微生物根底知識及潔凈區微生物控制

1整理ppt一、微生物簡介二、微生物的分布三、微生物的作用及危害四、微生物的形態結構五、微生物污染及消毒滅菌六、潔凈區微生物的控制2整理ppt一、微生物簡介1、微生物的定義〔microorganism,microbe〕:微生物是存在于自然界中的個體微小，結構簡單、肉眼看不見，必須借助于顯微鏡才能看清它們外形的一群低等的、原始的微小生物，如細菌。2、微生物的分類按其結構、化學組成可分為:★原核類:僅有原始核質，無核仁或核膜，細胞器很不完善。如細菌、放線菌、支原體、立克次氏體。★真核類:細胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體，細胞器完整。如真菌〔酵母菌和霉菌〕、原生動物、藻類★非細胞類:體積微小，能通過除菌過濾器。如病毒和朊病毒3整理ppt按其致病性可分為:★病原性微生物：有致病性★非病原性微生物：無致病性3.微生物的五大特點：①個體小，面積大：小于0.1mm。肉眼不可見。②分布廣,種類多〔10萬多種〕：自然界中到處都有，如水、空氣、土壤等,土壤中的數量最多。③代謝強，轉化快：發酵乳糖的細菌在1小時內可分解其自重1000～10000倍的乳糖；產朊假絲酵母合成蛋白質的能力比食用公牛強10萬倍④生長旺，繁殖快：微生物有驚人的繁殖速度，大多數微生物幾十分鐘內就可以繁殖一代⑤適應性強，易變異〔耐藥性產生的原因〕4整理ppt二、微生物的分布1.微生物在自然界的分布：土壤：是微生物生活的最適環境，土壤中的微生物又可分為如下幾類：

細菌：占土壤微生物總數的70%~90%。

放線菌：占土壤中微生物含量的5%~30%。

霉菌：主要生活在靠近地面的土壤中，在通氣良好的土壤中，霉菌數量很多。

酵母菌：普通土壤中酵母菌含量很少。水：僅次于土壤的微生物分布、定居的第二場所，90%為革蘭氏陰性菌，主要有假單胞菌、黃桿菌等。5整理ppt空氣：空氣中的微生物主要來源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵〔這類微生物大多數是腐生性的，〕還來源于人和動物，它們大多數是通過呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，懸浮在大氣中。2.微生物在人體中的分布：在正常人體皮膚、粘膜及外界相通的各種腔道〔如口腔、鼻咽腔、腸道和泌尿道〕等部位，存在著對人體無害的微生物群.6整理ppt部位常見菌種皮膚表皮葡萄球菌、類白喉桿菌、綠膿桿菌、恥垢桿菌等口腔鏈球菌〔甲型或乙型〕、乳酸桿菌、螺旋體、梭形桿菌、白色念球菌、〔真菌〕表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、類白喉桿菌胃正常一般無菌腸道類桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、厭氧性鏈球菌、糞鏈球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸桿菌、變形桿菌、破傷風桿菌、產氣莢膜桿菌等鼻咽腔甲型鏈球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等眼結膜皮表葡萄球菌、結膜枯燥桿菌、類白喉桿菌等人體中的微生物7整理ppt三、微生物的作用及危害

1.微生物的作用絕大多數微生物對人和動物是有益的。微生物已廣泛應用于農業、食品、醫藥、釀造、化工、制革、石油等行業，發揮了越來越重要的作用。例如與我們日常生活密切相關的如酸奶、酒類、抗生素、疫苗等。2.微生物的危害微生物中也有一局部能引起人及動、植物發生病害，如人類的許多傳染病，如傷寒、結核、病毒性肝炎，鼠疫等。從藥品生產的而言，微生物對藥品的原料、生產環境和成品的污染是造成生產失敗、成品不合格的重要因素。8整理ppt四、微生物的形態結構

