生物選修1生物技術實踐學案39微生物的培育與應用題號1234567選項一、單項選擇題1．關于滅菌和消毒的理解中不正確的是()A．滅菌是指殺滅物體內外的一切微生物的細胞、芽孢和孢子B．消毒和滅菌實質上是相同的C．常用滅菌法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌D．常用消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外線法、化學藥物法答案：B2．下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的挨次為1、2、3、4、5。下列操作方法正確的是()A．操作前要將接種環放在火焰旁滅菌B．劃線操作須在火焰上進行C．在5區域中才有可能得到所需菌落D．在1、2、3、4、5區域中劃線前后都要對接種環進行滅菌解析：接種環滅菌時應放在火焰上，而不是火焰旁，A錯誤；劃線操作應在火焰旁，而不是火焰上，否則接種微生物會全部死亡，B錯誤；假如菌種密度低，則在5區域前面就有可能得到所需菌落，C錯誤。答案：D3．在10、102、103倍稀釋液中的平均菌落數為2760、295和46，則菌落總數(個/mL)為()A．2.76×105B．2.95×105C．4.6×105D．3.775×105解析：首先選擇平均菌落數在30～300之間的，當只有一個稀釋倍數的平均菌落數符合此范圍時，則以該平均菌落數除以涂布平板時所用稀釋液體積(0.1mL)，再乘以稀釋倍數作為該樣品的細菌總數；若有兩個稀釋倍數的平均菌落數均在30～300之間，則按兩者菌落總數的比值來打算，若比值小于2，應取兩者的平均數，若大于2，則取其中較小的菌落總數。本題295和46在30～300之間，46×103與295×102比值為1.6，應取二者的平均數進行計算。答案：D4．下列關于“檢測土壤中細菌總數”試驗操作的敘述中錯誤的是()A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基，經高溫、高壓滅菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上C．將試驗組和對比組平板倒置，37℃D．確定對比組無菌后，選擇菌落數在300以上的試驗組平板進行計數答案：D5．下列說法正確的是()A．從落葉豐富的土壤中篩選能分解纖維素的細菌B．家庭利用酵母菌制作腐乳C．用紅色西瓜汁作還原糖鑒定的替代材料D．觀看線粒體時，利用甲基綠染液將線粒體染成綠色，再用顯微鏡觀看解析：落葉中含有大量纖維素，落葉豐富的土壤中能分解纖維素的細菌較多，A正確；制作腐乳主要利用毛霉，B錯誤；還原糖是用斐林試劑來鑒定，通過形成磚紅色沉淀來推斷是否含有還原糖，故要求材料為白色或無色最好，假如材料為紅色，則會干擾試驗結果，C錯誤；觀看線粒體應用健那綠染色，D錯誤。答案：A6．以下有關生物技術實踐的敘述中，不正確的是()A．用稀釋涂布平板法測定某土壤浸出液中活菌數目時，測定值可能比實際值小B．制備果酒過程中，每隔一段時間擰松瓶蓋，目的是向瓶中通氣保證發酵順當C．測定發酵過程中樣品的亞硝酸鹽含量時，需要與標準顯色液進行比色D．以尿素為唯一氮源并加入酚紅指示劑的培育基可分別并鑒定土壤中分解尿素的細菌解析：用稀釋涂布平板法測定時，形成的菌落可能不是由一個微生物繁殖而來的，這樣測得的值比實際值小，A正確；制備果酒時，擰松瓶蓋的目的是排出在發酵過程中產生的二氧化碳，防止瓶中壓強過大，B錯誤。答案：B7．現有兩種固體培育基，已知其配制時所加的成分和含量如下表，用這兩種培育基分別去分別土壤中的兩種微生物，你認為它們適于分別()A.甲培育基適于分別自養型自生固氮菌；乙培育基適于分別異養型自生固氮菌B．甲培育基適于分別異養型自生固氮菌；乙培育基適于分別自養型自生固氮菌C．甲培育基適于分別酵母菌；乙培育基適于分別真菌D．甲培育基適于分別自養型共生細菌；乙培育基適于分別異養型共生固氮菌答案：B二、非選擇題8．下表是篩選異養型細菌的培育基配方。KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2gFeCl30.1gX1g維生素微量瓊脂15g將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到100mL(1)苯胺是致癌物質，土壤中有分解苯胺的異養型細菌，此培育基中的成分X除了為目的菌供應能源外，還能供應____________(需答全)，該培育基從作用看屬于__________培育基。制備固體培育基時調整pH在溶化步驟后；對培育基進行滅菌的常用方法是____________________。(2)下圖是接受純化微生物培育的兩種接種方法接種后培育的效果圖。則獲得圖B效果的接種方法是__________________________。運用A所示接種方法統計的菌落經常比活菌的實際數目__________________。(3)在以尿素為唯一氮源的培育基中加__________________可初步鑒定該種細菌能夠分解尿素；在篩選能夠分解纖維素的微生物過程中，常用到________________染色法。解析：(1)依據培育基的配方可以看出，所給的物質中不能為微生物供應碳源和氮源，因此微生物生長所需要的碳源和氮源，可以由X供應。該培育基從作用看屬于選擇培育基，在制備固體培育基時一般要先溶化再調整pH值，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。(2)B圖為平板劃線法；運用A所示接種方法統計的菌落經常比活菌的實際數目低，由于一個菌落可能是由一個或多個細菌繁殖形成。(3)在以尿素為唯一氮源的培育基中加酚紅指示劑可初步鑒定該種細菌能夠分解尿素，緣由是尿素被細菌合成的脲酶分解產生氨，而氨能使酚紅指示劑變紅；篩選能夠分解纖維素的微生物過程中，常用到剛果紅染色法。答案：(1)碳源和氮源選擇高壓蒸汽滅菌法(2)平板劃線法低(3)酚紅指示劑剛果紅9．氧化硫硫桿菌(TT03)是一種化能自養細菌，它能將硫單質氧化為硫酸，常用于改良鹽堿地，而鹽堿地中的重金屬離子會影響改良效果。