醫學微生物小結緒論一.微生物:存在于自然界的一大群體形微小、結構簡單、肉眼直接看不見，必須籍助光學顯微鏡或電子顯微鏡放大數百倍、數千倍，甚至數萬倍才能觀察到的微小生物。1.種類:非細胞型微生物(無典型細胞結構，無產生能量的酶系統，只能在活細胞內生長增殖。核酸類型為DNA或RNA。病毒屬之),原核細胞型微生物(核呈環狀裸DNA團塊結構，無核膜、核仁。細胞器很不完善，只有核糖體。DNA和RNA同時存在。分為古生菌和細菌二大類。細菌的種類繁多，包括細菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌等),真核細胞型微生物(細胞核分化程度高，有核膜和核仁。細胞器完整。真菌屬此類)。2.與人類的關系:絕大多數微生物對人和動、植物是有益的，而且有些是必需的。正常情況下，寄生在人類和動物中微生物是無害的。少數微生物具有致病性，能引起人和動、植物的病害，這些微生物稱為病原微生物。有些微生物，正常情況下不致病，只在特定情況下導致疾病，這類微生物稱為機會致病性微生物。第一章細菌的形態與結構一.細菌：是屬原核生物界的一種單細胞微生物。1.廣義細菌：包括細菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體。狹義細菌：專指其中數量最大、種類最多、具有典型代表性的細菌。2.測量單位：微米。基本形態三種：球菌；桿菌；螺形菌。二.細胞壁：肽聚糖（革蘭陽性菌--聚糖骨架、四肽側鏈、五肽交聯橋；革蘭陰性菌--骨架、四肽側鏈）。1.Ｇ＋菌特有成分：磷壁酸，占菌體干重50％（壁磷壁酸、膜磷壁酸）。Ｇ-菌特有成分：外膜--脂多糖（內毒素組成：脂質A--毒性部分、核心多糖、特異多糖--菌體O抗原）、脂質雙層（類似于細胞膜結構，雙層內鑲嵌著多種蛋白質稱為外膜蛋白）、脂蛋白（位于肽聚糖和脂質雙層之間，穩定外膜）。2.功能：維持細菌形態，承受細胞內高滲透壓，參與菌體內外的物質交換；帶有多種抗原表位，可以誘發機體的免疫應答；細胞壁的某些成分與細菌致病性有關。3.細胞壁缺陷菌（L型菌）：細菌細胞壁的肽聚糖結構受到理化或生物因素的直接破壞或合成被抑制，這種細胞壁受損的細菌在高滲環境下仍可存活者稱為細菌細胞壁缺陷型。形態大小不一，G－。（臨床意義：慢性和反復感染、常規細菌檢查陰性）三.細胞膜：由脂質雙層，蛋白質（無膽固醇）組成。參與物質轉運，呼吸作用，合成作用，細菌分裂。中介體：細胞膜內陷、折疊形成的囊狀膜性結構，多見于Ｇ＋菌。與分裂有關；類似真核細胞線粒體。四.細胞質：無色透明膠狀物，由水、蛋白質、脂類、核酸及少量無機鹽組成。是細菌新陳代謝的場所。1.質粒：細菌染色體外的雙鏈環狀DNA帶有遺傳信息，能自我復制控制細菌某些特定的遺傳性狀。2.胞質顆粒：細菌儲存營養物質。（白喉桿菌的異染顆粒，成分為RNA，多偏磷酸鹽）。3.核蛋白體：蛋白質合成場所；某些抗生素作用部位。4.核質：細菌的遺傳物質稱為核質或擬核，集中于細胞質的某一區域，多在菌體中央，無核膜、核仁。五.特殊結構：1.莢膜：某些細菌細胞壁外包繞一層粘液樣物質；普通染色不易著色，光鏡下可見透明環。多數細菌由多糖組成，少數細菌由多肽（炭疽桿菌）、透明質酸（鏈球菌）組成。形成：營養豐富的培養基（含糖、血清）；有莢膜菌形成粘液型（M）、光滑型（S）菌落；失去莢膜后菌落變為粗糙型（R）。功能：抗吞噬作用（是病原菌的重要毒力因子），抗殺菌物質損傷（如溶酶體、補體），粘附作用（與致病性有關，形成生物膜）。2.鞭毛：伸出菌體外的細長而彎曲的絲狀物。（染色特性：鞭毛染色法）功能：細菌的運動器官，某些細菌鞭毛與致病有關，鞭毛蛋白有抗原性（H抗原）。3.菌毛：許多G－菌和少數G＋菌菌體表面存在著一種直的比鞭毛更細、更短的絲狀物。（與運動無關）普通菌毛：遍布細胞表面，每菌可達數百根，短而直，粘附結構。性菌毛：每菌1-4根，比普通菌毛長而粗，傳遞質粒。4.芽孢：某些細菌在一定環境條件下，胞質脫水濃縮，在菌體內部形成一個圓形或卵圓形的小體，是細菌的休眠形式，稱為芽胞。特點：保存有細菌全部生命活性；是細菌的休眠狀態，具有很強的抗高溫、抗干燥、抗化學消毒劑和抗射線能力；芽胞可發芽，形成新的菌體（一個細菌只形成一個芽胞，一個芽胞發芽也只生成一個菌體，芽胞不是細菌的繁殖方式）；芽胞是滅菌指標。六.檢查方法：革蘭染色法（涂片→固定→結晶紫初染→碘液媒染→95%酒精脫色→復紅復染）。Ｇ＋菌--紫色；Ｇ－菌--紅色。第二章細菌的生理一.細菌的理化性狀：菌體半透明、表面積大、帶電現象、半透性、內部滲透壓高。由水、無機鹽、蛋白質、糖類、脂質和核酸等組成。二.細菌的營養與生長繁殖：1.細菌營養類型：自養菌（以無機物或光合作用為能源）、異養菌（以有機物為原料合成菌體成分，大部分病原菌都是異養菌）。2.細菌的營養物質：水（營養物質必須先溶于水，營養的吸收與代謝均需有水才能進行），氮源（來源于氨基酸、蛋白質等，合成菌體成分），碳源（來源于糖類，提供能量），無機鹽（鉀、鈉、鈣、鎂、磷、硫等），生長因子（生長必需但自身不能合成的物質，如維生素、氨基酸等）。3.細菌攝取營養物質的機制：被動擴散，主動轉運系統（依賴于周漿間隙結合蛋白的轉運系統、化學滲透驅使轉運系統、基團轉移）。4.影響細菌生長的環境因素：營養物質，氫離子濃度(多數病原菌最適pH為7.2-7.6)，溫度（多數病原菌最適37℃），氣體（專性需氧菌--如結核桿菌，專性厭氧菌--如破傷風梭菌，兼性厭氧菌--大多數病原菌，微需氧菌--如空腸彎曲CO2對細菌的生長也很重要，大部分細菌在新陳代謝過程中產生的CO2可滿足需要），滲透壓（一般培養基滲透壓適于大多數細菌）5.細菌的生長繁殖：細菌個體的生長繁殖（二分裂繁殖；繁殖速度一般20～30分鐘一代），細菌群體的生長繁殖（生長曲線）。三.細菌的新陳代謝和能量轉換：1.分解代謝--營養物質分解和轉化為能量的過程。合成代謝--所產生的能量用于細胞組分的合成。2.細菌對糖、蛋白質的分解能力的不同，因而代謝產物各異，利用生物化學方法鑒別不同細菌稱為細菌的生化反應（糖發酵試驗--大腸埃希菌分解乳糖，產酸產氣；傷寒沙門菌不分解乳糖。吲哚試驗--大腸桿菌有色氨酸酶，分解色氨酸產生吲哚。甲基紅試驗--大腸桿菌（+），產氣桿菌（-）。VP試驗--大腸桿菌（-），產氣桿菌（+）。枸櫞酸鹽利用試驗--產氣桿菌以枸櫞酸鹽為碳源、以銨鹽為氮源→分解銨鹽產氨（堿性）→指示劑淡綠變深藍為陽性。尿素酶試驗--變形桿菌有尿素酶，可分解尿素產生氨→培養基變堿→酚紅指示劑顯紅色。硫化氫試驗--變形桿菌、沙門菌分解含硫氨基酸產生硫化氫→遇鉛或鐵離子生成黑色的硫化物。IMViC試驗）。3.合成代謝產物：熱原質--細菌合成的一種注入人體內引起發熱反應的物質。大多數是G-菌的脂多糖。熱原質耐高溫，高壓蒸汽滅菌不能破壞（121℃，20min），2504.毒素和侵襲性酶：內毒素：G－菌的脂多糖。外毒素：G＋菌和少數G－菌產生的蛋白質。侵襲性酶：損傷機體組織，促進細菌侵襲和擴散，如卵磷脂酶（產氣莢膜梭菌）、透明質酸酶（鏈球菌）。色素：金黃色葡萄球菌--金黃色色素（脂溶性），銅綠假單胞菌--綠色色素（水溶性）；可用于細菌鑒別。抗生素：多粘菌素、桿菌肽。細菌素：只能殺傷有親緣關系的細菌，如大腸菌素。無治療意義，有助于細菌分型。維生素：某些腸道菌合成，如B族維生素、VK。四.細菌的人工培養：1.培養基：是由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養物制品。（基礎培養基、增菌培養基、選擇培養基、鑒別培養基、厭氧培養基）2.細菌在培養基中的生長現象：液體培養基中生長現象。混濁--大多數細菌；沉淀--鏈狀生長的細菌；菌膜--專性需氧菌，如結核桿菌、枯草桿菌。3.固體培養基中生長情況分離培養：將標本或培養物劃線接種在固體培養基的表面，因劃線的分散作用，使許多原混雜的細菌在固體培養基表面上散開。菌落：單個細菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細菌集團。4.半固體培養基中生長情況：有鞭毛細菌：擴散生長，周圍渾濁。