高級中學名校試卷PAGEPAGE1江蘇省揚州市高郵市2023-2024學年高二下學期3月月考試題本試卷分第Ⅰ卷（選擇題）和第Ⅱ卷（非選擇題）兩部分。第Ⅰ卷共40分，第Ⅱ卷共60分。試卷滿分100分?？荚嚂r間75分鐘。第Ⅰ卷（選擇題共40分）一、單項選擇題：共14小題，每題2分，共28分。每小題只有一個選項最符合題意。1.某些微生物能合成幾丁質酶，使幾丁質降解為N乙酰氨基葡萄糖后進一步轉化利用?？蒲腥藛T試圖從土壤中篩選出能高效降解幾丁質的菌株，通過微生物培養獲得幾丁質酶，用于生物防治。下列相關敘述錯誤的是（）A.土壤樣品應加到以幾丁質為唯一碳源的選擇培養基中培養B.目的菌的純化和計數可以使用平板劃線法或稀釋涂布平板法C.可依據單菌落周圍“水解圈直徑/菌落直徑”的值來篩選目的菌株D.獲得的幾丁質酶可用于防治某些有害的甲殼類動物、昆蟲等生物〖答案〗B〖祥解〗1、要從土壤中分離出能合成幾丁質酶的微生物，應以幾丁質為唯一碳源，以淘汰不能產生幾丁質酶的真菌達到篩選效果.2、水解圈是產生幾丁質酶的微生物產生相關酶水解幾丁質產生的，水解圈直徑/菌落直徑越大，說明該菌降解能力越強。【詳析】A、據題意可知，要從土壤中篩選出能高效降解幾丁質的菌株，那么應該用以幾丁質為唯一碳源的選擇培養基培養，A正確；B、目的菌的純化和計數可以使用稀釋涂布平板法，平板劃線法只能用于目的菌的純化，不能計數，B錯誤；C、水解圈直徑/菌落直徑可以反應水解能力的大小，水解圈直徑/菌落直徑越大，說明該菌降解幾丁質能力越強，反之越弱，因此可依據單菌落周圍“水解圈直徑/菌落直徑”的值來篩選目的菌株，C正確；D、幾丁質為N-乙酰葡糖胺通過β連接聚合而成的結構同多糖，廣泛存在于甲殼類動物的外殼、昆蟲的甲殼和真菌的胞壁中，因此獲得的幾丁質酶可用于防治某些有害的甲殼類動物、昆蟲等生物，D正確。故選B。2.醬油中含有食鹽、氨基酸、糖類、有機酸等成分，醬油釀造過程中，大豆等原料先被米曲霉產生的多種酶初步分解，然后在無氧條件下再被耐鹽的乳酸菌、酵母菌發酵，最終提取得到醬油，流程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.原材料進行蒸煮后需要盡快拌上米曲霉，以利于快速發酵B.階段Ⅰ的原料中的蛋白質會被米曲霉產生的蛋白酶初步分解C.階段Ⅱ在無氧條件下進行，因此要嚴格封罐直至發酵結束D.發酵時加入食鹽的目的是抑制米曲霉、乳酸菌和酵母菌的生長〖答案〗B〖祥解〗米曲霉在發酵過程中產生的蛋白酶能將蛋白質分解為小分子的肽和氨基酸，產生的脂肪酶能將脂肪分解為甘油和脂肪酸，使發酵的產物具有獨特的風味?！驹斘觥緼、原材料進行蒸煮后不能盡快拌上米曲霉，否則會導致發酵失敗，因為高溫會殺死菌種，A錯誤；B、階段Ⅰ中的菌種主要是米曲霉，米曲霉等微生物產生的蛋白酶能將原料中的蛋白質分解成小分子肽和氨基酸，B正確；C、階段Ⅱ在無氧條件下進行，酵母菌無氧呼吸過程中有二氧化碳產生，因此還需要排氣，因此不能嚴格封罐直至發酵結束，C錯誤；D、發酵時加入食鹽的目的是抑制米曲霉等，進而促進乳酸菌和酵母菌的生長，因為酵母菌和乳酸菌耐鹽，D錯誤。故選B。3.辣椒的辣椒素是食品調味料的重要成分之一，辣椒素可通過下圖途徑獲得，下列敘述正確的是（）A.①過程需對外植體進行滅菌以防止后續培養過程中雜菌污染，且有利于獲得脫毒苗B.圖中所示的愈傷組織是未分化的有固定形態的薄壁組織團塊，具備較強的分裂分化能力C.若在細胞分離過程中使用鹽酸進行解離，則植物細胞繼續增殖前需再生細胞壁D.在脫分化過程中一般不需要光照，在再分化過程中光照可誘導植物形態建成〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養技術是指將離體的植物器官、組織或細胞等，在人工配制的培養基上，給予適宜的培養條件，誘導其形成完整植株的技術。其具體流程為：接種外植體→誘導愈傷組織→誘導生芽→誘導生根→移栽成活。在一定的激素和營養等條件的誘導下，外植體可脫分化形成愈傷組織。愈傷組織能重新分化成芽、根等器官，該過程稱為再分化?！驹斘觥緼、①過程需對外植體進行消毒以防止后續培養過程中雜菌污染，且有利于獲得脫毒苗，A錯誤；B、愈傷組織是一團沒有特定結構和功能，排列疏松而無規則，高度液泡化的呈無定形狀態的薄壁組織團塊。愈傷組織是由外植體脫分化形成，它要經過再分化形成植物個體，因此愈傷組織是未分化的，具有分裂分化能力，B錯誤。C、鹽酸會殺死細胞，不能用鹽酸分離細胞，C錯誤；D、在脫分化過程中一般不需要光照，利于形成愈傷組織，再分化過程中光可誘導葉綠素的合成，可誘導植物形態建成，D正確。故選D。4.研究人員研究了馬鈴薯莖尖外植體大小對苗的成苗率和脫毒率的影響，實驗結果如圖所示，下列敘述正確的是（）A.馬鈴薯的莖尖經過滅菌后才能用于脫毒苗培育B.利用組織培養技術獲得的脫毒苗，是具有抗病毒的新品種C.莖尖和脫分化形成的愈傷組織細胞中核酸種類相同D.馬鈴薯脫毒培養中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm〖答案〗D〖祥解〗分析題圖：圖示表示莖尖外植體大小對苗的脫毒率和成活率的影響，實驗的自變量是莖尖大小，因變量是成苗率和脫毒率，據此分析作答?！