〔一〕、細菌細菌是一類細胞細而短、結構簡單、細胞壁堅韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛。細菌的形態與結構〔1〕球菌多數球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。常見的有雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。〔2〕桿菌形態多數呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數呈分散存在，也有的呈鏈狀排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。〔3〕螺形菌菌體彎曲，呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。細菌雖小，仍具有一定的細胞結構和功能。細胞壁、細胞膜、細胞質和核質是細菌的根本結構。

9整理ppt大腸菌群大腸菌群為人和動物腸道中的常居菌，在一定條件下可引起腸道外感染。生存環境大腸菌群在自然界中分布廣泛，在15—46℃均可生長，最適生長溫度為37℃。在水和土壤中大量存在，對自然環境有較強的抵抗力。主要污染的食品是肉類、水產品、蔬菜等。85℃熱水1~3分鐘滅菌。300ppm次氯酸納溶液1~3分鐘內殺滅本菌。

10整理ppt金黃色葡萄球菌在自然界中分布廣泛，空氣、水、地面、物體外表、人和動物的體表、粘膜等處均有存在。食品藥品中生長有金黃色葡萄球菌，是食品藥品衛生的一種潛在危險，因為金黃色葡萄球菌可以產生腸毒素，食后能引起食品中毒。金黃色葡萄球菌11整理ppt金黃色葡萄球菌

繁殖條件

金黃色葡萄球菌能在12~45℃生長繁殖，最適生長溫度為37℃，特征

傷口化膿的地方、口、鼻子等處繁殖；污染來源于手指的可能性很高；產生的毒素，非常耐熱；預防：

手指處有傷口、化膿口的人，不要直接接觸產品；徹底對手指進行洗凈消毒，佩戴手套，要戴帽子、戴口罩；殺滅條件加熱80℃30分鐘才能殺死，煮沸可迅速使它死亡12整理ppt沙門氏菌沙門氏菌常在動物中廣泛傳播，人的沙門氏菌感染也非常普遍。世界上沙門氏菌的食物中毒占首位，因此，檢查食品藥品中的沙門氏菌非常重要。生存環境

沙門氏菌在水中不易繁殖，但可生存2—3周，冰箱中可生存3—4個月，在—25℃可存活10個月，在自然環境的糞便中可存活1—2個月。繁殖條件沙門氏菌最適繁殖溫度為37℃，在20℃以上即能大量繁殖，因此，低溫儲存食品是一項重要預防措施。13整理ppt污染渠道沙門氏菌的來源主要是患病的人和動物，及人和動物的帶菌者，其中在肉類中最為多見。殺滅條件沙門氏菌對熱及外界環境的抵抗力屬于中等，

60℃20—30分鐘

75℃5分鐘即被殺死，

100℃立即被殺死。沙門氏菌14整理ppt〔二〕、真菌真菌是一類有細胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數為單細胞，多數為多細胞，能進行無性或有性繁殖的一類真核細胞型微生物。真菌包括單細胞與多細胞兩類。單細胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團，稱絲狀菌或霉菌。真菌生長的最適的溫度為22～28℃，最適的pH值為4～6。其繁殖能力強，但生長速度比細菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌對熱的抵抗力不強，一般加熱60~70℃1小時即被殺死，但對枯燥、日光、紫外線和一些化學消毒劑有抵抗力，但對2.5％碘酒、10％甲醛那么較敏感。15整理ppt〔三〕、病毒病毒屬非細胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動物、植物、真菌和細菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結構最簡單的微生物，它僅有一種核酸〔DNA或RNA〕作其遺傳物質。病毒必須在宿主活細胞內寄生，依靠細胞提供的能量、營養物質及生物大分子合成機制，完成病毒的復制過程。病毒與人類的關系極為密切，人類的傳染病約75％是由病毒引起的。有些病毒傳染性強，可引起世界大流行〔如流感、艾滋病等〕。16整理ppt〔四〕、熱原與內毒素熱原：是微量即可引起恒溫動物體溫異常升高的物質的總稱。內毒素：是革蘭氏陰性菌細胞壁上的一種脂多糖和微量蛋白的復合物，具有多種生物活性。熱原包括內毒素，內毒素是主要的熱原物質。在產品檢測中，細菌內毒素是檢測熱原的方法之一。我廠產品，脯氨酸檢測內毒素---鱟試劑法。?中國藥典?＜10EU/gAJI2002＜6EU/g肌苷檢測熱原----動物試驗法〔家兔法〕。