無鞭毛細菌：沿穿刺線生長，周圍透明。五.細菌的分類：屬（由密切相關的種組成，如金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌屬于葡萄球菌屬），種（細菌的基本分類單位），型（同一種細菌基本性狀相同，而某些方面的特征稍有不同，便可分為不同的型別），株（對不同來源的同一菌種的細菌稱為該菌的不同菌株）。第四章噬菌體一.噬菌體：噬菌體是感染細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒；個體微小，可以通過細菌濾器；無細胞結構，主要由衣殼（蛋白質）和核酸組成；只能在活的微生物細胞內復制增殖，是一種專性胞內寄生的微生物。噬菌體分布極廣。噬菌體有三種基本形態，即蝌蚪形、微球形和細桿形。大多數噬菌體呈蝌蚪形。結構--由頭部和尾部組成；化學組成--蛋白質與核酸；核酸類型--為DNA或RNA，大多數DNA噬菌體的DNA為線狀雙鏈；噬菌體具有抗原性；抵抗力--比一般細菌繁殖體強。二.毒性噬菌體：能在宿主菌內復制增殖，產生許多子代噬菌體，并最終裂解細菌。1.復制周期：毒性噬菌體在宿主菌內的增殖過程（復制周期或溶菌周期）包括吸附、穿入、生物合成、成熟與釋放等四個階段。2.噬斑：在固體培養基上，將適量噬菌體和宿主菌液混合接種培養后，培養基表面可出現透亮的溶菌空斑，每個空斑系由一個噬菌體復制增殖并裂解宿主菌后形成的。（噬斑形成單位：不同噬菌體噬斑的形態與大小不盡相同。通過噬斑計數，可測知一定體積內的噬菌體數量）三.溫和噬菌體或溶原性噬菌體：噬菌體基因組整合于宿主菌染色體中，不產生子代噬菌體，也不引起細菌裂解，但噬菌體DNA隨細菌基因組的復制而復制，并隨細菌的分裂而分配至子代細菌的基因組中。溫和噬菌體有三種存在狀態：游離的具有感染性的噬菌體顆粒；宿主菌細胞質內類似質粒形式的噬菌體核酸；前噬菌體。1.前噬菌體：整合在細菌染色體上的噬菌體基因。2.溶原性細菌：帶有前噬菌體的細菌。3.溶原性：溫和噬菌體具有的這種產生成熟子代噬菌體顆粒和裂解宿主菌的潛在能力。4.溫和噬菌體有溶原性周期和溶菌性周期，而毒性噬菌體只有一個溶菌性周期。5.溶原性轉換：某些前噬菌體可導致細菌基因型和性狀發生改變。（例如白喉棒狀桿菌產生白喉毒素的機理）第五章細菌的遺傳變異一.細菌的遺傳物質：1.細菌染色體：dsDNA，復制快，無組蛋白，無內含子，為連續基因，單倍體（突變后更易表現）。2.質粒：復制能力，轉移能力，整合能力，相容性，丟失或消除。（F質粒--轉移；Vi質粒--毒力；R質粒--耐藥；Col質粒--細菌素）3.轉位因子：插入序列（IS）：兩端重復序列，與插入有關；中心序列有轉位酶基因。轉座子（Tn）：兩端為IS，中心序列有與轉位無關基因。（如毒素基因、耐藥基因等）4.整合子（In）：定位于細菌染色體、質粒或轉座子上。兩端為保守末端，中間為可變區，含一個或多個基因盒。整合子含有3個功能元件--重組位點、整合酶基因、啟動子。通過轉座子或接合性質粒，使多種耐藥基因在細菌中進行水平傳播。5.噬菌體：參與細菌變異（轉導,溶原性轉換）。二.基因的轉移與重組：1.轉移：供菌提供DNA；受菌接受DNA。2.重組：受菌獲得供菌DNA。3.轉化：受菌主動攝取外源性DNA，供菌死亡時釋放或人工方法提取DNA。受供受菌基因型（同源性；親緣關系近，轉化率高），感受態（生理活動過程中攝取，轉化因子的最佳時期），環境因素（Mg2＋、Ca2＋等可促進轉化）影響。4.轉導：噬菌體媒介，將供菌DNA轉給受菌，分普遍性轉導（毒性噬菌體，溫和噬菌體均可發生→包裝錯誤--任何部位細菌DNA片段→轉導性噬菌體--宿主菌DNA，無噬菌體DNA→受菌接受轉導噬菌體(供菌)DNA→受菌獲得供菌性狀）和局限性轉導（發生于溫和性噬菌體。脫落錯誤：前噬菌體及兩邊的細菌DNA。轉導性噬菌體：噬菌體DNA及細菌DNA）。5.接合：通過性菌毛將供菌DNA轉給受體菌，受體菌獲得供體菌性狀。F質粒（致育因子）：接觸--細胞質溝通；轉移--F質粒進入F－菌，1分鐘完成；復制--F－菌轉為F＋菌。Hfr（高頻重組菌株）：F質粒與染色體整合；具有結合和轉移功能；細菌染色體轉移頻率高，F質粒低；受體菌獲得供體菌性狀；用于繪制基因圖。R質粒：耐藥傳遞因子--編碼性菌毛；r決定因子--耐藥。6.溶原性轉換：噬菌體DNA與菌染色體整合，受菌獲得新的性狀。（白喉桿菌）三.基因突變：突變率低；自發突變與誘發突變；突變與選擇；回復突變與抑制突變。1.彷徨試驗：隨機的、非定向的突變是在接觸噬菌體之前就已發生，噬菌體對突變僅起篩選而不是誘導作用。2.突變型細菌及其分離：耐藥性突變型--藥敏試驗；營養缺陷突變型--營養物質篩選；條件致死性突變型--溫度敏感試驗；發酵陰性突變型--乳糖發酵試驗。第七章細菌的感染與免疫一.正常菌群：1.生物拮抗：2.營養作用：3.免疫作用：4.抗衰老作用：二.條件致病菌：產生原因：三.微生態平衡與失調：四.細菌的毒力：1.侵襲力：粘附素：菌毛粘附素；非菌毛粘附素。莢膜：侵襲性物質：侵襲素、侵襲性酶類（血漿凝固酶、透明質酸酶、IgA蛋白酶）細菌生物被膜：2.毒素：外毒素：主要由G＋和少數G－菌合成及分泌蛋白質，毒性強，絕大多數不耐熱，抗原性強，可脫毒為類毒素。分為神經毒素、細胞毒素、腸毒素。內毒素：G－菌細胞壁脂多糖（LPS），由O特異多糖、非特異核心多糖、脂質A組成。毒性弱、耐熱、不能脫毒為類毒素、致發熱反應。五.細菌侵入的數量。六.細菌侵入的途徑。七.非特異性免疫1.屏障結構：皮膚與黏膜、血腦屏障、胎盤屏障。2.吞噬細胞。3.體液因素：補體、溶菌酶、防御素。八.特異性免疫：1.體液免疫。2.細胞免疫：CTL、CD4+Th1。3.黏膜免疫。九.抗感染免疫的特點：1.抗胞外菌感染：吞噬細胞的作用、抗體和補體的調節作用、細胞免疫的作用。2.抗胞內菌感染：吞噬細胞作用、細胞免疫作用、局部黏膜免疫。十.感染的來源：1.外源性感染：病人、帶菌者（傳播途徑）、病畜及帶菌動物。2.內源性感染：體內正常菌群。十一.感染的類型：1.隱性感染。2.顯性感染。3.帶菌狀態--帶菌者。十二.醫院感染：患者住院期間發生的其他感染。1.特點：主要為條件致病性微生物，常具有耐藥性，常發生種類的變遷，適應性強。2.危險因素：易感對象的年齡和基礎疾病，診療技術，侵入性(介入性)檢查與治療，損害免疫系統的因素。3.預防和控制：消毒與滅菌、隔離預防、合理使用抗生素。第八章細菌感染的檢查方法與防治原則一.細菌感染的檢查：1.病原菌檢測：標本采集與運送原則：早期、無菌、盡快送檢。細菌分離培養與鑒定：分離培養、形態學檢查、生化試驗、血清學試驗、藥物敏感試驗。病原菌抗原的檢測：EIA,IF,Westernblotting。檢測病原菌核酸：核酸雜交、PCR、基因芯片。2.血清學診斷：用已知細菌或特異性抗原檢測血清中的抗體。若恢復期或一周后血清抗體效價比早期升高4倍或4倍以上，有診斷意義。二.細菌感染的特異性預防：1.人工主動免疫：疫苗：死疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗、重組載體疫苗（基因工程疫苗）、核酸疫苗。類毒素。2.人工被動免疫：抗毒素、血清丙種球蛋白、其他免疫制劑（IFN-γ，CSF等）。三.細菌感染的治療：1.抗菌藥物的種類。2.抗菌藥物的主要作用機制。第六章細菌耐藥性一.抗菌藥物：對病原菌具有抑制或殺滅作用、用于預防和治療細菌性感染的藥物，包括抗生素和化學合成的藥物。抗生素：微生物在其代謝過程中產生的能殺滅或抑制其它特異病原微生物的產物。抗生素分子量小，低濃度就能發揮其生物活性，有天然和人工半合成兩類。二.分類：1.按抗菌藥物化學結構和性質分類：β-內酰胺類--化學結構中含有β-內酰胺環的抗生素；β-內酰胺抗生素分子側鏈的組成形式多樣，形成了抗菌譜不同、臨床藥理學特性各異的多種不同β-內酰胺抗生素（青霉素類、頭孢菌素類、頭霉素、單環β-內酰胺類、碳青霉素烯類、β-內酰胺酶抑制劑）。大環內酯類：紅霉素、螺旋霉素等。氨基糖苷類：鏈霉素、慶大霉素。