驹斘觥緼、馬鈴薯莖尖經過滅菌后會死亡，用于脫毒苗培育之前需要經過消毒處理，A錯誤；B、利用組織培養技術獲得的脫毒苗，是脫毒苗，而非能抗病毒，B錯誤；C、核酸包括DNA和RNA，由于基因選擇性表達，莖尖和脫分化形成的愈傷組織細胞中核酸種類不完全相同，C錯誤；D、據圖可知，實驗范圍內，在莖尖外植體為0.27mm時成苗率和脫毒率均相對較高，是馬鈴薯脫毒培養中莖尖外植體的適宜大小，D正確。故選D。5.蕪菁、黑芥和花椰菜是三種二倍體品種，通過相互雜交和誘導處理可形成不同的四倍體新品種，如圖所示，圖中A、B、C分別代表不同的染色體組，數字代表體細胞中的染色體數。下列說法錯誤的是（）A.一定濃度的秋水仙素和驟然低溫處理都能夠誘導染色體數目加倍B.芥菜與花椰菜雜交產生的子代為三倍體，子代體細胞含有同源染色體C.利用蕪菁和黑芥形成芥菜的過程中發生了基因重組和染色體變異D.將蕪菁和花椰菜進行植物體細胞雜交處理，也可培育出AACC油菜品種〖答案〗B〖祥解〗由受精卵發育而來，體細胞中含有兩個染色體組的個體叫作二倍體。由圖可知，蕪菁、黑芥和花椰菜是三種二倍體品種，蕪菁減數分裂產生的配子中含有1個A染色體組，包含10條非同源染色體；黑芥減數分裂產生的配子中含有1個B染色體組，包含8條非同源染色體；花椰菜減數分裂產生的配子中含有1個C染色體組，包含9條非同源染色體。人工誘導多倍體的方法很多，如低溫處理、用秋水仙素誘發等。用秋水仙素來處理萌發的種子或幼苗，是目前最常用且最有效的方法。當秋水仙素作用于正在分裂的細胞時，能夠抑制紡錘體的形成，導致染色體不能移向細胞的兩極，從而引起細胞內染色體數目加倍。染色體數目加倍的細胞繼續進行有絲分裂，就可能發育成多倍體植株?！驹斘觥緼、驟然低溫處理和秋水仙素處理可以有到染色體數目加倍，機理是抑制紡錘體的形成，導致染色體不能移向細胞的兩極，從而引起細胞內染色體數目加倍，A正確；B、芥菜減數分裂產生的配子含有2個染色體組，含有18條非同源染色體，花椰菜減數分裂產生的配子中含有1個染色體組，包含9條非同源染色體，因此芥菜與花椰菜雜交產生的子代有3個染色體組，為三倍體。子代的體細胞中共有27條染色體，它們的關系是非同源染色體，沒有同源染色體，B錯誤；C、蕪菁和黑芥形成芥菜的過程中經歷了減數分裂、受精作用和染色體數目加倍的過程，因此減數分裂過程發生基因重組和染色體數目變異，C正確；D、將蕪菁和花椰菜進行植物體細胞雜交處理，染色體都是兩親本之和，因此可培育出AACC的油菜品種，D正確。故選B。6.實驗小鼠皮膚細胞培養的基本過程如下圖所示。下列敘述錯誤的是（）實驗小鼠皮膚組織皮膚細胞懸液細胞群體1細胞群體2A.甲過程需要對實驗小鼠進行消毒B.乙過程需要用胰蛋白酶等處理皮膚組織，使細胞分散開C.丙過程表示原代培養，該過程中會出現接觸抑制現象D.丁過程表示傳代培養，傳代培養的正常動物細胞在培養瓶壁上可形成多層細胞〖答案〗D〖祥解〗圖示中甲表示從實驗小鼠獲取皮膚組織，該過程需要對小鼠進行消毒，乙表示用胰蛋白酶將組織細胞分散成單個細胞，丙表示原代培養過程，丁表示傳代培養?！驹斘觥緼、離體動物細胞培養需要無菌、無毒的環境，甲過程表示從實驗小鼠身上取下皮膚組織，該過程需要對小鼠進行消毒，A正確；B、皮膚細胞培養前需用胰蛋白酶等處理皮膚組織，使細胞分散開，并制成細胞懸液，B正確；C、丙過程表示原代培養，動物細胞原代培養該過程中會出現接觸抑制現象，C正確；D、丁過程表示傳代培養，由于接觸抑制，正常動物細胞培養時在培養瓶壁上只能形成單層細胞，D錯誤。故選D。7.“篩選”是生物工程中常用的技術手段。下列相關敘述錯誤的是（）A.體細胞誘變育種時，需要篩選誘變處理后的植株，以獲得新品種B.制備單克隆抗體時，可利用選擇培養基篩選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞C.植物體細胞雜交時，要進行雜種細胞的鑒定和篩選以及雜種植株的鑒定和選育D.基因工程操作時，目的基因導入受體細胞后，需要篩選，以確保目的基因已經成功導入〖答案〗B〖祥解〗很多生物工程技術都需要進行“篩選”，如基因工程中需根據標記基因等篩選出含有重組DNA的受體細胞；由于基因突變具有多害少利性，誘變育種過程中需要篩選誘變處理后的植株；單克隆抗體制備過程中進行了兩次篩選（一次是使用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；另一次是進行抗體陽性檢測以篩選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞）。【詳析】A．體細胞誘變育種時，需要篩選誘變處理后的植株，以獲得新品種，因為誘變育種的原理是基因突變，基因突變具有不定向性，A正確；B．制備單克隆抗體時，可利用選擇培養基篩選出融合的雜交瘤細胞，再進行抗體的陽性檢測，篩選能產生所需抗體的雜交瘤細胞，B錯誤；C．植物體細胞雜交時，需要進行雜種細胞的鑒定和篩選以及雜種植株的鑒定和選育，進而獲得所需要的類型，C正確；D．基因工程操作時，目的基因導入受體細胞后，需要篩選，以確保目的基因已經成功導入，這是保證基因工程育種成功的保證，D正確。故〖答案〗為B。8.