信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與腫瘤四川大學(xué)華西醫(yī)院腫瘤內(nèi)科信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及分子靶向治療研究室畢鋒信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第1頁1940年Stout等認(rèn)為胃腸道發(fā)生間葉組織腫瘤都是平滑肌腫瘤信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第2頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第3頁胃腸道平滑肌瘤？70年代初:未發(fā)覺顯著平滑肌結(jié)構(gòu)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第4頁胃腸道平滑肌瘤？80年代:大多缺乏平滑肌細(xì)胞免疫表型信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第5頁1999年發(fā)覺這類間葉性腫瘤分子特征是：

c-Kit陽性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第6頁

胃腸道間質(zhì)腫瘤：一個(gè)獨(dú)特分子病定義：胃腸道c-Kit陽性間葉性（間質(zhì)性或結(jié)締組織）腫瘤分子特征：c-Kit陽性細(xì)胞起源：顯示向Cajal間質(zhì)細(xì)胞分化/或起源于它發(fā)生頻度：胃腸道間葉性腫瘤中最常見腫瘤病理判別：非上皮非間皮非淋巴非普通血管脂肪及結(jié)締組織、以梭形細(xì)胞為主

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第7頁GISTNormalsmallintestineH&ECD117GISTwithinternalcontrol.信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第8頁GIST治療局部、可切除瘤灶首選手術(shù)化療有效率低于5％放療無效生物治療？信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第9頁SCFSCFABDCMembraneMembraneMembraneMembraneCytoplasmCytoplasmCytoplasmCytoplasm

JM

TK1

TK2LigandbindingsiteSCFSCFPPPPSCFSCFPPPPPP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第10頁MembraneCytoplasmPPPPPPInframemutationofexon11(JM)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第11頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第12頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第13頁正常KIT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)PPPADPPPPPPATP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)激酶區(qū)底物效應(yīng)器KIT激酶區(qū)經(jīng)過磷酸化激活底物蛋白，如磷酸肌醇-3激酶(PI3-K)；激活底物促發(fā)了信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，以細(xì)胞增殖和存活為最終止局。SavageandAntman.NEnglJMed.;346:683.ScheijenandGriffin.Oncogene.;21:3314.信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第14頁伊馬替尼：作用機(jī)制PPPPATP表示伊馬替尼激酶區(qū)伊馬替尼占據(jù)了ATP在KIT激酶區(qū)結(jié)合位點(diǎn)；從而阻止了底物磷酸化及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)；信號(hào)缺失抑制了細(xì)胞增殖和存活。SavageandAntman.NEnglJMed.;346:683.ScheijenandGriffin.Oncogene.;21:3314.信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第15頁

伊馬替尼療效與活化突變關(guān)系酪氨酸激酶（外顯子）突變部位突變類型發(fā)生頻率（％）原發(fā)病灶部分緩解率（％）中位PFSKIT外顯子11近膜區(qū)胞漿部位密碼子557和559缺失/插入，點(diǎn)突破：557、559、560、57666-71胃部83.523個(gè)月外顯子9胞外區(qū)AY501-502或FAF506-508復(fù)制/插入10-1890％-95％在小腸47.87個(gè)月外顯子13酪氨酸激酶區(qū)第一部分裂隙處K642E點(diǎn)突變1-4未確定100*無資料外顯子17磷酸轉(zhuǎn)移酶區(qū)域（TKⅡ區(qū)）N822H、N822K、D816V點(diǎn)突變1-4未確定50*無資料PDGFRα外顯子12近膜區(qū)V842D點(diǎn)突變1-2只見于胃部66.7*無資料外顯子18TKⅡ區(qū)D842V點(diǎn)突變2-6只見于胃部0*無資料野生型－－1-12胃或網(wǎng)膜/腸系膜0*3個(gè)月PFS：無進(jìn)展生存期*研究病例數(shù)少，僅供參考信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第16頁格列衛(wèi)在147例晚期GIST中療效完全緩解

00部分緩解79

53.7%疾病穩(wěn)定

4127.9%疾病進(jìn)展

2013.6%無法評(píng)定

74.8%NEnglJMed,Vol.347,No.7August15,信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第17頁主要終點(diǎn)生存率無疾病進(jìn)展生存期(PFS)多吉美?400mgbid撫慰劑903名患者隨機(jī)分組(1:1)分層預(yù)后區(qū)域合格標(biāo)準(zhǔn)組織學(xué)/細(xì)胞學(xué)確認(rèn)，無法切除/或已轉(zhuǎn)移過去8個(gè)月里有一次全身治療失敗當(dāng)前為止最大RCC隨機(jī)、對(duì)照、III期臨床試驗(yàn)?zāi)I癌全球評(píng)價(jià)試驗(yàn)治療進(jìn)展信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第18頁RCCIII期臨床試驗(yàn)：

