B.錯誤23、生殖性克隆是指通過克隆技術產生獨立生存的新個體。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共1題，共4分)24、科學家的發現給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養基中搖瓶培養，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數滴質量分數為10%的酚）培養基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術擴增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進行菌株的種屬鑒定。PCR技術中起關鍵作用的酶是_____________。該技術能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉錄病毒轉入小鼠成纖維細胞中。2~3周后，這些細胞顯示出ES細胞的形態、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細胞。在這個實驗過程中，逆轉錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細胞的產生不是由于培養基的作用？請寫出實驗設計思路______________評卷人得分六、綜合題(共3題，共6分)25、人工栽培的馬鈴薯易感染病菌而出現青枯病導致產量降低。某研究小組采用農桿菌轉化法將抗菌肽基因轉入馬鈴薯中提高其抗性；具體步驟如下：基因表達載體的構建（含抗菌肽基因與青霉素抗性基因）；重組DNA分子導入農桿菌、轉化細胞的篩選、農桿菌侵染外植體、愈傷組織的誘導與分化。請回答下列有關問題：

(1)農桿菌轉化法利用的原理是其Ti質粒的T-DNA片段具有_________的特點。本實驗中基因表達載體的組成除了有抗菌肽基因與青霉素抗性基因外，還有啟動子、終止子和__________等。

(2)將重組DNA分子導入農桿菌時可用_________對農桿菌進行處理；提高其吸收外源DNA的能力。

(3)將本實驗中農桿菌轉入含有_________的培養基中培養；可以篩選出成功導入抗菌肽基因的細胞。

(4)使用不同種類農桿菌對馬鈴薯外植體侵染后的轉化成功率不同。某研究小組為了尋找較高轉化效率的侵染方法；測定了不同種類農桿菌侵染馬鈴薯外植體后的轉化效率，結果如下圖甲。

由圖甲可知，進行馬鈴薯農桿菌轉化時應該選擇_________農桿菌菌種。實驗中農桿菌過度繁殖可能會使外植體細胞壞死，判斷依據是___________________________。

(5)為避免農桿菌過度繁殖，被侵染后的外植體在培養一段時間后還需要進行脫菌處理，研究小組測定了不同抗生素對未導入質粒的不同種農桿菌抑菌率如圖乙。根據圖甲和圖乙分析，本實驗中導入了抗菌肽基因的農桿菌與外植體共培養一段時間后，選擇_________作為抑菌抗生素能起到最佳脫菌效果。

(6)調查發現，抑菌抗生素在對農桿菌生長起抑制作用的同時，對馬鈴薯愈傷組織的誘導與分化也可能產生抑制作用，為探究是否存在這種毒副作用，還需要進行的實驗是__________________。26、棉花為雌雄同株植物，某一品系的棉花野生型植株既不抗蟲也不抗除草劑，如圖為構建轉基因植株的過程示意圖，從中選擇抗蟲抗除草劑的單株甲和乙分別進行自交獲得F1，F1性狀表現如下表所示。（不考慮相同目的基因多次插入受體細胞同一條染色體上的情況，A+表示有抗蟲基因，A-表示沒有抗蟲基因；B+表示有抗除草劑基因，B-表示沒有抗除草劑基因）

自交親本F1植株數抗蟲抗除草劑抗蟲不抗除草劑不抗蟲抗除草劑不抗蟲抗除草劑甲1411乙1141

(1)基因A和基因B在結構上的區別是_______。采用Ti質粒作為載體的優勢是________。為防止自身環化及相互連接，準備工作①中應至少使用____種不同的限制性內切核酸酶。

