-/液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用的原理及應(yīng)用液質(zhì)聯(lián)用與氣質(zhì)聯(lián)用的區(qū)別:氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS)是最早商品化的聯(lián)用儀器，適宜分析小分子、易揮發(fā)、熱穩(wěn)定、能氣化的化合物；用電子轟擊方式（EI）得到的譜圖，可與標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)對(duì)比。感謝閱讀液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)主要可解決如下幾方面的問(wèn)題：不揮發(fā)性化合物分析測(cè)定；極性化合物的分析測(cè)定；熱不穩(wěn)定化合物的分析測(cè)定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析測(cè)定；沒(méi)有商品化的譜庫(kù)可對(duì)比查詢，只能自己建庫(kù)或自己解析譜圖。感謝閱讀目前的有機(jī)質(zhì)譜和生物質(zhì)譜儀，除了GC-MS的EI和CI源，離子化方式有大氣壓電離（API）（包括大氣壓電噴霧電離ESI、大氣壓化學(xué)電離APCI、大氣壓光電離APPI）與基質(zhì)輔助激光解吸電離。前者常采用四極桿或離子阱質(zhì)量分析器，統(tǒng)稱(chēng)API-MS。后者常用飛行時(shí)間作為質(zhì)量分析器，所構(gòu)成的儀器稱(chēng)為基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜儀（MALDI-TOF-MS）。API-MS的特點(diǎn)是可以和液相色譜、毛細(xì)管電泳等分離手段聯(lián)用，擴(kuò)展了應(yīng)用范圍，包括藥物代謝、臨床和法醫(yī)學(xué)、環(huán)境分析、食品檢驗(yàn)、組合化學(xué)、有機(jī)化學(xué)的應(yīng)用等；MALDI-TOF-MS的特點(diǎn)是對(duì)鹽和添加物的耐受能力高，且測(cè)樣速度快，操作簡(jiǎn)單。精品文檔放心下載質(zhì)譜原理簡(jiǎn)介：質(zhì)譜分析是先將物質(zhì)離子化，按離子的質(zhì)荷比分離，然后測(cè)量各種離子譜峰的強(qiáng)度而實(shí)現(xiàn)分析目的的一種分析方法。以檢測(cè)器檢測(cè)到的離子信號(hào)強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，離子質(zhì)荷比為橫坐標(biāo)所作的條狀圖就是我們常見(jiàn)的質(zhì)譜圖。感謝閱讀常見(jiàn)術(shù)語(yǔ):質(zhì)荷比:離子質(zhì)量(以相對(duì)原子量單位計(jì))與它所帶電荷(以電子電量為單位計(jì))的比值,寫(xiě)作m/Z.謝謝閱讀峰:質(zhì)譜圖中的離子信號(hào)通常稱(chēng)為離子峰或簡(jiǎn)稱(chēng)峰.離子豐度:檢測(cè)器檢測(cè)到的離子信號(hào)強(qiáng)度.基峰:在質(zhì)譜圖中，指定質(zhì)荷比范圍內(nèi)強(qiáng)度最大的離子峰稱(chēng)作基峰.