四環素類：四環素、強力霉素等。氯霉素類：包括氯霉素、甲砜霉素。化學合成的抗菌藥物：磺胺類--磺胺嘧啶、復方新諾明；喹諾酮類--包括氟哌酸、環丙沙星等。其他：抗結核藥物--利福平、異煙肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺等；多肽類抗生素--多粘菌素類、萬古霉素、桿菌肽、林可霉素和克林霉素等。2.按生物來源分類：細菌產生的抗生素如多粘菌素和桿菌肽。真菌產生的抗生素如青霉素及頭孢菌素，現在多用其半合成產物。放線菌產生的抗生素放線菌是生產抗生素的主要來源。其中鏈霉菌和小單孢菌產生的抗生素最多。常見的抗生素包括鏈霉素、卡那霉素、四環素、紅霉素、兩性霉素B等。三.作用機制：根據對病原菌的作用靶位，將抗生素的作用機制分為四類。1.抑制細菌細胞壁的合成：β-內酰胺類抗生素主要抑制肽聚糖合成所需的轉肽酶反應，阻止肽聚糖鏈的交叉連結，使細菌無法形成堅韌的細胞壁。β-內酰胺抗生素可與細胞膜上的青霉素結合蛋白共價結合。該蛋白質是青霉素作用的主要靶位，當PBPs與青霉素結合后，導致了肽聚糖合成受阻。可以抑制轉肽酶活性，使細菌的細胞壁形成受阻。細菌一旦失去細胞壁的保護作用，在相對低滲環境中會變形、裂解而死亡。抑制胞漿外交叉聯接過程（青霉素、頭孢菌素）。抑制胞漿膜階段粘肽合成（萬古霉素、桿菌肽）。抑制胞漿內粘肽前體的形成(磷霉素、環絲氨酸）。2.損傷細胞膜的功能,增加細胞膜的通透性：兩種機制。某些抗生素分子（如多粘菌素類）呈兩極性，親水端與細胞膜蛋白質部分結合，親脂端與細胞膜內磷脂結合，導致細菌胞膜裂開，胞內成分外漏，細菌死亡。兩性霉素B和制霉菌素能與真菌胞膜上固醇類結合，酮康唑抑制真菌胞膜中固醇類的生物合成，均致細胞膜通透性增加。細菌胞膜缺乏固醇類，故作用于真菌的藥物對細菌無效。3.抑制蛋白質的合成：抗生素可影響細菌蛋白質合成，作用部位及作用時段各不相同。使細菌蛋白質合成受到干擾。氨基糖苷類--蛋白質合成全過程抑制藥；四環素類--30S亞基抑制藥；氯霉素；林可霉素類--50S亞基抑制藥；大環內酯類。4.抑制核酸合成：喹諾酮類--作用于DNA回旋酶，抑制細菌繁殖。利福平（RFP）--與依賴DNA的RNA多聚酶結合，抑制mRNA的轉錄。磺胺類藥物--與對氨基苯甲酸（PABA）的化學結構相似，競爭二氫葉酸合成酶，使二氫葉酸合成減少，影響核酸的合成，抑制細菌繁殖。四.細菌耐藥性：亦稱抗藥性，是指細菌對某抗菌藥物（抗生素或消毒劑）的相對抵抗性。指病原體或腫瘤細胞對反復應用的化學治療藥物敏感性降低或消失的現象。耐藥性的程度：用某藥物對細菌的最小抑菌濃度（MIC）表示。臨床上有效藥物治療劑量在血清中濃度大于最小抑菌濃度稱為敏感，反之稱為耐藥。五.遺傳機制：遺傳學上把細菌耐藥性分為固有耐藥性和獲得耐藥性。1.固有耐藥：細菌對某些抗菌藥物的天然不敏感。固有耐藥性細菌稱為天然耐藥性細菌，其耐藥基因來自親代，由細菌染色體基因決定而代代相傳的耐藥性，存在于其染色體上，具有種屬特異性。如腸道桿菌對青霉素的耐藥，固有耐藥性始終如一并可預測。2.獲得耐藥：獲得耐藥性指細菌DNA的改變導致其獲得耐藥性表型。耐藥性細菌的耐藥基因來源于基因突變或獲得新基因,作用方式為接合、轉導或轉化。可發生于染色體DNA、質粒、轉座子等結構基因,也可發生于某些調節基因。在原先對藥物敏感的細菌群體中出現了對抗菌藥物的耐藥性，這是獲得耐藥性與固有耐藥性的重要區別。獲得耐藥性大多由質粒介導，但亦可由染色體介導的耐藥性，如金葡菌對青霉素的耐藥。影響獲得耐藥性發生率有三個因素：藥物使用的劑量、細菌耐藥的自發突變率和耐藥基因的轉移狀況。染色體突變：所有的細菌群體都會發生自發的隨機突變，頻率很低，其中有些突變賦予細菌耐藥性。可傳遞的耐藥性（突變基因水平轉移方式--接合、轉導、轉化）。耐藥基因轉移能依靠R質粒（細菌中廣泛存耐藥質粒，質粒介導的耐藥性傳播在臨床上占有非常重要的地位。多數細菌的質粒具有傳遞和遺傳交換能力,細菌質粒能在細胞中自我復制,并隨細菌分裂穩定地傳遞給后代，能在不同細菌間轉移），轉座子（又名跳躍基因，是比質粒更小的DNA片段，可在染色體中跳躍，實現菌間基因轉移或交換，使結構基因的產物大量增加，使宿主細胞失去對抗菌藥物的敏感性）和整合子(又名跳躍基因，是比質粒更小的DNA片段，可在染色體中跳躍，實現菌間基因轉移或交換，使結構基因的產物大量增加，使宿主細胞失去對抗菌藥物的敏感性)等可移動的遺傳元件介導下，進行傳播。六.生化機制：1.產生鈍化酶使抗菌藥物失效：鈍化酶是耐藥菌株產生的、具有破壞或滅活抗菌藥物活性的某種酶，它通過水解或修飾作用破壞抗生素的結構使其失去活性，如分解青霉素的酶或改變氨基糖苷類抗生素結構的酶。β-內酰胺酶：特異性水解打開藥物分子結構中的β-內酰胺環，使其完全失去抗菌活性，又稱滅活酶，由染色體和質粒介導。分青霉素型水解青霉素類；頭孢菌素型水解頭孢類和青霉素類。在G－桿菌中有兩種：超廣譜β-內酰胺酶和AmpCβ-內酰胺酶。氨基糖苷類鈍化酶：由質粒介導，其機制是通過羥基磷酸化、氨基乙酰化或羧基腺苷酰化作用，將相應的化學基團結合到藥物分子上，使藥物的分子結構發生改變，失去抗菌作用。氯霉素乙酰轉移酶：由質粒編碼產生該酶，使氯霉素乙酰化而失去抗菌活性。2.藥物作用靶位的結構和數量改變：導致與抗生素結合的有效部位發生變異，影響藥物的結合，對抗生素不再敏感，這種改變使抗生素失去作用位點和親和力降低，但細菌的生理功能卻正常。如青霉素結合蛋白改變導致對β-內酰胺類抗生素親和力極低導致耐藥。3.抗菌藥物的滲透障礙:細菌細胞壁的障礙和/或外膜通透性的改變將嚴重影響抗生素進入細菌內部到達作用靶位發揮抗菌效能，耐藥屏蔽也是耐藥的一種機制。如細菌生物被膜是細菌為適應環境而形成的，可保護細菌逃逸抗菌藥物的殺傷作用。又如細胞膜上微孔缺失時，亞胺培南不能進入胞內而失去抗菌作用。銅綠假單胞菌對抗生素的通透性比其他G－菌差是該菌對多種抗生素固有耐藥的主要原因之一。4.主動外排機制:已發現數十種細菌外膜上有特殊的藥物主動外排系統，藥物主動外排使菌體內抗菌藥濃度下降，難以發揮抗菌作用導致耐藥，主動外排耐藥機制與細菌的多重耐藥性有關。5.其他：改變代謝途徑：細菌可通過改變代謝途徑逃避抗菌藥物作用，如呈休眠狀態的細菌或細菌營養缺陷菌均可出現對多種抗生素耐藥。耐磺胺藥的細菌自身產生PABA或直接利用葉酸轉化為二氫葉酸。產生拮抗劑：細菌也可以通過增加生產代謝頡頏劑來抑制抗生素，從而獲得耐藥性。耐藥金黃色葡萄球菌通過增加對氨基苯甲酸產量，從而耐受磺胺類藥物的作用。七.細菌耐藥性的防治原則：1.合理使用抗菌藥物：制定抗生素用藥常規，教育醫務工作者和病人規范化用藥，供臨床選用抗菌藥物參考。嚴格根據適應證選用藥物。病人用藥前應盡可能進行病原學檢測，并進行藥敏試驗，作為調整用藥的參考。按藥物的藥動學特性，制定合理的用藥方案。用藥療程應盡量縮短，一種抗菌藥物可以控制的感染則不任意采用多種藥物聯合。嚴格掌握抗菌藥物的局部應用、預防應用和聯合用藥，避免濫用。2.嚴格執行消毒隔離制度：對耐藥菌感染的患者應予隔離，防止耐藥菌的交叉感染。醫務人員應定期檢查帶菌情況，以免傳播醫院內感染。3.加強藥政管理：加強細菌耐藥性的檢測，建立細菌耐藥監測網，掌握本地區、本單位重要致病菌和抗菌藥物的耐藥性變遷資料，及時提為臨床供信息。必須規定抗菌藥物憑處方供應。農牧業應盡量避免供臨床應用的抗菌藥物作為動物生長促進劑或用于牲畜的治療，以避免對醫用抗菌藥物產生耐藥性。細菌耐藥性一旦產生后，在停用有關藥物一段時期后敏感性有可能逐步恢復。4.研發新抗菌藥物：根據細菌耐藥性的機制及其與抗菌藥物結構的關系，改造化學結構，使其具有耐酶特性或易于透入菌體。尋找和研制具有抗菌活性，尤其對耐藥菌有活性的新抗菌藥物；同時針對耐藥菌產生的鈍化酶，尋找有效的酶抑制劑。5.破壞耐藥基因：隨著細菌基因組研究的進展，學者們發現通過破壞耐藥基因可使細菌恢復對抗菌藥物的敏感性。耐藥性質粒在細菌耐藥性的產生和傳播方面占有重要的地位，可篩選用于人體的質粒消除劑或防止耐藥性轉移的藥物。