(2)畫出甲植株體細胞中A+、B+基因與染色體所有可能的位置關系（不考慮染色體復制后的情況）_______。

(3)若給甲自交后代F1植株噴施一定量的除草劑，則存活植株中含一個A+基因的占____。

(4)乙中的抗蟲基因和抗除草劑基因分別有____個，乙測交子代的表型及比例為____（不考慮突變和交叉互換）。27、實驗小組將啟動子rd29A和擬南芥植株的抗寒累因DREBI相連后導入大豆，獲得了抗寒轉基因植株，下圖1表示構建重組質粒時所用的載體，已知Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ為四種不同的限制酶，其各自識別的DNA序列如下表所示，回答下列問題：。限制酶ⅠⅡⅢⅣ識別序列及。

切割位點

(1)構建重組質粒過程中最好同時使用______兩種限制酶切割質粒，原因是______________，培養基中需要加入______（填“四環素”或“氨芐青霉素”），其作用是________________。

(2)實驗小組進一步研究了不同的溫度誘導下轉基因植株中抗寒基因DREBI的表達情況；實驗結果如圖2所示：

試根據檢測結果闡述目的植株導入DREB7基因的優點在于______________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

1；分析題干可知：自變量是藥物X；因變量是檢測癌細胞數量。

2；動物細胞培養的條件：

（1)無菌；無毒的環境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；防止培養過程中的污染；③定期更換培養液，以便清除代謝廢物，防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害。

（2)營養物質：糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質。

（3)溫度和pH。

（4)氣體環境：95%空氣和5%的CO2(CO2的作用是維持培養液的pH)。

【詳解】

A；培養動物細胞時；細胞培養液中通常需要加入血清，A正確；

B；對于已經貼壁生長的動物細胞；可用胰蛋白酶處理，使肝癌細胞脫落下來并進行計數，B正確；

C；實驗組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬（溶劑）的藥物X；故對照組中應加入等體積的二甲基亞礬（溶劑），C錯誤；

D；分析實驗結果可知；添加藥物X的實驗組肝癌細胞數目最少，可以初步判斷藥物X的抗癌效果較好，D正確。

故選C。

【點睛】

本題考查動物細胞培養等內容，意在考查學生的實驗探究能力。2、C【分析】【分析】

由于單克隆抗體的特異性強；能特異性識別抗原，因此可以把抗癌細胞的單克隆抗體跟放射性同位素；藥物等相結合，制成“生物導彈”借助單克隆抗體的定位導向作用將藥物定向帶到癌細胞，在原位殺死癌細胞，具有療效高，副作用小，位置準確等優點。

【詳解】

A；“瞄準裝置”是由識別腫瘤的單克隆抗體構成；單克隆抗體可與抗原(癌細胞)發生特異性結合，起到導向作用，A正確；

B；“彈頭”由放射性同位素、化學藥物和毒素等物質構成；殺傷癌細胞，B正確；

C；“彈頭”中的藥物不具有選擇作用；C錯誤；

D；單克隆抗體運用了動物細胞工程中的動物細胞融合技術；D正確。

故選C。3、A【分析】【分析】

1；土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌、細菌和放線菌等，它們可以產生纖維素酶；纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖，使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長；

2；微生物常見的接種的方法①平板劃線法②稀釋涂布平板法；

3；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型。

【詳解】

A；微生物A所利用的碳源為纖維素；微生物B所利用的碳源為纖維素降解物，A錯誤；

B；題圖中過程②表示生產乙醇的過程；常用的微生物是酵母菌，B正確；

C；根據題圖可知；微生物A利用的碳源是纖維素，故要獲得微生物A，最好選擇富含纖維素的土壤采集土樣，C正確；

D；微生物A可利用纖維素作為碳源；故其同化作用類型為異養型，D正確。

故選A。4、C【分析】【分析】

1；細胞核移植技術；是指將一個動物細胞的細胞核移植至去核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體。

2；對囊胚階段的胚胎進行分割時要注意將內細胞團均等分割；否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。

