結(jié)核分枝桿菌（TB）抗體診斷試劑盒

（膠體金法）結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查目錄

結(jié)核病的現(xiàn)狀結(jié)核病的防治結(jié)核病的診斷/篩查方法中新科炬的產(chǎn)品產(chǎn)品原理預(yù)期用途檢測(cè)方法與判讀樣本要求操作注意事項(xiàng)產(chǎn)品特點(diǎn)結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查結(jié)核病的現(xiàn)狀

自1882年RobertKoch發(fā)現(xiàn)結(jié)核桿菌（mycobacteriumtuberculosisMTB）以來(lái)，結(jié)核病仍然是僅次于愛(ài)滋病的第二大致死性感染性疾病。聯(lián)合國(guó)1995年確定每年的3月24日為世界防治結(jié)核病日。據(jù)世界衛(wèi)生組織公布2000年度全世界因結(jié)核病致死人數(shù)達(dá)220萬(wàn)，占世界總死亡人數(shù)的4%。全世界有20億人感染過(guò)結(jié)核分枝桿菌，每年約有800萬(wàn)新結(jié)核病患者產(chǎn)生。兒童感染率為9.6%。據(jù)世界衛(wèi)生組織公布2010

年度全球新發(fā)結(jié)核病患者880

萬(wàn)例（區(qū)間為850

萬(wàn)至920

萬(wàn)例），艾滋病毒陰性結(jié)核病患者死亡人數(shù)為110萬(wàn)人（區(qū)間為90萬(wàn)至120萬(wàn)人），另有35

萬(wàn)人（位于32

萬(wàn)至39萬(wàn)人之間）死于艾滋病病毒相關(guān)結(jié)核病。

結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查結(jié)核病現(xiàn)狀

2013年3月24日是第18個(gè)“世界防治結(jié)核病日”據(jù)報(bào)道：全球每年奪走140萬(wàn)人的生命。我國(guó)結(jié)核病人數(shù)居世界第2位，中國(guó)疾控中心結(jié)核病預(yù)防控制中心副主任陳明亭介紹說(shuō)，中國(guó)有5.5億人感染結(jié)核，其中約有10%的人會(huì)發(fā)病。每年有5萬(wàn)人死于結(jié)核病。我國(guó)75%的肺結(jié)核病人年齡在15―54歲之間，給社會(huì)、家庭造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)；80%的肺結(jié)核病人在農(nóng)村。

結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查結(jié)核病的現(xiàn)狀

在過(guò)去的十年間，不斷加大防治工作投入和力度，取得了舉世矚目的成就。但是，中國(guó)作為結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一的現(xiàn)狀并沒(méi)有根本改變。目前，全國(guó)約有肺結(jié)核患者499萬(wàn)，位居全球第二位；每年新發(fā)病人約100萬(wàn)，始終位居全國(guó)甲乙類傳染病報(bào)告發(fā)病數(shù)的前列。國(guó)家衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示2011年肺結(jié)核的發(fā)病953275例，死亡2840例。在28種傳染病中發(fā)病例數(shù)僅次于病毒性肝炎，死亡人數(shù)僅次于艾滋病。

結(jié)核病在全球范圍和中國(guó)仍是一個(gè)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。

結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查結(jié)核病的防治

控制傳染病的三大環(huán)節(jié)

控制傳染源（通過(guò)篩查發(fā)現(xiàn)病人）切斷傳播途徑（通過(guò)治療病人切斷傳播途徑）保護(hù)易感人群（卡介苗免疫效果不理想）可見(jiàn)，結(jié)核篩查是控制結(jié)核病的重要手段。2011年11月由國(guó)務(wù)院辦公廳下發(fā)《全國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃（2011－2015年）》提出，到2015年全國(guó)活動(dòng)性肺結(jié)核患者發(fā)現(xiàn)并治療人數(shù)達(dá)400萬(wàn)和結(jié)核病患者周圍接觸者篩查率達(dá)95%以上的工作指標(biāo)。鼓勵(lì)應(yīng)用新技術(shù)、新方法，提高患者發(fā)現(xiàn)水平。對(duì)結(jié)核病密切接觸者、艾滋病病毒感染者、羈押人群等高危人群以及老年人、學(xué)生、流動(dòng)人口等重點(diǎn)人群的結(jié)核病篩查工作，盡早發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核患者。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查結(jié)核病的診斷/篩查方法