某同學列表比較了動植物細胞工程的有關內容，你認為錯誤的是（）比較內容植物體細胞雜交動物細胞融合A特殊處理酶解法去除細胞壁用胰蛋白酶處理分離出單個細胞B融合方法物理方法、化學方法物理方法、化學方法、生物方法C典型應用種間雜種植物培養克隆動物D培養基區別固體培養基，含蔗糖和植物激素液體培養基，含葡萄糖，一般含有動物血清A.A B.B C.C D.D〖答案〗C〖祥解〗植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較，二者融合的原理都是細胞膜的流動性、植物體細胞雜交的原理還包括了植物細胞的全能性；誘導原生質體融合的方法有離心、電刺激、聚乙二醇等試劑誘導，而誘導動物細胞融合的方法有離心、電刺激、聚乙二醇、滅活病毒等試劑誘導。植物體細胞雜交的主要目的是培育新品種，而動物細胞融合的主要目的是用于獲得單克隆抗體?！驹斘觥緼、在植物細胞雜交時首先運用纖維素酶或果膠酶去除植物細胞的細胞壁獲得原生質體，而在動物細胞培養過程中要運用胰蛋白酶將細胞分散成單個細胞，A正確；B、植物體細胞雜交過程中運用物理法和化學法將原生質體進行融合，沒有生物方法，而動物細胞融合可以利用物理、化學、生物三種方法，B正確；C、可以利用植物組織培養技術獲得無病毒植物和人工種子，利用植物體細胞雜交進行種間植物雜交，動物細胞工程中利用動物細胞融合技術制備單克隆抗體，無法培養克隆動物，C錯誤；D、植物組織培養的培養基屬于固體培養基，利用蔗糖作為營養物質，其中還含有植物激素；動物細胞培養的培養基屬于液體培養基，其中含有葡萄糖和動物血清等，利用動物血清作為促進細胞生長的物質，D正確。故選C。9.再生醫學領域在2019年首次利用異源誘導多能干細胞（iPS細胞）培養出的眼角膜組織，移植到病人體內，成功治療一名失明患者，且未發生免疫排斥反應。下列有關敘述正確的是（）A.造血干細胞和誘導多能干細胞（iPS細胞）的分化程度相同B.神經干細胞和iPS細胞在治療阿爾茨海默病等方面有重要價值C.體外培養iPS細胞時培養液中不需要加入血清等物質D.患者未發生免疫排斥反應是因為移植細胞與其自身細胞的基因相同〖答案〗B〖祥解〗胚胎干細胞（簡稱ES細胞）存在于早期胚胎中，具有分化為成年動物體內的任何一種類型的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能；胚胎干細胞必須從胚胎中獲取，這涉及倫理問題，因而限制了它在醫學上的應用。2006年，科學家通過體外誘導小鼠成纖維細胞，獲得了類似胚胎干細胞的一種細胞，將它稱為誘導多能干細胞（簡稱iPS細胞），并用iPS細胞治療了小鼠的鐮狀細胞貧血?，F在，用iPS細胞治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領域的研究也取得了新進展?？茖W家已嘗試采用多種方法來制備iPS細胞，包括借助載體將特定基因導入細胞中，直接將特定蛋白導入細胞中或者用小分子化合物等來誘導形成iPS細胞。iPS細胞最初是由成纖維細胞轉化而來的，后來發現已分化的T細胞、B細胞等也能被誘導為iPS細胞?！驹斘觥緼、造血干細胞和誘導多能干細胞（iPS細胞）的分化程度不同，前者大于后者，A錯誤；B、神經干細胞在治療神經組織損傷和神經系統退行性疾?。ㄈ缗两鹕?、阿爾茨海默病等）方面有重要的應用價值；用iPS細胞治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領域的研究也取得了新進展；可見神經干細胞和iPS細胞在治療阿爾茨海默病等方面有重要價值，B正確；C、體外培養iPS細胞時培養液中需要加入血清等物質，C錯誤；D、患者未發生免疫排斥反應是因為角膜是一層透明的膜，不含有血管，也不含有淋巴組織，屬于免疫豁免的部位，D錯誤。故選B。10.精子載體法是以精子作為外源基因載體攜帶外源基因進入卵細胞，下圖表示用該方法制備轉基因鼠的基本流程。下列敘述正確的是（）A.①過程需將成熟的精子放入ATP溶液中進行獲能處理B.②采用體外受精技術，受精卵中的遺傳物質不都來自于父母雙方C.③過程的早期胚胎需要發育到桑椹胚或原腸胚才能進行胚胎移植D④過程進行胚胎移植前需要對供體和受體進行基因檢測〖答案〗B〖祥解〗分析題圖：圖示表示培育轉基因鼠的基本流程，其中①是篩選獲得導入外源基因的精子的過程，②是體外受精過程，③是早期胚胎培養過程，④是胚胎移植過程。【詳析】A、①是精子獲能過程，該過程需將成熟的精子放在一定濃度的肝素或鈣離子溶液中，用化學藥物誘導精子獲能，A錯誤；B、②采用體外受精技術，受精卵中的遺傳物質來自于父母雙方和外源基因，B正確；C、胚胎移植前要檢查胚胎質量并在桑椹胚或囊胚階段移植，C錯誤；D、④是胚胎移植過程，應選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體，進行胚胎移植前無需對供體和受體進行基因檢測，D錯誤。故選B。11.在體細胞克隆猴培育過程中，為調節相關基因的表達，研究人員將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重構胚，同時用組蛋白脫乙酰酶抑制劑（TSA）處理，使胚胎的發育率和妊娠率提高，具體培育流程如圖所示。下列說法錯誤的是（）A.去核的實質是去除卵母細胞中的紡錘體—染色體復合物B.