【詳解】

A；蛙是體外受精；生殖發育過程都是在體外完成的，所以實驗中用到核移植技術，不用胚胎移植，A錯誤；

B；該實驗用的是蛙的不同種類細胞；說明同一物種不同種類細胞全能性不同，B錯誤；

C；細胞核和細胞質是相互依存的；這種差異與兩種核原先所處的細胞質環境有關，C正確；

D；不同細胞核移植都可能發育成個體；不能說明細胞質對異源細胞核的調控具有專一性，D錯誤。

故選C。5、A【分析】【分析】

植物組織培養基的主要成分是無機營養物（主要由大量元素和微量元素兩部分組成）；有機物（維生素、蔗糖、瓊脂等）和生長調節物質（植物生長素類、細胞分裂素、赤霉素等）。培養基中的碳水化合物通常是蔗糖；作為培養基內的碳源和能源外，對維持培養基的滲透壓也起重要作用。培養基中添加了瓊脂，主要是作為培養基的支持物，使培養基呈固體狀態，而成為固體培養基。

秸稈是食用菌栽培的主要基質,其中的纖維素和木質素在食用菌菌絲生長過程中大量降解,秸稈栽培食用菌是秸稈利用的最佳途徑。

【詳解】

據題干的信息；“秸稈碎化后作為食用菌的栽培基質”，秸稈中的纖維素在食用菌菌絲生長過程中大量降解，提供碳源和能源，這相當于植物組織培養基中添加的蔗糖；秸稈中的纖維素是固體，可以作為培養基的支持物，使培養基呈固體狀態，這相當于植物組織培養基中添加的瓊脂。

故選A。

【點睛】

本題主要考查植物組織培養的相關知識，意在考查考生對所學知識的識記和辨析的能力。6、D【分析】【分析】

微生物培養基的成分有水；無機鹽、碳源、氮源和生長因子；不同的生物有不同的碳源和氮源，如尿素分解菌以尿素為唯一氮源，某些碳源、氮源也可以提供能源，如牛肉膏蛋白胨培養基。

【詳解】

A；乳酸菌是異養型微生物；需要有機碳源，而硝化細菌是自養型微生物，需要的碳源是二氧化碳，A錯誤；

B；固體培養基中去除瓊脂（凝固劑）才可制成液體培養基；B錯誤；

C；培養基中的瓊脂是凝固劑；不會被微生物利用，C錯誤；

D；自生固氮微生物可以利用大氣中的氨氣作為氮源；因此以尿素為唯一氮源的培養基上長出的不都是尿素分解菌，D正確。

故選D。二、多選題(共6題，共12分)7、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲釀酒菌種是酵母菌；代謝類型是兼性厭氧型真菌，屬于真核細胞，條件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【詳解】

A、用酒曲釀酒是利用了微生物細胞呼吸的原理，進行的是酵母菌的無氧發酵，不能一直通入O2；A錯誤；

B；由于呼吸作用會產熱；故會導致酒液溫度產生變化，B正確；

C、起泡是由微生物進行呼吸作用產生的CO2釋放到發酵液中形成的；C正確；

D；“曲勢盡”可能是隨著發酵的進行甕中液體pH降低、酒精濃度過高導致酵母菌大量死亡；D正確。

故選BCD。8、A:B:C【分析】【分析】

1；平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

2；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后形成單個菌落。

【詳解】

A；為獲得長滿測試菌的瓊脂平板；需要用到的接種方法是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法需要用到酒精燈、涂布器和培養基，A正確；

B；MIC是指藥敏試驗中某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。含有相同濃度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四個大小相同的紙片分別貼在長滿測試菌的瓊脂平板上；抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的抑菌圈小。說明抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC。即想要達到和抗生素Ⅲ相同的抑菌效果抗生素Ⅰ要增加濃度才行，B正確；

C；圖2抑菌圈中出現菌落的原因可能是病原菌中出現了能抗抗生素Ⅳ的突變株；這些突變株在抗生素的環境下能夠存活并繁殖形成菌落。細菌是原核生物，發生變異最可能是基因突變，C正確；