感謝閱讀總離子流圖；質(zhì)量色譜圖；準(zhǔn)分子離子；碎片離子；多電荷離子；同位素離子精品文檔放心下載總離子流圖:在選定的質(zhì)量范圍內(nèi)，所有離子強(qiáng)度的總和對(duì)時(shí)間或掃描次數(shù)所作的圖,也稱(chēng)TIC圖.感謝閱讀質(zhì)量色譜圖指定某一質(zhì)量(或質(zhì)荷比)的離子其強(qiáng)度對(duì)時(shí)間所作的圖.精品文檔放心下載利用質(zhì)量色譜圖來(lái)確定特征離子，在復(fù)雜混合物分析及痕量分析時(shí)是LC/MS測(cè)定中最有用的方式。當(dāng)樣品濃度很低時(shí)LC/MS的TIC上往往看不到峰，此時(shí)，根據(jù)得到的分子量信息，輸入M+1或M+23等數(shù)值，觀察提取離子的質(zhì)量色譜圖，檢驗(yàn)直接進(jìn)樣得到的信息是否在LC/MS上都能反映出來(lái)，確定LC條件是否合適，以后進(jìn)行MRM等其他掃描方式的測(cè)定時(shí)可作為參考。精品文檔放心下載1.0指與分子存在簡(jiǎn)單關(guān)系的離子，通過(guò)它可以確定分子量.液質(zhì)中最常見(jiàn)的準(zhǔn)分子離子峰是[M+H]+或[M-H]-.謝謝閱讀-/在ESI中,往往生成質(zhì)量大于分子量的離子如M+1,M+23,M+39,M+18......稱(chēng)準(zhǔn)分子離子,表謝謝閱讀示為:[M+H]+,[M+Na]+等碎片離子：準(zhǔn)分子離子經(jīng)過(guò)一級(jí)或多級(jí)裂解生成的產(chǎn)物離子.碎片峰的數(shù)目及其豐度則與分子結(jié)構(gòu)有關(guān),數(shù)目多表示該分子較容易斷裂,豐度高的碎片峰表示該離子較穩(wěn)定,也表示分子比較容易斷裂生成該離子。謝謝閱讀多電荷離子：指帶有2個(gè)或更多電荷的離子,常見(jiàn)于蛋白質(zhì)或多肽等離子.有機(jī)質(zhì)譜中,單電荷離子是絕大多數(shù),只有那些不容易碎裂的基團(tuán)或分子結(jié)構(gòu)-如共軛體系結(jié)構(gòu)-才會(huì)形成多電荷離子.它的存在說(shuō)明樣品是較穩(wěn)定的.采用電噴霧的離子化技術(shù),可產(chǎn)生帶很多電荷的離子,最后經(jīng)計(jì)算機(jī)自動(dòng)換算成單質(zhì)/荷比離子。感謝閱讀同位素離子由元素的重同位素構(gòu)成的離子稱(chēng)為同位素離子.各種元素的同位素,基本上按照其在自然界的豐度比出現(xiàn)在質(zhì)譜中,這對(duì)于利用質(zhì)譜確定化合物及碎片的元素組成有很大方便,還可利用穩(wěn)定同位素合成標(biāo)記化合物,如:氘等標(biāo)記化合物,再用質(zhì)譜法檢出這些化合物,在質(zhì)譜圖外貌上無(wú)變化,只是質(zhì)量數(shù)的位移,從而說(shuō)明化合物結(jié)構(gòu),反應(yīng)歷程等謝謝閱讀如何看質(zhì)譜圖：(1)確定分子離子,即確定分子量氮規(guī)則：含偶數(shù)個(gè)氮原子的分子，其質(zhì)量數(shù)是偶數(shù)，含奇數(shù)個(gè)氮原子的分子，其質(zhì)量數(shù)是奇數(shù)。與高質(zhì)量碎片離子有合理的質(zhì)量差，凡質(zhì)量差在3~8和10~13，21~25之間均不可能，則說(shuō)明是碎片或雜質(zhì)。