第三章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全一.術語：1.滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。2.消毒：殺死物體上或環境中的病原微生物的方法。3.防腐：防止或抑制皮膚表面細菌生長繁殖的方法。4.清潔：是指通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數量的過程。5.無菌和無菌操作：無菌是無活菌的意思，多是滅菌的結果。防止細菌進入人體或其它物品的操作技術，稱為無菌操作。二.物理消毒滅菌法1.熱力滅菌法：干熱滅菌法（焚燒；燒灼；干烤；紅外線）；濕熱滅菌法（巴氏消毒法、煮沸法、流動蒸汽消毒法、間歇蒸汽滅菌法、高壓蒸汽滅菌法)。2.輻射殺菌法：紫外線、電離輻射、微波。3.濾過除菌法：濾菌器（液體除菌）、空氣除菌采用生物潔凈技術。4.干燥與低溫抑菌法。三.化學消毒法：1.高效消毒劑：含氯消毒劑、過氧化物消毒劑、醛類消毒劑、環氧乙烷。2.中效消毒劑：含碘消毒劑、醇類消毒劑。3.低效消毒劑：季銨鹽類、氯已定、高錳酸鉀。四.醫療器械物品的消毒滅菌：1.高危器械物品：用時需進入無菌組織的物品。所有這些物品都應該滅菌。2.中危器械物品：用時不進入無菌組織；但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。3.低危器械物品：只接觸未損傷皮膚但不進入無菌組織和不接觸黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。4.快速周轉的醫療器械。五.室內空氣消毒滅菌1.物理消毒法：①紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用；②濾過除菌：空氣通過孔徑小于0.2μm的高效過濾裝置以除去細菌和帶菌塵埃。2化學消毒法：包括化學消毒劑噴霧和熏蒸：①過氧乙酸噴霧、熏蒸；②過氧化氫噴霧；③二氧化氯溶液噴灑；④中草藥點燃煙熏。六.手和皮膚的消毒：用肥皂和流動水經常并正確洗手，病原微生物污染時應用消毒劑消毒。七.生物安全是生物技術安全的簡稱。狹義地指現代生物技術的研究、開發、應用及轉基因生物可能對生物多樣性、生態環境和人類健康產生潛在的危害。廣義地指與生物有關的各種因素對社會、經濟、人類健康及生態環境所產生的危害或潛在風險。病原微生物所致的安全問題，如病原微生物實驗室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發流行等，也是人類社會所面臨的最現實的生物安全問題。病原微生物實驗室生物安全的核心是防擴散和防感染。關于病原微生物實驗室生物安全，我國法令包括對病原微生物的分類管理，對實驗室的分級管理，實驗室感染的控制以及監督和法律責任等。

八.微生物分類：根據傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類。其中第一類、第二類統稱為高致病性病原微生物。1.第一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發現或者已經宣布消滅的微生物。2.第二類是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。3.第三類是指能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。4.第四類是指在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。九.實驗室分級：一、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物實驗活動。從事高致病性病原微生物相關實驗活動應當有２名以上的工作人員共同進行。在同一個實驗室的同一個獨立安全區域內，只能同時從事一種高致病性病原微生物的相關實驗活動。應有健全安全保衛制度。實驗室工作人員應掌握實驗室技術規范、操作規程、生物安全防護知識和實際操作技能。應有符合要求的防護用品，應建立健康檔案；進行預防接種。實驗室應有科學、嚴格的管理制度，定期對實驗室設施設備、材料等進行檢查、維護和更新，應對廢水、廢氣以及其他廢物進行合理處置，防止環境污染。十.實驗室感染的控制以及監督和法律責任：實驗室感染控制工作包括定期檢查實驗室的生物安全防護、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實施情況。實驗室發生高致病性病原微生物泄漏時，預防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實驗室或可能造成病原微生物擴散的場所；②開展流行病學調查；③對病人進行隔離治療，對相關人員進行醫學檢查；④對密切接觸者進行醫學觀察；⑤進行現場消毒；⑥對染疫或者疑似染疫的動物采取隔離、撲殺等措施。監督的主要內容是監督病原微生物實驗室執行國家有關法律、行政法規、國家標準和要求的記錄、檔案及報告的情況。法律責任的核心是承擔造成傳染病傳播、流行或者其他嚴重后果的法律責任。第九章球菌一.球菌（coccus）：個體形狀呈球形或橢圓形的一大類細菌。1.病原性球菌：球菌中對人類有致病性的球菌。包括四個屬的一些球菌：葡萄球菌屬：G＋球菌；鏈球菌屬：G＋球菌；腸球菌屬：G＋球菌；奈瑟菌屬：G－球菌（腦膜炎、淋病奈瑟菌）。2.化膿性球菌：引起機體化膿性炎癥的球菌。二.金黃色葡萄球菌：球形，無鞭毛，無芽胞；葡萄串狀，革蘭染色陽性（G＋）。葡萄球菌中金黃色葡萄球菌毒力最強，通過在宿主體內增殖、擴散和產生有害的胞外物質（酶和毒素）引起宿主疾病。葡萄球菌的毒力因子（致病物質）包括：①酶；②毒素；③細菌的一些表面結構蛋白。1.培養特性：易培養--普通平板、血平板；產色素--金黃色、白色、檸檬色。有些菌溶血，產生溶血環--致病性葡萄球菌菌落呈金黃色，于血瓊脂平板上生長后，在菌落周圍還可見完全透明溶血環（β溶血）。2.生化反應：多數菌分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖。產酸不產氣。致病性球菌分解甘露醇。觸酶陽性（與鏈球菌區分標準）。3.抗原構造：葡萄球A蛋白（SPA）--細胞壁表面蛋白質，完全抗原。莢膜多糖--有利于細菌粘附。多糖抗原--存在于細胞壁，有群特異性。SPA功能：體內作用--SPA與IgG結合后所形成的復合物具有抗吞噬、促細胞分裂、引起超敏反應、損傷血小板等多種生物活性。體外作用--用于多種微生物抗原檢測。4.分類：據色素、生化反應：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。根據有無凝固酶分型：凝固酶陰性菌和凝固酶陽性菌兩大型。繼而依據噬菌體分為4個噬菌體群和23個噬菌體型。III群引起葡萄球菌腸毒素食物中毒。根據核酸分析的遺傳學分型：DNA脈沖電泳分型、PCR分型等方法。依16SrRNA不同，葡萄球菌屬分48個種和亞種。5.抵抗力：對外界因素的抵抗力強于其他無芽胞菌；對堿性染料（龍膽紫）敏感；易產生耐藥性，特別對青霉素；耐甲氧西林金黃色葡萄球菌。6.致病物質：酶：凝固酶--血漿纖維蛋白原轉為纖維蛋白，使血漿凝固，抵抗吞噬細胞的吞噬；保護病菌不受血清中殺菌物質的破壞；使感染局限化和形成血栓。耐熱核酸酶--水解DNA。纖維蛋白溶酶--水解纖維素（纖維蛋白溶酶、葡激酶）。透明質酸酶--降解結締組織（擴散因子）。脂酶--分解脂肪。觸酶--分解H2O2。毒素：葡萄球菌溶素--α溶素，損傷細胞膜的毒素（細胞毒素）。毒性休克綜合征毒素-1--引起機體發熱，增加對內毒素的敏感性；引起多器官系統功能紊亂或毒性休克綜合征（TSS）。殺白細胞素--細胞毒素，攻擊中性粒細胞和巨噬細胞；抵抗宿主吞噬細胞，增強細菌侵襲力。腸毒素--約1/3臨床分離金黃色葡萄球菌可產生；引起急性胃腸炎（即食物中毒）；耐熱，抗胃腸液中蛋白酶；作用機制--刺激嘔吐中樞導致以嘔吐為主要-癥狀的食物中毒；還具有超抗原作用。