wsTechnicalguidanceforderivingreferencedoseofenvironmentalchemi2023-12-15發(fā)布2024-05-01實施I 2 2 2 2 2 2 3 3 4 4 4 5 5 5 5 5 6 69.2未觀察到有害效應劑量（NOAEL）/可觀察到有害效應最低劑量（LOAEL）法 6 6 6 6 7 7 7 7 8 8 8 9 391環(huán)境化學污染物參考劑量推導技術(shù)指南本文件提供了以保護人體健康為目標的環(huán)境化學污染物參考劑量推導的程序、方法步驟和技術(shù)內(nèi)本文件適用于能夠引起有閾值毒性作用的單一環(huán)境化學污染物經(jīng)不同暴露途徑導致人體急性或慢），慢性參考劑量chronicreferencedose起算點pointofdepartu2在規(guī)定的試驗條件下，通過現(xiàn)有技術(shù)手段或檢測指標未觀察到任何與受試物有關(guān)有害效應的最高在規(guī)定的試驗條件下，通過現(xiàn)有技術(shù)手段或檢測指標觀察到與受試物有關(guān)有害效應的最低染毒劑不確定性系數(shù)uncertaintyfact在參考劑量推導時，用于處理研究結(jié)果從實驗動物或部分個體外推到一般人群以及處理數(shù)據(jù)局限修正因子modifyingfactor4基本原則4.2數(shù)據(jù)充分性4.3過程科學性推導方法與當前科學水平相一致，推導過程涉及的數(shù)據(jù)及不確定性系數(shù)的選用宜有明確的科學依4.4結(jié)果嚴謹性4.5公開透明性推導得出的參考劑量宜清楚描述推導過程，提供每個環(huán)境化學污染物參考劑量的詳細推導過3相關(guān)性評價有補充數(shù)據(jù)無終止推導過程不符合不確定性分析不確定性系數(shù)起算點計算相關(guān)性評價有補充數(shù)據(jù)無終止推導過程不符合不確定性分析不確定性系數(shù)起算點計算參考劑量的推導步驟主要包括目的分析、數(shù)據(jù)收集、數(shù)據(jù)評價、起 數(shù)據(jù)收集基本信息代謝數(shù)據(jù)毒性數(shù)據(jù)人群研究數(shù)據(jù)基本信息代謝數(shù)據(jù)毒性數(shù)據(jù)人群研究數(shù)據(jù)理化性質(zhì)危害等級數(shù)據(jù)參考劑量數(shù)據(jù)備選數(shù)據(jù)庫建立可靠性評價不充分 充分性評價充分基準劑量法基準劑量法數(shù)據(jù)條件判斷符合修正因子NOAEL/LOAEL法基準劑量法修正因子起算點確定參考劑量推導和解釋參考劑量審核4a)基本信息。包括中英文化學名稱、CAS編號、分子f)已發(fā)布的參考劑量數(shù)據(jù)。包括國內(nèi)外相關(guān)機構(gòu)發(fā)布的該環(huán)境化學污染物的參考劑量及其研究g)危害等級數(shù)據(jù)。包括國內(nèi)外相關(guān)環(huán)境污染物毒性研究機構(gòu)對該環(huán)境化學污染物的危害等級分動物實驗需注明動物種類、性別組成及暴露所發(fā)生的生目標環(huán)境化學污染物已有的毒物代謝動力學數(shù)據(jù)，選用相應暴露途徑代謝模型轉(zhuǎn)換為特定暴露途徑的外暴露劑量。暴露劑量或濃度的單位為毫克每千克體重（mg/kg·bw）、毫克每升5——數(shù)據(jù)中的受試物與目標環(huán)境化學污染物為同一種物質(zhì)或與母體化學物毒——研究人群與推導參考劑量保護的目標人群具有相關(guān)性，目標人群通常為該環(huán)境化學污染物的——所觀測的動物毒性效應與人體有害效應有相關(guān)或相似的依據(jù)，動物毒性數(shù)據(jù)一般采用哺乳動——暴露劑量（濃度）與目標保護人群的暴露水平接近。