第59課時動物細胞工程課標要求1.闡明動物細胞培養的條件和過程。2.闡明動物細胞核移植的原理和過程。3.闡明動物細胞融合的概念。4.概述細胞融合技術是單克隆抗體制備的重要技術。5.簡述干細胞在生物醫學工程中有廣泛的應用價值。考情分析1.動物細胞培養技術2022·福建·T32022·江蘇·T142022·湖北·T62.動物細胞融合和單克隆抗體的制備2023·北京·T122023·湖北·T222022·山東·T152022·福建·T132021·山東·T152021·江蘇·T112020·全國Ⅰ·T383.動物細胞核移植技術2023·天津·T72021·遼寧·T132020·天津·T1考點一動物細胞培養1．動物細胞培養的概念從動物體中取出相關的組織，將它分散成______________________，然后在適宜的培養條件下，讓這些細胞__________________________的技術。2．動物細胞培養的條件3．動物細胞培養的過程(1)細胞貼壁：體外培養的大多數動物細胞往往________在培養瓶的瓶壁上。(2)接觸抑制：當貼壁細胞分裂生長到表面________________時，細胞通常會停止________________。(3)原代培養：________之前的細胞培養，即動物組織經處理后的________________。(4)傳代培養：________后的細胞培養。

4.干細胞培養及其應用種類胚胎干細胞成體干細胞誘導多能干細胞來源骨髓、臍帶血和外周血體細胞(如成纖維細胞等)特點能分化為成年動物體內的任何一種類型的細胞，并進一步形成機體的組織和器官甚至______________________________________________________________分化成________________________________________________________能誘導分化成類似__________________的細胞應用分化成心肌細胞、神經元和造血干細胞等造血干細胞用于治療白血病等；神經干細胞用于治療帕金森病、阿爾茨海默病等治療小鼠的鐮狀細胞貧血、阿爾茨海默病、心血管疾病等(1)在進行細胞培養時，通常采用培養皿或打開培養瓶蓋的方式以獲取新陳代謝所必需的O2()(2)將動物細胞置于含有95%O2和5%CO2的混合氣體的CO2培養箱中進行培養()(3)動物細胞在培養過程中都具有細胞貼壁的現象()(4)培養動物細胞的第一代(即第一次細胞增殖)被稱為原代培養()(5)干細胞都能分化成多種類型的細胞()(6)胚胎干細胞是發現最早、研究最多、應用也最為成熟的一類成體干細胞()為研究長春新堿(VCR)對肝癌細胞凋亡的影響，科研人員進行了相關研究。①將等量的小鼠肝癌Hepa1－6細胞懸液，分別接種于若干個含有等量培養液的培養瓶中；②將培養瓶放于37℃、5%CO2培養箱中培養24h，靜置、去除上清液；③分別加入等量但含不同濃度VCR的培養液，置于37℃、5%的CO2培養箱中繼續培養；④分別在24h、36h、48h時吸取培養液，觀察結果，得到不同濃度VCR作用于肝癌細胞不同時間的抑制率(%)如表所示。濃度24h36h48h0.5mg/mL12.517.2261.0mg/mL20.531422.0mg/mL31.538.847請回答下列問題：(1)步驟③中需要設置對照組，對照組的處理方法為_____________________________。步驟③中每個實驗組設置5個培養瓶同時進行培養，計數后統計平均值，目的是什么？______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(2)根據表格中的結果可以得出的結論是什么？______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________考向一動物細胞培養1．航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養的心肌細胞跳動的視頻。下列相關敘述正確的是()A．培養心肌細胞的器具和試劑都要先進行高壓蒸汽滅菌B．培養心肌細胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳C．心肌細胞在培養容器中通過有絲分裂不斷增殖D．心肌細胞在神經細胞發出的神經沖動的支配下跳動2．(2022·湖北，6)某興趣小組開展小鼠原代神經元培養的研究，結果發現其培養的原代神經元生長緩慢，其原因不可能是()A．實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B．為了防止污染將培養瓶瓶口密封C．血清經過高溫處理后加入培養基D．所使用的培養基呈弱酸性考點二動物細胞融合技術與單克隆抗體1．動物細胞融合技術2．單克隆抗體的制備(1)傳統抗體的獲得①方法②缺點：產量低、________低、____________差。(2)單克隆抗體的制備及優點①制備過程②單克隆抗體的優點a．能準確地識別抗原的細微差異，與特定抗原發生__________________結合(特異性強、靈敏度高)。b．可以________制備。(3)單克隆抗體的應用①被廣泛用作________試劑，在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發揮重要的作用。②運載________，形成抗體—藥物偶聯物，實現對腫瘤細胞的____________殺傷。③用于____________。(1)動物細胞融合過程中既有細胞膜的融合也有核的融合()(2)動物細胞融合的結果是形成單核的雜交細胞，植物體細胞雜交的結果是得到雜種植株()(3)動物體細胞融合后的雜交細胞仍然是二倍體細胞()(4)將抗原注入小鼠體內，是為了獲得能產生相應抗體的B淋巴細胞()(5)將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行誘導融合，培養液中融合后的細胞即雜交瘤細胞()(6)單克隆抗體診斷試劑提高了診斷的準確性、靈敏性()長春新堿(VCR)能夠干擾腫瘤細胞的有絲分裂，也會影響正常細胞的增殖和分裂，導致藥物副作用的發生。H18雜交瘤細胞產生的抗人肝癌單克隆抗體HAb18對于人體肝癌的診斷和靶向治療具有重要的意義。回答下列問題：(1)抗人肝癌單克隆抗體HAb18的制備過程中，需要向小鼠體內注射肝癌細胞懸液，其目的是什么？______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(2)單克隆抗體被廣泛用作診斷試劑的原因是什么？______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(3)資料：①細胞合成DNA包括D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基蝶呤阻斷。②免疫的B淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但它不能分裂增殖，其本身也不能在體外長期存活。③鼠骨髓瘤細胞中只有D途徑，沒有S途徑，但它能不斷分裂增殖。如果它的D途徑被阻斷的話，它會因不能合成DNA而死亡。抗人肝癌單克隆抗體HAb18的制備過程中，需要兩次篩選，請根據上述資料提出第1次篩選的目的和具體方法。______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(4)將VCR與抗人肝癌單克隆抗體HAb18通過接頭連接形成抗體—藥物偶聯物(ADC)，可實現對肝癌細胞的特異性殺傷，ADC的作用機制如圖。