胚胎移植前應對代孕母猴進行同期發情處理C.將組蛋白去甲基化和去（脫）乙?；?，有利于重構胚的分裂和發育D.形成重構胚后可加入化學藥物將其激活，待發育至桑葚胚或囊胚再進行胚胎移植〖答案〗C〖祥解〗細胞核移植概念：將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物?！驹斘觥緼、將卵母細胞培養到MII期后進行去核操作，此時細胞核退化，出現的是紡錘體—染色體復合物，故去核的實質是去除卵母細胞中的紡錘體—染色體復合物，A正確；B、胚胎移植前需對供體和代孕母猴注射孕激素進行同期發情處理，保證胚胎移植入相同的生理環境，不發生免疫排斥反應，B正確；C、結合題意和圖示操作可知，將組蛋白去甲基化和增加乙?；欣谥貥嬇叩姆至押桶l育，使其完成細胞分裂和發育進程，C錯誤；D、重組細胞融合后，可以用物理或化學方法進行激活，使其完成細胞分裂和發育進程，發育至桑葚胚或囊胚期再進行胚胎移植，D正確。故選C。12.下列有關基因工程中載體的說法，正確的是（）A.基因工程的操作中最常用的載體是來自于細菌的天然質粒B.質粒是一種獨立于細菌染色體外的雙鏈環狀DNA分子C.具有某些標記基因，以便為目的基因的表達提供條件D.能夠在宿主細胞中復制并穩定保存，以便提供大量的目的基因〖答案〗D〖祥解〗1、載體需含有標記基因，且能夠在宿主細胞中復制并穩定保存。2、基因工程載體的種類有質粒、噬菌體、動植物病毒等?！驹斘觥緼、基因工程的操作中最常用的載體是改造后的質粒，A錯誤；B、細菌是原核生物，沒有染色體，B錯誤；C、標記基因是用于檢驗目的基因是否導入受體細胞，與目的基因的表達無關，C錯誤；D、載體能將目的基因導入到受體細胞，作為載體的條件之一是能夠在宿主細胞中復制并穩定保存，以便提供大量的目的基因，D正確。故選D。13.熒光定量PCR技術是在常規PCR的基礎上，加入與模板DNA某條鏈互補的熒光探針（一類兩端經過特殊基團修飾的單鏈DNA片段），當子鏈延伸至探針處時DNA聚合酶會水解掉探針一端并生成熒光分子，使熒光監測系統接收到熒光信號，即DNA每擴增一次，就有一個熒光分子生成，原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（）A.該項技術可用來直接檢測樣本中新冠病毒核酸的含量B.1個雙鏈DNA分子經過3輪循環一共會生成8個熒光分子C.1個雙鏈DNA分子經過5輪循環一共需要消耗15對引物D.該PCR技術中DNA聚合酶既催化形成磷酸二酯鍵，又催化斷裂磷酸二酯鍵〖答案〗D〖祥解〗PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。【詳析】A、利用熒光定量PCR技術可以進行DNA的含量測定，模板DNA越多，熒光信號越強，而新冠病毒的核酸為RNA，無法直接用該技術檢測，A錯誤；B、熒光探針只能跟模板DNA的某條鏈互補配對，DNA分子每擴增一次，就有一個熒光分子生成，3輪循環后得到8個DNA分子，即擴增形成了7個新DNA分子，一共會生成1+2+4=7個熒光分子，B錯誤；C、1個雙鏈DNA分子經過5輪循環一共會形成32個DNA分子，即形成64條鏈，其中62條鏈都是新合成的，一共需要消耗31對引物，C錯誤；D、子鏈延伸時DNA聚合酶可在子鏈的3′端不斷添加脫氧核苷酸，從而形成磷酸二酯鍵，當子鏈延伸至探針處時DNA聚合酶可以利用5′-3′外切酶活性水解DNA單鏈探針的一端，使其有關基團出現熒光，D正確。故選D。14.對禽流感的確診，先用PCR技術將標本基因大量擴增，然后利用基因探針，測知待測標本與探針核酸的堿基異同。下圖P表示禽流感病毒探針基因在凝膠的電泳標記位置，M、N、Q、W是四份送檢樣品在測定后的電泳標記位置，哪份標本最有可能確診為禽流感（）A.M B.N C.Q D.W〖答案〗C〖祥解〗【詳析】由于P表示禽流感病毒探針基因在凝膠的電泳標記位置，Q的DNA片段與P的相同的最多，所以Q最有可能確診為禽流感，故ABD錯誤，C正確。故選C。二、多項選擇題：共4題，每題3分，共12分。每題有不止一個選項符合題意。每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。15.植物組織培養、單克隆抗體的制備、微生物培養過程都需要進行的是（）A.制備細胞懸液 B.培養基滅菌C.嚴格無菌操作 D.抗原抗體檢測〖答案〗BC〖祥解〗為了避免污染，植物組織培養、單克隆抗體的制備、微生物培養過程都需要進行滅菌和無菌操作?！驹斘觥緼、植物組織培養無需制備細胞懸液，A錯誤；BC、三者培養基都需要進行滅菌，和進行嚴格的無菌操作，以避免污染，BC正確；D、只有單克隆抗體的制備需要進行抗原抗體檢測，D錯誤。故選BC。16.第三次全國大熊貓野外種群調查顯示，全國野生大熊貓不足1600只，為保護和繁殖大熊貓，科研人員進行了如圖實驗，相關敘述正確的是（）A.克隆熊貓培育成功的部分原因是卵細胞質具有調控細胞核發育的作用B.圖中用激素處理可使供體超數排卵，代孕受體在移植前需要進行同期發情處理C.圖中的熊貓甲與親代雌性大熊貓的性狀基本相同D.熊貓乙和熊貓丙的基因型和表型不一定都相同〖答案〗ABD〖祥解〗圖示為克隆熊貓和試管熊貓的形成過程，為了得到更多的早期胚胎，可以對供體使用超數排卵法處理，使供體排出更多的卵子。