——采用產(chǎn)生過程符合國際國內(nèi)標準方法或準則的數(shù)據(jù)；——不采用未提供足夠數(shù)據(jù)產(chǎn)生過程細節(jié)或無法判斷可靠性的數(shù)據(jù)。——數(shù)據(jù)覆蓋多種暴露時長，或所包含的特定暴露時長可滿足用于推導特定急性毒性或慢性毒性69起算點確定9.1基準劑量法9.1.1數(shù)據(jù)條件在符合基準劑量法數(shù)據(jù)條件的情況下，優(yōu)先采用該方法計算起算——劑量組設(shè)置不小于所選模型所需劑量組數(shù)量且不少于三個劑量組。9.1.2基本步驟量組效應值及標準差，對定性資料采用各劑量組的有害效應發(fā)9.2未觀察到有害效應劑量（NOAEL）/可觀察到有害效應最低劑量（LOAEL）法不確定性宜由本領(lǐng)域?qū)＜医M對案例進行逐個分析和判斷，采用不確定性系數(shù)與修正因子解釋數(shù)據(jù)外推的不確定性，最終選用的不確定性系數(shù)與修正因子的乘積不宜7b)對經(jīng)口攝入，毒代動力學差異采用種間劑量調(diào)整因子（dosimetric通常由亞慢性外推至慢性取值為3；由亞急性外推至亞慢性取值為根據(jù)觀察效應的嚴重程度選取，效應越嚴重則取值越大根據(jù)數(shù)據(jù)庫的缺失程度選取，缺失量越大則取值越大范圍為1~10的數(shù)值。當推導過程中的不確定性均能由各項不確定性系數(shù)解釋時，取默認UF——不確定性系數(shù)，為表1中各項來源不確定性系數(shù)的乘積；MF——修正因子。8度RfC表示。根據(jù)暴露時長，參考劑量可分為急性參考劑量（ARfD）和慢性參考劑量（CRfD）。結(jié)果參考劑量宜附有推導過程技術(shù)報告，模板見附錄——有充分證據(jù)證明目標環(huán)境化學污染物對人體毒性很低，從而沒有必要給出參考劑量；注相關(guān)科學進展，根據(jù)現(xiàn)有的數(shù)據(jù)及時更新評估及修——所有要求的數(shù)據(jù)均已獲得并且來源可靠；——所有數(shù)據(jù)中不存在可疑數(shù)據(jù)或異常數(shù)據(jù)；——數(shù)據(jù)評價和篩選過程科學；——推導過程準確；9量NOAEL/LOAEL備注推導環(huán)境化學污染物的參考劑量最常用的人群研究為流行病學研究中的隊列研究、病例對照研究斯爾-渥太華量表（Newcastle-OttawaScal和研究機構(gòu)（AgencyofHealthcareResearchandQuality，AHRQ）推薦的評價標準進行評價。原則上采用高質(zhì)量研究數(shù)據(jù)作為推導起算點的依據(jù)；中質(zhì)量研究由專家對其進行充分論證后方可采用為推導依據(jù)；不采用低質(zhì)量研究作為推導起算點的111說明研究起始時人群尚未出1設(shè)計和分析時考慮了組間可21隨訪期足夠長使可以觀察到11于規(guī)定百分比或描述了失訪情況1分1111設(shè)計和分析時考慮了組間可21采用相同方法確定病例和對111111說明了對研究對象的評估在盲法操作下進行且不受1111111432猴42狗人1按本文件推導環(huán)境化學污染物參考劑量所撰寫的技術(shù)報告4神經(jīng)行為毒性環(huán)境化學污染物參考劑量推導示例——全氟辛烷磺酸參考劑E.2.1全氟辛烷磺酸參考劑量推導全氟辛烷磺酸（perfluorooctanesulfonate，PFOS的碳氟鍵，其性質(zhì)穩(wěn)定。