表皮剝脫毒素--引起金黃色燙傷樣皮膚綜合征。表面結構或蛋白：如粘附素、莢膜、胞壁肽聚糖和SPA等。7.所致疾病：侵襲性--局部感染、全身感染；毒素性--食物中毒、TSS、SSSS。8.免疫性：人類有一定的天然免疫力，只有當皮膚黏膜受傷后，宿主免疫力降低時，才易引起葡萄球菌感染。感染后能獲得一定的免疫力，但不強，難以防止再次感染。9.微生物學檢查法：標本：膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等。直接涂片鏡檢：革蘭陽性葡萄球菌。分離培養：生長現象--色素，溶血；生化反應--血漿凝固酶、發酵甘露醇、耐熱核酸酶。毒素檢查。動物實驗：對食物中毒患者。10.防治原則：抗菌素藥敏試驗、自身菌苗療法，注意消毒隔離、防止醫源性感染、注意個人衛生、防止耐藥性產生。第十章腸桿菌科一.腸桿菌科：是一大群生物學性狀相似的革蘭陰性桿菌，常寄居在人和動物的腸道內，亦存在于土壤、水和腐物中。目前已有44個屬，170多個種。但該科引起人類95％以上感染的菌種卻不到20個。致病菌：有少數細菌總是引起人類疾病，如傷寒沙門菌、志賀菌、鼠疫耶爾森菌等；機會致病菌：一部分細菌屬于正常菌群，但當宿主免疫力降低或細菌移位至腸道以外部位時，即可引起機會性感染，如大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌等；由正常菌群轉變而來的致病菌：如引起胃腸炎的大腸埃希菌，即是由于獲得位于質粒、噬菌體或毒力島上的毒力因子基因后而成為致病菌。1.形態與結構：中等大小G－桿菌。大多有菌毛，多數有周鞭毛，少數有莢膜，不產生芽胞。2.培養：兼性厭氧或需氧。3.生化反應：乳糖發酵試驗可初步鑒別志賀菌、沙門菌等致病菌和其他大部分非致病腸道桿菌，前二者不發酵乳糖。4.抗原結構：主要有菌體O抗原、鞭毛H抗原和莢膜抗原。5.抵抗力：對理化因素抵抗力不強。6.變異：腸桿菌科細菌易出現變異菌株，其中最常見的是耐藥性變異。二.埃希菌屬：有6個種，只有大腸埃希菌是臨床最常見、最重要的一個菌種。大腸埃希菌是腸道中重要的正常菌群；在宿主免疫力下降或細菌侵入腸外組織器官后即可成為機會致病菌，引起腸道外感染；一些血清型的大腸埃希菌具有致病性，能導致人類胃腸炎；在環境衛生和食品衛生學中常被用作糞便污染的衛生學檢測指標。1.生物學性狀：G－桿菌。多數菌株有周身鞭毛，有菌毛，無芽胞。兼性厭氧。能發酵葡萄糖等多種糖類，產酸并產氣。絕大多數菌株發酵乳糖。IMViC試驗結果為“＋＋－－”。有O、H和K三種抗原。能產生大腸菌素。2.致病物質：黏附素：包括定植因子抗原、集聚黏附菌毛、束形成菌毛、緊密粘附素、P菌毛、I型菌毛和侵襲質粒抗原蛋白等。外毒素：志賀毒素、耐熱腸毒素、不耐熱腸毒素；還有內毒素、莢膜、載鐵蛋白和III型分泌系統等。3.所致疾病腸道外感染：腸道外感染以化膿性感染和泌尿道感染最為常見。胃腸炎：某些血清型可引起人類胃腸炎，與食入污染的食品和飲水有關，為外源性感染。4.微生物學檢查法：標本：腸外感染采取中段尿、血液、膿液、腦脊液等；胃腸炎則取糞便。分離培養與鑒定：腸道外感染、腸道內感染。衛生細菌學檢查。5.防治原則：疫苗接種預防已在畜牧業領域中開展了廣泛研究。預防人類ETEC感染、O157感染的疫苗正在研究中。抗生素治療應在藥物敏感試驗的指導下進行。尿道插管和膀胱鏡檢查應嚴格無菌操作。對腹瀉病人應進行隔離治療。污染的水和食品是ETEC最重要的傳染媒介，EHEC則常由污染的肉類和未消毒的牛奶引起，充分的烹飪可減少感染的危險。三.志賀菌屬：分解葡萄糖，產酸不產氣。除宋內志賀菌個別菌株外，均不發酵乳糖。動力陰性。抵抗力比其它腸道桿菌弱。志賀菌屬細菌有O和K兩種抗原。O抗原是分類的依據，藉以將志賀菌屬分為4群和40余血清型--A群即痢疾志賀菌、B群即福氏志賀菌、C群即鮑氏志賀菌、D群即宋內志賀菌。1.生物學性狀：G－短小桿菌。無芽胞，無鞭毛，無莢膜，有菌毛。2.致病物質：侵襲力和內毒素，有的菌株能產生外毒素。3.所致疾病：細菌性痢疾。我國主要為B群和D群。傳染源--病人和帶菌者；傳播途徑--糞-口途徑。感染幾乎只局限于腸道，一般不侵入血液。典型的急性細菌性痢疾：潛伏期1-3天，突然發病，常有發熱、腹痛、膿血黏液便，伴有里急后重。急性中毒性痢疾多見于小兒。急性細菌性痢疾有10％～20％的病人可轉為慢性。4.免疫性：抗感染免疫主要是消化道粘膜表面的分泌型IgA。病后免疫期短暫，也不鞏固。5.微生物學檢查法：標本：取糞便膿血或黏液部分，避免與尿混合；在使用抗生素前采樣；標本應新鮮；若不能及時送檢，宜將標本保存于30％甘油緩沖鹽水或專門送檢的培養基內。中毒性痢疾者可取肛拭。分離培養與鑒定。毒力試驗。快速診斷法：免疫染色法；免疫熒光菌球法；協同凝集試驗；膠乳凝集試驗；分子生物學方法。6.防治原則：非特異性預防--水、食物和牛奶的衛生學監測，垃圾處理和滅蠅；隔離病人和消毒排泄物；發現亞臨床病例和帶菌者；抗生素治療感染個體。此菌很易出現多重耐藥菌株。免疫防御現致力于活疫苗的研究。主要分為3類，即減毒突變株、用不同載體菌構建的雜交株以及營養缺陷減毒株。例如鏈霉素依賴株。四.沙門菌屬：分兩個種，即腸道沙門菌和邦戈沙門菌，血清型現已達2500多種。沙門菌血清型的正確命名方法--腸道沙門菌腸道亞種傷寒血清型,并可縮寫為傷寒血清型沙門菌。沙門菌屬中少數血清型是人的病原菌，引起腸熱癥。絕大多數血清型宿主范圍廣泛，家畜、家禽、野生脊椎動物及冷血動物、軟體動物、環形動物、節肢動物（包括蒼蠅）等均可帶菌，其中部分沙門菌是人畜共患病的病原菌，可引起人類食物中毒或敗血癥。1.生物學性狀：G－桿菌，有菌毛。除個別例外，都有周身鞭毛。一般無莢膜。均無芽孢。兼性厭氧，不發酵乳糖。對葡萄糖、除傷寒沙門菌產酸不產氣外，其它沙門菌均產酸產氣。主要有O和H兩種抗原，少數菌中尚有Vi抗原。沙門菌對理化因素的抵抗力較差。2.致病物質侵襲力：有毒株能侵襲小腸粘膜。通過種特異性菌毛先與M細胞結合，接著SPI-I分泌系統向M細胞中輸入沙門菌分泌侵襲蛋白，引發宿主細胞內肌動纖維重排，誘導細胞膜凹陷，導致細菌內吞。沙門菌在吞噬小泡內生長繁殖，使宿主細胞死亡，細菌擴散并進入毗鄰細胞淋巴組織。內毒素。腸毒素：個別沙門菌如鼠傷寒沙門菌可產生腸毒素。3.所致疾病：傳染源為病人和帶菌者，其次為帶菌動物及其動物產品。人類沙門菌感染有4種類型：腸熱癥：包括傷寒沙門菌引起的傷寒，甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌（原稱乙型副傷寒沙門菌）和希氏沙門菌引起的副傷寒。胃腸炎（食物中毒）：常見食物主要為肉類食品、蛋類、奶和奶制品，系動物生前感染或加工處理過程污染所致。多見于老人、嬰兒和體弱者。敗血癥：多見于兒童和免疫力低下成人。經口感染后，病菌即侵入血循環。敗血癥癥狀嚴重，但腸道癥狀較少見。無癥狀帶菌者：約1％～5％傷寒或副傷寒患者，在癥狀消失后一年仍可在其糞便中檢出沙門菌，轉變為無癥狀（健康）帶菌者。4.免疫性：特異性細胞免疫是主要防御機制。胃腸炎的恢復與腸道局部生成sIgA有關。5.微生物學檢查法：標本：第1周取外周血，第2周起取糞便，第3周起還可取尿液，從第1周至第3周均可取骨髓液；胃腸炎取糞便和可疑食物。敗血癥取血液。膽道帶菌者可取十二指腸引流液。分離培養和鑒定。血清學診斷：用于腸熱癥的血清學試驗有肥達試驗（用已知傷寒沙門菌菌體O抗原和H鞭毛抗原、副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌和希氏沙門菌H鞭毛抗原的診斷菌液與受檢血清做試管或微孔板定量凝集試驗，測定受檢血清中有無相應抗體及其效價的試驗）、間接血凝法、EIA法等，其中肥達試驗在我國仍較普及。傷寒帶菌者的檢出：一般先用血清學方法檢測可疑者Vi抗體進行篩選，若效價≥1：10時，再反復取糞便等標本進行分離培養，以確定是否為傷寒帶菌者。6.預防原則：做好水源和食品的衛生管理，防止被沙門菌感染的人和動物的糞便污染。