84%患者疾病得到控制*研究者評(píng)價(jià);

患者最晚于數(shù)據(jù)搜集起始日期-5-31前6周隨機(jī)入組DatafromEscudierB.ECCO;November3,;Paris,France.最正確反應(yīng)率(RECIST標(biāo)準(zhǔn))多吉美?組(n=451)*撫慰劑組(n=452)*完全緩解(%)1(<1)0(0)部分緩解(%)43(10)8(2)疾病穩(wěn)定(%)333(74)239(53)疾病進(jìn)展(%)56(12)167(37)脫落(%)18(4)38(8)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第19頁*獨(dú)立評(píng)定06054484236302418126時(shí)間（周）無疾病進(jìn)展患者百分比00.250.500.751.00索拉非尼撫慰劑設(shè)限點(diǎn)中位PFS多吉美?=24周撫慰劑=12周危險(xiǎn)比(S/P)=0.44p-值<0.000001RCCIII期臨床試驗(yàn):顯著雙倍延長(zhǎng)無疾病進(jìn)展生存期DatafromEscudierB.ECCO;November3,;Paris,France.信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第20頁RAS內(nèi)皮細(xì)胞或周圍細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移血管生成:微血管形成PDGF-bVEGFVEGFR-2PDGFR-b旁分泌刺激分化線粒體細(xì)胞凋亡腫瘤細(xì)胞PDGFVEGFEGF增殖存活線粒體EGFHIF-2細(xì)胞核VHL自分泌環(huán)細(xì)胞凋亡ERKRASMEKRAF細(xì)胞核ERKMEKRAF多吉美?WilhelmSetal.ClinCancerRes.;64:7099-7109.多吉美?靶向作用于腫瘤細(xì)胞增殖和血管生成信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第21頁索拉非尼抗腫瘤作用機(jī)制索拉非尼經(jīng)過抑制RAF/MEK/ERK路徑上游RTKs（KIT和FLT-3）和下游絲氨酸/蘇氨酸激酶，抑制腫瘤細(xì)胞增殖索拉非尼經(jīng)過抑制RAF/MEK/ERK路徑上游RTKs（VEGFR和PDGFR）及下游受體絲氨酸/蘇氨酸激酶，抑制血管生成抑制癌細(xì)胞增殖抑制腫瘤血管生成信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第22頁WilhelmS,etal.

CancerRes.;64:7099–109;MendelDBetal.ClinCancerRes.;9:327-37;

InaiT,etal.AmJPathol.;165:35-52;抗血管生成主要靶標(biāo)抗細(xì)胞增殖主要靶標(biāo)藥品VEGFVEGFRPDGFREGFRRafmTORAvastin?

多吉美

Sutent?

Tarceva?

AG-013736

CCI-779

KimKJ,etal.Nature.1993;362:841-4;PolackVA,etal.JPharmacolExpTher.1999;291:739-748;

LicunW,etal.CancerRes.;65:2825-31多吉美?可靶向抗血管生成和抗細(xì)胞增殖作用信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第23頁格列衛(wèi)治療費(fèi)用每片100mg：200元每日4~6片：800~1200元每個(gè)月約3萬元每年約36萬元信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第24頁抗腫瘤分子靶向藥品一療程費(fèi)用

藥物阻斷分子治療疾病月費(fèi)用————————————————————————格列衛(wèi)c-kitGISTs、白血病等3.0萬赫塞汀erbB2乳腺癌、胃癌等2.5萬美羅華CD20淋巴瘤、白血病2.0萬依瑞莎EGFR肺癌等2.0萬多吉美VEFFRAF腎癌、肝癌5.0萬

愛必妥EGFR結(jié)腸癌頭頸癌5.0萬————————————————————————信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第25頁未來有多少種分子靶向藥品？腫瘤是分子病病因與上千種分子產(chǎn)生異常信號(hào)相關(guān)每一個(gè)分子都有各種拮抗分子當(dāng)前世界上已經(jīng)有幾十種分子靶向藥品投入臨床幾百種靶向藥品正在進(jìn)行I、II期臨床試驗(yàn)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第26頁新世紀(jì)療法：腫瘤分子靶向治療信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第27頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第28頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第29頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第30頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基本組成

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第31頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第32頁細(xì)胞外因子受體胞內(nèi)蛋白（分子）