17整理ppt消除細菌內毒素的方法高溫破壞法：可用180℃干烤3~4h或250℃干烤至少60min。吸附法：一般選用活性炭。化學酸堿和氧化法。離子交換法。反滲透法。凝膠過濾法。注：在產品微檢中，無菌生長，不代表無內毒素，細菌死亡后會產生大量內毒素。18整理ppt五、微生物污染及消毒滅菌1.藥品微生物污染：藥品微生物污染：微生物的產生、附著而給藥品帶來不良影響。藥品的微生物污染也稱染菌。污染藥品的細菌：常見污染藥品的細菌是一些生命力較強的細菌，如：葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、枯草桿菌及一些霉菌，抵抗力弱的細菌一般不易造成污染。藥品的微生物污染源：空氣、水、廠房與設備、藥品生產用原輔料、包裝材料、昆蟲、生產操作人員等19整理ppt2.消毒與滅菌消毒：殺死物體上病源微生物的方法，并不一定能殺死細菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消毒劑。滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細菌芽孢在內的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌：抑制體內或體外細菌的生長繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素，可抑制細菌的繁殖。防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法，細菌一般不死亡。同一種化學藥品在高濃度時為消毒劑，低濃度時常為防腐劑。無菌：不存在活的細菌。防止細菌進入人體或其他物品的操作技術，為無菌操作。20整理ppt3、常用的消毒滅菌法：物理滅菌法和化學消毒法物理滅菌方法熱力滅菌法輻射殺菌法濾過除菌法超聲波殺菌法枯燥與低溫抑菌法21整理ppt熱力滅菌法：使蛋白質、酶及核酸永久性破環，細胞膜溶解，導致細胞發生不可逆轉的死亡。①干熱滅菌法：采用灼燒或干熱空氣滅菌。常用方式是把待滅菌的物品均勻的放入烘箱，升溫至160℃，恒溫1h。此方法適合玻璃皿，金屬用具的滅菌。②濕熱滅菌法—利用熱蒸汽殺死微生物。相同條件下，濕熱滅菌效果比干熱滅菌效果好。這是因為一方面細胞內蛋白質含水量高，容易變性，另一方面高溫水蒸氣對蛋白質有高度的穿透力，從而加速蛋白質變性，死亡。高壓蒸汽滅菌：濕熱滅菌法的一種。高壓蒸汽滅菌是最可靠、最適用、最廣泛的滅菌方法。22整理ppt輻射滅菌法：是采用輻射進行滅菌消毒。包括可見光、紅外線、紫外線、X射線和γ射線等。紫外線：波長200-300nm的紫外線具有殺菌作用，265~266nm波段殺菌能力最前。紫外線穿透物質的能力差，一般用于空氣及物體外表消毒。電離輻射：高速電子、X射線、γ射線，適用于不耐熱物品的滅菌，常用于藥品和醫療用品的滅菌。微波：波長1mm~1m。23整理ppt濾過除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去,以到達除菌目的。濾菌器含有微細小孔≤0.22微米,只允許液體或氣體通過,而大于孔徑的細菌等顆粒不能通過。適用范圍：血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。24整理ppt化學消毒法法：一般化學藥劑無法殺死所有的微生物，而只能殺死其中的病原微生物，所以是消毒的作用，而不是滅菌的作用。消毒劑：能迅速殺滅病原微生物的藥物。防腐劑：能抑制或阻止微生物生長繁殖的藥物。消毒劑、防腐劑沒有選擇性，對一切活細胞都有毒性，不僅能殺死或抑制病原微生物，而且對人體組織細胞也有損傷作用，所以常用于器械，體表、環境的消毒。常用的化學消毒劑有：來蘇水、碘酒、酒精等25整理ppt類別作用機制常用種類用途酚類蛋白變性，細胞膜損傷石炭酸地面、器具表面、皮膚消毒醇類蛋白變性75％酒精皮膚、體溫計消毒氧化劑氧化、蛋白沉淀二氧化氯地面、器具表面、皮膚消毒過氧乙酸、碘酒塑料、玻璃器材、皮膚消毒重金屬鹽氧化、蛋白酶變性紅汞、硫柳汞皮膚、粘膜、小創傷消毒表面活性劑蛋白變性細胞膜損傷0.1％新潔爾滅地面、器具表面、皮膚消毒

