…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年上教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、能作為自養微生物的碳源的是（）A.糖類B.石油C.二氧化碳D.花生粉餅2、下列有關哺乳動物早期胚胎發育的敘述中，錯誤的是（）A.胚胎干細胞是一類未分化的細胞，可以從早期胚胎中分離獲得B.桑椹胚的細胞一般都具有全能性，囊胚的細胞逐漸分化C.在桑椹胚階段，胚胎的內部開始出現含有液體的腔D.受精卵早期分裂時，胚胎中細胞數目不斷增加，但胚胎的總體積并不增加3、下列關于DNA粗提取與鑒定的敘述，正確的是（）A.可以選取新鮮的洋蔥、豬成熟紅細胞等作為實驗材料B.DNA只能溶于2mol/LNaCI溶液C.預冷的乙醇可用來溶解DNAD.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱4、蛛絲的強度和柔韌度得益于蛛絲蛋白的特殊布局。有人試圖通過破解蛛絲蛋白的結構推測出相應的基因結構，用以指導對蠶絲蛋白的修改，讓蠶也吐出堅韌的絲。下列有關說法正確的是（）A.蠶合成像蛛絲蛋白一樣堅韌的絲的過程不遵循“中心法則”B.上述過程運用的蛋白質工程技術是基因工程的延伸C.可以利用核酸分子雜交技術檢測是否有目標蛋白的合成D.利用基因工程技術不能改變基因上特定位點的核苷酸序列5、為了防止轉基因作物的目的基因通過花粉轉移到自然界的其他植物中，科學家設法將目的基因整合到受體細胞的葉綠體基因組中。其理論依據是（）A.該做法使轉基因植物與其他植物間不能發生基因交流B.葉綠體基因組一定不會進入生殖細胞中C.受精卵中的細胞質幾乎全部來自卵細胞D.這種植物雜交的后代不會出現一定的性狀分離比6、北方白犀牛目前僅剩兩頭雌性個體，科研人員嘗試通過現代生物技術，利用實驗室冷凍保藏的少量北方白犀牛精子拯救該物種。下列說法不正確的是（）A.科研人員可以使用體外受精、胚胎移植等技術繁育北方白犀牛B.若利用體細胞核移植技術培育出北方白犀牛的克隆動物，該動物一定是雌性C.為了繁育更多子代，可以選擇人工繁育技術得到的原腸胚期的胚胎進行分割D.進行胚胎移植時，經同期發情處理過的雌性北方白犀牛不會發生免疫排斥反應7、某同學從植物中提取了W物質，并研究其抑菌效果。用鋼管在平板中央處打孔后加入提取物W，在適宜條件下培養一段時間測量抑菌圈的大小并計算抑菌圈平均增幅速率，實驗方法和結果如下圖所示。據圖分析下列說法錯誤的是（）

A.將一定量菌液與冷卻后的滅菌培養基混勻并倒平板可得到試驗菌平板B.在平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，目的是防止微生物污染平板C.提取物W在培養基中擴散，加入提取物W后的2小時可獲得最佳抑菌效果D.菌體濃度、提取物W的濃度和擴散時間可能會對抑菌圈直徑的大小造成影響評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)8、下列關于單克隆抗體的敘述中，正確的是（）A.制備單克隆抗體是動物細胞融合技術最重要的應用B.單克隆抗體特異性強、純度高、產量大、靈敏度高C.工業化制備單克隆抗體一般通過體內培養獲得D.單克隆抗體是由骨髓瘤細胞和效應T細胞形成的雜交瘤細胞產生的9、下列關于DNA粗提取與鑒定的實驗敘述不正確的是（）A.獲取雞血時，容器中應先加入適量的NaCl溶液以防止血液凝固B.由于DNA對高溫耐受性差，故提取時需加入95%的冷酒精C.可用木瓜蛋白酶純化過濾后研磨液中的DNAD.向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中緩緩加蒸餾水，當出現析出物時停止加水10、生長圖形法是一種測定微生物營養需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類；研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養物質的培養基混合后倒成平板，然后在平板上劃分數區，將甲；乙、丙三種生長因子分別添加到不同區域，培養結果如圖所示，下列說法正確的是（）

A.倒成平板后直接培養可判斷有無污染B.倒成平板后需要進行滅菌處理C.圖示結果表明該菌需要生長因子乙或丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選11、細菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在與其他細菌的競爭中占優勢，其中tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白。研究人員利用野生型細菌X及其不同突變體進行了實驗：在固體培養基表面放置一張能隔離細菌的濾膜，將一種菌（下層菌）滴加在濾膜上后再放置第二張濾膜，滴加等量的另一種菌（上層菌），共同培養后，對上、下層菌計數得到如圖結果。下列分析正確的是（）