以下是有關硫酸鋅對TT03產酸量影響的爭辯：試劑與儀器：蒸餾水，兩種濃度的硫酸鋅溶液，液體培育基，恒溫搖床等。(1)試驗步驟：第一步：在液體培育基中先加入等量硫單質、再分別加入等量蒸餾水和兩種濃度硫酸鋅溶液并標記。其次步：對配制好的培育基進行______________________。第三步：各組接種______________________后放入恒溫搖床中培育7天。第四步：________________________________________________________________________。試驗結果：如圖所示。(2)分析回答：①TT03將CO2和H2O合成有機物所需能量來源于__________________________________。②培育TT03的液體培育基與培育大腸桿菌的液體培育基組成成分上最大的區分是________________________________________________________________________。③分析上圖可知，硫酸鋅對TT03產酸的影響是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)爭辯人員用相同的方法連續爭辯醋酸鉛對TT03產酸量的影響，請設計出記錄試驗結果的表格。答案：(1)滅菌等量的TT03每天測定并記錄各組的硫酸含量(2)①氧化硫單質時釋放的化學能②前者(培育TT03的液體培育基)含硫單質而不含有機碳，后者(培育大腸桿菌的液體培育基)必需含有機碳③低濃度(100mg/L)的硫酸鋅對其無影響(或影響不明顯)，而高濃度(1000mg/L)的硫酸鋅起抑制作用，(且隨培育時間的延長抑制作用減弱)(3)10．有機農藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環境。爭辯發覺，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分別降解苯磺隆的菌株和探究其降解機制的試驗過程如圖甲、乙所示。(1)微生物生長繁殖所需的主要養分物質有碳源、水、____________和____________四類，該試驗所用的選擇培育基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)與微生物培育基相比，植物組織培育的培育基常需添加生長素和__________________，這些植物激素一般需要事先單獨配置成________保存備用。(3)純化菌株時，通常使用的劃線工具是________。劃線的某個平板培育后，第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌，其次劃線區域的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有__________________________________________________(寫出兩點緣由)。(4)為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培育液過濾離心，取上清液做圖乙所示試驗。該試驗的假設是__________________________________，該試驗設計是否合理？為什么？______________________。解析：(1)微生物生長所需要的主要養分物質包括：碳源、氮源、水和無機鹽。選擇培育基允許特定的微生物生長，同時又能抑制或阻擋其他微生物的生長。(2)植物組織培育常需要添加的植物激素有生長素和細胞分裂素。MS培育基的成分一般先分別配制成母液備用。(3)平板劃線法接種時常使用接種環劃線。其次區域只有第一條線無菌落，而其他的劃線卻有菌落，很可能是由于接種環在灼燒后末冷卻，第一次劃線時將菌種燙死，而后接種環冷卻，能正常劃線，也可能是第一次劃線時劃線未從第一區域末端開頭，使接種環上無菌種。(4)題中試驗為取得菌種培育液過濾后離心上清液，加入蛋白酶處理后，測得其對苯磺隆的降解率。意為假設菌種能產生降解苯磺隆的蛋白質類酶，若用蛋白酶處理后，可使該酶分解，苯磺隆降解率下降，則假設成立。但由于缺乏空白對比，不能比較蛋白酶是處理是否降低苯磺隆降解率，該試驗不能得出相應結論。答案：(1)氮源無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖(2)細胞分裂素母液(3)接種環①接種環灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區域末端開頭(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質不合理，缺少空白對比11．磷是植物生活必不行少的元素，在植物代謝、生長和繁殖中有著重要作用。(1)植物的根系從土壤中吸取PO43－的主要方式是______________________，吸取后的磷元素可用于合成______________________________________等化合物(要求2項)。(2)依據含磷化合物的作用，葉片中磷元素含量與光合速率之間的關系最可能是下列中的______________________。(3)下表是冬小麥和棉花對磷的吸取量。表中數據表明，作物對磷的吸取量因______________________和______________________的不同而異。(4)農夫每年都需要施磷肥來提高作物產量，但殘余的磷肥成分進入江河湖泊后，經常促使藍藻等生物的大量繁殖，毀滅______________________現象。(5)科研人員發覺，土壤中存在著一類細菌，能夠將土壤中難溶的含磷化合物溶解轉變為植物能吸取的磷酸鹽離子。對這類細菌進行分別并計數的方法是______________________。假如要進一步提高自然菌株的溶磷力氣，則可以通過______________________等方法。解析：(1)植物根細胞以主動運輸的方式吸取PO43－。DNA、RNA、磷脂、ATP、[H]都含有P元素。(2)磷是葉片光合作用