聯(lián)結(jié)蛋白

G蛋白第二信使胞內(nèi)激酶核受體轉(zhuǎn)錄因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第33頁一.細(xì)胞外因子（一）.刺激細(xì)胞增殖因子

1.生長(zhǎng)因子作用：刺激細(xì)胞生長(zhǎng)特點(diǎn)：受體活性——酪氨酸激酶活性特異性——每種因子有對(duì)應(yīng)受體多樣性——激活多條不一樣通路家族性——結(jié)構(gòu)相同，功效相近交叉性——結(jié)合不一樣受體

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第34頁2.細(xì)胞因子（Cytokine）

對(duì)象：淋巴細(xì)胞作用：活化為主，生長(zhǎng)為輔白細(xì)胞介素（Interleukine）：如LAK血細(xì)胞刺激因子干擾素3.激素、神經(jīng)遞質(zhì)特點(diǎn)：經(jīng)過G蛋白聯(lián)接收體傳遞信號(hào)

如：生長(zhǎng)激素，乙酰膽堿，腎上腺素等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第35頁（二）其它主要細(xì)胞外因子抗原：活化淋巴細(xì)胞腫瘤壞死因子：引發(fā)細(xì)胞凋亡（Apoptosis）粘附分子：與腫瘤侵襲，轉(zhuǎn)移相關(guān)

纖粘連蛋白（fibronectine，F(xiàn)n）

層粘連蛋白（lamimin，lm）

膠原蛋白（cellagen，coll）

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第36頁細(xì)胞外因子受體胞內(nèi)蛋白（分子）

聯(lián)結(jié)蛋白

G蛋白第二信使胞內(nèi)激酶核受體轉(zhuǎn)錄因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第37頁二.受體（一）酪氨酸激酶受體大多數(shù)生長(zhǎng)因子受體，有近百個(gè)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：胞外：一段糖基化肽鏈為配體結(jié)合部位中間：疏水性跨膜區(qū)胞內(nèi)：酪氨酸激酶活性

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第38頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第39頁名稱特點(diǎn)家族分類生長(zhǎng)因子受體家族兩個(gè)半胱氨酸富集區(qū)EGFR,ErbB2,ErbB3,DER,Let23胰島素受體家族

二硫鍵胰島素受體，胰島素樣生長(zhǎng)因子受體，胰島素相關(guān)受體血小板衍生生長(zhǎng)因子受體家族5個(gè)免疫球蛋白相同區(qū)PDGFR-α,PDGFRβ,CSF-1R,c-KIT纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體家族3個(gè)免疫球蛋白相同區(qū)FGFR1~4,KGFR酪氨酸激酶受體類型CompanyLogo信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第40頁名稱特點(diǎn)分類含有fibronectinⅢ型重復(fù)序列受體——EPH,ECK,ELK,EEK神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體兩個(gè)Ig相同區(qū)域TrkA，TraB，TrkCs，DTrk肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體水解—二硫鍵連接Met，Ron，Sea血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體胞外7個(gè)IG相同區(qū)域FLt-1,FLk-1,和FLt-4,AxL受體家族，Tie家族續(xù)上表CompanyLogo信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第41頁CompanyLogo信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第42頁（二）G蛋白聯(lián)接收體大多數(shù)激素，神經(jīng)多肽，神經(jīng)遞質(zhì)受體。有上千個(gè)。

受體結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：有七個(gè)跨膜區(qū)本身無激酶活性與活性G蛋白偶聯(lián)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第43頁LigandG

EffectorSignalGPCR(G－proteincoupledreceptor）CellmembranesecondmessengerscAMPcGMPDAGPIP3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第44頁（三）細(xì)胞因子受體淋巴細(xì)胞表面受體（如：

TCR,BCR）白介素受體誘發(fā)細(xì)胞凋亡受體（如：Fas，TNF受體等）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第45頁（四）粘附分子受體1.Cadherins2.Integrins3.Ig超家族4.Selectin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第46頁細(xì)胞外因子受體胞內(nèi)蛋白（分子）

聯(lián)結(jié)蛋白

G蛋白第二信使胞內(nèi)激酶核受體轉(zhuǎn)錄因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第47頁三.聯(lián)接蛋白（Adaptor）蛋白相互作用結(jié)合區(qū)域