病原學(xué)檢測(cè)：1.痰涂片鏡檢：為各國(guó)結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室都在使用的最基本的細(xì)菌學(xué)檢查方法，具有快速簡(jiǎn)便且價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn)，缺點(diǎn)是無(wú)法判別細(xì)菌是死還是活，而且敏感性較低；特異性差，各種抗酸桿菌均可著色，同時(shí)受到染色劑質(zhì)量的影響，因此往往抗酸染色法的誤診率高。而且由于受到檢測(cè)原理的限制，檢測(cè)的突破性的很難得以進(jìn)展。2.分離培養(yǎng)：結(jié)核菌常規(guī)培養(yǎng)法的優(yōu)點(diǎn)是靈敏度、特異度、正確率較高，是鑒定死、活菌的可靠方法，是目前活菌檢測(cè)不可替代的方法，也是化療反應(yīng)的主要監(jiān)測(cè)指標(biāo);缺點(diǎn)是培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，需要４-８周才能報(bào)告結(jié)果。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查結(jié)核病的診斷/篩查方法免疫學(xué)檢測(cè)：結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)（OT試驗(yàn)）：結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)是最初用于診斷的免疫學(xué)診斷試驗(yàn)，主要用來(lái)了解被試者是否感染了結(jié)核分枝桿菌或作為有無(wú)結(jié)核病的輔助診斷依據(jù)，在結(jié)核病流行病學(xué)方面，可以作為人群感染后結(jié)核的危險(xiǎn)度的指標(biāo)，同時(shí)也是檢測(cè)卡介苗接種效果的一種方法。缺點(diǎn)是：由于是一種間接診斷結(jié)核病的方法，假陽(yáng)性率高極不易標(biāo)準(zhǔn)化。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查結(jié)核病的診斷/篩查方法免疫血清學(xué)檢測(cè)：酶聯(lián)免疫法：此法在臨床運(yùn)用廣泛。特異性，靈敏度較高。免疫膠體金技術(shù)：具有快速，簡(jiǎn)便，適用于結(jié)核病的篩查，涂片培養(yǎng)陰性有臨床癥狀的鑒別診斷。分子生物學(xué)技術(shù)：PCR：靈敏度高，特異性強(qiáng)，需要專業(yè)人士操作，目前處于研究狀態(tài)。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查中新科炬的產(chǎn)品25人份/盒40人份/盒結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查檢測(cè)原理本試劑是利用重組表達(dá)純化的結(jié)核分枝桿菌38KD、16KD抗原包被的NC膜和膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG及其它試劑制成的膠體金免疫診斷試劑。運(yùn)用免疫層析法檢測(cè)血清或血漿中的抗結(jié)核分枝桿菌抗體，用于結(jié)核病的輔助診斷。此法具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、使用方便、顯示結(jié)果快捷、易于保存等優(yōu)點(diǎn)。TB抗體診斷試紙條結(jié)構(gòu)示意圖結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查預(yù)期用途

本產(chǎn)品為結(jié)核分枝桿菌(TB)抗體診斷試劑盒(膠體金法)，檢測(cè)被檢血清或血漿中的抗TBIgG抗體，用于結(jié)核病的輔助診斷。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查檢驗(yàn)方法

1．將檢測(cè)卡和待檢標(biāo)本平衡至室溫，撕開(kāi)鋁箔袋，取出檢測(cè)卡，平放于桌面上。2．用移液槍調(diào)節(jié)加樣量為4ul，從樣品管中取出4ul血清或血漿，加入檢測(cè)卡的NC膜區(qū)中間位置，待樣品完全吸收后，在加樣孔加入50－80ul稀釋液，使膠體金層析。同時(shí)計(jì)時(shí)。3．15分鐘內(nèi)觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果（強(qiáng)陽(yáng)性樣本幾分鐘內(nèi)可顯示結(jié)果），超過(guò)30分鐘，結(jié)果無(wú)效。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查檢測(cè)方法與判讀結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查樣本要求

血清（血漿）標(biāo)本按常規(guī)方法由靜脈采集。5天內(nèi)測(cè)定的標(biāo)本可放置4℃保存。標(biāo)本放置在-20℃至少可保存3個(gè)月。標(biāo)本盡可能避免溶血或反復(fù)凍溶。混濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)離心或過(guò)濾澄清后再檢測(cè)。需保存的血清（血漿）在采集、保存過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查操作注意事項(xiàng)加樣量必須在4-6ul之間。加樣位置必須在反應(yīng)窗口中間的藍(lán)線上，加樣時(shí)注意不要?jiǎng)澠芅C膜。加緩沖液（稀釋液）的位置必須在標(biāo)有“緩沖液”的小孔中。加緩沖液（稀釋液）的時(shí)間必須在樣本剛剛擴(kuò)散超過(guò)T線和C線的位置后即刻加入2滴（50-80ul）緩沖液（稀釋液）。15分鐘內(nèi)判讀結(jié)果。30分鐘后結(jié)果無(wú)效。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查中新科炬產(chǎn)品特點(diǎn)