D；在抑菌圈中出現的菌落都是對該種抗生素具有抗性的菌株；它們之間抗性的強弱無法根據題干信息進行判斷。如果要判斷它們之間抗性的強弱還需進一步實驗才能確定，D錯誤。

故選ABC。

【點睛】

本題考查的知識點包括：微生物接種，微生物培養及微生物的應用。9、B:C:D【分析】苯丙酮尿癥是一種嚴重的單基因遺傳病，假設該病受一對等位基因A、a控制，分析圖1，Ⅰ1、Ⅰ2都無病，但其女兒Ⅱ3卻有病，所以該病為常染色體隱性遺傳病，Ⅱ3基因型為aa，Ⅰ1和Ⅰ2的基因型都為Aa，再結合圖2的酶切結果可知，Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1的基因型相同，因此Ⅱ1的基因型為Aa，Ⅱ2表現正常，且從酶切結果看，Ⅱ2與Ⅱ1基因型（Aa）不同，所以Ⅱ2的基因型為AA，由此可以推知，23kb探針雜交條帶對應正常顯性基因A，19kb探針雜交條帶對應隱性基因a。

【詳解】

A、由分析可知，個體Ⅱ1的基因型為Aa；雜合體的概率為1，A錯誤；

B、由分析可知，個體Ⅱ2的基因型為AA；與雜合體Aa婚配，生患病孩子aa的概率為0，B正確；

C、個體Ⅱ3是患者，是隱性純合體，故有19kb探針雜交條帶；C正確；

D、個體Ⅱ4是Ⅰ1（Aa）和Ⅰ2（Aa）所生的表現正常的后代；基因型可能是AA或Aa，若為雜合體就有2個探針雜交條帶，D正確。

故選BCD。10、A:C:D【分析】【分析】

分析題干信息：Ⅰ保留X；11號染色體；Ⅱ保留2、11號染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17號染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號染色體上。

【詳解】

A；動物細胞融合過程中；可以利用滅活的仙臺病毒或聚乙二醇作誘導劑促進細胞融合，A正確；

B；細胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號染色體；故不會是鼠-鼠融合細胞，B錯誤；

CD；根據分析可知；芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上，胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。

故選ACD。11、A:B【分析】【分析】

動物細胞工程技術包括動物細胞培養；動物細胞融合、核移植技術等技術；其中動物細胞培養是動物細胞工程的基礎。在進行細胞培養時，培養基中除了加入細胞所需的各種營養物質外，還需要加入血清等天然成分。干細胞包括胚胎干細胞和成體干細胞等，存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能。

【詳解】

A；在進行動物細胞培養時；培養基中除了加入細胞所需的各種營養物質外，還需要加入血清等天然成分，A錯誤；

B；動物細胞融合不能形成雜種個體；形成的是雜種細胞，而植物體細胞雜交能形成雜種個體，兩者都能形成雜種細胞，B錯誤；

C；干細胞包括胚胎干細胞和成體干細胞等；存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能，C正確；

D；動物體細胞分化程度較高；全能性較低，因此動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，D正確。

故選AB。12、A:B:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中5支試管為梯度稀釋；最后經稀釋涂布平板法接種培養后進行計數。統計菌落數在30~300的平板，取其平均值，進行計數。計數公式為（C÷V）×M。（C為平均菌落數，V為涂布液體積，M為稀釋倍數）。

【詳解】

A；設置重復組；增強實驗的說服力與準確性，故某一稀釋度下至少涂3個平板。稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細菌細胞長成一個菌落，使該實驗方法統計得到的結果往往會比實際活菌數目要低，A正確；

B、據圖可知，將10g土樣加入到90mL無菌水中定容至100mL后，此時土樣稀釋倍數為10倍，再經3次10倍稀釋得到3號試管中的樣品，故3號試管中樣品的稀釋倍數是104倍；B正確；

C、5號試管進行稀釋涂布平板法計數的結果表明每克土壤中的菌株數為（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109個；C錯誤；

