微生物的基本培養技術一、選擇題1.下列關于4種微生物的敘述,錯誤的是()A.CO2和NH3分別是硝化細菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自NH3的氧化B.CO2和硝酸鹽分別是藍細菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自太陽能C.糖類和N2是乳酸菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自乳酸的氧化分解D.葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,但CO2一定不是酵母菌的碳源2.將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量的蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養基。下列有關敘述錯誤的是()A.若M培養基中加入青霉素,可用于真菌的篩選B.制備培養細菌的培養基時,應將pH調至酸性C.M培養基中的馬鈴薯浸出液可為微生物提供無機鹽D.倒平板時,應將皿蓋打開一條稍大于瓶口的縫隙3.下表為某培養基的配方,下列敘述正確的有()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅含量10g10g2g0.4g成分亞甲藍H2O瓊脂含量0.065g定容至1000mL20g①從物理性質看該培養基屬于固體培養基,從用途看該培養基屬于鑒別培養基②培養基中屬于碳源的物質主要是葡萄糖,屬于氮源的物質是蛋白胨③該培養基中的蛋白胨可提供特殊營養物質④該培養基調節合適的pH和消毒后就可以接種使用⑤該培養基可以用于培養HIV⑥該培養基可以用于大腸桿菌的鑒定,其菌落為帶金屬光澤且為深紫色A.2項 B.3項 C.4項 D.5項4.下圖為實驗室培養和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟示意圖,下列說法錯誤的是()①②③④A.①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行B.步驟①中,需待倒入的培養基冷卻后蓋上培養皿的皿蓋C.步驟③中,每次劃線后都需對接種環進行灼燒處理D.劃線接種結束后,將平板倒置后放入培養箱中培養5.下列關于滅菌和消毒的理解,錯誤的是()A.滅菌是指殺滅物體內外一切微生物的細胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌實質上是相同的C.接種環用灼燒法滅菌D.常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌6.細菌培養過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌()A.接種環、手、培養基 B.高壓鍋、手、接種環C.培養基、手、接種環 D.接種環、手、高壓鍋7.下列操作與無菌技術無關的是()A.接種前用火焰灼燒接種環B.接種前用酒精棉球擦拭雙手C.將平板倒置放入培養箱中培養D.在酒精燈的火焰旁完成接種8.下列有關平板劃線操作的敘述,錯誤的是()A.在第二次劃線時,接種環上的菌種直接來源于菌液B.從第二次劃線開始,每次劃線前,灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束后接種環上殘留的菌種C.第一步灼燒接種環是為了避免接種環上可能存在的微生物污染培養物D.劃線結束后,灼燒接種環能及時殺死接種環上的菌種,避免污染環境和感染操作者9.將接種后的培養基和一個未接種的培養基都放入37℃恒溫箱的目的是()A.對比觀察培養基有沒有被微生物利用B.對比分析培養基上是否生有雜菌C.沒必要放入未接種的培養基D.為了下次接種時再使用10.做“酵母菌的純培養”實驗時,下列敘述錯誤的是()A.接種時為了獲得單菌落,從第二次開始每次劃線前都要灼燒接種環B.倒平板時,拔出錐形瓶棉塞后,應將瓶口迅速通過火焰C.倒平板要在酒精燈火焰旁進行,防止雜菌污染D.為了防止雜菌污染,接種環經火焰灼燒滅菌后,應趁熱快速蘸取菌液二、綜合題11.某同學配制含瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養基后,對培養基和培養皿進行高壓蒸汽滅菌,當培養基溫度下降到50℃時,在酒精燈火焰附近倒平板,待培養基冷卻至室溫,按表處理。將處理完畢的培養皿置于適宜溫度下培養2~3d,觀察每個培養皿中的菌落特征和數目。請思考回答下列問題。組別處理A打開培養皿蓋,距地面0.3m處暴露15minB打開培養皿蓋,距地面0.6m處暴露15minC打開培養皿蓋,距地面0.9m處暴露15minD打開培養皿蓋,距地面1.2m處暴露15minE不打開培養皿蓋(1)上述實驗的實驗目的是