據圖分析，ADC的抗體和藥物(VCR)各具有什么作用？______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________考向二動物細胞融合技術與單克隆抗體3．(2021·山東，15)一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機體產生一種抗體，由同一抗原刺激產生的不同抗體統稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內，可利用該小鼠的免疫細胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是()A．注入小鼠體內的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大B．單抗制備過程中通常將分離出的漿細胞與骨髓瘤細胞融合C．利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D．p72部分結構改變后會出現原單抗失效而多抗仍有效的情況4．(2023·湖北，22節選)某病毒對動物養殖業危害十分嚴重。我國學者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術路線如圖所示。回答下列問題：(1)與小鼠骨髓瘤細胞融合前，已免疫的脾細胞(含漿細胞)________(填“需要”或“不需要”)通過原代培養擴大細胞數量；添加脂溶性物質PEG可促進細胞融合，該過程中PEG對細胞膜的作用是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在雜交瘤細胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養基(如HAT培養基)，該培養基對________________________和____________________生長具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，其目的是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。考點三動物體細胞核移植技術和克隆動物1．動物細胞核移植技術的概念和類型(1)概念將動物一個細胞的____________移入去核的__________________中，使這個重新組合的細胞發育成____________，繼而發育為________________的技術。(2)原理：________________________。(3)類型：哺乳動物核移植可分為________________核移植和____________核移植，其中________________核移植較易成功。2．體細胞核移植的過程提醒目前動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時間照射和化學物質處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性。3．體細胞核移植技術的應用前景和存在的問題

前景畜牧業加速家畜________________進程、促進優良畜群繁育醫藥衛生①作為____________生產醫用蛋白；②______________________的細胞、組織或器官可以用于異種移植；③人核移植________________經過誘導分化形成相應的細胞、組織或器官，可用于器官移植科學研究①研究克隆動物可使人類更深入地了解__________________及衰老過程；②克隆一批遺傳背景相同的動物，可以通過它們之間的對比來分析______________；③克隆特定疾病模型的動物，為研究__________________和開發相應的藥物提供幫助保護瀕危物種增加瀕危物種的存活數量問題①成功率__________________；②絕大多數克隆動物存在____________問題，表現出____________________(1)通過克隆技術形成重組細胞并發育成一個新個體，體現了動物細胞的全能性()(2)核移植過程中供體理論上是提供細胞核，但操作過程中可以把整個細胞注入去核的卵母細胞中()(3)重構胚是指人工重新構建的胚胎，具有發育成完整個體的能力()(4)可用Ca2＋載體激活重構胚，使其完成細胞分裂和發育進程()(5)克隆動物的性狀與供核動物完全相同()癌癥早中期的患者往往通過相應的組織或者器官摘除來進行治療，但是組織和器官摘除往往嚴重影響患者的正常生活和身心健康，如圖是利用體細胞核移植技術生產器官的過程。分析并回答下列問題：(1)細胞A一般選用卵母細胞，為什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(2)在將體細胞的核移植到細胞A之前，為什么必須先對細胞A進行去核操作？________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________考向三動物體細胞核移植技術和克隆動物5．(2021·遼寧，13)如圖是利用體細胞核移植技術克隆優質奶牛的簡易流程圖，有關敘述正確的是()A．后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質共同決定B．過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體C．過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理D．過程③將激活后的重組細胞培養至原腸胚后移植6．(2024·廈門高三模擬)如圖為體細胞克隆猴“中中”和“華華”的培育流程，為建立動物模型、研究疾病機理帶來光明前景。下列敘述錯誤的是()A．過程①將成纖維細胞注射到去核的卵母細胞中，說明細胞膜的控制作用是相對的B．卵子細胞質中含有促使成纖維細胞核全能性表達的物質C．中中、華華的性別由成纖維細胞的遺傳物質決定D．“去核”去除的是紡錘體—染色體復合物1．(選擇性必修3P44)動物細胞培養時，一般置于含有________________________的混合氣體的CO2培養箱中進行培養。CO2的主要作用是________________。2．(選擇性必修3P44)細胞貼壁：________________________________。3．(選擇性必修3P44)接觸抑制：__________________________________________________。4．(選擇性必修3P44)細胞在培養過程中分裂受阻的原因：____________________________________________________________________________________________________________。5．(選擇性必修3P48)誘導動物細胞融合的常用方法有________________、______________和______________等。6．(選擇性必修3P49)雜交瘤細胞的特點是______________________________________________________________________________________________________________