A.實驗中的培養皿、固體培養基和濾膜均需要進行滅菌處理B.對上、下層菌計數時應采用稀釋涂布平板法而不能用顯微鏡直接計數C.由甲、乙、丙三組結果可推測tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性D.野生型細菌X在與tcel-tcil雙突變體和tcel突變體的競爭中均占優勢12、2020年5月22日，在世界權威醫學期刊《柳葉刀》雜志在線刊登了中國陳薇團隊研發的重組腺病毒疫苗I期人體（108位志愿者）試驗臨床數據結果：安全、能誘導免疫反應。重組腺病毒疫苗是一種重組的基因工程產品，用不會使人體致病的腺病毒作為載體，把克隆出來的編碼新冠病毒S蛋白（介導新冠病毒感染細胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進入人體細胞，表達出S蛋白，刺激人體產生針對新冠病毒的免疫應答。相關敘述正確的是（）A.重組腺病毒疫苗包括S蛋白基因、啟動子、終止子和標記基因等B.重組腺病毒疫苗只能使人體產生體液免疫C.重組腺病毒疫苗引發的體液免疫中有吞噬細胞、T細胞的參與D.重組腺病毒疫苗引起免疫反應后相應淋巴細胞增多，細胞周期將變長評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)13、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地說，就是按照_____，把一種生物的_____提取出來，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遺傳性狀。14、功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中______部位的兩個核苷酸之間的______斷開，因此具有______。15、動物細胞融合與植物原生質體融合的原理基本相同，誘導動物細胞融合的方法與植物原生質體融合的方法類似，常用的誘導因素有______等。16、注意：a生理基礎：______，______

b植物細胞融合前需用______和______除去細胞壁17、近年來，克隆技術的發展取得了巨大突破?在日常生活中，我們遇到過與克隆技術有關的問題嗎？_____。評卷人得分四、判斷題(共1題，共6分)18、對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實際應用成果最多的領域，是因為微生物具有生理結構和遺傳物質簡單、生長繁殖快、對環境因素敏感和容易進行遺傳物質操作等優點。（選擇性必修3P101）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共16分)19、單克隆抗體特異性強；靈敏度高，用于診療疾病具有準確；高效等特點。下圖表示單克隆抗體制備過程。

回答下列問題：

（1）若細胞B是小鼠的骨髓瘤細胞；則A是_________________細胞，誘導d過程常用的因素是_________________（答出一個即可）。

（2）用于篩選細胞D的培養基必需滿足兩個條件：一是_________________細胞都會死亡；二是保證_________________細胞能生長。

（3）使用合成培養基體外培養雜交瘤細胞時；通常需要加入_________________等一些天然成分，并置于含有_________混合氣體的培養箱中進行培養。

（4）制備抗新冠病毒單克隆抗體檢測試劑，可用_________________（選填數字標號：①新冠病毒滅活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗）免疫小鼠，以獲得圖中的A細胞。20、某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價（能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數），結果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細胞；需取免疫后小鼠的B淋巴細胞（染色體數目為40條），并將該細胞與體外培養的小鼠骨髓瘤細胞（染色體數目為60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導細胞融合，經篩選培養及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞。

回答下列問題：

（1）制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上，則小鼠最少需要經過___________次免疫后才能有符合要求的。達到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交廇細胞外，可能還有________，體系中出現多種類型細胞的原因是________________。

（3）雜交瘤細胞中有______個細胞核，染色體數目最多是_________條。

（4）未融合的B淋巴細胞經過多次傳代培養后都不能存活，原因是_____________________。21、炭疽；是一種由炭疽芽孢桿菌引起的人獸共患性傳染病，也是我國規定的乙類傳染病。回答下列有關問題：

(1)人通常是通過接觸患炭疽的動物或動物制品被感染，皮膚炭疽病在人類炭疽病中最為常見，這類患者的皮膚滲出物中含有炭疽芽孢桿菌。皮膚炭疽病疑似患者就醫時，醫生先要取患者的皮膚滲出物稀釋后涂布到固體培養基上，經過一段時間的培養獲得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培養基上的菌落進行如圖所示實驗（注：實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽芽孢桿菌）。