D；要判斷選擇培養基是否起到選擇作用；需設置接種了的牛肉膏蛋白胨培養基作對照，若牛肉膏蛋白胨培養基培養基上的菌落種類數目多于選擇培養基上的菌落類型，則說明起到了選擇作用，D正確。

故選ABD。三、填空題(共8題，共16分)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發酵固體發酵葡萄糖定量14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制性核酸內切酶（限制酶15、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發酵時一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細菌，它的最適生長溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目低，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數目可以通過濾膜法來測定；將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養，大腸桿菌的菌落呈現黑色，從而計算出水樣中大腸桿菌的數目。

（4）固定化技術一般包括化學結合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學結合法和物理吸附法固定化；而細胞多采用包埋法固定化。

【點睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學生理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識的網絡結構，屬識記內容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落伊紅美藍黑色包埋法化學結合法物理吸附法包埋法16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2種引物DNA或RNA20—3017、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】組織單個細胞培養基生長和繁殖18、略

【分析】【詳解】

生物信息學是研究生物信息的采集、處理、存儲、傳播,分析和解釋等各方面的學科，也是隨著生命科學和計算機科學的迅猛發展，生命科學和計算機科學相結合形成的一門新學科，生物信息學主要是核酸和蛋白質序列數據的計算機處理和分析。【解析】生物信息學是研究生物信息的采集、處理、存儲、傳播,分析和解釋等各方面的學科，也是隨著生命科學和計算機科學的迅猛發展，生命科學和計算機科學相結合形成的一門新學科19、略

【分析】略【解析】目的基因標記基因啟動子終止子啟動子上游RNA聚合酶終止子下游轉錄標記20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質蛋白質抗體抗原－抗體雜交四、判斷題(共3題，共15分)21、B【分析】【詳解】

胚胎發育早期；細胞數量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯誤。22、B【分析】【詳解】

基因工程技術可以使建立移植器官工廠的設想成為現實；說明并未開始實際應用。

故題中描述錯誤。23、A【分析】【詳解】

生殖性克隆，即通常所說的克隆人，通過克隆技術產生獨立生存的新個體，即通常所說的克隆人，該說法正確。五、實驗題(共1題，共4分)24、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養基中搖瓶培養，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術是一項通過體外控制溫度擴增DNA的技術，該技術中由于溫度較高，起關鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的；PCR產物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉錄病毒轉入小鼠成纖維細胞中，該過程中逆轉錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞；分析題意，實驗目的是iPS細胞的產生不是由于培養基的作用，故實驗的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細胞的產生情況，實驗設計應遵循對照與單一變量原則，故可設計實驗如下：將轉入外源基因的細胞和沒有轉入外源基因的細胞分別培養在相同的培養基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉入外源基因的細胞轉化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產生不是由于培養基的作用。【解析】(1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結合（引物是根據16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。將轉入外源基因的細胞和沒有轉入外源基因的細胞分別培養在相同的培養基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉入外源基因的細胞轉化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產生不是由于培養基的作用六、綜合題(共3題，共6分)25、略

【分析】【分析】

農桿菌易感染植物細胞；其Ti質粒上的T-DNA可轉移并整合到受體細胞的染色體DNA上。利用上述原理，將目的基因插入Ti質粒的T-DNA上，再導入農桿菌，用農桿菌侵染植物細胞，可以將目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上。

【詳解】

（1）農桿菌轉化法利用的原理是其Ti質粒的T-DNA片段具有可轉移并整合到植物細胞的染色體DNA上的特點。

在農桿菌轉化法中；構建基因表達載體是為了把目的基因插入到Ti質粒的T-DNA中，并在導入農桿菌后，讓農桿菌將目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上，并且可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發揮作用。構建基因表達載體時，所選的載體需要具備以下條件：①能在受體細胞中復制并穩定保存；②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入；③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；④對受體細胞無害。基因表達載體包括目的基因；標記基因、啟動子、終止子、復制原點等。本實驗中基因表達載體的組成除了有抗菌肽基因（目的基因）與青霉素抗性基因（標記基因）外，還有啟動子、終止子和復制原點或多個限制酶酶切位點等。