謝謝閱讀(2)確定元素組成，即確定分子式或碎片化學(xué)式高分辨質(zhì)譜可以由分子量直接計(jì)算出化合物的元素組成從而推出分子式低分辨質(zhì)譜利用元素的同位素豐度，例:感謝閱讀(3)峰強(qiáng)度與結(jié)構(gòu)的關(guān)系豐度大反映離子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定在元素周期表中自上而下，從右至左，雜原子外層未成鍵電子越易被電離，容納正電荷能力越強(qiáng)，含支鏈的地方易斷，這同有機(jī)化學(xué)基本一致，總是在分子最薄弱的地方斷裂。謝謝閱讀不同類(lèi)型有機(jī)物有不同的裂解方式相同類(lèi)型有機(jī)物有相同的裂解方式,只是質(zhì)量數(shù)的差異需要經(jīng)驗(yàn)記憶。謝謝閱讀質(zhì)譜解析的一般步驟(適于低分辨小分子譜圖,若已經(jīng)是高分辨質(zhì)譜圖得到元素組成更好)精品文檔放心下載(1)核對(duì)獲得的譜圖,扣除本底等因素引起的失真,考慮操作條件是否適當(dāng)謝謝閱讀(2)綜合樣品其他知識(shí)：例如熔點(diǎn)，沸點(diǎn)，溶解性等理化性質(zhì)，樣品來(lái)源，光譜，波譜數(shù)據(jù)等.謝謝閱讀盡可能判斷出分子離子。假設(shè)和排列可能的結(jié)構(gòu)歸屬：高質(zhì)量離子所顯示的，在裂解中失去的中性碎片，如M-1，M-15，M-18，M-20，M-31......意味著失H，CH3，H2O，HF，OCH3......精品文檔放心下載(5)假設(shè)一個(gè)分子結(jié)構(gòu)，與已知參考譜圖對(duì)照，或取類(lèi)似的化合物，并作出它的質(zhì)譜進(jìn)行對(duì)精品文檔放心下載-/比。有機(jī)質(zhì)譜的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):(1)定分子量準(zhǔn)確，其它技術(shù)無(wú)法比。(2)靈敏度高，常規(guī)10-7—10-8g,單離子檢測(cè)可達(dá)10-12g。謝謝閱讀(3)快速，幾分甚至幾秒。(4)便于混合物分析，LC/MS，MS/MS對(duì)于難分離的混合物特別有效,其它技術(shù)無(wú)法勝任。感謝閱讀(5)多功能，廣泛適用于各類(lèi)化合物。局限性:(1)異構(gòu)體，立體化學(xué)方面區(qū)分能力差。(2)重復(fù)性稍差，要嚴(yán)格控制操作條件。所以不能象低場(chǎng)NMR，IR等自己動(dòng)手，須專(zhuān)人操作。感謝閱讀(3)有離子源產(chǎn)生的記憶效應(yīng)，污染等問(wèn)題。(4)價(jià)格稍顯昂貴，操作有點(diǎn)復(fù)雜。質(zhì)譜儀器：質(zhì)譜儀由以下幾部分組成數(shù)據(jù)及供電系統(tǒng)┏━━━━┳━━━━━╋━━━━━━┓進(jìn)樣系統(tǒng) 離子源 質(zhì)量分析器 檢測(cè)接收器┗━━━━━╋━━━━━━┛真空系統(tǒng)真空系統(tǒng)質(zhì)譜儀的離子源、質(zhì)量分析器和檢測(cè)器必須在高真空狀態(tài)下工作，以減少本底的干擾，避免發(fā)生不必要的離子-分子反應(yīng)。所以質(zhì)譜反應(yīng)屬于單分子分解反應(yīng)。利用這個(gè)特點(diǎn)，我們用液質(zhì)聯(lián)用的軟電離方式可以得到化合物的準(zhǔn)分子離子，從而得到分子量。精品文檔放心下載由機(jī)械真空泵(前極低真空泵)，擴(kuò)散泵或分子泵(高真空泵)組成真空機(jī)組，抽取離子源和分析器部分的真空。感謝閱讀只有在足夠高的真空下，離子才能從離子源到達(dá)接收器，真空度不夠則靈敏度低。