①該實驗的目的是_____。

②對照組試管中應加入_____，實驗過程中為避免雜菌污染進行的操作包括_____（至少寫出兩點）。

③實驗結果為_____時；表明該疑似患者被炭疽芽孢桿菌感染。

④實驗過程中需將錐形瓶固定在搖床上，在35℃下振蕩培養24h，直至液體培養基變渾濁。振蕩培養說明炭疽芽孢桿菌的代謝類型是_____，振蕩培養的目的是_____。液體培養基變渾濁的原因是_____。

(3)對炭疽芽孢桿菌進行計數時，選用10-4、10-5、10-6三個稀釋度的菌液，各取0．2mL涂布，每個稀釋度作三次重復，經24h恒溫培養后結果如表。稀釋度10-410-510-6平板編號A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落數31529830245535112911

由表可知，最適合計數的稀釋度為_____，原因是_____。22、Hela細胞系是人工培養具有無限增殖能力的水生瘤細胞系；在世界各地的相關實驗室中為研究者提供了相同的研究對象。回答下列問題：

（1）Hela細胞源自一位美國婦女的宮頸癌細胞，目前實驗室中為了進步研究Hela細胞，需進行___________(填“原代”或“傳代”)培養。在動物細胞培養過程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________________________________________。

（2）某小組為研究葡萄糖饑餓對Hela細胞生長的抑制情況，其他營養條件適宜，用不同葡萄糖濃度的培養基，培養Hela細胞24h，實驗結果如下表所示：。葡萄糖濃度（mmol:L-1）Hela細胞生長抑制率%056．161．036．301．525．002．016．44

該實驗_____________(填“需要”或“不需要”)另設對照組。實驗結果表明：葡萄糖濃度與Hela細胞生長抑制率的關系是____________________。

（3）體內低濃度葡萄糖可_________________癌細胞的增殖，為腫瘤的限食療法提供理論依據。Hela細胞在生物醫學領域應用廣泛，例如，它幫助科學家首次實現了人源細胞與小鼠細胞融合。細胞融合技術的意義是__________________________________________。評卷人得分六、綜合題(共3題，共27分)23、不知從什么時候開始；酵素被賦予了各種神奇色彩，如“排毒；美容養顏，甚至減肥，用酵素敷面膜，效果更好”，等等。但實際上，酵素最初的含義就是與發酵過程有關的酶而已。請回答下列問題：

(1)蘋果酒是產量僅次于葡萄酒的世界第二大果酒，參與蘋果酒發酵的酶主要位于酵母菌細胞的____________________中，該過程的酶發揮作用的主要環境條件是____________________。

(2)為了提高蘋果酒的品質，需要用__________（填兩種酶）去除蘋果細胞的細胞壁。蘋果酒如果開瓶后不及時喝掉，很快就會變酸，這是由于____________________。

(3)豆鼓是我國傳統的發酵豆制食品和調味料，與腐乳的制作過程類似，都是利用微生物產生的______（酶的名稱）進行發酵制作而成，含有多種營養成分。在制作腐乳的過程中，加鹽的作用是__________，使豆腐塊變硬，同時__________；避免豆腐塊變質。

(4)纖維素分解菌產生的纖維素酶可以將廢棄物轉化為簡單糖類等產品，對能源、食品和化工原料以及環境污染等具有重要的現實意義，纖維素酶是一種復合酶，其中葡萄糖苷酶的作用是_____________。24、苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的，基因定點整合可以將正常PKU基因定點整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體DNA上，替換突變基因，用于研究該病的治療。基因定點整合的過程是：從染色體DNA的突變PKU基因兩側各選擇一段DNA序列HB1和HB2，根據其堿基序列分別合成HB1和HB2，再將兩者分別與基因K1、K2連接，中間插入正常PKU基因和標記基因neor；構建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發生交換，導致兩者之間區域發生互換（如下圖）。

(1)構建重組載體時，需采用PCR技術對PKU基因進行擴增，PCR擴增的原理是_______。擴增時，需要先加熱至90~95℃使DNA解鏈后，后冷卻至55～60℃的目的是___________。

(2)重組載體中的HB1和HB2之間除了插入正常的PKU基因和neor基因以外，還必須含有_____。neor基因的作用是_________。

(3)用圖中重組載體轉化時，會出現一些PKU基因錯誤整合的胚胎干細胞。錯誤整合時，載體的兩個K基因中至少會有一個與neor基因一起整合到染色體DNA上，已知含有neor基因的細胞具有G418的抗性。Kl、K2的產物都能把DHPG轉化成有毒物質而使細胞死亡。根據上述信息，設計簡要的實驗方案從轉化的胚胎干細胞中篩選出正確整合的胚胎干細胞_____。25、西北農業大學的科學家們將抗煙草花葉病毒的基因與土壤農桿菌的質粒進行重組。下圖表示構建重組質粒和篩選含抗煙草花葉病毒基因的土壤農桿菌的過程；請據圖回答：

