第第18頁真題回放2023屆高考生物熱點：微生物的培育利用真題回放1．(2023·全國卷Ⅱ，37)物質W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培育基中到達確定量時培育基表現為不透亮。某爭論小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌(目標菌)。答復以下問題。要從土壤中分別目標菌，所用選擇培育基中的氮源應當是_W 。在從土壤中分別目標菌的過程中，覺察培育基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落(如以下圖)。假設要得到目標菌，應中選擇_乙菌落進一步純化，選擇的依據是_乙菌落四周消滅透亮圈，說明乙菌能降解W。土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源假設要設計試驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出試驗思路、預期結果和結論，即_將甲、乙菌分別接種在無氮源培育基上假設細菌能生長則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源 。該小組將人工合成的一段DNAW的酶(酶E)。為了比較酶E與自然酶降解W力氣的差異，該小組擬進展如下試驗，請完善相關內容。①在含有確定濃度W的固體培育基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有一樣濃度自然酶的緩沖液，C處滴加_緩沖液 ，三處滴加量一樣。②一段時間后，測量透亮圈的直徑。假設C處沒有消滅透亮圈，說明_緩沖液不能降解W ；假設A、B處形成的透亮圈直徑大小相近，說明_酶E與自然酶降解W的力氣相近 。[解析] (1)物質W是一種含氮有機物要分別能夠降解物質W的細菌需用以物質W為唯一氮源的選擇培育基進展篩選。(2)由題圖可知，甲菌落四周沒有透亮圈，說明甲菌不能降解物質W，乙菌落四周消滅透亮圈，說明乙菌能降解物質W，故要得到目標菌，應選擇乙菌落進一步純化。(3)要鑒定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，則培育基中不(其他條件一樣且適宜)，假設細菌能生長，則說明細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。(4)試驗目的是比較自然酶和酶E降解W的力氣，做試驗時要設計空白比照試驗，所以C處應滴加緩沖液。C處沒有消滅透亮W，A、BW被降解，假設兩個透亮圈直徑大小相近，則說明酶E與自然酶降解物質W的力氣相近。2．(2023·北京卷，3)篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培育基。接種培育后，(如圖)，試驗結果見下表。菌種 菌落直徑：C(mm)透亮圈直徑：H(mm)H/C細菌Ⅰ 5.111.22.2細菌Ⅱ 8.1有關本試驗的表達，錯誤的選項是( C )13.01.6A．培育基除淀粉外還含有氮源等其他養分物質B．篩選分解淀粉的細菌時，菌液應稀釋后涂布C．以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外D．H/C值反映了兩種細菌分解淀粉力氣的差異[解析] 微生物的培育基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽等，A項正確。篩選分解淀粉的細菌時試驗流程為取樣→梯度稀釋→樣品涂布到鑒別分解淀粉的細菌的培育基上→選擇產生透亮圈的菌落，B項正確。由題意可知，淀粉被分解后經稀碘液處理才能消滅透亮圈淀粉分解需要淀粉酶的催化圖中兩種細菌都消滅了以菌落為中心的透亮圈說明以上兩種細菌均能將淀粉酶分泌到細胞外來發揮作用C項錯誤透亮圈是細菌分解淀粉得到的，H表示透亮圈直徑，C表示菌落直徑，因此H/C值可以反映兩種細菌分解淀粉力氣的差異，即H/C值越大，細菌分解淀粉的力氣越強，D項正確。3．(2023·江蘇卷，12)以下關于微生物試驗操作的表達，錯誤的選項是( A A．培育微生物的試劑和器具都要進展高壓蒸汽滅菌B．接種前后，接種環都要在酒精燈火焰上進展灼燒C．接種后的培育皿要倒置，以防培育污染D．菌種分別和菌落計數都可以使用固體培育基[解析] 培育微生物的器具不愿定都要進展高壓蒸汽滅菌，如接種環需要進展灼燒滅菌，A項錯誤。接種前灼燒接種環的目的是徹底殺滅環上的細菌、芽孢等，接種后再灼燒是為了防止菌種逸出，污染接種室或者超凈臺，影響整體接種環境B項正確。接種后的培育皿要倒置既可以防止皿蓋上的水珠落入培育基造成污染又可以避開培育基外表的水分過快地揮發，C項正確。固體培育基可通過平板劃線法或稀釋涂布平板法進展菌種分別在固體培育基上才能形成菌落，故菌落計數用固體培育基，D項正確。4．(2023·全國卷Ⅱ)在生產、生活和科研實踐中，常常通過消毒和滅菌來避開雜菌的污染。答復以下問題：在試驗室中，玻璃和金屬材質的試驗器具_可以 (填“可以”或“不行以”)放入干熱滅菌箱中進展干熱滅菌。牛奶的消毒常承受巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優點是_在到達消毒目的的同時，養分物質損失較少 。密閉空間內的空氣可承受紫外線照耀消毒，其緣由是紫外線能_破壞DNA構造 。