。若E組的培養基表面有菌落生長,說明。

(2)培養基中的牛肉膏和蛋白胨主要為微生物生長提供和。在酒精燈火焰附近進行相關操作是為了。

(3)實驗過程特別強調溫度控制,請簡要說明下列溫控措施的目的。①“待培養基冷卻至室溫”的目的有。

②“將處理完畢的培養皿置于適宜溫度下培養”的目的是。

(4)培養微生物時將培養皿倒置的目的是

。

實驗結束后,對使用過的培養基應進行處理。

12.下表是某微生物培養基的配方,請分析回答下列問題。編號①②③成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4含量0.4g4.0g0.5g編號④⑤成分CaCl2H2O含量0.5g定容至100mL(1)從培養基的營養成分看,此培養基可用來培養的微生物的同化作用類型是。利用該培養基培養微生物時,微生物所需要的碳源來自。

(2)此表中含有的微生物所需的營養成分是

。

(3)若去除該培養基中的①后再加入不含氮元素的有機物,則此培養基可培養的微生物種類是。

(4)若將氨基酸加入培養基,則它可充當的營養成分是。

(5)若要觀察微生物的菌落的特點,培養基中還應添加的成分是。

微生物的基本培養技術一、選擇題1.下列關于4種微生物的敘述,錯誤的是()A.CO2和NH3分別是硝化細菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自NH3的氧化B.CO2和硝酸鹽分別是藍細菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自太陽能C.糖類和N2是乳酸菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自乳酸的氧化分解D.葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,但CO2一定不是酵母菌的碳源解析:硝化細菌是化能自養需氧型微生物,CO2和NH3分別是硝化細菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自NH3的氧化;藍細菌是自養生物,能進行光合作用,CO2和硝酸鹽分別是藍細菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自太陽能;乳酸菌是異養厭氧型微生物,糖類和有機酸是乳酸菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自糖類的氧化分解;酵母菌是異養生物,葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,酵母菌不能直接利用CO2。答案:C2.將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量的蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養基。下列有關敘述錯誤的是()A.若M培養基中加入青霉素,可用于真菌的篩選B.制備培養細菌的培養基時,應將pH調至酸性C.M培養基中的馬鈴薯浸出液可為微生物提供無機鹽D.倒平板時,應將皿蓋打開一條稍大于瓶口的縫隙解析:青霉素可抑制細菌生長,篩選出真菌;制備培養細菌的培養基時,應將pH調至中性或弱堿性;M培養基中的馬鈴薯浸出液可為微生物提供碳源、氮源、無機鹽等;倒平板時,應將皿蓋打開一條稍大于瓶口的縫隙。答案:B3.下表為某培養基的配方,下列敘述正確的有()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅含量10g10g2g0.4g成分亞甲藍H2O瓊脂含量0.065g定容至1000mL20g①從物理性質看該培養基屬于固體培養基,從用途看該培養基屬于鑒別培養基②培養基中屬于碳源的物質主要是葡萄糖,屬于氮源的物質是蛋白胨③該培養基中的蛋白胨可提供特殊營養物質④該培養基調節合適的pH和消毒后就可以接種使用⑤該培養基可以用于培養HIV⑥該培養基可以用于大腸桿菌的鑒定,其菌落為帶金屬光澤且為深紫色A.2項 B.3項 C.4項 D.5項解析:此配方中含有瓊脂,從物理性質看該培養基屬于固體培養基,含伊紅和亞甲藍,從用途看該培養基屬于鑒別培養基;葡萄糖是主要的碳源,蛋白胨可作為氮源,同時還可提供碳源、維生素等物質;該培養基調節合適的pH后,需要進行滅菌處理;HIV營寄生生活,需要用活細胞培養,不能用培養基直接培養;大腸桿菌在固體培養基上與伊紅和亞甲藍結合,其菌落為帶金屬光澤且為深紫色。答案:C4.下圖為實驗室培養和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟示意圖,下列說法錯誤的是()①②③④A.①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行B.步驟①中,需待倒入的培養基冷卻后蓋上培養皿的皿蓋C.步驟③中,每次劃線后都需對接種環進行灼燒處理D.