圖1表示含有目的基因的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列；限制性核酸內切酶SmaⅠ的識別序列為CCCGGG，切點在C和G之間。

（1）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，其產物長度為___________。若圖1中虛線方框內的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變為基因d。從雜合子中分離出圖1及對應的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產物中共有___________種不同長度的DNA片段。

（2）構建重組質粒需要_____酶，為了促進重組質粒導入土壤農桿菌的過程，常用_________處理土壤農桿菌，使之成為感受態，即___________。

（3）分析圖中B、C兩個培養基上的菌落存活情況，含抗煙草花葉病毒基因的菌落位于____________（B/C）上，由此可知目的基因很可能是插入到________________（卡那霉素基因/氯霉素基因）中。

（4）將含有重組質粒的土壤農桿菌轉入煙草的葉肉細胞后，通過_____技術培養成抗煙草花葉病毒的煙草植株，為檢測轉基因煙草是否抗煙草花葉病毒，可采用________的方法檢測煙草體內是否含煙草花葉病毒的蛋白質，也可進行___________水平的鑒定，既用病毒進行接種實驗。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、C【分析】【分析】

自養微生物以二氧化碳作為主要或唯一的碳源。原因:自養微生物可以通過細菌光合作用或化能合成作用獲得能量,以無機氮化物作為氮源。

【詳解】

A；自養微生物可以利用無機碳源合成自身需要的營養物質；糖類是有機碳，能利用糖類的是異養微生物，A錯誤。

B；石油中含有有機物；利用石油的微生物也是異樣微生物，B錯誤。

C；二氧化碳是無機碳；能利用無機碳的是自養微生物，C正確。

D；花生粉餅中富含有機物；能利用花生粉餅的是異養微生物，D錯誤。

故選C。2、C【分析】【分析】

胚胎發育過程：（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂；數量增加，胚胎總體積不增加；

（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎[之前所有細胞都能發育成完整胚胎的潛能屬全能細胞]；

（3）囊胚：細胞開始分化；其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發育成胎兒的各種組織；而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現囊胚腔；

（4）原腸胚：內細胞團表層形成外胚層；下方細胞形成內胚層，由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔。

【詳解】

A；胚胎干細胞未分化；可從早期胚胎中獲取，A正確；

B；桑葚胚的細胞一般都具有全能性；囊胚的細胞分為為內細胞團和滋養層，所以開始出現分化，B正確；

C；在囊胚階段；胚胎的內部開始出現含有液體的腔，C錯誤；

D；早期卵裂時；胚胎細胞數目不斷增加，但總體積基本不變，D正確。

故選C。3、D【分析】【分析】

DNA的粗提取和分離：

1；DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用這一特點，選擇適當的鹽濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步的分離。

2；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質；但是對DNA沒有影響。大多數蛋白質不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。

3；DNA的鑒定：在沸水浴條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；豬是哺乳動物；哺乳動物的成熟紅細胞中沒有細胞核，不含DNA，不能用于做DNA提取實驗材料，A錯誤；

B；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同；當NaCl溶液的濃度為0.14mo/L時，DNA溶解度最小，0.15mol/L、2mol/LNaCI溶液中溶解度較大，B錯誤；

C；在預冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低；DNA的沉淀量最大，故預冷的乙醇可用來進一步純化粗提的DNA，C錯誤；

D；在沸水浴條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑，D正確。

故選D。

【點睛】4、B【分析】【分析】

蛋白質工程的基本思路是：從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質。蛋白質工程的目標是根據人們對蛋白質功能的特定需求；對蛋白質的結構進行設計改造。由于基因決定蛋白質，因此要對蛋白質的結構進行設計改造，最終還必須通過改造或合成基因來完成。

【詳解】

A；蠶合成像蛛絲蛋白一樣堅韌的絲的過程包括轉錄、翻譯兩個過程；遵循“中心法則”，A錯誤；

B；基因決定蛋白質；因此要對蛋白質的結構進行設計改造，最終還必須通過改造或合成基因來完成，故上述過程運用的蛋白質工程技術是基因工程的延伸，B正確；

C；核酸分子雜交技術不能檢測蛋白質；可用抗原抗體雜交技術檢測蛋白質，C錯誤；

D；利用基因工程技術可以改變基因上特定位點的核苷酸序列；進而實現對蛋白質的改造，D錯誤。

故選B。5、C【分析】【分析】

花粉中含有精子；幾乎不含細胞質，因此受精卵中的細胞質幾乎全部來自卵細胞，所以科學家設法將目的基因整合到受體細胞的葉綠體基因組中后，就不會通過花粉轉移到自然界中的其他植物。