在照耀前，適量噴灑_消毒液 ，可強化消毒效果。水廠供給的自來水通常是經過_氯氣 (填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，假設壓力到達設定要求，而鍋內并沒有到達相應溫度，最可能的緣由是_未將鍋內冷空氣排盡 。核心拓展[解析] (1)干熱滅菌是指將物品放入干熱滅菌箱內在160～170℃條件下加熱1～2h。耐高溫、需要保持枯燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培育皿)和金屬用具等，可承受干熱滅菌的方法。(2)巴氏消毒法是在70～75℃條件下煮30min或在80℃條件下煮15min，可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶的養分物質損失較少。(3)接種室、接種箱或超凈工作臺在使用前，可以用紫外線照耀30min，紫外線能破壞微生物的DNA構造，以殺死物體外表或空氣中的微生物。在照耀前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以強化消毒效果。(4)自來水通常是用氯氣進展消毒的。(5)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，假設壓力到達設定要求，而鍋內并沒有到達相應溫度，最可能的緣由是鍋內原有的冷空氣沒有排盡。核心拓展圖解識記微生物的培育、分別與計數(填圖)熟記微生物分別與計數的兩個實例(填空)(1)土壤中分解尿素的細菌的分別與計數：①篩選菌株：利用_選擇培育基 篩選菌株。②測定微生物數量的常用方法：_活菌計數法 和_顯微鏡 直接計數。③過程：土壤取樣→制備培育基→_樣品稀釋 →涂布平板→培育與觀看→菌落計數。④鑒定方法：含酚紅指示劑的以尿素為唯一氮源的培育基→細菌→指示劑_變紅 ，則該菌能分解尿素。(2)分解纖維素的微生物的分別：①試驗原理：即：可通過是否產生_透亮圈 來篩選纖維素分解菌。題型突破②流程：土壤取樣→選擇培育→_梯度稀釋 →涂布平板→選擇菌落。題型突破題型1 考察微生物的培育1．(2023·全國卷Ⅰ)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸確定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中參與確定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培育基。答復以下問題：M培育基假設用于真菌的篩選則培育基中應參與鏈霉素以抑制_細菌 了鏈霉素的培育基屬于_選擇 培育基。M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供給了多種養分物質，養分物質類型除氮源外還有_碳源、無機鹽(答出兩點即可)_蛋白質、核酸(答出兩點即可)。假設在M培育基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培育，平板上長出菌落后可通過參與顯色劑篩選出能產淀粉酶的微生物。參與的顯色劑是_碘液，該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是_淀粉遇碘液顯藍色，產淀粉酶的菌落四周淀粉被水解，形成透亮圈。甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數量，在同一稀釋倍數下得到以下結果：3110、140149，取平均值133；327、169176124。有人認為這兩位同學的結果中乙同學的結果可信度低其緣由是_乙同學的結果中，1個平板的計數結果與另2個相差懸殊，結果的重復性差 。[解析] (1)鏈霉素是抗生素，可抑制細菌生長，故在M培育基中參與鏈霉素作為選擇培育基，可篩選出真菌。培育基中的養分成分一般包括碳源、氮源、水和無機鹽等。細胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白質、核酸等，故所參與的氮源可參與以上物質的合成。能產生淀粉酶的微生物可將淀粉分解成麥芽糖，淀粉遇碘變藍，向加有淀粉的培育透亮圈的大小推斷產生淀粉酶的多少。30～3003個平板中的菌落數在正常范圍內且差距不大，比較準確；乙同學統計的3個平板中，1個平板的計數結果2個相差懸殊，結果的重復性差。2．(2023·全國卷Ⅲ，37)答復以下與細菌培育相關的問題。在細菌培育時，培育基中能同時供給碳源、氮源的成分是_蛋白胨(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制備培育基時要依據所培育細菌的不同來調整培育基pH，其緣由是_pH不同。硝化細菌在沒有碳源的培育基上_能夠(填“能夠”或“不能”)_硝化細菌可以利用空氣中的CO2作為碳源 。用平板培育細菌時一般需要將平板_倒置 (填“倒置”或“正置”)。單個細菌在平板上會形成菌落，爭論人員通常可依據菌落的外形、大小、顏色等特征來初步區分不同種的微生物，緣由是_在確定的培育條件下，不同種微生物表現出各自穩定的菌落特征。有些使用后的培育基在丟棄前需要經過_滅菌 處理，這種處理可以殺死丟棄物中全部的微生物。[解析] (1)蛋白胨中含有碳元素和氮元素可為細菌生長供給碳源和氮源葡萄糖只能供給碳源，NaNO3只能供給氮源。