ICS65.020.01

B05

DB41

河南省地方標準

DB41/T1930—2019

泡桐組織培養快繁技術規程

2019-11-21發布2020-02-21實施

河南省市場監督管理局發布

DB41/T1930—2019

目次

前言...............................................................................II

1范圍..............................................................................1

2術語和定義........................................................................1

3外植體的無菌化培養................................................................1

4芽誘導............................................................................2

5增殖培養..........................................................................2

6生根培養..........................................................................2

7煉苗與移栽........................................................................2

I

DB41/T1930—2019

前言

本標準按照GB/T1.1—2009給出的規則起草。

本標準由河南省林業局提出并歸口。

本標準起草單位：河南農業大學、河南省林業科學研究院。

本標準主要起草人：范國強、翟曉巧、趙振利、陳卓、劉榮寧、李永生、曹喜兵、林海、劉輝。

II

DB41/T1930—2019

泡桐組織培養快繁技術規程

1范圍

本標準規定了泡桐組織培養快繁的術語和定義、外植體的無菌化培養、芽誘導、增殖培養、生根培

養、煉苗移栽、檔案管理。

本標準適用于泡桐組織培養快速繁殖。

2術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

2.1

泡桐組織培養

在無菌條件下，將泡桐的種子、葉片或莖段接種在裝有人工配制培養基的培養瓶中。將培養瓶放置

于人工控制光照和溫度的組織培養室內，使之生長、分化或發育成完整植株的培養技術。

2.2

外植體

從植物活體上切取下來用于建立組織培養體系的材料，包括完整植株、器官或組織。

2.3

植物生長調節物質

調節植物生長發育的物質。

2.4

芽誘導

將培養材料在誘導培養基中進行培養，分化出不定芽的過程。

2.5

增殖培養

把外植體培養獲得的培養物轉移到增殖培養基中，使培養物得以成倍增殖的過程。

2.6

生根培養

將芽轉移到生根培養基中進行生根培養，形成完整植株的過程。

3外植體的無菌化培養

3.1枝條無菌化材料培養

取生長健康的泡桐當年生帶有腋芽或頂芽的嫩枝，用清水清洗后，先用質量分數為0.1%HgCl2消毒

8min，再用無菌水清洗5次，然后接種于不附加植物生長調節物質的MS基本培養基上。培養基中蔗糖濃

度20g/L，瓊脂濃度3.0g/L～8.0g/L。培養瓶放置于培養室中，培養溫度25℃±2℃，光照強度

130μmoL/m2·s，光照時間16h/d。60d可獲得3～4對葉片的無菌材料，其葉片和莖段用作芽誘導的材

料。

1

DB41/T1930—2019

3.2種子無菌化材料培養

采集生長健康的泡桐當年生種子，先用70%酒精消毒30s，再放入0.1%HgCl2溶液中進行浸泡消

毒5min，然后用無菌水沖洗3～5次。最后將種子接種于不附加植物生長調節物質的MS培養基上，培養

基中蔗糖濃度20g/L，瓊脂濃度5.0g/L。培養瓶放置于培養室中，培養溫度、光照強度和光照時間

同3.1。50d后可獲得3～4對葉片的無菌材料，其葉片和莖段用作芽誘導的材料。

4芽誘導

4.1葉片外植體芽的誘導

將獲得的無菌葉片沿主脈切成約1.0cm×2.0cm的外植體，接種于附加不同濃度6-BA（8mg/L～

18mg/L）和NAA（0.1mg/L～0.5mg/L）的MS培養基上，培養基中蔗糖濃度20g/L，瓊脂濃度5.0g/L。

培養瓶放置于培養室中，培養溫度、光照強度和光照時間同3.1。培養35d后，在葉緣處分化出芽。

4.2莖段外植體芽的誘導

將獲得的無菌莖段切成長1cm左右的外植體，接種于附加不同濃度6-BA（10mg/L～18mg/L）和NAA

（0.2mg/L～0.5mg/L）的MS基本培養基上，培養基中蔗糖濃度20g/L，瓊脂濃度5.0g/L。培養瓶放

置于培養室中，培養溫度、光照強度和光照時間同3.1。培養30d后分化出芽。

5增殖培養

將誘導出的芽接種于附加不同濃度6-BA（8mg/L～12mg/L）和NAA（0.1mg/L～0.5mg/L）的MS基

本培養基上，培養基中蔗糖濃度20g/L，瓊脂濃度5.0g/L。培養瓶放置于培養室中，培養溫度、光照

強度和光照時間同3.1。35d后長出叢生芽。

6生根培養

當誘導出的泡桐芽長到約3cm時，從莖基部切下，接種于附加不同濃度NAA（0.1mg/L～0.5mg/L）

的1/2MS培養基上進行生根培養，培養基中蔗糖質量濃度為20g/L，瓊脂4.5g/L。培養瓶放置于培養室

中，培養溫度、光照強度和光照時間同4.1。7d后分化出根。

7煉苗與移栽

當泡桐幼苗的根在生根培養基上長到約3cm時，逐步去掉組培瓶蓋，在溫室內鍛煉7d，然后移入

盛有蛭石或草炭土（經5%的高錳酸鉀消毒處理或121℃高溫滅菌20min）的營養缽中。用1/2MS營養液

澆灌濕潤，放到溫室中培養，溫室溫度25℃～28℃，開始2周空氣濕度85%以上，2周后濕度逐漸降低

與室外環境相同，4～5周后，可以移栽到大田中。

8檔案管理

建立泡桐組織培養基本情況檔案，包括以下內容：品種名稱、材料來源、培養過程、培養照片等。

檔案由組培人員填寫，檔案填寫后，及時整理歸檔。

________________________________

2

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目次

前言...............................................................................II

1范圍..............................................................................1

2術語和定義........................................................................1

3外植體的無菌化培養................................................................1

4芽誘導............................................................................2

5增殖培養..........................................................................2

6生根培養..........................................................................2

7煉苗與移栽........................................................................2

I

DB41/T1930—2019

前言

本標準按照GB/T1.1—2009給出的規則起草。

本標準由河南省林業局提出并歸口。

本標準起草單位：河南農業大學、河南省林業科學研究院。

本標準主要起草人：范國強、翟曉巧、趙振利、陳卓、劉榮寧、李永生、曹喜兵、林海、劉輝。

II

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泡桐組織培養快繁技術規程

1范圍

本標準規定了泡桐組織培養快繁的術語和定義、外植體的無菌化培養、芽誘導、增殖培養、生根培

養、煉苗移栽、檔案管理。

本標準適用于泡桐組織培養快速繁殖。

2術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

2.1

泡桐組織培養

在無菌條件下，將泡桐的種子、葉片或莖段接種在裝有人工配制培養基的培養瓶