【詳解】

A；題中顯示轉基因作物的目的基因可通過花粉轉移到自然界的其他植物中；說明轉基因植物與其他植物之間可以進行交流，不存在生殖隔離，A錯誤；

B；花粉中的精子在形成過程中；丟掉了大部分的細胞質包括葉綠體，但是卵細胞中含有葉綠體基因組，即葉綠體基因組可以進入到卵細胞中，B錯誤；

C；受精卵中的細胞質幾乎全部來自卵細胞；精子中幾乎不含葉綠體基因組，即葉綠體中的目的基因不會通過花粉傳遞給下一代，可防止造成環境污染，C正確；

D；轉基因植物相當于雜合子；雜交后代會出現性狀分離，D錯誤。

故選C。6、C【分析】【分析】

胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的；生理狀態相同的其它雌性動物的體內，使之繼續發育為新個體的技術，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。

【詳解】

A；因為有兩頭雌性個體和少量北方白犀牛精子；故科研人員可以使用體外受精、胚胎移植等技術繁育北方白犀牛的試管動物，拯救北方白犀牛物種，A正確；

B；目前只有雌性個體；即體細胞只有雌性動物的體細胞，若利用體細胞核移植技術培育出北方白犀牛的克隆動物，該動物一定是雌性，B正確；

C；為了繁育更多子代；可以選擇人工繁育技術得到的桑椹胚（桑葚胚）或囊胚時期的胚胎進行分割，C錯誤；

D；在進行胚胎移植時；要用激素進行同期發情處理，為胚胎移入受體提供相同的生理環境，經同期發情處理過的雌性北方白犀牛不會發生免疫排斥反應，D正確。

故選C。7、C【分析】【分析】

抑菌圈的出現是因為W物質將微生物殺死所致；因此抑菌圈直徑越大，表示W物質對微生物的殺傷作用越強，抑菌效果越好。題圖信息顯示：隨著提取物W擴散時間的延長，抑菌圈平均增幅速率先增加后減少，但是抑菌圈的直徑逐漸增大，說明抑菌效果逐漸增強。

【詳解】

A；菌液中含有試驗菌；將一定量菌液與冷卻后的滅菌培養基混勻并倒平板可得到試驗菌平板，A正確；

B；在平板上打孔時；需要防止打孔的鋼管上可能存在的微生物污染平板，因此在平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，B正確；

C；抑菌圈的大小與抑菌效果呈正相關；提取物W在培養基中擴散，加入提取物W后的2小時，抑菌圈的直徑沒有達到最大值，說明還沒有獲得最佳抑菌效果，C錯誤；

D；試驗菌的數量隨菌體濃度的增加而增多；W物質的分子數量隨提取物W的濃度的增加而增多，抑菌圈直徑的大小隨著提取物W擴散時間的延長而增大，因此菌體濃度、提取物W的濃度和擴散時間都會對抑菌圈直徑的大小造成影響，D正確。

故選C。二、多選題(共5題，共10分)8、A:B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養雜交瘤細胞（體內培養和體外培養），最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；制備單克隆抗體是動物細胞融合技術最重要的應用；融合后形成的雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產生單克隆抗體，A正確；

B；單克隆抗體具有特異性強、純度高、靈敏度高；并可能大量制備的特點，B正確；

C；體內誘生法制備的單克隆抗體需要注入到小鼠的體內；最后從小鼠的腹腔中提取腹水，此方法比較麻煩，而且抗體的量也較少，因此對于工業上需求較多的抗體而言，通常是采用體外培養法，C錯誤；

D；單克隆抗體是由骨髓瘤細胞和效應B細胞形成的雜交瘤細胞產生的；D錯誤。

故選AB。9、A:B:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的實驗原理：1；DNA的溶解性（1）DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用這一特點，選擇適當的鹽濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精．利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步的分離。2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質，但是對DNA沒有影響。大多數蛋白質不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性．洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。3、DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；檸檬酸鈉可以防止血液凝固；因此獲取雞血時，容器中應先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固，加入適量的NaCl溶液目的是維持血細胞的形態，A錯誤；