感染動物的肉類、蛋等制品要徹底烹飪。發現、確診和治療帶菌者。帶菌期間不能從事飲食行業的工作。目前國際上公認的新一代疫苗是傷寒Vi莢膜多糖疫苗，我國也以正式批準使用。腸熱癥的治療目前使用的有效藥物主要是環丙氟哌酸。第十四章分枝桿菌屬一.分枝桿菌屬：一類細長或稍彎的桿菌，因有分枝生長的趨勢而得名。結核桿菌引起結核病。對人類致病的有人型結核桿菌和牛型結核桿菌。1.形態與染色：結核桿菌細長略彎曲，端極鈍園，大小約1～4×0.4μm，呈單個或分枝狀排列，無莢膜、無鞭毛、無芽胞。在陳舊的病灶和培養物中，形態常不典型，可呈顆粒狀、串珠狀、短棒狀、長絲形等。抗酸染色顯示痰標本中染為紅色的特異性抗酸細菌（結核桿菌）。其他非抗酸性細菌及細胞漿質等呈藍色。結核桿菌的抗酸性取決于胞壁內所含分枝菌酸殘基和胞壁固有層的完整性。2.培養特性與生化反應：專性需氧菌營養要求高：在含有蛋黃、馬鈴薯、甘油和天門冬酰胺等的固體培養基上才能生長。最適pH為6.5~6.8，最適溫度為37℃生長緩慢：18~24h繁殖一代，接種后3～4周才出現肉眼可見的菌落。菌落為干燥、堅硬、表面呈顆粒狀、乳酪色或黃色，形似菜花樣。在液體培養基中呈粗糙皺紋狀菌膜生長。不發酵糖類：與牛分枝桿菌的區別在于前者可合成煙酸和還原硝酸鹽，而后者則不能。3.主要菌體成分及其作用：結核分枝桿菌無內毒素，也不產生外毒素和侵襲性酶類，其致病作用主要靠菌體成分，特別是胞壁中所含的大量脂質。脂質含量與結核分枝桿菌的毒力呈平行關系，含量愈高毒力愈強。脂質：占菌體干重20～40%，占胞壁干重60%，主要是磷脂、脂肪酸和蠟質，大多與蛋白質或多糖結合成復合物。磷脂--能刺激單核細胞增生，并可抑制蛋白酶的分解作用，使病灶組織溶解不完全，形成結核結節和干酪樣壞死。脂肪酸--在脂質中比重較大，與分枝桿菌抗酸性有關；其中6,6-雙分枝菌酸海藻糖具有破壞細胞線粒體膜，毒害微粒體酶類，抑制中性粒細胞游走和吞噬，引起慢性肉芽腫的作用；具有該物質的結核桿菌毒株在液體培養基中能緊密黏成索狀，故稱索狀因子。蠟質D--胞壁中的主要成分，是一種肽糖脂與分枝菌酸復合物，能引起遲發型超敏反應，并具有佐劑作用。硫酸腦苷脂和硫酸多酰基化海藻糖--存在于結核分枝桿菌毒株細胞壁中，能抑制吞噬細胞中的吞噬體與溶酶體融合，使結核分枝桿菌在細胞內存活；這類糖脂能結合中性紅染料產生中性紅反應，借此可鑒定結核分枝桿菌有無毒力。蛋白質：結核分枝桿菌菌體內含有多種蛋白質，其中重要的是結核菌素。結核菌素與蠟質D結合，能引起較強的遲發型超敏反應。多糖：多糖常與脂質結合存在于胞壁中，主要有半乳糖、甘露醇、阿拉伯糖等。多糖可使中性粒細胞增多，引起局部病灶細胞浸潤。而多糖抗原Ⅱ是阿拉伯甘露聚糖，是分枝桿菌發生凝聚反應的特異性表面抗原。

核酸：核糖體核糖核酸是本菌的免疫原之一，能刺激機體產生特異性細胞免疫。莢膜：主要成分為多糖，部分脂質和蛋白質。莢膜對結核分枝桿菌有一定保護作用：①與吞噬細胞表面補體受體3（CR3）結合，有助于結核桿菌在宿主細胞上的粘附與入侵；②莢膜中有多種酶可降解宿主組織中的大分子物質，給入侵細菌提供繁殖所需的營養；③防止宿主的有害物質進入結核分枝桿菌，甚至如小分子NaOH也不易進入。4.抵抗力：較強。干痰中可存活6～8個月；在3％HCl、6％H2SO4或4％NaOH溶液中能耐受30min，因而常以酸堿處理嚴重污染的樣本，殺死雜菌和消化粘稠物質，以提高檢出率。對濕熱、紫外線、乙醇的抵抗力弱。在液體中加熱62～63℃15min或煮沸、直射日光下2～3h、75%乙醇內數分鐘即死亡。5.抵抗力：對鏈霉素、利福平、異煙肼等抗結核藥物較易產生耐藥性，耐藥性菌株常伴隨活力和毒力減弱。菌落、毒力等也易發生變異。1908年Calmette和Guérin將有毒的牛分枝桿菌培養于含膽汁、甘油、馬鈴薯的培養基中，經230次傳代，歷時13年，使其毒力發生變異，成為對人無致病性，而仍保持良好免疫原性的疫苗株，稱為卡介苗。6.致病性：結核分枝桿菌無內毒素，也不產生外毒素和侵襲性酶類，其致病作用可能與細菌在組織細胞內頑強增殖引起炎癥反應，以及誘導機體產生遲發型超敏反應性損傷有關。結核分枝桿菌可通過呼吸道、消化道和破損的皮膚黏膜進入機體，侵犯多種組織器官，引起相應器官的結核病，以肺結核最為常見。7.肺部感染：原發感染：多見于兒童。隨飛沫和塵埃通過呼吸道進入肺泡。細胞內寄生。原發灶內結核桿菌可經淋巴管擴散到肺門淋巴結。隨著機體免疫力的建立，原發灶大多可纖維化和鈣化而自愈。極少數免疫力低下者經淋巴、血流擴散至全身，導致全身粟粒性結核或結核性腦膜炎。繼發感染：多見于成年人。大多為內源性感染，極少由外源性感染所致。由于機體已形成對結核分枝桿菌的特異性細胞免疫，對再次侵入的結核分枝桿菌有較強的局限能力，故繼發感染的特點是病灶局限，一般不累及鄰近的淋巴結，主要表現為慢性肉芽腫性炎癥，形成結核結節，發生纖維化或干酪樣壞死。病變常發生在肺尖部位。8.肺外感染：部分肺結核患者體內的結核分枝桿菌可經血液、淋巴液擴散侵入肺外組織器官，引起相應的臟器結核，如腦、腎、骨、關節、生殖器官等結核。艾滋病等免疫力極度低下者，嚴重時可造成全身播散性結核。痰菌被咽入消化道可引起腸結核、結核性腹膜炎等。通過破損皮膚感染結核分枝桿菌可導致皮膚結核。近年有許多報道，肺外結核標本中結核分枝桿菌L型的檢出率比較高，應引起足夠重視。9.免疫性：抗結核免疫力的持久性依賴于結核分枝桿菌在機體內的存活，一旦體內結核分枝桿菌消亡，抗結核免疫力也隨之消失，這種免疫稱為有菌免疫或傳染性免疫。抗結核免疫主要是細胞免疫，包括致敏T淋巴細胞和Mφ。致敏T淋巴細胞可殺死有結核桿菌的靶細胞，同時釋放多種淋巴因子（如TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6等），吸引NK、T、Mφ等聚集炎癥部位，還能增強這類細胞的直接或間接殺菌活性。激活的Mφ極大地增強對結核分枝桿菌的吞噬消化、抑制繁殖、阻止擴散甚至徹底消滅的能力，充分發揮細胞免疫的作用。10.超敏反應：機體獲得對結核桿菌免疫力的同時，結核分枝桿菌的蛋白質與蠟質D共同刺激T淋巴細胞，形成遲發型超敏反應狀態。體內致敏的T淋巴細胞再次遇到結核分枝桿菌時，即釋放出淋巴因子，引起強烈的遲發型超敏反應，形成以單核細胞浸潤為主的炎癥反應，容易發生干酷樣壞死，甚至液化形成空洞。兒童結核病大多為初次感染，機體尚未建立免疫和超敏反應，可發生急性全身粟粒性結核和結核性腦膜炎。成年人結核大多為復發或再次感染，此時機體已建立了抗結核分枝桿菌的免疫和超敏反應性，病癥常為慢性局限性結核，不引起全身粟粒性結核和結核性腦膜炎，但局部病癥較重，形成結核結節，發生纖維化或干酪樣壞死。11.結核菌素實驗：將一定量結核菌素注入皮內，如受試者曾感染結核桿菌，則在注射部位出現遲發型超敏反應炎癥，判為陽性，未感染者則為陰性。此法可用于檢測可疑患者曾否感染過結核菌、接種卡介苗后是否陽轉以及檢測機體細胞免疫功能。12.微生物學檢查法：根據結核分枝桿菌感染的類型，應采取病灶部位的適當樣本。如肺結核取咳痰（最好取第一次晨痰，挑帶血或膿痰）；腎或膀胱結核以無菌導尿或取中段尿液；腸結核取糞便；結核性腦膜炎取腦脊液；膿胸、肋膜炎、腹膜炎或骨髓結核等則穿刺取膿汁。13.預防：接種卡介苗能極大降低結核病發病率。嬰兒出生后即接種，較大兒童須做結核菌素試驗，陰性者接種。接種后6～8周結核菌素試驗即可陽性，陽轉率可達96～99%，表示接種者已有免疫力。陽性反應可維持約5年。14.治療：早期、聯合、足量、規范使用抗結核藥物。常用藥物有異煙肼、利福平、鏈霉素、對氨水楊酸、乙胺丁醇等。二.麻風分枝桿菌：麻風分枝桿菌可引起麻風病。該病是一種慢性傳染病，世界各地均有流行。病菌可侵犯皮膚、黏膜和外周神經組織，晚期可侵入深部組織和臟器，形成肉芽腫。1.生物學性狀：形態上酷似結核分枝桿菌，亦表現明顯的抗酸染色特性，常在患者破潰皮膚滲出液的細胞中發現，呈束狀排列。該菌是典型的胞內寄生菌，某些類型患者的滲出物標本中可見大量麻風分枝桿菌存在的感染細胞，這種細胞的胞質呈泡沫狀，稱為泡沫細胞或麻風細胞，這是與結核分枝桿菌感染的一個主要區別。