卵母細胞核與早期胚胎細胞細胞質融合形成重組細胞，經過早期胚胎培養形成早期胚胎，并通過胚胎移植移到代孕母體中，產生克隆熊貓?！驹斘觥緼、克隆熊貓培育技術為細胞核移植技術，培育成功的部分原因是卵細胞質具有調控細胞核發育的作用，A正確；B、圖中激素處理供體，會促進其超數排卵，受精后產生更多胚胎；為了給移植胚胎創造良好的孕育條件，應對代孕母畜進行同期發情處理，B正確；C、據圖可知，熊貓甲的細胞核中的遺傳物質來自雌性和雄性大熊貓，細胞質遺傳物質來自雌性大熊貓，故其性狀不一定與親代雌性大熊貓相同，C錯誤；D、熊貓乙和熊貓丙是利用胚胎分割獲得的胚胎，經胚胎移植獲得的，其遺傳物質相同，但是其生存環境不一定相同，且發生的變異類型也不一定相同，所以熊貓乙和熊貓丙的基因型相同，但是表型不一定相同，D正確。故選ABD。17.細胞融合不僅在自然條件下常見，在現代生物技術中也被經常應用。下圖為細胞融合的簡略過程，下列說法不正確的是（）A.若細胞d是雜交瘤細胞，則在選擇性培養基中篩選后即可大規模培養生產單抗B.若細胞a、b分別取自優良奶牛，則采集的卵母細胞和精子可直接體外受精C.若細胞a、b分別代表白菜、甘藍細胞，則完成融合的標志為核的融合D.細胞融合過程都涉及膜的流動性，常用聚乙二醇、電激等進行促融處理〖答案〗ABC〖祥解〗1、植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞，進而利用植物的組織培養將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斘觥緼、單克隆抗體的制備過程中需要進行二次篩選，第一次是用選擇性培養基篩選出雜交瘤細胞后，還需要用抗原-抗體特異性結合的原理篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞，再進行大規模培養，A錯誤；B、采集來的卵母細胞培養到減數第二次分裂中期，精子要經過獲能處理，方可進行體外受精，B錯誤；C、若細胞a、b分別代表白菜、甘藍細胞，則完成融合的標志為產生新的細胞壁，C錯誤；D、細胞融合過程都涉及膜的流動性，常用聚乙二醇、電激等進行促融處理，D正確。故選ABC。18.雙脫氧終止法對DNA進行測序原理如圖，在4支試管中分別加入4種脫氧核苷三磷酸(dNTP)和1種雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)；ddNTP可以與dNTP競爭核苷酸鏈延長位點，并終止DNA片段的延伸。在4支試管中DNA鏈將會分別在A、C、G及T位置終止，并形成不同長度的DNA片段。這些片段隨后可被電泳分開并顯示出來。下列說法正確的是（）A.這種測序方法需要引物和耐高溫的DNA聚合酶B.電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥嘌呤結尾C.測得未知DNA的序列為5′—GATTCGAGCTGA—3′D.ddNTP與dNTP競爭的延長位點是核苷酸鏈的5′末端〖答案〗AB〖祥解〗PCR技術：1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術；2、原理：DNA復制；3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物；4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶(Taq酶)；5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程(PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開)；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈?！驹斘觥緼、PCR是一種體外擴增DNA的技術，與細胞內DNA復制相似，需要一定的條件，主要包括Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）、引物，dNTP、一定的（含Mg2+）緩沖液和DNA模板，A正確；B、電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥嘌呤（G）結尾，B正確；C、由圖可知：由下往上讀出的序列是GATTCGAGCTGA,所以原來的互補序列是3’→5’：CTAAGCTCGACT,測得未知DNA的序列為5＇-TCAGCTCGAATC-3＇，C錯誤；D、DNA的延伸，是通過前一個dNTP的3位碳上的羥基官能團與后一位dNTP的5位碳上的磷酸基團反應形成磷酸二酯鍵來實現的。而ddNTPs的三位碳上沒有羥基官能團，也就不能形成磷酸二酯鍵，從而終止DNA的合成。ddNTP與dNTP競爭的延長位點是核苷酸鏈的3’末端，D錯誤。故選AB。第Ⅱ卷（非選擇題共60分）三、非選擇題：共5題，共60分。除特別說明外，每空1分。19.高濃度的銨鹽對土壤中的生物有一定的毒害作用，土壤中含有具有高降解能力的硝化細菌可吸收利用銨鹽轉變為其他生物可吸收利用的物質，科研人員擬從當地土壤中篩選出對銨鹽降解率高且穩定的硝化細菌菌株Q。