B；DNA對高溫的耐受性比蛋白質強；DNA不溶于冷酒精，而其他雜質可溶于酒精，則用體積分數為95%的冷酒精能提純DNA，B錯誤；

C；木瓜蛋白酶能分解蛋白質；但不能分解DNA，因此可用木瓜蛋白酶純化過濾后研磨液中的DNA，C正確；

D；當氯化鈉的物質的量濃度為0.14mol/L時；DNA的溶解度最低，DNA析出量最大，因此向溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液中緩緩加蒸餾水，直至析出物不再增加為止，D錯誤。

故選ABD。10、A:D【分析】【分析】

培養基的概念及營養構成。

（1）概念：人們按照微生物對營養物質的不同需求；配制出的供其生長繁殖的營養基質。

（2）營養構成：各種培養基一般都含有水；碳源、氮源、無機鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求．例如，培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素，培養霉菌時需將培養基的pH調至酸性，培養細菌時需將pH調至中性或微堿性，培養厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。

【詳解】

A；平板上不含任何生長因子；若倒成平板后直接培養，出現菌落說明已被雜菌感染，因為該嗜熱菌不能在缺乏生長因子的培養基中生長，A正確；

B；制備平板時；先滅菌再倒平板，B錯誤；

C；圖中菌落生活在乙丙區域之間；說明同時需要乙和丙，C錯誤；

D；不同菌種所需生長因子不同；可利用生長圖形法篩選菌種，D正確。

故選AD。11、A:B:C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

【詳解】

A；為避免雜菌的污染；實驗中的濾膜、培養皿、固體培養基等均需滅菌處理，A正確；

B；對活菌進行計數的方法是稀釋涂布平板法；具體方法是：先將菌體進行梯度稀釋，再涂布到濾膜的表面，待菌落數穩定時進行計數，不能用顯微鏡直接計數的原因是顯微鏡直接計數不能區分死菌和活菌，B正確；

C；tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白；乙組中野生型可產生tce1蛋白作用于tcel-tcil雙突變體，后者無法產生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在競爭中占據優勢；而在丙組中，野生型可產生tce1蛋白作用于tcel突變體，后者可以產生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生長受到抑制，由此推測，tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性，C正確；

D；由甲組、乙組可知；野生型細菌X在與tcel-tcil雙突變體的競爭中均占優勢，由甲組、丙組可知，野生型細菌X在與tcel突變體的競爭中不占優勢，D錯誤。

故選ABC。12、A:C【分析】【分析】

編碼新冠病毒的S蛋白不具有感染性；但可以引起機體產生特異性免疫，腺病毒不會使人致病，可將克隆出來的編碼新冠病毒S蛋白（介導新冠病毒感染細胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進入人體細胞，表達出S蛋白，刺激人體產生針對新冠病毒的免疫應答。

【詳解】

A；基因表達載體的構建是基因工程的核心；一個完整的基因表達載體至少包括目的基因（S蛋白基因）、啟動子、終止子和標記基因等，A正確；

B；由于病毒需要寄生在細胞內；且S蛋白是在細胞內合成的，所以重組腺病毒疫苗能使人體產生體液免疫和細胞免疫，B錯誤；

C；重組腺病毒疫苗引發的體液免疫中有吞噬細胞（處理抗原）、T細胞（釋放淋巴因子）的參與；C正確；

D；重組腺病毒疫苗引起免疫反應后相應淋巴細胞增多；細胞周期將變短，D錯誤。

故選AC。

【點睛】三、填空題(共5題，共10分)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因重組基因拼接技術DNA重組技術人們意愿某種基因修飾改造另一種生物細胞里定向14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】特定磷酸二酯鍵特異性15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細胞膜流動性植物細胞全能性纖維素酶果膠酶17、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到過的與克隆技術有關的問題有：

①瀕臨滅絕動物的克隆：克隆可以拯救瀕危的國家保護動物以及植物；我們可運用克隆，復制瀕臨滅絕的生物，讓其不至于在我們的生活中消失；

②農業克隆：應用于農業等領域；通過轉基因的方式，增加糧食的畝產量，提高土地的單位出產量；

③細胞克隆替代或者修復人體細胞問題；比如胚胎干細胞；

④畜牧業克隆：應用于畜牧業，提升優良品種群體基數，縮短畜牧育種年限。【解析】有，比如：①瀕臨滅絕動物的克隆；②農業克隆：應用于農業等領域，通過轉基因的方式，增加糧食的畝產量，提高土地的單位出產量；③細胞克隆替代或者修復人體細胞問題，比如胚胎干細胞；④畜牧業克隆：應用于畜牧業，提升優良品種群體基數，縮短畜牧育種年限。四、判斷題(共1題，共6分)18、A【分析】【詳解】

