SIRPα敲除對小鼠能量代謝的影響及機制的初步研究的任務書任務書一、研究背景近年來，代謝性疾病（如肥胖癥、糖尿病等）在全球范圍內呈逐年上升趨勢，嚴重影響了人類健康。針對這些代謝性疾病的治療方法主要包括藥物治療和運動療法等，然而目前仍存在不少問題，如藥物副作用大、長時間使用可能耐藥等問題。因此，進一步探究機體內能量代謝調節的分子機制，發掘新的治療靶點，對于預防和治療代謝性疾病具有重要意義。SIRPα是一種單核細胞表面受體，即信號傳導調節蛋白α（Signalregulatoryproteinα），已被證明參與了許多生理和病理狀態的調節，并在調節細胞免疫、神經遞質釋放、腫瘤發生等方面發揮了重要作用。最近的研究表明，SIRPα在調節機體代謝方面也具有重要作用。一項研究發現，在小鼠體內SIRPα基因表達量降低后，小鼠增重減緩，能量消耗增加，脂肪存儲減少，血糖水平也下降，提示SIRPα可能與小鼠能量代謝調節有關。因此，進一步研究SIRPα在能量代謝調節上的作用及機制，對于揭示代謝性疾病的發生機制、發現新的治療靶點具有重要意義。二、研究內容本研究將構建SIRPα敲除小鼠模型，研究SIRPα敲除對小鼠能量代謝的影響及機制。具體內容如下：1.構建SIRPα敲除小鼠模型。在小鼠基因組中靶向敲除SIRPα基因，制備SIRPα基因敲除小鼠模型。采用PCR鑒定、DNA測序等方法對敲除小鼠模型進行鑒定。2.對SIRPα敲除小鼠的基本生理、代謝特征進行研究。對SIRPα敲除小鼠和野生型小鼠（對照組）進行體重監測、體組分分析、血糖測定等，比較兩組小鼠的基本生理、代謝特征差異。3.研究SIRPα敲除對小鼠能量代謝調節的影響。利用代謝艙測定技術，測定SIRPα敲除小鼠和野生型小鼠的能量消耗、氧耗量等指標，比較兩組小鼠的代謝差異。4.探究SIRPα敲除對小鼠脂肪代謝的影響。對SIRPα敲除小鼠和野生型小鼠的脂肪組織進行組織學、基因表達及脂質代謝相關指標的測定，比較兩組小鼠的脂質代謝差異。5.揭示SIRPα敲除作用的分子機制。通過RNA測序等技術，分析SIRPα敲除對小鼠基因表達譜的影響，篩選出變化明顯的基因并進一步進行生物信息學分析，探究SIRPα敲除作用的可能分子機制。三、研究意義及預期結果本研究將系統探究SIRPα在小鼠能量代謝調節上的作用及機制，揭示SIRPα作為潛在治療靶點的可能性，并為代謝性疾病的預防和治療提供新的思路。預期結果包括：1.成功構建SIRPα敲除小鼠模型，并鑒定敲除效果。2.描述SIRPα敲除小鼠的基本生理、代謝特征和能量代謝調節的差異。3.研究SIRPα敲除對小鼠脂質代謝的影響，并探究其分子機制。4.揭示SIRPα作為治療代謝性疾病的潛在新靶點。四、研究方法與技術路線1.構建SIRPα敲除小鼠模型。基于CRISPR/Cas9基因編輯技術靶向敲除小鼠基因組中的SIRPα基因，利用PCR鑒定、DNA測序等方法對敲除小鼠模型進行鑒定。2.對SIRPα敲除小鼠的基本生理、代謝特征進行研究。采用體重監測、體組分分析、血糖測定等方法，對SIRPα敲除小鼠和野生型小鼠進行生理生化指標的測定，比較兩組小鼠的差異。3.研究SIRPα敲除對小鼠能量代謝調節的影響。利用代謝艙測定技術對SIRPα敲除小鼠和野生型小鼠的能量消耗、氧耗量等指標進行測定。4.研究SIRPα敲除對小鼠脂肪代謝的影響。對SIRPα敲除小鼠和野生型小鼠的脂肪組織進行組織學、基因表達及脂質代謝相關指標的測定，比較兩組小鼠的差異。5.揭示SIRPα敲除作用的分子機制。通過RNA測序分析SIRPα敲除對小鼠基因表達譜的影響，并篩選出變化明顯的基因，進一步進行實時熒光定量PCR和生物信息學分析，探究SIRPα敲除作用的分子機制。五、工作計劃和進度安排第1-2個月：閱讀相關文獻，熟悉實驗室基本操作流程和安全規范。第3-6個月：構建SIRPα敲除小鼠模型，并鑒定敲除效果。第7-9個月：對SIRPα敲除小鼠的基本生理、代謝特征進行研究。第10-12個月：研究SIRPα敲除對小鼠能量代謝調節的影響。第13-15個月：研究SIRPα敲除對小鼠脂肪代謝的影響。第16-20個月：揭示SIRPα敲除作用的分子機制。第21-24個月：撰寫論文并進行實驗結果的總結與歸納。六、經費預算本項目的經費主要用于實驗材料采購、實驗設備及儀器維護、實驗室能源、論文發表等。1.實驗材料采購：20,000元。2.實驗設備及儀器維護：5,000元