單元四：出血和血栓性疾病的檢驗項目十九：血管壁和血小板止血作用及檢驗任務一血管壁的止血作用及檢驗目錄項目十九：血管壁和血小板止血作用及檢驗任務二血小板的止血作用及檢驗1.掌握：血管壁以及血小板的止血作用；血漿VWF測定、血漿血栓調節蛋白檢測、血漿內皮素-1檢測、血漿6-酮-前列腺素F1a、出血時間測定、血小板粘附、聚集試驗，血小板相關抗體檢測的檢測方法、結果分析和臨床意義。2.熟悉：血小板花生四烯酸代謝、血小板活化表現。3.了解：束臂試驗、血塊收縮試驗結果分析和臨床意義。4.學會依據臨床表現，選擇相關試驗，并對其結果進行分析。學習目標項目十九：血管壁和血小板止血作用及檢驗任務一血管壁的止血作用及檢驗項目十九：血管壁和血小板止血作用及檢驗任務一血管壁的止血作用及檢驗一、概述（一）血管壁的結構ABC內層，即大血管管壁的最內層，與血液接觸，由單層內皮細胞和基底膜組成中層,由平滑肌細胞組成，動脈平滑肌較厚，靜脈較薄，毛細血管則沒有平滑肌層外層,主要由起支持作用的結締組織組成，能夠連續完整地與周圍的組織器官分開血管壁的結構任務一血管壁的止血作用及檢驗01收縮反應02激活血小板03激活凝血04血栓凝固的調節任務一血管壁的止血作用及檢驗（二）、血管壁的作用常見的調節血管舒縮的活性物質

任務一血管壁的止血作用及檢驗束臂試驗出血時間測定血漿vWF檢測凝血酶調節蛋白測定

血漿6酮-前列腺

素F1a測定

血漿內皮素-1檢測任務一血管壁的止血作用及檢驗

（一）束臂試驗【原理】束臂試驗又稱為毛細血管脆性試驗（capillaryfragilitytest，CFT）。束臂試驗是在手臂局部加壓，使靜脈血流受阻給毛細血管以負荷，檢查一定范圍內新出現的出血點來估計血管壁的脆性。本試驗主要與血管壁的結構和功能、血小板的數量和質量以及血漿vWF等因素有關。本試驗測定的敏感性和特異性均較差，已趨向淘汰。【參考值】5cm直徑圓圈內新出血點的數目，男性少于5個；女性及兒童少于10個。任務一血管壁的止血作用及檢驗任務一血管壁的止血作用及檢驗【臨床應用】新出血點數目超過正常為陽性。1．血管壁結構和（或）功能缺陷：如遺傳性出血性毛細血管擴張癥、過敏性紫癜、單純性紫癜及其他血管性紫癜。2．血小板的數量和（或）質量異常：如原發性和繼發性血小板減少癥，血小板增多癥、血小板無力癥等。3．血管性血友病。4．少數正常人，尤其是婦女CFT可呈陽性。

(二)出血時間測定

在特定條件下，皮膚小血管被刺破后，血液自行流出到自然停止的時間稱為出血時間（bleedingtime，BT）。BT的異常與血小板的數量和功能、血管壁的完整性、某些凝血因子缺乏有關。任務一血管壁的止血作用及檢驗1）BT延長主要涉及血小板和血管壁的一期止血缺陷，①血小板數量異常，如血小板減少癥及原發性血小板增多癥；②血小板功能缺陷，如血小板無力癥，巨大血小板綜合征；③血管壁結構異常（少見），如遺傳性出血性毛細血管擴張癥；

④某些凝血因子缺乏，如血管性血友病、低（無）纖維蛋白原血癥和彌散性血管內凝血（DIC）。2）BT縮短見于某些嚴重的血栓性疾病。任務一血管壁的止血作用及檢驗（三）血漿vWF檢測

血管性血友病因子在止凝血過程中起重要作用，除了介導血小板黏附于血管壁的受損處外，它還作為因子Ⅷ的載體。血管性血友病因子抗原（antigenlevelofvonWillebrandfactor，vWF：Ag）的測定，通常采用兩種方法，即火箭電泳法和酶聯免疫吸附法。任務一血管壁的止血作用及檢驗【臨床應用】1）.減低