PFOS具有表面活性劑特性，因而被廣泛應用于生產(chǎn)衣物、床上用品、軟墊家合作與發(fā)展組織召開的第34次化學品委員會聯(lián)合會議上將PFOS列為持久存在于環(huán)境、具有生物蓄積性越來越多研究發(fā)現(xiàn)其潛在的健康危害，而目前國內(nèi)歐盟在2006年12月27日發(fā)布限制PFOS銷售及使用指令——Directive2006/122/EC，規(guī)定歐盟市場上PFOS使用或制成制劑時，其含量不能超過其產(chǎn)品質(zhì)量的0.005%；歐盟市場上販賣的零部件中PFOS不能超過其單元質(zhì)量（均質(zhì)）的0.1%，紡織品或涂料中PFOS的限值含量為1μg/m2。推導PFOS的慢性經(jīng)口攝入RfD為20ng/kg·bw/day。2018年美國新澤西州飲用水質(zhì)量研究所制定飲用水中PFOS的慢性（終生）暴露MRL為13ng/L推導得出PFOS的經(jīng)口攝入RfD為1.8ng/kg·bw/day。美國衛(wèi)生與公眾服務(wù)部亞慢性經(jīng)口攝入PFOS的MRL為2.0ng/kg·bw/day。確定PFOS的每周容許攝入量為13ng/kg·bw/w等人基于PFOS對我國淡水生態(tài)系統(tǒng)的毒作用分析，計算得出我國水生系統(tǒng)中PFOS的最高濃度基準為研究結(jié)果，首次提出中國飲用水中PFOS的健康指導值為47ng/L。E.2.3推導目的與應用范圍以保護人體免受長期暴露的健康危害為目的，根據(jù)現(xiàn)有流行病學及毒理學數(shù)據(jù)，針對PFOS的主要暴露途徑，對PFOS經(jīng)口攝入的慢性參考劑量(chronicreferencedose,CRfD)進行推導。推導的參考劑量可應用于環(huán)境基準、標準限值等的制定及健康風險評估。E.3基本情況E.3.1理化性質(zhì)PFOS分子式為C?HF??O?S,分子結(jié)構(gòu)如圖E.1,相對分子質(zhì)量為500.13,CAS編號為1763-23-1。常溫下為白色固體，熔點為90℃,沸點為260℃(101.33kPa),20℃時密度為1.25g/cm3。PFOS屬于全氟化學品或全氟烷基酸的人造化學品。這些化學物質(zhì)的結(jié)構(gòu)包括3條不同長度的氟化碳鏈和一個帶電官能團，如羧酸鹽或磺酸鹽。PFOS分子的主干是一個完全氟化的八碳鏈，除了末端碳之外，其中兩個鍵是氟化的，其余的鍵形成磺酸鹽。PFOS疏水疏油的特性使其能夠在脂質(zhì)/水界面之間架起橋梁，并充當表面活性劑。由于氟的電負性，碳-氟鍵是有機化學中發(fā)現(xiàn)的最強鍵之一，PFOS和其他全氟辛烷烴非常穩(wěn)定，而且耐化學反應。因此，PFOS在環(huán)境中非常穩(wěn)定，耐生物降解、直接光解、大氣光氧化和水解。PFOS的鉀鹽在水中相對可溶，其溶解度為680mg/L。它的蒸氣壓非常低，在20℃時為2.48×10?圖E.1PFOS的分子結(jié)構(gòu)示意圖E.3.2生產(chǎn)使用情況及污染分布PFOS因其獨特的表面活性而被廣泛用于表面涂層和保護劑配方中，主要包括紙張和紙板包裝產(chǎn)品、地毯、皮革產(chǎn)品和紡織品的生產(chǎn)中，以及用作廚具上的不粘涂層，可增強這些產(chǎn)品的防水、防油和防污因其具有難降解性、生物蓄積性、半揮發(fā)性、高毒性和長距離遷移等特性，如前文所述，2009年5月召開的《關(guān)于持久性有機污染物的斯德哥爾摩公約》第4次締約方大會將PFOS作為新增持久性有機污染物列入公約附件B受控清單。