劃線接種結束后,將平板倒置后放入培養箱中培養解析:①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行,防止被雜菌污染;倒完平板后立即蓋上培養皿的皿蓋,冷凝后將平板倒過來放置;灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束后接種環上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數的增加,使每次劃線時菌種的數目逐漸減少,以便得到單菌落;劃線接種結束后,將平板倒置后放入培養箱中培養,有利于表面的水分更好地揮發和防止皿蓋上的水珠落入培養基造成污染。答案:B5.下列關于滅菌和消毒的理解,錯誤的是()A.滅菌是指殺滅物體內外一切微生物的細胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌實質上是相同的C.接種環用灼燒法滅菌D.常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌解析:消毒是指使用較為溫和的物理、化學或生物等方法殺死物體表面或內部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌則是指使用強烈的理化方法殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子。兩者實質有很大區別。答案:B6.細菌培養過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌()A.接種環、手、培養基 B.高壓鍋、手、接種環C.培養基、手、接種環 D.接種環、手、高壓鍋解析:高壓蒸汽用于培養基的滅菌,酒精用于手的消毒,火焰灼燒用于接種環的滅菌。答案:C7.下列操作與無菌技術無關的是()A.接種前用火焰灼燒接種環B.接種前用酒精棉球擦拭雙手C.將平板倒置放入培養箱中培養D.在酒精燈的火焰旁完成接種解析:接種用具、器皿、空氣中都充滿了微生物,都有污染的可能,必須嚴格地消毒、滅菌。A、B、D三項是實驗操作過程中滅菌或防止雜菌污染的措施。將平板倒置放入培養箱中培養與無菌技術無關。答案:C8.下列有關平板劃線操作的敘述,錯誤的是()A.在第二次劃線時,接種環上的菌種直接來源于菌液B.從第二次劃線開始,每次劃線前,灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束后接種環上殘留的菌種C.第一步灼燒接種環是為了避免接種環上可能存在的微生物污染培養物D.劃線結束后,灼燒接種環能及時殺死接種環上的菌種,避免污染環境和感染操作者解析:在第二次劃線時,接種環上的菌種直接來源于第一次劃線的末端。答案:A9.將接種后的培養基和一個未接種的培養基都放入37℃恒溫箱的目的是()A.對比觀察培養基有沒有被微生物利用B.對比分析培養基上是否生有雜菌C.沒必要放入未接種的培養基D.為了下次接種時再使用解析:分析培養基上是否生有雜菌常用的方法是將接種后的培養基和一個未接種的培養基都放入37℃恒溫箱培養,看未接種的培養基是否有菌落產生,若有菌落產生,則說明培養基上生有雜菌。答案:B10.做“酵母菌的純培養”實驗時,下列敘述錯誤的是()A.接種時為了獲得單菌落,從第二次開始每次劃線前都要灼燒接種環B.倒平板時,拔出錐形瓶棉塞后,應將瓶口迅速通過火焰C.倒平板要在酒精燈火焰旁進行,防止雜菌污染D.為了防止雜菌污染,接種環經火焰灼燒滅菌后,應趁熱快速蘸取菌液解析:從第二次開始每次劃線前灼燒接種環的目的是殺死接種環上的菌種,以達到菌種稀釋的目的,最后獲得單菌落;倒平板時,拔出錐形瓶棉塞后,應將瓶口迅速通過火焰,以防止雜菌污染;為了防止雜菌污染,倒平板要在酒精燈火焰旁進行;接種環經火焰灼燒滅菌后,應該在火焰旁待接種環冷卻后再蘸取菌液,以免接種環因溫度過高而殺死菌種。答案:D二、綜合題11.某同學配制含瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養基后,對培養基和培養皿進行高壓蒸汽滅菌,當培養基溫度下降到50℃時,在酒精燈火焰附近倒平板,待培養基冷卻至室溫,按表處理。將處理完畢的培養皿置于適宜溫度下培養2~3d,觀察每個培養皿中的菌落特征和數目。請思考回答下列問題。組別處理A打開培養皿蓋,距地面0.3m處暴露15minB打開培養皿蓋,距地面0.6m處暴露15minC打開培養皿蓋,距地面0.9m處暴露15minD打開培養皿蓋,距地面1.2m處暴露15minE不打開培養皿蓋(1)上述實驗的實驗目的是

。若E組的培養基表面有菌落生長,說明。

(2)培養基中的牛肉膏和蛋白胨主要為微生物生長提供和。在酒精燈火焰附近進行相關操作是為了。

(3)實驗過程特別強調溫度控制,請簡要說明下列溫控措施的目的。①“待培養基冷卻至室溫”的目的有。

②“將處理完畢的培養皿置于適宜溫度下培養”的目的是。

(4)培養微生物時將培養皿倒置的目的是

。

實驗結束后,對使用過的培養基應進行處理。

答案:(1)探究不同高度空氣中微生物的種類和數量培養基滅菌不合格(或受到雜菌污染)(2)碳源氮源避免周圍環境中微生物的污染(3)①使培養基凝固及防止培養基溫度過高殺死接種在其上的微生物②讓微生物在適宜的溫度下生長(繁殖)(4)防止冷凝后形成的水珠滴落在培養基上(污染培養基和破壞菌落)滅菌12.下表是某微