下圖1表示制備固體培養基過程中的某操作，圖2是科研人員從土壤中分離出菌株Q的部分過程示意圖。（1）圖1所示操作稱為______，待平板冷凝后______，以防止______。為了篩選出硝化細菌，在配制選擇培養基時，特殊的處理有________________。（2）圖2所示接種方法是______。在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液，經適當培養后，3個平板上菌落數分別是48、52、50，則1g土壤中的活菌數約為______個。在利用平板計數時，需每隔一個“時間間隔”統計一次菌落數，最后選取穩定時的菌落數作為記錄結果，這樣可以避免因培養時間不足造成________，導致統計結果偏小。為使獲得的實驗數據準確，還應對每種候選菌株設置________。（3）圖3是某同學利用不同于圖2方法分離菌株Q的示意圖。下列對其操作及結果的敘述不正確的有______（填字母）。a.操作前用無水乙醇對雙手進行消毒處理b.劃線時將沾有菌種的接種環插入培養基c.只有在5這一區域中才能得到所需菌落d.整個過程需要對接種環進行6次灼燒（4）固體培養基中難溶性磷酸鹽在菌株Q的作用下溶解，會在菌落周圍形成透明圈（圖4），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解難溶磷酸鹽的能力大小。下表是初步篩選出的三種優良解磷菌株。菌株透明圈直徑（D）菌落直徑（d）M30114.84.3B35618.75.0T40123.54.5根據實驗結果分析，溶解難溶性磷酸鹽能力最強的菌株是____________。〖答案〗（1）①.倒平板②.倒置③.冷凝水落入培養基對培養基造成污染④.需要以銨鹽為唯一氮源（2）①.稀釋涂布平板法②.5.0×107③.遺漏菌落的數目④.（至少3個）平行組（3）abc（4）T401〖祥解〗1、微生物常見的接種的方法（1）平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。2、在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱做選擇培養基。（1）圖1所示操作稱為倒平板；待平板冷凝后需要將其倒置，以防止皿蓋上的冷凝水落入培養基，對培養基造成污染。硝化細菌是一類能降解銨鹽的自養型細菌，故為了篩選出硝化細菌，在配制選擇培養基時，需要以銨鹽為唯一氮源。（2）圖2所示接種方法是稀釋涂布平板法；取1g土壤按題圖稀釋，在三個平板上分別接入0.1mL稀釋液后，經適當培養后，3個平板上的菌落數分別是48、52、50，據此可計算出每克土樣中的活菌數為（48+52+50）÷3÷0.1×105=5.0×107（個）。菌落生長需要時間，在利用平板計數時，需每隔一個“時間間隔”統計一次菌落數，最后選取穩定時的菌落數作為記錄結果，這樣可以避免因培養時間不足造成遺漏菌落的數目，導致統計結果偏小。為使獲得的實驗數據準確，還應對每種候選菌株設置（至少3個）平行組。（3）圖3是通過平板劃線法接種操作，結合該接種方法的步驟和注意事項分析如下：a、操作前用70%的酒精溶液對接種人員的雙手進行消毒處理，a錯誤；b、劃線操作時將沾有菌種的接種環涂抹在培養基表面，不能插入培養基以避免劃破培養基表面，b錯誤；c、在5個區域中，無論哪個區域，只要有單個活細菌，通過培養即可獲得所需菌落，c錯誤；d、在每次劃線前后都要對接種環進行滅菌，接種環的滅菌方法應是在火焰上灼燒，整個過程需要對接種環進行6次灼燒，d正確。故選abc。（4）根據實驗原理中“透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表溶解難溶磷酸鹽的能力大小”，結合表格數據可以確定解磷能力最強的菌株是T401。20.I．如圖表示菊花的嫩枝和月季的花藥離體培養過程，據圖回答下面的問題：（1）菊花的組織培養與月季的花藥培養都需要制備專用的__________固體培養基。（2）用于培養的菊花嫩枝和月季花藥都需要消毒，要嚴格控制雜菌污染的原因是___________。通常消毒所用的藥劑是_________和5%的次氯酸鈉溶液。（3）為大量獲得菊花和月季的愈傷組織，適宜采取_________（填“黑暗”或“光照”）培養。在脫分化的過程中細胞的全能性__________（填“不斷增強”、“幾乎不變”或“不斷減弱”）II．土地鹽漬化是一種全球化現象，嚴重制約著農業生產的發展。我國育種專家用普通小麥（2N＝42）與耐鹽偃麥草（（2N＝70）體細胞雜交獲得耐鹽新品種山融3號，培育過程如下圖所示，圖中序號代表過程或結構。回答下列問題：（4）細胞①表示________。進行原生質體融合之前需要先去除細胞壁，原因是________。PEG的作用是________。某愈傷組織在誘導生芽的培養基上未形成芽，但分化出了根，原因可能是_________。（5）用特異性引物對普通小麥和耐鹽偃麥草基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖表示用該引物對雙親及再生植株1－6進行PCR擴增的結果。