中國作為生產(chǎn)PFOS的主要國家，在該修正案生效后，按照公約附件B的有關(guān)規(guī)定，已禁止PFOS除特定豁免和可接受用途外的一切生產(chǎn)、流通、使用和進出口。PFOS的化學結(jié)構(gòu)使其在環(huán)境中非常穩(wěn)定，所有環(huán)境介質(zhì)中都檢測到了PFOS,包括空氣、地表水、地下水(包括飲用水)、土壤和食物。人體可通過這些環(huán)境介質(zhì)暴露于PFOS,飲食是人體PFOS的主要暴露來源。在世界多國和地區(qū)都檢測到了PFOS,這表明PFOS具有長距離遷移的特性。歐洲食品安全局于2018年的PFOS健康風險評估報告中顯示，成人和兒童血清中PFOS中位數(shù)濃度分別為1.9ng/mL和數(shù)為4.99ng/mL。2019年Zhang等人的研究結(jié)果表明中國普通人群飲用水中PFOS的平均濃度為0.7±11.7ng/L,人群血清中PFOS的平均濃度為2.6±1.3ng/mL。PFOS的環(huán)境污染來源包括工業(yè)排放、含水滅火泡沫的排放、堆填區(qū)的處置、污水處理廠的排放以慢遷移，并滲入地下水。揮發(fā)性含氟調(diào)聚醇會分解成PFOS，經(jīng)大氣沉降導致土壤污染，并從點源滲入動物實驗研究表明，單次口服4.2mg/kg在一項經(jīng)皮接觸PFOS的研究中，單次使用了最大劑量為0.3mg/k尿液是人體內(nèi)PFOS排出的最重要途徑。尿中排泄率可能取決于腎臟中有機陰離子轉(zhuǎn)運體分泌和重吸收的程度。雖然在人體膽汁中發(fā)現(xiàn)了PFOS，但膽汁中的PFOS又經(jīng)胃腸道重新吸收進入體內(nèi)循環(huán)，因此，表明孕婦暴露PFOS與新生兒出生體重下降之間存在關(guān)聯(lián)，但結(jié)論并不一致。這些人群研究針對的是暴加和未成熟精子數(shù)量增加。其機制可能是PFOS會誘導嚙齒動物和人類睪丸支持細胞中基于肌動蛋白和胞的穩(wěn)態(tài)。PFOS還可通過干擾幾種信號蛋白/通路，例如FAK和mTORC1/rpS6/Akt1/2破壞精子活性，根據(jù)動物實驗研究的結(jié)果，生命早期可能是PFOS導致神經(jīng)行為毒性效應的敏感時期，其暴露會導致新生雄性小鼠海馬和大腦皮層的神經(jīng)蛋白水平發(fā)生變化。而慢性膠質(zhì)細胞活化伴隨的炎癥和突觸損但現(xiàn)有的動物實驗證據(jù)并沒有為PFOS的神經(jīng)行為毒性提供強有力的支持，同樣，現(xiàn)有的流行病學證據(jù)也沒有顯示PFOS暴露與神經(jīng)行為毒性效應之間有很強的關(guān)聯(lián)性。因此，現(xiàn)有證據(jù)暫不能證明神經(jīng)行為動物實驗研究表明PFOS存在各種免疫毒性效應，包括免疫抑制、脾臟及胸腺重量降低、胸腺細胞然關(guān)于免疫抑制的動物研究和流行病學研究的總數(shù)相對較少，但在動物和人類研究中觀察到這種效應等人發(fā)現(xiàn)兒童PFOS暴露與發(fā)燒癥狀呈正相關(guān)，Goudarzi等人發(fā)現(xiàn)孕期PFOS暴露與兒童4歲以下總傳染水平與頸動脈內(nèi)膜中層厚度增加有關(guān)。另外兩項前瞻性隊列研究發(fā)現(xiàn)，血清中較高的PFOS水平與妊娠有動物實驗結(jié)果表明大鼠產(chǎn)前暴露PFOS可引起子代心肌線粒體損傷和基因轉(zhuǎn)錄改變，這可能是PFOS對大鼠發(fā)育毒性的重要機制之一。