（2）Ca2+處理細胞，可以提高細胞吸收外源DNA的能力，成為感受態細胞。所以，可用Ca2+對農桿菌進行處理；讓重組DNA分子更容易導入農桿菌。

（3）因為基因表達載體含青霉素抗性基因；所以成功導入抗菌肽基因的農桿菌還含有青霉素抗性基因。能在含青霉素的培養基上生存，所以，將本實驗中農桿菌轉入含有青霉素的培養基中培養，可以篩選出成功導入抗菌肽基因的細胞。

（4）由圖甲可知；用不同種類農桿菌侵染馬鈴薯外植體15分鐘后，轉化效率最好，其中，EHA105菌株的轉化效率是四種菌株里最好的，所以，進行馬鈴薯農桿菌轉化時應該選擇EHA105農桿菌菌種。由圖甲可知，農桿菌侵染30分鐘時，四種農桿菌轉化效率都比15分鐘時更低，可能在農桿菌侵染15分鐘以后，農桿菌過度繁殖使外植體細胞壞死，外植體受侵害嚴重，生長受抑制，所以使得轉化效率下降。

（5）因為農桿菌過度繁殖可能會使外植體細胞壞死；所以為避免農桿菌過度繁殖，被侵染后的外植體在培養一段時間后還需要進行脫菌處理，由圖乙可知，在使用相同濃度的抑菌劑時，青霉素和頭孢曲松鈉比頭孢噻肟鈉對EHA105的抑菌率更高，又因為本實驗中導入了抗菌肽基因的農桿菌又含有青霉素抗性基因，所以不能選青霉素作脫菌處理，而選擇頭孢曲松鈉作為抑菌抗生素。

（6）調查發現，抑菌抗生素在對農桿菌生長起抑制作用的同時，對馬鈴薯愈傷組織的誘導與分化也可能產生抑制作用，為探究是否存在這種毒副作用，所設計的實驗的自變量應該是是否含抑菌抗生素，分別探究在沒有抑菌抗生素的情況下和有抑菌抗生素的情況下，馬鈴薯愈傷組織的誘導與分化情況，比較分析抑菌抗生素會不會對馬鈴薯愈傷組織的誘導與分化產生抑制作用。因為上題依據圖甲和圖乙的結果選擇了頭孢曲松鈉作為抑菌抗生素，所以還需進行的實驗是將馬鈴薯（相同部位）外植體分別放入含有頭孢曲松鈉和不含頭孢曲松鈉的等量（MS）培養基中進行培養，觀察統計愈傷組織的誘導與分化成功率。【解析】(1)可轉移并整合到植物細胞的染色體DNA上復制原點或多個限制酶酶切位點。

(2)Ca2+

(3)青霉素。

(4)EHA105農桿菌侵染15分鐘以后；外植體受侵害嚴重，生長受抑制，轉化效率下降。

(5)頭孢曲松鈉。

(6)將馬鈴薯（相同部位）外植體分別放入含有頭孢曲松鈉和不含頭孢曲松鈉的等量（MS）培養基中進行培養，觀察統計愈傷組織的誘導與分化成功率26、略

【分析】【分析】

基因是指有遺傳效應的DNA片段。不同基因內的堿基對的排列順序不同。基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是Ca2＋處理法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質－抗原－抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定等。

【詳解】

（1）基因A和基因B在結構上的區別是堿基對的數目和排列順序不同；農桿菌中的Ti質粒上的TDNA可轉移至受體細胞；并且整合到受體細胞染色體的DNA上，因此采用Ti質粒作為載體的優勢是其具有整合到受體細胞染色體DNA上的T－