微生物具有生理結構和遺傳物質簡單的優點，便于研究，生長周期短，具有生長繁殖快的優點，遺傳物質簡單，具有容易進行遺傳物質操作的優點，對環境因素敏感，因此對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實際應用成果最多的領域，這句話是正確的。五、實驗題(共4題，共16分)19、略

【分析】【分析】

1；動物細胞培養注意事項：

（1）原理：細胞增殖。

（2）培養基性質：液體培養基。動物細胞培養所用的培養基的成分與體內細胞基本相同；如需要有葡萄糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、動物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無菌環境。

（3）需要使用動物血清。

（4）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（5）無菌條件下進行。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素；以防培養過程中的污染。此外，應定期更換培養液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。

（6）氣體環境：95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養液的pH。

2；單克隆抗體的制備：

（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細胞能產生特異性抗體。②細胞融合原理：利用病毒對宿主細胞的穿透性使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合。③動物細胞培養技術：對雜交瘤細胞進行體內；體外培養。

（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：①免疫B細胞（漿細胞）：能產生單一抗體；但不能無限增殖。②骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產生抗體。③雜交瘤細胞：既能產生單一抗體，又能在體外培養條件下無限增殖。

（4）動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；細胞的增殖。動物細胞融合誘導手段有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等；結果產生雜交細胞。

【詳解】

（1）若細胞B是小鼠的骨髓瘤細胞；則此過程可以為單克隆抗體的制備過程。故A是已經免疫的B淋巴細胞或能產生特定抗體的B細胞。動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；細胞的增殖。動物細胞融合誘導手段（誘導d過程）有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結果產生雜交細胞。

（2）一般來說；誘導A細胞和B細胞融合，形成C細胞后，必須利用選擇培養基來篩選出目的細胞。那么滿足的條件必須是：未融合的（親本）細胞和融合的同種（核的）細胞都會死亡，而雜交（瘤）細胞（或雜種細胞）能夠在選擇培養基上生長。

（3）動物細胞培養注意事項：一是液體培養基。動物細胞培養所用的培養基的成分與體內細胞基本相同，如需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、動物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無菌環境。二是氣體環境：95%空氣+5%CO2。

（4）選用免疫原性好的細菌；病毒、立克次體、螺旋體等；經人工培養，再用物理或化學方法將其殺滅制成疫苗，即為滅活疫苗。而新冠病毒為RNA病毒，選用RNA疫苗都可以。故選③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗。

【點睛】

本題考查動物細胞培養、單克隆抗體制備的相關知識，意在考查考生理解所學知識要點，把握知識間內在聯系的能力；能運用所學知識與觀點，對某些現實生活中的生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論。【解析】經過（抗原、病原體）免疫的（小鼠）B（淋巴）細胞（或漿細胞，或已免疫的B細胞，或能產生特定抗體的B細胞）聚乙二醇（PEG）、滅活的（仙臺）病毒、電激（或電融合）未融合的（親本）細胞和融合的同種（核的）細胞雜交（瘤）細胞（或雜種細胞））血清（或血漿）95%空氣和5%CO2③20、略

【分析】【詳解】

本題以雜交瘤細胞為背景；考查了動物細胞融合；細胞分裂和細胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗體效價大于16000，所以最少需要經過四次免疫.由圖可知，血清抗體效價均達到16000以上時，Y的效價最大，最適合用于制備B淋巴細胞。

（2）B細胞與骨髓瘤細胞在一起融合時；可能發生B細胞與骨髓瘤細胞融合，B細胞之間的融合，骨髓瘤細胞之間的融合和B細胞與骨髓瘤細胞融合。由于細胞細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%，故體系中會出現多種類型的細胞。

（3）由于核膜也具有流動性；故小鼠的免疫B淋巴細胞核與其骨髓瘤細胞核會融合形成一個雜交的細胞核。B細胞有40條染色體，骨髓瘤細胞有60條染色體，融合后的雜交瘤細胞有100條染色體。

（4）未融合的B淋巴細胞是已分化的細胞；不能無限增殖，所以多次培養后不能存活。

【點睛】

本題考查動物細胞工程，意在考查考生識記所列知識點，并能運用所學知識做出合理的判斷或得出正確的結論的能力。【解析】4YY小鼠的血清抗體效價最高B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%1100不能無限增殖21、略

【分析】【分析】

1；稀釋涂布平板法：將待測樣品制成均勻的系列稀釋液；盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養基內。2、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞，用接種環在平板表面上作多次由點到線的劃線稀釋而獲得較多獨立分布的單個細胞，并讓其成長為單菌落的方法。