大鼠產(chǎn)前PFOS暴露的實驗觀察到PFOS各劑量組子代大鼠心臟嚙齒動物的實驗研究表明孕期接觸PFOS會導致后代死亡率增加，并通過觀察與死亡率相關(guān)的呼吸系統(tǒng)毒性的發(fā)展特點，推測其機制可能與PFOS干擾肺表面活性物質(zhì)導致肺發(fā)育未成熟有關(guān)。還有一項動物實驗證據(jù)表明，PFOS暴露會導致三碘甲狀腺原氨酸但導致重量減輕或增加的結(jié)論并不一致。除甲狀腺濾泡細胞瘤外，未觀察到PFOS暴露對甲狀腺組織病存在關(guān)聯(lián)或在多大程度上反映了潛在毒性。有流行病學研究提出PFOS與糖尿病和微血管病發(fā)生的風險增加有關(guān)，動物實驗也有證據(jù)支持PFOS增加糖尿病風險這一推論。有研究發(fā)現(xiàn)孕期和哺乳期暴露于PFOS會導致子代大鼠從出生到斷奶這一時期的體重降低，并引發(fā)糖脂代謝紊亂，如空腹血清胰島素和瘦素水平升高等。流行病學研究報道了PFOS與某些癌癥的發(fā)生具有正相關(guān)關(guān)聯(lián)，Butenhoff等人于2012年研究認為與癌癥的關(guān)聯(lián)。考慮到職業(yè)性接觸PFOS比環(huán)境暴露高一到兩個數(shù)量級，這種不一致的結(jié)果很可能來源根據(jù)這些證據(jù)，本文件認為美國環(huán)保署于2005年頒布的致癌風險評估指南中將PFOS歸類為“致癌可能沒有統(tǒng)計學上的顯著性，并未達到可能對人類致癌的證據(jù)量”。綜上所述，流行病學證據(jù)不支持PFOS暴露與人類癌癥之間存在因果關(guān)系的假設(shè)。發(fā)生率和嚴重程度與PFOS存在劑量-反應（效應）關(guān)系，比如多項嚙齒動物亞急性及亞慢性PFOS暴露加具有劑量-反應（效應）關(guān)系，并以PFOS暴露使動物的相對肝臟重量增加作為推導PFOS參考劑量的人群流行病學研究PFOS暴露的肝臟毒性效應主要集中在與肝臟損傷有關(guān)的血清酶的變化上，但研堿性磷酸酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶，暫不能明確將血清酶指標作為PF只有少數(shù)動物和流行病學研究評估了PFOS暴露對腎臟的影響。兩項橫斷面研究檢測了成人血清量-反應（效應）趨勢的一致證據(jù)，但不能排除反向因果的可能性，且研究數(shù)量較少，現(xiàn)有證據(jù)暫不能支持PFOS暴露與腎毒性存在劑量-反應（效應）關(guān)時可能導致腎小管細胞明顯凋亡。通過進一步的研究，他們于2017年的研究中報道了PFOS引起的腎纖呤的代謝，在腎小球系膜細胞中誘導更多的纖維化和炎癥，從而加重糖尿病時的腎損通過以上對PFOS毒性效應研究的總結(jié)和評估，目前已有人類流行病學研究顯示PFOS與血清TC水及動物肝臟重量增加作為敏感效應，建立備選數(shù)據(jù)庫演示推導參考劑量的步驟過程。在PubMed、Embase和WebofScience等數(shù)據(jù)庫中以“((PFOS）or(perfluorooctanesulfonate))and表E.1所示，PFOS暴露與血清TC濃度關(guān)聯(lián)的人群研究共有29篇研究，6篇為隊列研究，余下23篇為有3篇，中質(zhì)量研究有25篇，低質(zhì)量研究1篇。Maisonetetal.2015、Dongetal.2019和Jensenetal.2020為的為低質(zhì)量研究。高質(zhì)量的文獻共4篇，分別為Seacatetal.2003、Kawamotoetal.2011、Butenhoffetal.Cuietal.2009、Dongetal.2009、Dongetal.2011、Wanetal.2012；其余的為低質(zhì)量的文獻共8篇。