不同細菌生長生殖所需要的最適pH不同，制備培育基時要依據所培育細菌種類的不同來調整pH。硝化細菌是自養生物，可通過化能合成作用利用空氣中的CO2合成有機物，所以在沒有碳源的培育基上也能生長。(2)用平板培育細菌時，一般將平板倒置，防止水滴滴落到培育基中造成污染。(3)在確定的培育條件下，不同微生物表現出各自穩定的菌落特征，因此爭論人員可依據菌落的這些特征初步區分微生物的種類。(4)消毒僅殺死物體外表或內部的局部微生物，滅菌可殺死物體內外全部的微生物，包染環境。3．(2023·全國卷Ⅰ)空氣中的微生物在重力等作用下，可以確定程度地沉降。某爭論小步驟如下：①配置培育基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；②制作無菌平板；③設置空白比照組和假設干試驗組，進展相關操作；④將各組平板置于37℃恒溫箱中培育一段時間，統計各組平板上菌落的平均數。答復以下問題：該培育基中微生物所需的氮來源于_牛肉膏、蛋白胨 。假設要完成步驟②，該培育基中的成分X通常是_瓊脂 。步驟③中，試驗組的操作是_將試驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間 。36個/6個菌落，這種結果說明在此次調查中消滅了_污染30(36－6)個/平板作為本組菌落數的平均值，該做法_不正確(填“正確”或“不正確”)。[解析] (1)牛肉膏、蛋白胨都含有N，可為微生物的生長供給氮源。制作無菌平板所用培育基為固體培育基，因此X應為瓊脂。(2)由試驗目的可知，該試驗的自變量為教室的不同高度因變量為微生物的分布狀況故試驗組的操作應為將試驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間。(3)空白培育基上消滅菌落，說明培育基被污染了，即調查中消滅了污染現象試驗過程中假設培育基被污染必需將其拋棄重制作的培育基進展試驗。3個錯混點在培育基中參與某種化學物質。例如，參與青霉素可以分別出酵母菌和霉菌；參與高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的參與是在主要養分成分完整的根底上進展的。轉變培育基中的養分成分。例如缺乏氮源時可以分別出固氮微生物；石油作為唯一碳源時，可以分別出能消退石油污染的微生物。轉變微生物的培育條件。例如，將培育基放在高溫環境下培育，可以得到耐高溫的微生物。題型2 考察微生物的分別與計數等綜合學問4．(2023·全國卷Ⅰ，37)X(僅含有C、H兩種元素)不易降解，會造成環境污染。某小組用三種培育基篩選土壤中能高效降解X的細菌(目標菌)。Ⅰ號培育基：在牛肉膏蛋白胨培育基中參與X(5g/L)。Ⅱ號培育基：氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機鹽(適量)，X(15g/L)。Ⅲ號培育基：氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機鹽(適量)，X(45g/L)。答復以下問題。在Ⅰ號培育基中，為微生物供給氮源的是_牛肉膏、蛋白胨 。Ⅱ、Ⅲ號培育基中為微生物供給碳源的有機物是_X 。假設將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培育基中，培育一段時間后，不能降解X的細菌比例會_下降，其緣由是_X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠增殖。Ⅱ號培育基參與瓊脂后可以制成固體培育基，假設要以該固體培育基培育目標菌并對菌落進展計數，接種時，應承受的方法是_稀釋涂布平板法 。假設從Ⅲ號培育基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長供給_能量 和_合成其他物質的原料 。[解析] (1)Ⅰ號培育基中含有牛肉膏、蛋白胨和有機物X等，其中X僅含有C、H兩種元素，故為微生物供給氮源的是牛肉膏、蛋白胨Ⅱ、Ⅲ號培育基中除無機鹽外，還含有有機物X，故為微生物供給碳源的有機物是X。(2)因Ⅱ號液體培育基中的有機碳源只有X，故培育一段時間后不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖而能降解X的細菌能夠增殖，故不能降解X的細菌比例會下降(3)對微生物分別的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，但其中只有稀釋涂布平板法能夠計數。(4)能高效降解X的細菌能將X代謝為丙酮酸，丙酮酸在有氧條件下被降解時能釋放出大量能量故丙酮酸可為該細菌的生長供給能量丙酮酸還可以為該細菌中其他物質的合成供給原料。5．(2023·江蘇卷，19)以下關于產纖維素酶菌分別及運用的表達，不合理的是( A A．篩選培育基中應含有大量的葡萄糖或蔗糖供給生長養分B．可從富含腐殖質的林下土壤中篩選產纖維素酶菌C．在分別平板上長出的菌落需進一步確定其產纖維素酶的力氣D．用產纖維素酶菌發酵處理農作物秸稈可提高其飼用價值[解析] 分別產纖維素酶菌時，篩選培育基中應以纖維素作為唯一碳源，A項錯誤。富含腐殖質的林下土壤中纖維素多故含有能分解纖維素的產纖維素酶菌，B項正確。用篩選培育基分別得到的菌落只是初步篩選還需進一步確定其產