化學滅菌法常用消毒劑種類和用途：26整理ppt潔凈區的主要污染源：空氣、制藥用水、操作人員、設備，原輔料等，其中操作人員是主要的污染源。?藥品生產質量管理標準?中明確規定：潔凈區內的人員應嚴格控制，其工作人員應定期進行衛生和微生物學根底知識、潔凈區作業等方面的培訓和考核；進進入潔凈區的臨時外來人員因進行指導和監督。防止微生物污染的措施：①了解污染源、杜絕污染途徑②潔凈區潔凈技術的的應用及衛生管理③制藥用水的質量控制④進行微生物限度檢查，控制藥品質量潔凈區防污染必須以塵埃粒子和微生物為環境監控對象。六、潔凈區微生物的控制27整理ppt六、潔凈區微生物的控制潔凈區的污染源：塵埃及細菌污染來自人的塵粒污染占潔凈室污染的80%生產工具和設備引起的污染占15%潔凈區本身和過濾器的缺陷引起的污染占5%1.1操作人員帶來的塵埃粒子：

a.

成年人產生的皮屑：10萬~1000萬粒子/min；

b.

操作人員身穿工作服，劇烈活動：產生

100萬個粒徑＞0.1μm的微粒

20萬個粒徑0.5μm的微粒

c.交談1min，產生1.5~2.0萬粒子

d.

咳嗽:70萬個粒子，噴嚏：140萬個粒子28整理ppt

1.2人體微生物分布情況：

人體部位

微生物種類名稱

檢出率%

皮膚表皮葡萄球菌瘡皰丙酸桿菌類白喉棒桿菌金黃色葡萄球菌85~10045~100555~25鼻和鼻咽表皮葡萄球菌金黃色葡萄球菌類白喉棒桿菌黏膜炎布蘭漢氏球菌流感嗜血桿菌9020~855~80121229整理ppt口腔表皮葡萄球菌α-溶血鏈球菌唾液鏈球菌消化鏈球菌金黃色葡萄球菌流感嗜血桿菌產堿韋榮氏球菌75~100100100占優勢常見25~100100口咽部表皮葡萄球菌類白喉棒桿菌α-鏈球菌和非溶血鏈球菌金黃色葡萄球菌30~7050~9025~9935~4030整理ppt大腸脆弱擬桿菌產黑素擬桿菌口腔擬桿菌具核梭桿菌壞死梭桿菌腸球菌大腸桿菌100100100100100100100在潔凈區內的人員數量應盡量少，應嚴格按照SOP要求操作以減少塵埃粒子,要有自我約束的概念。