感謝閱讀進(jìn)樣系統(tǒng)把分析樣品導(dǎo)入離子源的裝置，包括：直接進(jìn)樣，GC，LC及接口，加熱進(jìn)樣，參考物進(jìn)樣等。感謝閱讀離子源使被分析樣品的原子或分子離化為帶電粒子(離子)的裝置，并對(duì)離子進(jìn)行加速使其進(jìn)入分析器，根據(jù)離子化方式的不同，有機(jī)質(zhì)譜中常用的有如下幾種，其中EI，ESI最常用。精品文檔放心下載EI:電子轟擊電離—硬電離。CI:化學(xué)電離—核心是質(zhì)子轉(zhuǎn)移。FD:場(chǎng)解吸—目前基本被FAB感謝閱讀取代。FAB:快原子轟擊—或者銫離子(LSIMS,液體二次離子質(zhì)譜)。ESI:電噴霧電離—謝謝閱讀-/屬最軟的電離方式。適宜極性分子的分析，能分析小分子及大分子(如蛋白質(zhì)分子多肽等)APCI:大氣壓化學(xué)電離—同上，更適宜做弱極性小分子。APPI:大氣壓光噴霧電離—同上，更適宜做非極性分子。MALDI:基體輔助激光解吸電離。通常用于飛行時(shí)間質(zhì)譜和FT-MS，特別適合蛋白質(zhì)，多肽等大分子．其中ESI，APCI，APPI統(tǒng)稱(chēng)大氣壓電離(API)感謝閱讀實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的離子源:ESI電噴霧電離源APCI大氣壓化學(xué)電離源電噴霧（ESI）的特點(diǎn)通常小分子得到[M+H]+]+,[M+Na]+或[M-H]-單電荷離子，生物大分子產(chǎn)生多電荷離子，由于質(zhì)譜儀測(cè)定質(zhì)/荷比，因此質(zhì)量范圍只有幾千質(zhì)量數(shù)的質(zhì)譜儀可測(cè)定質(zhì)量數(shù)十幾萬(wàn)的生物大分子。精品文檔放心下載電噴霧電離是最軟的電離技術(shù)，通常只產(chǎn)生分子離子峰，因此可直接測(cè)定混合物，并可測(cè)定熱不穩(wěn)定的極性化合物；其易形成多電荷離子的特性可分析蛋白質(zhì)和DNA等生物大分子；通過(guò)調(diào)節(jié)離子源電壓控制離子的碎裂（源內(nèi)CID）測(cè)定化合物結(jié)構(gòu)。謝謝閱讀大氣壓化學(xué)電離（APCI）特點(diǎn)大氣壓化學(xué)電離也是軟電離技術(shù)，只產(chǎn)生單電荷峰，適合測(cè)定質(zhì)量數(shù)小于2000Da的弱極性的小分子化合物；適應(yīng)高流量的梯度洗脫/高低水溶液變化的流動(dòng)相；通過(guò)調(diào)節(jié)離子源電壓控制離子的碎裂。謝謝閱讀電噴霧與大氣壓化學(xué)電離的比較電離機(jī)理：電噴霧采用離子蒸發(fā)，而APCI電離是高壓放電發(fā)生了質(zhì)子轉(zhuǎn)移而生成[M＋H]+或[M-H]-離子。感謝閱讀樣品流速：APCI源可從0.2到2ml／min；而電噴霧源允許流量相對(duì)較小,一般為0.2-1ml／min.精品文檔放心下載斷裂程度；APCI源的探頭處于高溫，對(duì)熱不穩(wěn)定的化合物就足以使其分解.謝謝閱讀靈敏度：通常認(rèn)為電噴霧有利于分析極性大的小分子和生物大分子及其它分子量大的化合物，感謝閱讀APCI更適合于分析極性較小的化合物。多電荷：APCI源不能生成一系列多電荷離子精品文檔放心下載NanoSpray離子源專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)的 NanoSpray離子源特別適合于做微量的生化樣品，其流速范圍可從 5nL／min精品文檔放心下載luL／min。