麻風分枝桿菌是至今唯一不能人工培養的細菌。以麻風分枝桿菌感染小鼠足墊或接種至犰狳可引起動物的進行性麻風感染，是研究麻風病的主要動物模型。2.致病性與免疫性：自然狀態下麻風分枝桿菌只侵害人，細菌由患者鼻分泌物及其他分泌物、精液或陰道分泌液中排出，故主要通過呼吸道、破損皮膚和密切接觸等方式傳播，家庭內傳播多見。流行地區人群多為隱性感染，幼年最敏感。潛伏期長，平均2～5年，長者可達數十年。發病緩慢，病程長，遷延不愈。根據臨床表現、免疫病理變化、細菌檢查等可將大部分患者分為瘤型麻風和結核樣型麻風；介于兩型之間的少數患者又可再分為兩類：界限類與未定類，兩類可向兩型轉化。3.微生物學檢查法：涂片染色鏡檢：患者鼻黏膜或皮膚病變處取刮取物做涂片，抗酸染色法檢查有無排列成束的抗酸桿菌存在。一般瘤型和界限類患者標本在細胞內找到抗酸染色陽性桿菌有診斷意義，而結核樣型患者標本中則很難找到抗酸陽性桿菌。也可以用金胺染色熒光顯微鏡檢查以提高陽性率。病理活檢也是較好的診斷方法。麻風菌素試驗：應用原理和結核菌素試驗相同。麻風菌素常由麻風結節病變組織制備。此試驗在診斷上意義不大。4.預防：主要依靠早期發現、早期隔離及早期治療患者，特別對密切接觸者要做定期檢查。目前尚無特異性的疫苗。5.治療：麻風藥物主要是砜類，如氨苯砜、苯丙砜、醋氨苯砜等。利福平也有較強的抗麻風分枝桿菌作用。為防止耐藥性產生應采用多種藥聯合治療。第十六章動物源性細菌一.動物源性細菌：以動物為傳染源，引起人獸共患病的病原菌稱為動物源性細菌。人類感染的病原菌來自于動物宿主，通過直接接觸動物或其污染物，或經媒介動物叮咬等途徑而傳播。二.布魯菌屬：1.生物學性狀：G－小球桿菌或短桿菌。需氧菌，營養要求較高。為M抗原和A抗原，均為LPS，在不同的布魯斯菌中含量不同。抵抗力較強。2.致病物質：內毒素、莢膜與侵襲性酶。3.感染途徑：人主要通過接觸病畜及其分泌物或接觸被污染的畜產品經皮膚、黏膜、呼吸道、消化道等途徑感染。4.所致疾病：人類--波浪熱，1-6周的潛伏期，胞內寄生菌，反復形成菌血癥及內毒素血癥，發熱呈波浪型，慢性病變--肝脾腫大。家畜--母畜流產。5.免疫性：以細胞免疫為主。有菌免疫→無菌免疫。Ⅳ型超敏反應（免疫保護及病理損害）。6.微生物學檢查法：標本--血液、骨髓、尿、乳汁及關節滲出液等；分離培養與鑒定--雙相肝浸液培養基；血清學檢測--玻片凝集試驗和補體結合試驗。布魯斯菌素皮膚試驗用來診斷慢性布魯斯菌病或是否感染過布魯斯菌。7.防治原則：控制和消滅家畜布魯菌病；切斷傳播途徑；免疫接--減毒活疫苗；抗生素治療--急性期和亞急性期患者，利福平與強力霉素聯合；神經系統受累者，四環素合用鏈霉素；慢性期患者，除上述病原治療外尚需進行脫敏和對癥治療。三.鼠疫耶爾森菌：1.生物學性狀：G－短桿菌、兩端濃染、有莢膜，可呈多形性，抵抗力較弱。2.培養特性：渾濁→沉淀→菌膜（呈“鐘乳石”狀下沉），27～30℃3.抗原結構：F1抗原、V/W抗原、外膜抗原、T抗原。4.致病性：莢膜、鼠毒素、內毒素等。5.途徑：鼠蚤、人蚤、呼吸道。6.微生物學檢查法：在專用生物安全實驗室檢測。不同癥狀或體征，可采取淋巴結穿刺液、痰、血液、咽喉分泌物等。標本直接涂片鏡檢，免疫熒光試驗可用于快速診斷。分離培養接種于血瓊脂平板等，涂片染色鏡檢、免疫熒光染色、生化試驗方法等進一步鑒定。ELISA等方法檢測抗體滴或抗原。核酸檢測。7.預防：滅鼠、滅蚤；盡快隔離患者，阻斷人間鼠疫進一步流行；與患者接觸者可口服磺胺嘧啶；對易感人群進行預防接種。8.治療：早期應用抗生素是降低病死率的關鍵。腺鼠疫常用鏈霉素加磺胺類藥物；肺鼠疫和敗血癥鼠疫常用鏈霉素或阿米卡星加四環素治療。四.炭疽芽胞桿菌：1.生物學性狀：致病菌中最大的G＋粗大桿菌，兩端截平，無鞭毛；新鮮標本培養后形成竹節樣排列的長鏈。有氧條件和適宜溫度下易形成橢圓形芽胞，位于菌體中央，寬度小于菌體，有毒株可形成莢膜。需氧或兼性厭氧，在普通瓊脂培養基培養形成灰白色大而扁平的R型菌落，低倍鏡觀察可見卷發狀邊緣。抗原有結構抗原（莢膜、菌體和芽胞等）和炭疽毒素復合物。芽胞抵抗力很強，對青霉素、氯霉素、紅霉素等多種抗生素敏感。人類歷史上第一個被發現的病原菌。致病物質主要是莢膜和炭疽毒素。炭疽芽胞桿菌引起食草動物炭疽病，人類可經多種途徑感染該菌。2.致病性：人類炭疽病有3種臨床類型，3型均可并發敗血癥，偶可引起炭疽性腦膜炎，死亡率極高。皮膚炭疽：由直接接觸患病動物或受染毛皮所致。肺炭疽：由吸入芽胞所致。腸炭疽：由食入未煮熟的病畜肉類、奶或被芽胞污染的食物所致。3.免疫性：感染炭疽后獲得持久性免疫力。4.微生物學檢查法：根據病型、病程采取不同標本，直接涂片、革蘭染色或特異性熒光抗體染色鏡檢。接種血瓊脂平板和碳酸氫鈉瓊脂平板進行分離培養。必要時將標本或培養物接種小鼠或豚鼠。免疫熒光法檢測莢膜抗體，ELISA檢查炭疽毒素，PCR技術檢測核酸。5.防治原則：病畜應嚴格隔離，死畜焚毀或深埋，嚴禁食用；易感家畜接種疫苗；患者嚴密隔離至痊愈。易感人群皮上劃痕接種炭疽桿菌減毒活疫苗。病原治療首選青霉素G，青霉素過敏者可采用環丙沙星及紅霉素等。第十三章厭氧性細菌一.厭氧性細菌：必須在無氧環境下才能生長繁殖。根據能否形成芽胞，可分為厭氧芽胞梭菌屬、無芽胞厭氧菌。1.厭氧芽胞梭菌屬：大多為嚴格厭氧菌，G＋。芽胞直徑比菌體粗，使菌體膨大呈梭狀，對熱、干燥和消毒劑均有強大的抵抗力。除產氣莢膜梭菌等極少數例外，均有周鞭毛，無莢膜。2.無芽胞厭氧菌。二.破傷風梭菌：破傷風（tetanus）的病原菌。發病后機體呈強直性痙攣、抽搐，可因窒息或呼吸衰竭死亡。1.生物學性狀：菌體細長，有周身鞭毛、無莢膜。形成芽胞后，使細菌呈鼓槌狀。G＋。嚴格厭氧。血平板上，有β溶血。不發酵糖類，不分解蛋白質。芽胞抵抗力很強，75～80℃10min仍保持活力，100℃1小時可完全被破壞，2.致病條件：該菌無侵襲力，僅在局部繁殖，致病作用完全有賴于病菌所產生的毒素。傷口需形成厭氧微環境--傷口窄而深（如刺傷）、有泥土或異物污染大面積創傷、燒傷，壞死組織多，局部組織缺血的同時有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口。3.致病因子：對氧敏感的破傷風溶血毒素。質粒編碼的破傷風痙攣毒素：屬神經毒，毒性極強（小鼠LD50為0.015ng，對人致死量<1μg）；為蛋白質，不耐熱；可被蛋白酶破壞。與神經系統的結合--毒素對腦干神經和脊髓前角神經細胞有高度親和力，結合非常牢固，一旦結合，抗毒素便不能中和毒素。毒素重鏈識別神經肌肉結點處運動神經元上的受體并與之結合，促使毒素進入細胞內形成小泡。內在化作用--小泡從外周神經末稍沿神經軸突逆行向上，到達運動神經元胞體，進入傳入神經末稍，最終進入中樞神經系統。膜的轉位--通過重鏈N端的介導產生膜的轉位，使輕鏈進入胞質溶膠。胞質溶膠中作用--靶的改變。輕鏈發揮毒性作用，阻止抑制性神經介質γ-氨基丁酸的釋放，使肌肉活動的興奮與抑制失調，造成強直性痙攣。4.所致疾病：破傷風。潛伏期，幾天-幾周。典型的癥狀--苦笑面容，角弓反張。5.免疫性：破傷風免疫屬外毒素免疫，主要是抗毒素發揮中和作用。一般病后不會獲得牢固免疫力。獲得有效抗毒素的途徑是人工免疫。6.微生物學檢查法：一般不進行涂片、鏡檢和分離培養。典型的癥狀和病史即可作出診斷。7.防治原則：正確處理創口及清創、擴創。注射白百破三聯疫苗進行人工主動免疫。對可疑病人可立即注射破傷風抗毒素進行緊急預防。發病早期可足量使用抗毒素進行特異性治療。抗生素。三.產氣莢膜梭菌：1.生物學性狀：兩端幾乎平切的G＋粗大桿菌，芽胞位于次極端，呈橢圓形，不大于菌體。無鞭毛，在體內有明顯的莢膜。厭氧，繁殖周期為8分鐘。血瓊脂平板上，雙層溶血環；蛋黃瓊脂平板上，有Nagler反應；代謝活躍，分解多種糖類，產酸產氣。在牛奶培養基中分解乳糖，大量產氣，出現所謂“洶涌發酵”。根據4種主要毒素（α、β、ε、ι）的產生情況，可分為5個毒素型；對人致病的主要為A型。2.致病物質：產氣莢膜梭菌能產生10余種外毒素，有些外毒素即為胞外酶。