【詳解】

（1）A；B、C中的菌落分布較均勻；是通過稀釋涂布平板法獲得的，而D是通過平板劃線法獲得的，劃線平板法是從上一次劃線的末端開始劃線。故選ABC。

（2）①從整個實驗過程可以看出；實驗通過對皮膚滲出物稀釋培養形成的菌落進行擴大培養后，利用噬菌體的作用檢測其中是否含有炭疽芽孢桿菌。②對照組中加入的液體不應含有噬菌體，因此應加入等量的生理鹽水；在進行微生物培養時為防止雜菌的混入，消毒和滅菌工作是關鍵，主要包括對操作的空間；操作者的衣著和手進行清潔和消毒；將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等進行滅菌；實驗操作在酒精燈火焰附近進行；操作過程中避免已經滅菌的材料用具與周圍物品相接觸等。③若實驗組液體培養基的渾濁度低于對照組，說明實驗組中的炭疽芽孢桿菌被噬菌體侵染與破壞，即該疑似患者感染了炭疽芽孢桿菌。④炭疽芽孢桿菌屬于細菌，能寄生在人和動物體內，說明它是異養型生物，培養時需要借助搖床振蕩培養，說明它是需氧型生物；振蕩培養的目的是增加培養液中的氧氣含量，使細菌與營養物質充分接觸，有利于炭疽芽孢桿菌的大量繁殖；培養液變渾濁表明炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

（3）分析表中數據可知，只有稀釋度為10-5時菌落數在30~300之間，適合用于計數。【解析】(1)ABC

(2)檢驗皮膚炭疽病疑似患者的皮膚滲出物中是否含有炭疽芽孢桿菌與實驗組等量的生理鹽水對操作的空間；操作者的衣著和手進行清潔和消毒；將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等進行滅菌；實驗操作在酒精燈火焰附近進行；操作過程中避免已經滅菌的材料用具與周圍物品相接觸實驗組液體培養基的渾濁度比對照組低（異養）需氧型增加培養液中的氧氣含量；使細菌與營養物質充分接觸炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

(3)10-5稀釋度為10-5時菌落數在30~300之間22、略

【分析】【分析】

1；動物細胞培養的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養。

2；培養條件：

（1）無菌無毒環境：無菌--對培養液和所有培養用具進行無菌處理；在細胞培養液中添加一定量的抗生素；無毒--定期更換培養液；防止細胞代謝產物積累對自身造成危害。

（2）營養：

成分：所需營養物質與體內基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。

培養基類型：合成培養基（將細胞所需的營養物質按其種類和所需數量嚴格配制而成的培養基）

（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜；多數細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

（4）氣體環境：通常采用培養皿或松蓋培養瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。O2是細胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養液的pH。

【詳解】

（1）目前實驗室中為了進一步研究Hela細胞；需進行傳代培養；由于是在多數動物細胞培養液適宜的pH范圍內，胃蛋白酶（最適pH是強酸性）已失去活性，所以在動物細胞培養過程中，需要用胰蛋白酶處理制備細胞懸液。

（2）分析表格數據；該實驗需要另設對照組，觀察在正常條件下細胞生長情況。實驗結果表明：葡萄糖濃度與Hela細胞生長抑制率的關系是葡萄糖濃度越低，Hela細胞生長抑制率越高。

（3）體內低濃度葡萄糖可抑制癌細胞的增殖；為腫瘤的限食療法提供理論依據。兩個或多個細胞融合形成的單核細胞叫做雜交細胞，細胞融合技術的意義是突破了有性雜交局限，使遠緣雜交成為可能。

【點睛】

本題考查動物細胞培養的相關內容，重點考查動物細胞培養的過程和條件，相關知識點只需考生識記即可正確作答，屬于考綱識記層次的考查。對于此類試題，考生在平時的學習過程中，應該注意構建知識網絡結構。【解析】傳代在多數動物細胞培養的適宜pH范圍內，胃蛋白酶已失去活性需要葡萄糖濃度越低，Hela細胞生長抑制率越高抑制突破了有性雜交局限，使遠緣雜交成為可能六、綜合題(共3題，共27分)23、略

【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養需氧型。

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

（1）酒精發酵需要在無氧條件下進行；無氧呼吸的場所是細胞質基質，因為與無氧呼吸相關的酶在細胞質基質。

（2）植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠；根據酶的專一性原理，去除蘋果細胞的細胞壁時，需要用纖維素酶和果膠酶。蘋果酒如果開瓶后不及時喝掉，很