31整理ppt

1.3人體帶菌及皮屑情況

項目

部位

數量（個）

細菌手前額頭皮100~1000/立方厘米1000~10萬/立方厘米100萬/立方厘米

皮屑皮膚表面皮膚更替脫落塵粒1.75平方米5天一次

7.1億/天為保證生產環境的潔凈度，應認清人體產生污染的部位，做好措施①出入潔凈區的無菌服應盡可能覆蓋全身，皮膚暴露局部越少越好，以盡量減少產品的污染。②在潔凈區從事藥品生產的人員須每年至少進行一次身體檢查，有皮膚疾病者、傳染病者、體表有傷口者不得進入潔凈區。32整理ppt2.1潔凈室的設計：外表應光滑平整易于清潔消毒、無死角、無裂縫，不易藏灰塵；不同潔凈度級別的房間應有足夠的壓差天花板應密封、穿墻的管道與墻體之間應密封100級潔凈區內應無地漏、其它區域地漏應液封設置更衣室、緩沖間，并安裝過濾器，門設計成連鎖空氣流動一般為雜流，上送風下排風，100級為層流更衣室的潔凈度級別應與高級別的房間相同。2.潔凈區潔凈技術的應用33整理ppt2.2潔凈區污染的控制①保持房間正壓：潔凈級別不同的相鄰房間，之間的靜壓差＞5Pa潔凈區對外界的靜壓差＞10Pa空氣總是由潔凈級別高的房間向低的房間流動②對潔凈區空氣進行凈化：保持空調系統的設計符合潔凈區潔凈度要求。保持空調系統的凈化功能符合要求。按規定對潔凈區進行消毒、滅菌③保持潔凈室聯鎖裝置的正常：34整理ppt3.潔凈區操作本卷須知：3.1潔凈區人流管理操作人員進入潔凈區應嚴格按照SOP程序：存放個人物品→換鞋→穿上潔凈拖鞋→脫去外衣→洗手→穿上潔凈服→戴上口罩→檢查→手消毒→戴上潔凈手套→進入潔凈區人員離開潔凈區程序：潔凈區→緩沖間→更衣室〔脫下工作鞋、換穿拖鞋、脫下口罩、衣、帽〕→存衣室〔洗手、穿上外衣〕→換鞋間〔脫下拖鞋、走出換鞋間〕→換鞋→存放室35整理ppt維修人員進入潔凈區維修工作要求：①必須按進入潔凈區的SOP要求進入潔凈區。②將工具清潔后從傳遞窗傳入。③在生產狀態下，不得從事可能影響產品質量的維修④維修工具必須為專用工具，存放在專用地點，并有標識。⑤維修用具在使用完后必須馬上清潔，并放回指定地點。⑥不得裸手直接接觸藥品。⑦不得高聲談笑，必須戴口罩。⑧不可穿著潔凈服走出更衣室外面，然后再回到潔凈區。36整理ppt潔凈區人員工作要求：①個人衛生要求不得化裝不得在潔凈區內吃飯、喝水。不得在潔凈區內抽煙不得有可見傷口不得留長手指甲、戴首飾、傳染病患者不得進入潔凈區。平時生產工作中，如患有腹瀉、感冒、咳嗽、不明原因發熱或體表有傷口等輕微疾病，不得進入潔凈區。37整理ppt潔凈區人員工作要求：②正確的行為和操作：保持在潔凈區內工作，不隨意出入潔凈區不隨便說話，必要時才說話不要通過傳遞窗說話，使用總是戴上口罩以減少來自口腔的污染機械和設備的維修保養必須有規律的進行定期對潔凈室和潔凈室內物品進行清潔始終保持潔凈區的清潔和整齊良好的行為很關鍵，請記住：穿著正確、移動正確、行動正確、工作正確38整理ppt③防止不正確的行為和操作：防止著裝不正確而散播身體的粒子，引起污染防止不戴手套接觸物料，引起交叉污染防止在潔凈室內脫去潔凈室工作服防止用手指接觸頭發或身體的其他部位防止在患感冒或其他疾病期間進潔凈室工作防止在潔凈室內吃、喝、抽煙或讀報等防止在潔凈室內戴