進一步對這11篇中、高質(zhì)量的動物研究提取數(shù)據(jù)以確定起算點。表E.3所示，最終滿足BMD法數(shù)據(jù)條件的人群Steenland等人2009年的研究是基于美國C8健康項目在大于18歲及未服用降膽固醇藥物的成年人中取了以血清PFOS濃度十分位數(shù)分組與TC的劑量-效應關(guān)系數(shù)據(jù)。每個十分位數(shù)組PFOS濃度的中位數(shù)、TC平均值和95%CI的數(shù)據(jù)是從該文獻結(jié)果中提取。然后假設(shè)每個組的人數(shù)相等，根據(jù)TC平均值和95%調(diào)查普通中年人群中血漿PFOS暴露與TC濃度的關(guān)系。總樣本量為753人。提取以PF1）：無2無3無4）：無5無6無7無8無9無）：無無關(guān)無聯(lián)無無）；無無maxzano-Salgadoet）；無美國，458人，兒童無），無）：）；）：無無無無無無無無無NOAEL/LOAEL14~6/性/組NOAEL：0.15234NOAEL：無LOAEL：無5NOAEL：無LOAEL：5NOAEL/LOAEL6NOAEL：無LOAEL：無7Zhengetal.2009NOAEL：無LOAEL：58NOAEL：0.0089NOAEL：0.0833NOAEL：無LOAEL：5NOAEL：無LOAEL：5NOAEL：0.50NOAEL/LOAELNOAEL：無LOAEL：1NOAEL：1LOAEL：5NOAEL：無LOAEL：1NOAEL：1.85NOAEL：無Butenoffetal.NOAEL：無LOAEL：無NOAEL：無LOAEL：5NOAEL/LOAELNOAEL：無NOAEL：無LOAEL：無NOAEL：無LOAEL：11123456789212345678312344123456789斷面研究。研究目的是調(diào)查血清中氟烷基化合物（PFOS不同濃度組與TC的劑量-效應關(guān)系的數(shù)據(jù)。該研究依據(jù)PFOS的暴露濃度分為了12組。每組中位數(shù)及每組的人數(shù)、TC的平均值和95%CI從該文獻結(jié)果中提取，根據(jù)TC平均值和95%CI計算表E.4所示為最終滿足BMD法數(shù)據(jù)條件的6篇動物研究，其PFOS暴露劑量和肝臟重量或肝臟相對重量數(shù)據(jù)從發(fā)表的文獻中提取。肝臟相對重量指肝臟重量與身體重量的比值的100倍。各研究的數(shù)據(jù)提取Seacat等人2002年的研究，通過胃內(nèi)插管給予成年雄性和雌性食蟹獼猴含有0、0.03、0.15或0.750.75mg/kg·bw/day劑量組2只雄性和4只雌性獼猴禁食后處死，對各器官稱重，獲得肝臟重量和肝臟相對重量數(shù)據(jù)。有大鼠并稱重各器官，獲得肝臟重量和肝臟相對重量數(shù)據(jù)。103442034044205555350555515304050—— ———— ——606 6 6——6——6 6——7055555擇擬合優(yōu)度最佳的BMD模型，該模型得到的BMDL值即為所獲得擬合度優(yōu)的BMD模型結(jié)果。基于Seacat等人2002年研究中雄性食蟹獼猴的數(shù)據(jù)獲得BMDL10為0.12于雄性大鼠數(shù)據(jù)獲得最小的BMDL10為0.21mg/kg·bw/day，基于雌性大鼠數(shù)據(jù)獲得最小的BMDL10為0.27mg/kg·bw/day。以小鼠為動物模型的實驗，基于雄性小鼠數(shù)據(jù)獲得最小的BMDL10為0.05mg/kg·bw/day，基于雌性小鼠沒有獲得提