α毒素：以A型產生量最大。分解細胞膜上磷脂和蛋白形成的復合物，造成細胞溶解，引起血管通透性增加伴大量溶血、組織壞死、肝臟、心功能受損。腸毒素：不耐熱的蛋白質，100℃3.所致疾病：氣性壞疽：戰傷、工傷、車禍。氣性壞疽潛伏期短，發展迅速，病情險惡。氣腫（捻發音）及組織壞死，致毒血癥、休克。食物中毒。4.微生物學檢查法：直接涂片鏡檢：深部創口取材涂片。G＋大桿菌，大莢膜。白細胞甚少且形態不典型。伴其它雜菌。分離培養及動物實驗：血平板，鏡檢及生化反應。動物實驗。本菌引起的食物中毒在發病后1日內，檢出大于105病菌/克食品或106病菌/克糞便，即可確立診斷。5.防治原則：及時處理傷口，破壞和消除厭氧微環境；預防性的使用抗生素。局部擴創，清創；抗生素；α抗毒素；高壓氧艙法。四.肉毒梭菌：1.生物學性狀：G＋粗短桿菌。芽胞呈橢圓形，使細胞呈湯匙狀或網球拍狀。厭氧。肉毒毒素不耐熱，煮沸1分鐘即可被破壞。2.致病性：肉毒毒素（對人致死量為0.1μg），作用于外周膽堿能神經，抑制神經肌肉接點處神經介質乙酰膽堿的釋放，導致弛緩性麻痹。3.所致疾病：食物中毒：本病是單純性毒素中毒而非細菌感染，臨床表現與其它食物中毒不同，主要為神經末稍麻痹。嬰兒肉毒病。4.微生物學檢測法：標本，毒素檢查。5.防治原則：加強食品衛生管理和監督，提高防范意識。盡早根據癥狀作出診斷，迅速注射A、B、E三型多價抗毒素。五.艱難梭菌：1.生物學性狀：新生兒腸道中正常菌群，可因長期使用抗生素引起的偽膜性腸炎。G＋粗大桿菌，有鞭毛，有芽胞。2.致病性：產生A、B兩種毒素，即腸毒素和細胞毒素。因長期使用抗生素導致菌群失調后可引起內源性感染。六.無芽胞厭氧菌：屬人體內的正常菌群，包括革蘭陽性和革蘭陰性的球菌和桿菌。在某些特定狀態下，這些厭氧菌作為條件致病菌可導致內源性感染1.革蘭陰性厭氧桿菌：脆弱類桿菌--臨床上最常見的無芽胞厭氧菌分離株。韋榮菌屬最重要，咽喉部主要厭氧菌，常為混合感染菌之一。2.革蘭陽性厭氧球菌：消化鏈球菌屬--在臨床厭氧菌分離株中僅次于脆弱類桿菌，主要寄居于陰道。丙酸桿菌--能發酵糖類產生丙酸。痤瘡丙酸桿菌。雙歧桿菌屬--正常腸道菌群，在大腸中起重要的調節作用。真桿菌屬。3.致病條件：寄居部位改變，宿主免疫力下降，菌群失調，厭氧微環境。4.感染特征：內源性感染；呈慢性。大多為化膿性感染。分泌物或膿液粘稠，有惡臭，使用氨基糖苷類抗生素長期無效。分泌物直接涂片可見細菌，但普通培養法無細菌生長。5.所致疾病：敗血癥、中樞神經系統感染、腦膿腫、口腔與牙齒感染、呼吸道感染、腹部和會陰部感染、女性生殖道感染。6.微生物學檢查法：標本采取--采取后立刻放入厭氧標本瓶中，迅速送檢。直接涂片鏡檢。分離培養與鑒定。7.預防原則：破壞其成為條件致病菌的條件，合理使用抗生素。第十九章支原體一.支原體：缺乏細胞壁，形態上呈高度多形性，能通過除菌濾器，在無生命培養基中能生長繁殖，最小的原核細胞型微生物，能形成有分支的長絲，故稱支原體。1.形態：0.3-0.5μm，無細胞壁；高度多形性--球、桿、絲狀和分枝狀等；一般Giemsa染色較好，染為淡紫色。2.結構：內外兩層為蛋白質及糖類，中層為脂類（磷脂為主），凡作用于膽固醇的物質，如皂素、毛地黃甙、二性霉素B等均能破壞細胞膜致其死亡。特殊的頂端結構：粘附宿主上皮細胞表面，與支原體的致病有關。3.培養特性：營養豐富的培養基--10%～20%人或動物血清以提供膽固醇與其它長鏈脂肪酸，多數還需添加酵母浸液、組織浸液、核酸提取物和輔酶。pH--適宜7.6～8.0（<7.0易死亡），但解脲脲原體最適pH5.5～6.5。兼性厭氧--大多寄生性支原體在37℃時在微氧環境（含5%CO2和90%N2）中生長最佳。繁殖方式多樣--二分裂繁殖外，還有分節、斷裂、出芽或分枝等方式固體培養基：2～7天長出直徑約10～600μm的典型的“荷包蛋樣”菌落：低倍鏡下見菌落呈圓形，心致密隆起，深入瓊脂，外周由顆粒包繞。液體培養基：清亮，用顏色變化單位（CCU）表示。4.抗原結構：補體結合試驗可檢測糖脂類抗原，ELISA試驗可檢測蛋白質類抗原，血清抗體可用生長抑制試驗（GIT）和代謝抑制試驗（MIT）以鑒定。5.抵抗力：對化學消毒劑敏感，對結晶紫、醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力；對影響細胞壁合成的抗生素如青霉素類天然耐受，但對干擾蛋白質合成的抗生素如強力霉素、交沙霉素等敏感。6.致病機制：莢膜或微莢膜：抗吞噬作用。毒性代謝產物：神經毒素、磷脂酶C、核酸酶、過氧化氫和超氧離離子均能引起宿主黏膜上皮細胞或紅細胞的病理損傷。超抗原：免疫調節。其它：如穿透支原體粘附侵入CD4＋T細胞引起損傷。粘附素：粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮細胞。7.所致疾病：存在廣泛，多不致病。肺炎支原體引起原發性非典型性肺炎；溶脲脲原體、人型支原體和生殖支原體可引起泌尿生殖系統感染和不育癥；穿透支原體和發酵支原體為艾滋病的輔助致病因素。8.免疫性：體液免疫：抗膜蛋白的抗體包括IgM、IgG和SIgA。細胞免疫：主要是特異性CD4＋Th1細胞分泌細胞因子。二.肺炎支原體：1.生物學性狀：0.2～0.3μm，高度多形性，如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀；初次分離應在含血清和新鮮酵母浸出液的培養基中，一般10天左右長出菌落；多次傳代后生長加快，菌落呈“油煎蛋”狀；能發酵葡萄糖，不能利用精氨酸與尿素；對美藍、醋酸鉈、青霉素不敏感。2.致病性：主要經飛沫傳播，但大多數發生于夏末秋初，5～15歲青少年發病率最高。含特殊的頂端結構：P1表面蛋白（170kDa）和P30（32kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎癥細胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-α、IL-1、IL-6）引起組織損傷。3.所致疾病：原發性非典型性肺炎，臨床以咳嗽、發熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主，有時并發支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經系統癥狀。4.免疫性：血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細胞；呼吸道局部黏膜產生的SIgA對防止再感染有較強保護作用；出現IgE介導的I型超敏反應，促使哮喘病急性發作。5.微生物學檢查法：分離培養：痰或咽拭子接種在SP-4培養基，挑選可疑菌落，經形態學、糖發酵、溶血性、血細胞吸附試驗進行初步鑒定，進一步鑒定需用特異性抗血清做GIT與MIT實驗。血清學檢查：冷凝集試驗--即用病人血清與人O型血紅細胞或自身紅細胞混合，4℃過夜時可發生凝集，而在37℃時這種凝集又分散解離開，但僅50％左右的患者才出現陽性。此反應為非特異性。快速診斷--ELISA，檢測P1和P30蛋白mAbs；PCR，6.防治原則：大環內酯類藥物，喹諾酮類藥物。三.解脲脲原體：1.生物學性狀：0.5～0.3μm，單個或成雙排列。在固體培養上48h后長出直徑15～30μm“油煎蛋”狀菌落。最適pH為5.5～6.5。分解尿素，不分解糖類和精氨酸。對1:2000醋酸鉈不敏感。MB抗原是其主要膜抗原，將解脲脲原體分為A、B兩大群，14個血清型。2.致病機制：粘附于宿主細胞表面，引起細胞膜損傷；產生毒性代謝產物如NH3，對宿主細胞有急性毒性作用；磷脂酶損傷宿主的細胞膜。3.所致疾病：非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睪炎等泌尿生殖道疾病，還與自然流產、早產、死胎和男性不孕有關。4.微生物學檢查法：病原體檢測：接種液體培養基，分解尿素產堿，酚紅指示劑由橘黃色變為紅色；再取