主要有：SH2區(qū)，SH3區(qū)；PH區(qū)及

DeathDomain等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第48頁圖：聯(lián)接蛋白功效PHSH2SH3MembraneProteinX-P-P-X-PProteinpTyr信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第49頁聯(lián)接蛋白氨基數(shù)量結(jié)合特征特異性生化效應(yīng)SH2100磷酸化酪氨酸磷酸化酪氨酸附近結(jié)構(gòu)使酶定位到膜上；促使底物靠近；直接調(diào)整酶生物活性SH360脯氨酸富集區(qū)PXXP使蛋白定位對(duì)應(yīng)區(qū)域；調(diào)整酶催化活性活性PH100PIP2磷脂結(jié)合立體構(gòu)型相同介導(dǎo)G蛋白βγ亞單位生物功效，結(jié)合PIP2磷脂結(jié)合DD60～80TNF受體超家族膜區(qū)內(nèi)

——激活Caspase誘導(dǎo)凋亡其它連接蛋白：HLH,PDZ,MH(Smad),PTB,WW,LIM等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第50頁四.G蛋白（一）.經(jīng)典G蛋白（大G蛋白）

由α,β,γ三個(gè)亞基組成

α亞單位四個(gè)功效組：Gs：激活腺苷酸，使cAMP增多Gi：抑制腺苷酸，使cAMP降低Gq：激活PLC-β，產(chǎn)生DAG和PIP3G12:激活Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第51頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第52頁（二）小G蛋白（Ras超家族）分子量小:20~26KD分類：Ras，Rho，Rab，Arf，Ran等六個(gè)亞家族。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第53頁Rho活性調(diào)整機(jī)制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第54頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第55頁五.第二信使主要有：cAMP,cGMP,DAG,PIP3,Ca++等作用：激活胞漿內(nèi)一些激酶，將信號(hào)傳遞下去信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第56頁六.胞內(nèi)激酶

MAPK通路（mitogen－avtivatedproteinkinase

pathway）

MAPK特點(diǎn)：1.絲氨酸/蘇氨酸激酶

2.平時(shí)位于胞漿，激活后進(jìn)入核內(nèi)，開啟/關(guān)閉轉(zhuǎn)錄

3.真核生物“共享”通路主要分類及功效：

Erk——與細(xì)胞增殖相關(guān)

JNK/SAPK——與細(xì)胞應(yīng)激、凋亡相關(guān)

P38——與免疫反應(yīng)相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第57頁MAPK傳導(dǎo)通路模式路徑：生長(zhǎng)因子受體小G蛋白MAPK鏈

MAPK轉(zhuǎn)錄因子生物應(yīng)答如：EGFEGFRRasC-RafMEKMAPKTCF細(xì)胞生長(zhǎng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第58頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第59頁二.

主要傳導(dǎo)通路一分類（一）細(xì)胞生命活動(dòng)（二）細(xì)胞類型（神經(jīng)元細(xì)胞、上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等信號(hào)傳導(dǎo)通路；T細(xì)胞、B細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路等。）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第60頁（三）受體類型1.酪氨酸激酶受體傳導(dǎo)通路2.G蛋白偶聯(lián)受體傳導(dǎo)通路3.EGF受體傳導(dǎo)通路4.胰島素受體傳導(dǎo)通路5.乙酰膽堿受體傳導(dǎo)通路6.生長(zhǎng)激素等受體傳導(dǎo)通路信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第61頁（四）激酶類型

對(duì)激酶信號(hào)傳導(dǎo)通路分類時(shí)，習(xí)慣用某一特定激酶。比如MAP激酶，JNK激酶，PI-3激酶等。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第62頁主要傳導(dǎo)通路酪氨酸激酶受體通路G蛋白連接收體通路TGF-β通路TNF通路Wnt通路Integrin傳導(dǎo)通路Hedgehog傳導(dǎo)通路信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第63頁酪氨酸激酶受體通路

生長(zhǎng)因子刺激細(xì)胞生長(zhǎng)信號(hào)細(xì)胞因子信號(hào)抗原結(jié)合淋巴細(xì)胞表面受體誘發(fā)反應(yīng)過程：生長(zhǎng)因子與受體結(jié)合形成二聚體受體構(gòu)型改變酪氨酸激酶受體磷酸化信號(hào)經(jīng)受體進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)子、傳遞子/聯(lián)接子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第64頁ligandTKR(tyrosinekinasereceptor）adaptorRasRafMEKMAPKCellmembraneNuclearmembrane信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第65頁信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第66頁EGFR靶點(diǎn)主要作用信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤第67頁愛必妥TM

(西妥昔單抗)IgG1單克隆抗體特異性靶向于EGFR及其異二聚體，阻止配體與EGFR結(jié)合與內(nèi)源性配位體相比，與EGFR親和力更高阻斷受體二聚化、酪氨酸激酶磷酸化及信號(hào)傳導(dǎo)刺激受體內(nèi)化Fc區(qū)域可能誘導(dǎo)抗體依賴