據圖判斷，再生植株1－6中確定為雜種植株的有__________，判斷依據是_________。注：Ⅰ為普通小麥，Ⅱ為耐鹽偃麥草〖答案〗（1）MS（2）①.雜菌可在培養基上生長，與植物組織爭奪營養，同時雜菌產生的物質會影響植物組織生長②.（70%）酒精（3）①.黑暗②.不斷增強（4）①.雜種細胞②.細胞壁會阻礙細胞間的雜交③.誘導原生質體融合④.生長素與細胞分裂素用量的比值高（5）①.5和6②.5和6含有這兩種植物的所有電泳條帶〖祥解〗植物組織培養就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養在人工配制的培養基上，給予適宜的培養條件，誘導其產生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。（1）植物的組織培養過程中都需要制備MS固體培養基，其營養成分適合植物細胞利用，菊花的組織培養與月季的花藥培養都屬于植物組織培養過程。（2）植物的組織培養要嚴格控制雜菌污染，雜菌可在培養基上生長，與植物組織爭奪營養，同時雜菌產生的物質會影響植物組織生長，方法是流水充分沖洗后的外植體(幼嫩的莖段)用70%的酒精消毒30s，然后立即用無菌水清洗2~3次，再用5%的次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無菌水清洗2~3次，所以用到的是70%的酒精和0.1%的氯化汞。（3）為大量獲得菊花和月季的愈傷組織，適宜采取黑暗培養，脫分化過程要避光，否則會形成維管組織，不形成愈傷組織。一般情況下，隨著細胞的分化，細胞的全能性會降低，脫分化過程中細胞的分化程度降低，組織細胞的全能性不斷增強。（4）圖中細胞①是普通小麥和耐鹽偃麥草原生質體融合后再生出細胞壁形成的，所以這是雜種細胞；細胞壁有保護和支撐的作用，會阻礙細胞間的雜交，所以需要先除去細胞壁。PEG可以誘導原生質體融合成雜種細胞。愈傷組織在誘導生根的培養基上未形成芽，但分化出了根，原因可能是培養基中生長素與細胞分裂素用量的比值高。（5）Ⅰ為普通小麥，Ⅱ為耐鹽偃麥草，圖中只有5和6含有這兩種植物的所有條帶，所以5和6為雜種植株。21.細胞工程在藥物生產和育種等領域應用十分廣泛。閱讀下列材料，回答下列問題。材料一：人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養層細胞分泌的一種糖蛋白。女性懷孕后尿液中含有HCG。如圖是制備抗HCG單克隆抗體流程示意圖。材料二：西湖龍井含有的茶堿是植物細胞的代謝產物，具有提神、抗衰老功效，可利用植物組織培養技術來實現茶堿的工業化生產。（1）免疫處理的小鼠產生相應的B淋巴細胞群能合成并分泌_________（填“一種”或“多種”）抗體。步驟③需對選擇培養的雜交瘤細胞進行________及抗體檢測，該過程一般在多孔細胞培養板上進行：先將細胞懸浮液稀釋到7～10個細胞/mL，再在每個培養孔中滴入0.1mL細胞稀釋液，其目的是________。選擇陽性孔中的細胞繼續植入小鼠腹腔內進行體內培養，可從_______中提取到單克隆抗體。（2）人絨毛膜促性腺激素（HCG）作為抗原，定期間隔免疫小鼠，目的是_________，經選擇培養篩選出的雜交瘤細胞具有__________特點。（3）單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，如科學家利用人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體，制作出了早孕試紙，該試紙可以利用尿液診斷早孕的理由是________。鼠源性單克隆抗體可應用于腫瘤的臨床免疫治療，在注射前需要進行人源化改造，除抗原結合區域外，其他部分都替換為人抗體區段，目的是降低_________。（4）若利用植物組織培養技術，可將龍井茶葉細胞培養到_________階段，然后從________（填細胞器）中提取茶堿；若要獲得神奇的人工種子，可將龍井茶葉細胞培養到__________，再和具有養分的人工胚乳一起包埋在具有保護功能的人工種皮中。（5）與常規育種相比，植物組織培養技術產生的植株特點有_________?！即鸢浮剑?）①.多種②.克隆化培養③.使每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養的目的④.小鼠腹水（2）①.獲得大量分泌抗人絨毛膜促性腺激素（HCG）抗體的B淋巴細胞（獲得能產生特異性抗體的B淋巴細胞）②.既能迅速大量增殖，又能產生特異性抗體（3）①.懷孕后尿液中含有HCG，單克隆抗體可以與它特異性結合，從而診斷早孕②.免疫排斥反應（4）①.愈傷組織②.液泡③.胚狀體（5）能保持植物原有遺傳特性、繁殖速度快〖祥解〗1、單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內，使其發生免疫，小鼠體內產生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合。2、植物細胞工程技術的應用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產物的工廠化生產。