化學(xué)檢驗(yàn)工（高級）第一章分光光度法分光光度法是根據(jù)物質(zhì)對不同波長的單色光的吸收程度不同而對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的分析方法。分光光度法光是一種電磁波：

1）波動性波長λ、頻率v、光速c、波數(shù)(cm-1)等參數(shù)。

2)粒子性(光量子)E=hv1.1光的性質(zhì)1.物質(zhì)的顏色1.2物質(zhì)對光的選擇性吸收遠(yuǎn)紫外近紫外可見10~200nm200~400nm400~760nm互補(bǔ)色：藍(lán)－黃、綠－紫紅、紅－青物質(zhì)呈現(xiàn)的顏色是其反射光的顏色，也是其吸收光的互補(bǔ)色。（）1.如果把適當(dāng)顏色的兩種光按一定強(qiáng)度比例混合，也可成為白光，這兩種顏色的光稱為互補(bǔ)色光，如綠色光與紫紅色光互補(bǔ)。（）2.當(dāng)一束白光通過KMnO4溶液時，該溶液選擇性地吸收了綠色光，所以KMnO4溶液呈現(xiàn)紫紅色。（）3.透光物質(zhì)不吸收任何光，黑色物質(zhì)吸收所有光。1.2物質(zhì)對光的選擇性吸收

2.吸收曲線1.2物質(zhì)對光的選擇性吸收λmax=525nm34605005405800.51.0波長/nm吸光度AKMnO4溶液(不同濃度)的吸收曲線121.同一物質(zhì)對不同波長的光吸光度不同。2.不同濃度同一物質(zhì)，吸收曲線相似。3.不同物質(zhì)，吸收曲線不同。1.吸收峰的長移和短移長移：吸收峰向長波移動的現(xiàn)象，紅移。短移：吸收峰向短波移動的現(xiàn)象，紫移。增強(qiáng)效應(yīng)：吸收強(qiáng)度增強(qiáng)的現(xiàn)象。減弱效應(yīng)：吸收強(qiáng)度減弱的現(xiàn)象。2.發(fā)色團(tuán)和助色團(tuán)發(fā)色團(tuán)：具有π軌道的不飽和官能團(tuán)。－C=O、－N=N－、－C≡C－助色團(tuán)：本身不“生色”，但能使生色團(tuán)生色效應(yīng)增強(qiáng)的官能團(tuán)。－OH、－NH2、－SH、－Cl

1.3紫外-可見吸收光譜It1.4光吸收基本定律—朗伯比爾定律I0透光率(T%)=It/I0吸光度(A)=

－lgT=

Kbcbc()1.朗伯－比耳定律的應(yīng)用條件：一是必須使用單色光；二是吸收發(fā)生在均勻的介質(zhì)；三是吸收過程中，吸收物質(zhì)相互不發(fā)生作用。()2.有色物質(zhì)的吸光度A是透光度的倒數(shù)。()3.在分光光度分析中，入射光強(qiáng)度與透射光強(qiáng)度之比稱為吸光度，吸光度的倒數(shù)的對數(shù)為透光率。()4.有色溶液的吸光度為0，其透光率也為0。1.4光吸收基本定律—朗伯比爾定律

×××吸光系數(shù)K物理意義：吸光物質(zhì)在單位濃度、單位厚度時的吸光度。1.5吸光系數(shù)1.質(zhì)量吸光系數(shù)

c單位g/L，b單位cm，K單位L·g-1·cm-1A=Kbc2.摩爾吸光系數(shù)

c單位mol/L，b單位cm，ε單位L·mol-1·cm-1A=εbc1.5吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)ε意義：1）吸光物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征常數(shù)。2）不隨濃度c和光程長度b的改變而改變。3）可作為定性鑒定的參數(shù)。4）同一物質(zhì)在不同波長下的ε值不同。1.5吸光系數(shù)（

）2.一遵守朗伯－比耳定律的溶液，吸收池厚度不變，測得透光度為40%，如果該溶液濃度增加1倍，則該溶液的透光度為A.20%B.32%C.80%D.16%（

）1.某有色溶液，當(dāng)用1cm吸收池時，其透光率為T，若改用2cm吸收池，則透光率應(yīng)為

A.2TB.2lgTC.D.T2DD1.吸收定律本身的局限性簡答題：朗伯比耳定律為什么只有在稀溶液中才能成立？由于在高濃度時(c>0.01mol/L)，吸收質(zhì)點(diǎn)之間的平均距離縮小到一定程度，鄰近質(zhì)點(diǎn)彼此的電荷分布都會相互受到影響，此影響能改變它們對特定輻射的吸收能力，相互影響程度取決于c，因此，此現(xiàn)象可導(dǎo)致A與c線性關(guān)系發(fā)生偏差。1.6引起偏離朗伯比耳定律的因素2.化學(xué)因素3.儀器因素(非單色光的影響)4.其他光學(xué)因素1.6引起偏離朗伯比耳定律的因素1.7分光光度計(jì)光源單色器吸收池檢測器信號指示1.紫外-可見分光光度計(jì)主要部件1)光源鎢燈或碘鎢燈340-2500nm氫燈或氘燈160-375nm1.7分光光度計(jì)2)單色器色散元件：棱鏡、光柵。3)吸收池4)檢測器光電管、光電倍增管5)信號檢測系統(tǒng)2.分光光度計(jì)的類型1.7分光光度計(jì)1)單光束分光光度計(jì)3)雙波長分光光度計(jì)2)雙光束分光光度計(jì)光譜比較法1.8定性及定量分析方法1.定性分析2.定量分析1)標(biāo)準(zhǔn)曲線法2)直接比較法A標(biāo)=Kbc標(biāo)A樣=Kbc樣1.8定性及定量分析方法3)差示分光光度法采用已知濃度的成分與待測溶液相同的溶液作參比溶液。高吸光度差示法低吸光度差示法極限精密差示法1.影響顯色反應(yīng)的因素及反應(yīng)條件的選擇1.9顯色反應(yīng)條件和測量條件的選擇(1)顯色劑的選擇1)選擇性好2)靈敏度高3)有色化合物穩(wěn)定、組成恒定4)有色化合物與顯色劑的顏色差別大1.9顯色反應(yīng)條件和測量條件的選擇(2)影響反應(yīng)的因素及反應(yīng)條件1)顯色劑的用量2)溶液的酸度3)顯色時間4)顯色溫度5)溶劑6)溶液中共存離子的干擾1.9顯色反應(yīng)條件和測量條件的選擇2.分光光度法測量誤差及實(shí)驗(yàn)條件的選擇(1)測量誤差及A選擇范圍控制溶液的c及b使A在0.2~0.7范圍內(nèi)。(2)測量波長選擇(3)狹縫寬度(4)空白溶液的選擇溶劑空白、試劑空白、試樣空白、平行操作空白()1.如果顯色劑有色，則要求有色化合物與顯色劑之間的顏色差別要大，以減小試劑空白值，提高測定的靈敏度。通常把兩種有色物質(zhì)最大吸收波長之差稱為“對比度”。一般要求顯色劑與有色化合物的對比度在?λ60nm以上。1.9