獨(dú)特抗原不受卡介苗的影響專利技術(shù)微量加樣靈敏度和特異性高可檢測(cè)出非開(kāi)放期結(jié)核病適合現(xiàn)場(chǎng)篩查使用結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查獨(dú)特抗原

包被抗原是重組表達(dá)制備TB16KDa、TB38KDa和獨(dú)特抗原。

TB16抗原是一種毒力相關(guān)基因hspX所編碼的低分子質(zhì)量蛋白質(zhì)，是TB處于靜息期時(shí)分泌的主要膜蛋白，大多數(shù)人體對(duì)16kd產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答，其抗體在TB患者中有相當(dāng)高的陽(yáng)性率(46%～50%)。

38kD蛋白是1986年YoungD等人首次用單克隆抗體為基礎(chǔ)經(jīng)親和層析純化而成。獨(dú)特抗原：靈敏度高，特異性好。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查不受卡介苗的影響16kD抗體在BCG免疫后產(chǎn)生中的量極少，檢測(cè)患者血清中16kD抗體與人型PPD抗體對(duì)于診斷結(jié)核的敏感性和特異性均無(wú)顯著差異，然而B(niǎo)CG陽(yáng)性者中特異性要高于PPD，能將結(jié)核病患者與BCG接種區(qū)別開(kāi)來(lái)。AndersenAB等從結(jié)核桿菌中分離了該蛋白的基因,認(rèn)為38kD只能在致病的分枝桿菌中檢出，BCG中只能檢出非常少的量，而其他分枝桿菌不能檢出。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查不受卡介苗的影響

我國(guó)數(shù)十年來(lái)已開(kāi)始BCG的接種，幾乎所有人都進(jìn)行過(guò)接種，BCG的陽(yáng)性率非常高，小學(xué)生陽(yáng)性水平達(dá)50-90%，成人亦基本不低于30%。

16KD、38KD和獨(dú)特抗原作為診斷抗原的敏感性和特異性與ＢＣＧ有顯著差異，也證明了抗原和BCG的交叉反應(yīng)率極低。試劑選用重組表達(dá)的抗原也避免了因抗原不純，含有和BCG相似的少量雜質(zhì)蛋白而產(chǎn)生的交叉反應(yīng)。研發(fā)人員對(duì)不同的抗原、包被抗原的用量和比例進(jìn)行多重的試驗(yàn)和優(yōu)化，使其最低檢出量控制在一定的水平，能有效區(qū)分出感染和接種抗體含量差別，避免了BCG的交叉感染。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查專利技術(shù)專利受理號(hào)：2.X

結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查微量加樣，快速判讀獨(dú)特的NC膜上加樣檢測(cè)技術(shù)15分種內(nèi)快速觀察結(jié)果結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查靈敏度特異性高臨床單位與樣本數(shù)：在華北油田總醫(yī)院、北京老年醫(yī)院和南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院進(jìn)行臨床試驗(yàn)，分別收集臨床樣本331、372和328例，共1031例，臨床樣本：按中華醫(yī)學(xué)會(huì)出版《臨床技術(shù)操作規(guī)范（結(jié)核病分冊(cè)）》要求綜合診斷確診(金標(biāo)準(zhǔn))為結(jié)核病患者或非結(jié)核病患者血清(血漿)樣本，其中結(jié)核病患者樣本511例，非結(jié)核病患者樣本520例。結(jié)核病現(xiàn)狀與現(xiàn)場(chǎng)篩查靈敏度特異性高臨床結(jié)果：

和金標(biāo)準(zhǔn)相比考核中新科炬試劑的靈敏度為78.3%，特異性為90.4%；總符合率為84.4%。奧普生物試劑的敏度為69.3%，特異性為89.2%；總符合率為79.3%。中新科炬試劑與上海奧普的試劑的陽(yáng)性符合率為90.0％，陰性符合率為87.0％，總符合率為88.2％相對(duì)上海奧普的T