一滴樣品就可做數(shù)小時(shí)的分析。可在最小的樣品消耗量下獲得最大靈敏度。靈敏度可高達(dá)fmole。并可直接與微孔HPLC聯(lián)用。感謝閱讀正負(fù)離子模式:一般的商品儀器中,ESI和APCI接口都有正負(fù)離子測(cè)定模式可供選擇。根據(jù)樣品的性質(zhì)選擇，也可兩種模式同時(shí)進(jìn)行質(zhì)量分析器:是質(zhì)譜儀中將離子按質(zhì)荷比分開(kāi)的部分,離子通過(guò)分析器后,按不同質(zhì)荷比(M/Z)分開(kāi),將相同的M/Z離子聚焦在一起,組成質(zhì)譜。精品文檔放心下載質(zhì)量分析器的分類(lèi)：-/雙聚焦扇形磁場(chǎng)-電場(chǎng)串聯(lián)儀器(sector).四極質(zhì)譜儀(Q).飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(TOF).離子阱質(zhì)譜儀（TRAP）付利葉變換-離子回旋共振質(zhì)譜儀(FT-ICRMS).精品文檔放心下載┏四極+TOF（Q-TOF）串列式多級(jí)質(zhì)譜儀┫三重四極（QqQ）(MS/MS) ┗TOF+TOF進(jìn)行MS/MS的儀器從原理上可分為兩類(lèi)第一類(lèi)儀器利用質(zhì)譜在空間中的順序，是由兩臺(tái)質(zhì)譜儀串聯(lián)組裝而成。即前面列出的串列式多級(jí)質(zhì)譜儀。精品文檔放心下載第二類(lèi)利用了一個(gè)質(zhì)譜儀時(shí)間順序上的離子儲(chǔ)存能力，由具有存儲(chǔ)離子的分析器組成，如離子回旋共振儀（ICR）和離子阱質(zhì)譜儀。但不能進(jìn)行母離子掃描或中性丟失。精品文檔放心下載實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的質(zhì)量分析器類(lèi)型：串聯(lián)四極質(zhì)譜儀(MS/MS)：三重四極（QqQ）離子源→第一分析器→碰撞室→第二分析器→接收器MS1 MS2Q1 q2 Q3QqQ儀器可以方便的改變離子的動(dòng)能，因此掃描速度快，體積小，常作為臺(tái)式進(jìn)入常規(guī)實(shí)驗(yàn)室，缺點(diǎn)是質(zhì)量范圍及分辨率有限，不能進(jìn)行高分辨測(cè)定，只能做到單位質(zhì)量分辨。（通過(guò)高分辨能得到化合物的分子式）謝謝閱讀在液質(zhì)聯(lián)機(jī)中使用的碎片化手段，能量都是以碰撞的形式輸送給分子離子，這個(gè)能量足以使得處在能量亞穩(wěn)態(tài)分子中的某些化學(xué)鍵斷裂并使一些特定的分子發(fā)生結(jié)構(gòu)重排。感謝閱讀碰撞誘導(dǎo)解離CID質(zhì)譜：選擇一定質(zhì)量的離子作為母體離子，進(jìn)入碰撞室，室內(nèi)充有靶子反應(yīng)氣體(碰撞氣體：N2、He、Ar、Xe、CH4等)，發(fā)生離子—分子碰撞反應(yīng)，從而產(chǎn)生‘子離子’，再經(jīng)MS2的分析器及接受器得到子離子質(zhì)譜，一般稱(chēng)做CID(collision-induceddissociation)譜感謝閱讀影響CID質(zhì)譜的因素：較大影響的因素有：所用碰撞氣體的種類(lèi)，壓力，離子的能量，儀器的配置以及離子電荷狀態(tài)感謝閱讀-/由于在不同的儀器上不可能在完全相同的條件下去分析樣品，任何一個(gè)給定的化合物將在不同的條件下給出差別或大或小的質(zhì)譜，尤其是各個(gè)離子峰的相對(duì)豐度的差別幾乎是無(wú)法避免的。