CtDNA液體活檢技術平臺介紹機密材料，非允勿轉MCA-qASA血漿突變檢測技術目錄

MCA-qASA體系組成MCA-qASA血漿突變檢測體系：

Mag@MutiCollect血漿游離DNA靶向捕獲技術 ACA-qMCA熒光定量PCR技術Mag@MutiCollectACA-qMCAassay

ACA-qMCA設計原理：Blocker+AMRS+qMCA突變偏向擴增系統〔AMRS〕PCR引物的3'端位必須和突變擴增子匹配，而野生不匹配實時偏向PCR反響熔解曲線分析〔MeltingCurveAnalysis〕熒光vs溫度作圖得到DNA熔解曲線DNA溶解曲線是DNA序列的“指紋〞核酸blocker阻滯野生擴增設計野生匹配blocker阻滯對野生片段擴增MCA-qASA：三種已有技術的有機結合。MCA-qASA檢測技術簡介

1、獨家知識產權的血漿突變檢測技術平臺；2.樣本前處理的獨家技術，包括自有ctDNA提取，效果是Roche或Qiagen同類試劑盒2-3倍，靶向富集技術等；3、國內唯一經大規模雙盲臨床驗證的血漿突變檢測技術平臺。

MCA-qASA特點優勢高效率的ctDNA靶向富集提取體系：Mag@MutiCollect

特異性引物3端的特異性修飾等獨特設計，具有比ARMS更高的特異性；

Blocker可以偏向性阻滯野生型片段的擴增，進一步提高特異性和靈敏度；引物擴增區域在60-90bp范圍內，更適合碎片化的ctDNA；靈敏度在0.05%~0.1%。技術示意圖〔局部〕

Mag@MutiCollect：大大提高靶向ctDNA富集效率Mag@MutiCollect原理利用氧化復原法制備得到粒徑均一的磁性納米微粒，修飾功能基團，依據靶向DNA，針對性在磁性納米微粒藕聯相輔DNA制備磁性納米微球探針，可以直接從血漿中快速高效富集靶向DNA片段。納米磁珠探針修飾方案

Mag@MutiCollect血漿游離DNA靶向捕獲技術實驗方案：取4個人的血漿，每個血漿平均分為2份，每份血漿500uL，1份使Mag@MutiCollect靶向捕獲，1份使用BloodVirusMiniKit〔Qiagen〕提取。Mag@MutiCollect靶向捕獲技術>>Qiagen試劑盒引物設計:與ARMS引物相比，極大提高靈敏度和特異性與ARMS原理不同，MCA-qASA體系中，引物3端除末端是突變特異點外，不引入第二個突變，而是進行特殊修飾；普通Taq酶5-3Exo+根底上，引入3-5Exo+；同時，引物的Tm比退火Tm值低5-10度，來提高特異性。與ARMS相比，極大提高了特異性和靈敏度。

野生型阻滯Blocker：LNA修飾PPT模板下載：行業PPT模板：節日PPT模板：素材下載：PPT背景圖片：圖表下載：優秀PPT下載：教程：Word教程：教程：資料下載：課件下載：范文下載：試卷下載：教案下載：

EGFR（血漿樣本）臨床數據陰性符合率96.18%陽性符合率81.93%總體符合率91.09%靈敏度0.1%血漿EGFR突變檢測試劑盒2021年7月1日新獲CFDA注冊批準；國內第一個大規模臨床研究獲批血漿ctDNA突變檢測產品；世界第2個獲批產品，相比阿斯利康在歐洲批準的的第1個血漿EGFR突變檢測，準確度有顯著提高〔下表〕。1007例組織肺癌樣本中，檢出T790M〔原發性耐藥〕13例；該13例T70M陽性的組織樣本中，與之配套的血漿樣本中檢出T790M11例，陽性符合率84.6%。臨床價值：適用無法獲取組織樣本人群；適用手術時間與藥物治療時間跨度較大的人群；治療過程耐藥性突變檢查；臨床用量數倍組織檢測量；提取、捕獲及檢測均屬于自有，大幅度降低試劑本錢。血漿EGFR突變試劑盒北京協和醫院局部臨床試驗統計表試劑盒檢測組織和測序方法檢測組織的總符合率為96.53%試劑盒檢測血液樣本與測序方法檢測組織的總符合率為90.35%青醫附院臨床實驗局部數據統計表試劑盒檢測組織和測序方法檢測組織的總符合率為95.61%試劑盒檢測血液樣本與測序方法檢測組織的總符合率為94.15%臨床實驗局部數據統計〔浙大附一〕試劑盒檢測組織和測序方法檢測組織的總符合率為99.17%試劑盒檢測血液樣本與測序方法檢測組織的總符合率為90.08%江蘇省腫瘤臨床實驗局部數據統計表試劑盒檢測組織和測序方法檢測組織的總符合率為97.44%試劑盒檢測血液樣本與測序方法檢測組織的總符合率為92.31%競爭產品1.凱杰檢測靈敏度遠低于本公司產品——靈敏度在0.05%~0.1%。特定儀器2.廈門艾德艾德-檢測靈敏度〔1%〕組織sanger測序1061例檢出率100%。艾德EGFR突變檢測試劑盒一共檢測了205例血漿與組織配套樣本，其陽性符合率為52.27%，其他數據暫時未知。阿斯利康相比阿斯利康〔1162例組織與血漿配套樣本〕在歐洲批準的的第1個血漿EGFR突變檢測，準確度