見于血管性血友病（vonWillebrandDiseases，vWD）是診斷vWD和vWD變異型的重要指標。2）.增高

見于血管內皮損傷，如缺血性心腦血管病、周圍血管病；高凝狀態疾病，如腎病綜合癥、妊娠高血壓、尿毒癥等；其他如大手術后、糖尿病、高脂血癥、DIC等；還可見于劇烈運動后、高原反應等應激狀態時。任務一血管壁的止血作用及檢驗(四)凝血酶調節蛋白測定

凝血酶調節蛋白（thrombomodulin，TM）測定分為TM活性測定（TM：A，發色底物顯色法）和TM抗原測定（TM：Ag，放射免疫法）。任務一血管壁的止血作用及檢驗

【臨床應用】目前認為，TM：A的檢測是血管內皮細胞損傷的標志物。血中TM增高見于急性心肌梗死、動脈粥樣硬化、糖尿病、系統紅斑性狼瘡、風濕性關節炎、彌散性血管內凝血、腦血栓、惡性腫瘤和嚴重肝功能不全等。任務一血管壁的止血作用及檢驗

（五）血漿內皮素-1檢測【原理】常用ELISA雙抗體夾心法測定血漿內皮素-1（endothelin-1，ET-1）含量。【參考值】血漿ET-1<5ng/L（ELISA）【臨床應用】血漿ET-1增高可見于心絞痛、心肌梗死、缺血性腦血管病、原發性高血壓病、高脂蛋白血癥、腎衰竭、肺動脈高壓休克及DIC等。因此血漿ET-1水平可作為了解血管內皮損傷程度的一項指標，用于心血管病患者的療效判斷、預后估計等。任務一血管壁的止血作用及檢驗

（六）血漿6酮-前列腺素F1a測定

【原理】血漿6酮-前列腺素F1a（6-keto-PGF1a）測定，ELISA法：將抗原（6-keto-PGF1a-牛血清白蛋白連接物）包被于酶標反應板，與游離的抗原（待測樣品和6-keto-PGF1a標準品）競爭性地與一定量的抗6-keto-PGF1a抗體結合，洗滌后加入過量的酶標二抗，再加底物顯色。任務一血管壁的止血作用及檢驗

【臨床應用】血漿6酮-前列腺素F1a的水平能客觀地反映血管內皮功能，有助于血管內皮損傷程度的了解和療效評價。血漿6酮-前列腺素F1a減低見于糖尿病、動脈粥樣硬化、急性心肌梗死、心絞痛、腫瘤轉移、腦血管病變及周圍血管血栓形成等。任務一血管壁的止血作用及檢驗任務二血小板的止血作用與檢驗項目十九：血管壁和血小板止血作用及檢驗

1.血小板的止血作用（1）血小板的組成與結構

血小板（platelet）由骨髓中成熟巨核細胞的胞質脫落而產生，由細胞膜包裹著含有顆粒的胞質。直徑1-4μm，平均容積為7.2fl，是哺乳動物中體積最小的血細胞。任務二血小板的止血作用與檢驗產血小板型巨核細胞任務二血小板的止血作用與檢驗

血小板結構可分為表面結構、溶膠質層結構、細胞器內含物。任務二血小板的止血作用與檢驗1）血小板表面結構由血小板膜和開放管道系統（opencanalicularsystem，OCS）組成。血小板表面結構血小板膜開放管道系統膜蛋白膜脂質任務二血小板的止血作用與檢驗主要的血小板膜糖蛋白和功能任務二血小板的止血作用與檢驗2）溶膠質層結構01微管0203致密管道系統微絲任務二血小板的止血作用與檢驗3）細胞器內容物結構

01α-顆粒0203γ-顆粒（溶酶體）δ-顆粒（致密顆粒）任務二血小板的止血作用與檢驗（2）血小板的花生四烯酸代謝任務二血小板的止血作用與檢驗（3）血小板活化表現