因而目前尚難以建立商品化的譜庫(kù)供檢索使用，只能進(jìn)行人工解析或自己建庫(kù)。感謝閱讀大氣壓電離技術(shù)中產(chǎn)生的離子為偶數(shù)電子離子，其主要的碎片應(yīng)由化學(xué)鍵的誘導(dǎo)斷裂和重排反應(yīng)來(lái)產(chǎn)生，所以在EI質(zhì)譜解析中總結(jié)出的偶數(shù)電子離子的開(kāi)裂規(guī)則一般可適用于CID質(zhì)譜的解釋。精品文檔放心下載檢測(cè)接收器：接收離子束流的裝置，有：電子倍增器、光電倍增器、微通道板數(shù)據(jù)及供電系統(tǒng)精品文檔放心下載將接收來(lái)的電信號(hào)放大、處理并給出分析結(jié)果及控制質(zhì)譜儀個(gè)部分工作。謝謝閱讀從幾伏低壓到幾千伏高壓。LC-MS分析條件的選擇和優(yōu)化1.接口的選擇：ESI適合于中等極性到強(qiáng)極性的化合物分子，特別是那些在溶液中能預(yù)先形成離子的化合物和可以獲得多個(gè)質(zhì)子的大分子（如蛋白質(zhì)）謝謝閱讀APCI不適合可帶多個(gè)電荷的大分子，其優(yōu)勢(shì)在于弱極性或中等極性的小分子精品文檔放心下載的分析。2.正、負(fù)離子模式的選擇：選擇的一般原則為：正離子模式：適合于堿性樣品，可用乙酸或甲酸對(duì)樣品加以酸化。樣品中含有仲氨或叔氨時(shí)可優(yōu)先考慮使用正離子模式。謝謝閱讀負(fù)離子模式：適合于酸性樣品，可用氨水或三乙胺對(duì)樣品進(jìn)行堿化。樣品中含有較多的強(qiáng)伏電性基團(tuán)，如含氯、含溴和多個(gè)羥基時(shí)可嘗試使用負(fù)離子模式。謝謝閱讀3.流動(dòng)相的選擇常用的流動(dòng)相為甲醇、乙腈、水和它們不同比例的混合物以及一些易揮發(fā)鹽的緩沖液，如甲酸銨、乙酸銨等，還可以加入易揮發(fā)酸堿如甲酸、乙酸和氨水等調(diào)節(jié)pH值。精品文檔放心下載LC／MS接口避免進(jìn)入不揮發(fā)的緩沖液，避免含磷和氯的緩沖液，含鈉和鉀的成分必須＜lmmol/l。（鹽分太高會(huì)抑制離子源的信號(hào)和堵塞噴霧針及污染儀器）含甲酸（或乙酸）＜2％。含三氟乙酸≤0.5％。含三乙胺＜l％。含醋酸銨＜10一5mmol/l。送樣前一定要摸好LC條件，能夠基本分離，緩沖體系符合MS要求。謝謝閱讀4.流量和色譜柱的選擇不加熱ESI的最佳流速是1—50ul／min，應(yīng)用4.6mm內(nèi)徑LC柱時(shí)要求柱后分流，目前大多采用l—2.1mm內(nèi)徑的微柱，TIS源最高允許lml／min，建議使用200—400ul／minAPCI的最佳流速～lml／min，常規(guī)的直徑4.6mm柱最合適。謝謝閱讀為了提高分析效率，常采用＜100mm的短柱（此時(shí)UV圖上并不能獲得完全分離，由于質(zhì)譜定量分析時(shí)使用MRM的功能，所以不要求各組分沒(méi)有完全分離）。這對(duì)于大批量定量分析可以節(jié)省大量的時(shí)間。謝謝閱讀-/5.輔助氣體流量和溫度的選擇霧化氣對(duì)流出液形成噴霧有影響，干燥氣影響噴霧去溶劑效果，碰撞氣影響二級(jí)質(zhì)譜的產(chǎn)生。操作中溫度的選擇和優(yōu)化主要是指接口的干燥氣體而言，一般情況下選擇干燥氣溫度高于分析物的沸點(diǎn)20℃左右即可。對(duì)熱不穩(wěn)定性化合物，要選用更低的溫度以避免顯著的分解。