（1）免疫處理的小鼠產生相應的B淋巴細胞群，能合成并分泌多種抗體，而1個漿細胞只能合成一種抗體；步驟③需對選擇培養的雜交瘤細胞進行克隆化培養及抗體檢測，該過程一般在多孔細胞培養板上進行；用多孔培養板培養時，需要稀釋，其目的是使每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養的目的。選擇陽性孔中的細胞繼續植入小鼠腹腔內進行體內培養，可從小鼠腹水中提取到單克隆抗體。（2）人絨毛膜促性腺激素（HCG）作為抗原，定期間隔免疫小鼠，目的是獲得大量分泌抗人絨毛膜促性腺激素（HCG）抗體的B淋巴細胞（獲得能產生特異性抗體的B淋巴細胞）。經選擇培養篩選出的雜交瘤細胞具有既能迅速大量增殖，又能產生特異性抗體特點。（3）人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體本質為蛋白質，所用檢測早孕的方法為抗原-抗體雜交，生產的單克隆抗體可以與人絨毛膜促性腺激素（或HCG）特異性結合，懷孕后尿液中含有HCG，單克隆抗體可以與它特異性結合，從而診斷早孕。為避免鼠源性單克隆抗體進入人體后被人體免疫系統識別并清除，降低免疫排斥反應，在注射前需要進行人源化改造，除抗原結合區域外，其他部分都替換為人抗體區段。（4）液泡中含有無機鹽、糖類等有機物，故若利用植物組織培養技術，可將龍井茶葉細胞培養到愈傷組織階段，愈傷組織細胞呈高度液泡化，然后從其液泡中提取茶堿；若要獲得神奇的人工種子，可將龍井茶葉細胞培養到胚狀體階段，經過人工薄膜包裹得到人工種子。（5）植物組織培養為無性生殖，與常規育種相比，植物組織培養技術產生的植株特點是：能保持植物原有的遺傳特性、繁殖速度快等。22.科研人員把豬卵母細胞進行人為的孤雌激活處理，使其發育成胚胎，將胚胎移植到代孕母豬體內，獲得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆豬。這種克隆豬不同于核移植獲得的克隆豬，現將兩種技術進行比較。（1）圖中過程①②③④是獲得孤雌生殖克隆豬的技術流程，那么獲得核移植克隆豬的技術流程是________（填序號）。（2）孤雌生殖克隆豬仍然是二倍體生物，但可能由于缺失_______方親本基因，其生長發育中出現多種問題。（3）卵母細胞能夠發育成早期胚胎，得到克隆豬，說明卵母細胞具有_________。（4）體細胞核移植技術中也會用到卵母細胞，使用_________處理，使其超數排卵，收集并選取_________期的卵母細胞，并用微型吸管吸出____________。（5）早期胚胎移植時，必須移植到同種且____________相同的其他雌性動物子宮中，才可能獲得成功。胚胎移植前，形成多個胚胎需通過________技術，以進一步增加胚胎的數量。從免疫學角度分析，早期胚胎能夠在受體內存活的主要生理基礎是___________。（6）可以從兩種不同的克隆豬中提取mRNA進行研究，通過______方法得到多種cDNA，并通過_______技術擴增產物?！即鸢浮剑?）⑤⑥③④（2）父（3）全能性（4）①.促性腺激素②.減數第二次分裂中期（MII中）③.細胞核和第一極體（5）①.生理狀態②.胚胎分割③.受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應（6）①.反轉錄/逆轉錄②.PCR〖祥解〗題圖分析，圖示為孤雌生殖克隆豬和核移植獲得的克隆豬技術流程比較，首先將豬卵母細胞進行人為的孤雌激活處理并發育成早期胚胎，再采用胚胎移植技術移植到受體子宮，最后妊娠形成克隆豬，所以孤雌生殖克隆豬流程可用①②③④表示；動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體，所以圖中⑤⑥③④可表示核移植獲得的克隆豬技術流程。（1）由圖可知，圖中①②③④是獲得孤雌生殖克隆豬的技術流程，而⑤⑥③④是獲得核移植克隆豬的技術流程。（2）孤雌生殖克隆豬是卵母細胞發育而來，仍然是二倍體生物，但缺失父方親本基因，因而其生長發育中出現多種問題。（3）卵母細胞能夠發育成早期胚胎，得到克隆豬，說明卵母細胞具有全能性，同時也能說明其中包含全套的遺傳物質。（4）促性腺激素能促進卵母細胞的生成，得到大量的卵母細胞；體細胞核移植技術中也會用到卵母細胞作為受體細胞，收集并選取減數第二次分裂中期的卵母細胞才是成熟的卵母細胞；同時需要通過顯微操作去除卵母細胞中的核，由于減數第二次分裂中期卵母細胞核的位置靠近第一極體，所以用微型吸管可一并吸出細胞核和第一極體。（5）早期胚胎移植時，必需移植到同種、生理狀態相同的其他雌性動物子宮中，才可能移植成功。胚胎移植前，形成多個胚胎需通過胚胎分割技術，以進一步增加胚胎的數量，這些胚胎的獲得屬于無性繁殖。從免疫學角度分析，早期胚胎能夠在受體內存活的主要生理基礎是受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應，因而能在受體細胞中成活。（6）對兩種不同的克隆豬進行研究，需要以mRNA為模板合成cDNA，該過程稱為反轉錄（逆轉錄）；獲得DNA后，還可通過PCR技術體外擴增，進而對獲取的DNA進行分析。23.下圖是將