血小板參與止血要通過三個步驟才能完成：

首先是血小板與膠原物質間的粘著，以防止血液從損傷的血管內皮外流；

其次是加速內皮損傷處的凝血因子活化，使纖維蛋白在損傷處沉著；

最后是釋放血小板內容物，活化更多的血小板，并促使血管收縮，以利傷口的愈合。這些步驟都可以找到血小板活化的依據。任務二血小板的止血作用與檢驗1）血小板形態改變

血小板呈多角形或多偽足形活化狀態2）血小板表面特殊蛋白的表達GPⅡb/Ⅲa受體和α顆粒膜上的P-選擇素（3）血小板活化表現任務二血小板的止血作用與檢驗3）血小板的止血功能黏附聚集釋放促凝收縮任務二血小板的止血作用與檢驗

血小板止血功能示意圖任務二血小板的止血作用與檢驗2血小板檢驗

（1）血小板計數（見《臨床檢驗基礎》）

（2）血塊退縮試驗

【臨床應用】血塊收縮小于40%，表明收縮不佳，見于血小板無力癥、特發性血小板減少性紫癜、血小板增多癥、低（無）纖維蛋白原血癥、嚴重凝血障礙等。任務二血小板的止血作用與檢驗（3）血小板粘附試驗

【臨床應用】血小板粘附率增高見于高凝狀態和血栓性疾病，如心肌梗死、心絞痛、動脈粥樣硬化、腦血管疾病、糖尿病、腎小球腎炎、口服避孕藥、妊娠高血壓綜合征；血小板粘附率減低見于血管性血友病、巨大血小板綜合征、血小板無力癥、骨髓增生性疾病、尿毒癥及服用血小板抑制藥物（如潘生丁等）。任務二血小板的止血作用與檢驗（4）血小板聚集試驗

【臨床應用】增高反映血小板聚集功能增強。見于血栓前狀態和血栓性疾病，如心肌梗死、心絞痛、糖尿病、腦血管病變、妊高癥、靜脈血栓形成、口服避孕藥、晚期妊娠、高脂血癥、人工心臟、瓣膜移植術和吸煙等；減低反映血小板聚集功能減退。見于血小板無力癥、巨大血小板綜合征、尿毒癥、肝硬化、特發性血小板減少性紫癜（Idiopathicthrombocytopenicpurpura，ITP）、急性白血病、服用抗血小板藥物（如阿司匹林等）、低（無）纖維蛋白原血癥等。任務二血小板的止血作用與檢驗（5）血小板第三因子有效性測定【臨床應用】PF3aT是最常用的血小板凝血活性檢測試驗，方法簡單，易于操作。PF3有效性減低見于先天性血小板PF3缺乏癥，血小板無力癥、巨大血小板綜合征、肝硬化、尿毒癥、彌散性血管內凝血、系統紅斑性狼瘡、特發性血小板減少性紫癜、骨髓增生異常綜合征、急性白血病及服用抗血小板藥物等；PF3有效性增高，見于高脂血癥、動脈粥樣硬化、心肌梗死、糖尿病伴血管病變等。任務二血小板的止血作用與檢驗（6）血小板膜糖蛋白測定

【臨床應用】本試驗具有比較高的敏感性和特異性。GPⅡb/Ⅲa（CD41/CD61）缺乏見于血小板無力癥；GPⅠb（CD42b）缺乏見于巨大血小板綜合征。任務二血小板的止血作用與檢驗（7）血小板相關抗體測定

【臨床應用】作為診斷特發性血小板減少性紫癜（ITP）的指標之一。90%以上ITP患者PAIgG增高，若同時測定PAIgA、PAIgM，則陽性率可達100%；血小板相關抗體也可以作為ITP觀察療效及判斷預后的指標。ITP患者經腎上腺素治療有效者，PAIgG會下降。若PAIgG在2周內下降者其預后良好；PAIgG也有助于研究其他一些疾病的免疫機制，如系統紅斑性狼瘡、Evans綜合征、慢性活動性肝炎、惡性淋巴瘤、多發性骨髓瘤等疾病PAIgG增高。任務二血小