選用干燥氣溫度和流量大小時(shí)還要考慮流動(dòng)相的組成，有機(jī)溶劑比例高時(shí)可采用適當(dāng)?shù)偷臏囟群土髁啃∫稽c(diǎn)的。謝謝閱讀樣品的預(yù)處理：為什么要進(jìn)行樣品的預(yù)處理：從保護(hù)儀器角度出發(fā)，防止固體小顆粒堵塞進(jìn)樣管道和噴嘴，防止污染儀器，降低分析背景，排除對(duì)分析結(jié)果的干擾。要求獲得最佳的分析結(jié)果，從ESI電離的過(guò)程分析：ESI電荷是在液滴的表面，樣品與雜質(zhì)在液滴表面存在競(jìng)爭(zhēng)，不揮發(fā)物（如磷酸鹽等）防礙帶電液滴表面揮發(fā)，大量雜質(zhì)防礙帶電樣品離子進(jìn)入氣相狀態(tài)，增加電荷中和的可能。精品文檔放心下載樣品的預(yù)處理常用方法a）超濾 b）溶劑萃取／去鹽 c）固相萃取 d）灌注（Perfusion）凈化／去鹽精品文檔放心下載e）色譜分離反相色譜分離親和技術(shù)分離f）甲醇或乙腈沉淀蛋白g）酸水解，酶解h）衍生化感謝閱讀化合物鑒別全掃描方式（Q1掃描）全掃描數(shù)據(jù)采集可以得到化合物的準(zhǔn)分子離子，從而可判斷出化合物的分子量，用于鑒別是否有未知物，并確認(rèn)一些判斷不清的化合物，如合成化合物的質(zhì)量及結(jié)構(gòu)。感謝閱讀子離子分析（MS/MS）子離子，用于結(jié)構(gòu)判斷(得到化合物的二級(jí)譜圖即碎片離子)和選擇離子對(duì)作多種反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）。子離子譜圖與錐體電壓斷裂譜圖（源內(nèi)CID）可能十分相似，所不同的是子離子質(zhì)譜圖已知只有一種質(zhì)量通過(guò)MS1，因此也已知所有碎片離子都是由我們所選定的母離子所產(chǎn)生的，所以我們更相信由MS/MS產(chǎn)生的譜圖的純度。用大氣壓電離質(zhì)譜儀可以得到分子量信息謝謝閱讀影響分子量測(cè)定的因素1）pH的影響：正離子方式pH要低些，負(fù)離子方式pH要高些，除對(duì)離子化有影響外，還影響LC的峰形。謝謝閱讀2）氣流和溫度：當(dāng)水含量高及流量大時(shí)要相應(yīng)增加。3）溶劑和緩沖液流量：流速適當(dāng)高可以提高出峰的靈敏度。謝謝閱讀4）溶劑和緩沖液的類(lèi)型：通常正離子用甲醇好，負(fù)離子乙腈好些謝謝閱讀5）選擇合適的液相色譜類(lèi)型：正相、反相、選擇合適的色譜柱精品文檔放心下載6）合適的電壓：DP電壓高時(shí)，樣品在源內(nèi)分解或碎裂；高DP電壓時(shí)回使多電荷離子比例低，多聚體也減少精品文檔放心下載7）樣品結(jié)構(gòu)和性質(zhì)8）雜質(zhì)的影響：溶劑的純度、水的純凈程度等。當(dāng)成分復(fù)雜，雜質(zhì)太多時(shí)，競(jìng)爭(zhēng)使被測(cè)物離子化不好，同時(shí)使LC分離不好感謝閱讀9）樣品濃度不夠，有時(shí)需要濃縮-/分子量測(cè)定中的誤判溶劑中的雜質(zhì)來(lái)自于塑料添加劑的峰樣品容器不干凈，常見(jiàn)表面活性劑的峰進(jìn)樣系統(tǒng)污染樣品在源內(nèi)碎裂，形成碎片離子LC-MS中常見(jiàn)的本底離子m/z50-150,溶劑離子，[(H2O)nH+ ，n=3-112]謝謝閱讀m/z102,H+乙腈+乙酸,C4H7NO2H+,102.0549謝謝閱讀m/z149,管路中鄰苯二甲酸酯的酸酐,C8H4O3H+,14